大鼠急性坏死性胰腺炎外周血中的TNFa,IL-6浓度的动态测定及意义

目的：探讨急性胰腺时外周血清TNFa，IL—6的动态变化及其意义。方法：用chetty法制作大鼠的ANP模型，术后动态测定对照组、ANP组及大黄素治疗组血淀粉酶，并取胰组织作病理检查，同时动态检测外周血清中TNFa，IL—6的情况。结果：血清淀粉酶在0h三组间无差别；24h治疗组、ANP组与对照组间有显著差异(P＜0．01)；36h治疗组与ANP组之间无显著差异(P＞0．05)；二组与对照之间有显著差异(P＜0．01)；24h治疗组、ANP组与对照组间有显著异(P＜0.01)；TNFa，IL-6在0h三组间无差别；24h时治疗组与ANP无统计学差别与对照组比较有明显的升高(P＜0．05)；30h及36h治疗组与ANP组之间有显著差异(P＜0．01)。结论：细胞因子参与急性胰腺炎的发病过程，又与其病情严重程度呈正相关，表明细胞因子在ANP的发生和发展过程中起着一定作用。     

丁酸钠对重症急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的影响

目的探讨丁酸钠（NaB）对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠胰腺腺泡细胞凋广的影响。方法30只SD大鼠分成对照组、SAP组及NaB治疗组,每组各10只．采用牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射制作SAP动物模型,NaB治疗组为SAP制模5rain后通过股静脉注射NaB（5mg／kg）。检测血清淀粉酶、胰腺湿十重比值,利用Kusske方法对胰腺组织的病理学改变：水肿、出血、坏死、炎细胞浸润进行计分,TUNEL法检测胰腺腺泡细胞凋亡。结果SAP组血清淀粉酶与对照组比较明显升高,差异有高度统计学意义（P〈0．01）,NaB治疗组血清淀粉酶较SAP组明显下降,差异有统计学意义（P〈0．05）：SAP组胰腺组织湿,干重比值较对照组下降,差异有高度统计学意义（P〈0．01）,NaB治疗组胰腺组织湿／干重比值较SAP组明显下降,差异有统计学意义（P〈0．05）。SAP组胰腺损伤积分明显高于对照组,差异有高度统计学意义（P〈0．01）,NaB治疗组胰腺损伤积分明显低于SAP组,差异有统计学意义（P〈0．05）。SAP组胰腺腺泡细胞凋亡指数高于对照组,差异有高度统计学意义（P〈0．01）,NaB治疗组胰腺腺泡细胞凋亡指数显著高于SAP组．差异有统计学意义（P〈0．05）。结论NaB可以促进SAP大鼠胰腺腺泡细胞凋亡,减轻中性粒细胞活化,降低SAP严重程度。     

核因子-κB在重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织中的表达

目的探讨核因子-κB在重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）发病中的影响及作用。方法36只SD大鼠随机分成SAP组、假手术组。动态观察各组大鼠血清淀粉酶、胰腺组织中NF-κB的表达及胰腺组织病理变化。结果SAP组大鼠血清淀粉酶、胰腺组织学病评分比假手术组明显升高（P〈0．01）；术后3h起，SAP组胰腺组织中NF-κB p65即持续上调，呈时间依赖性，12h与3h比较差异显著（P〈0．01），假手术组无明显表达（P〈0．01）。结论NF-κB的活化作为始动因子参与急性胰腺炎的炎症反应．NF-κB表达与胰腺组织损伤呈正相关，抑制NF-κB的表达有可能减轻胰腺炎症。     

刺五加大鼠急性胰腺炎的保护作用实验研究

目的：观察刺五加治疗大鼠生坏死性胰炎（ANP）血清一氧化氮（NO）含量和过氧化物歧化酶（SOD）活性变化，及其病理学的改变，探讨刺五加对ANP的保护作用，方法：Wistar大鼠36只随机分为3组：ANP组，经互胆管注入5％牛磺胆酸钠，建立大鼠ANP模型，治疗组，ANP模型建立后，经腹腔注入刺五加注射液，对照组，开腹后仅作翻动胰腺，结果：治疗组血清NO含量和SOD活性明显高于ANP组（P＜0．05），血清淀粉酶显著下降（P＜0．05），病理学观察，治疗组各时相点较胰腺炎减轻，结论：刺五另对ANP可能有保护作用。     

奥曲肽治疗急性坏死性胰腺炎的疗效评价

目的评价奥曲肽治疗急性坏死性胰腺炎（ANP）的疗效。方法采用奥曲肽治疗22例ANP患者进行了临床多项指标观察，并与传统方法治疗的25例ANP患者作比较。结果奥曲肽能够显著降低血清淀粉酶和血LDH的水平；使ANP并发症发生率、死亡率明显降低，与对照组相比有显著性差异（P＜0．01）；平均住院时间也明显缩短。结论奥曲肽治疗ANP具有良好的疗效。     

急性坏死性胰腺炎大鼠硫氧还蛋白-1肺表达的实验研究

目的：探讨内源性硫氧还蛋白一1（Thioredoxin-1,Trx-1）在急性坏死性胰腺炎（AcuteNecrotizingPancreatitis,ANP）大鼠模型肺组织中的表达。方法：将48只SD大鼠随机分成对照组（C组,n=24）、急性胰腺炎组（A组,n=24）。A组用6％的左旋精氨酸（L-Arginine,L—Arg）腹腔内注射,每次1．5mg／g体重,共3次,注射间隔1h,诱导ANP模型;C组同法注射等量生理盐水。在注射完L—Arg后的第6小时、第12小时和第24小时3个时点分批处死大鼠,应用免疫组织化学技术检测各组ANP肺组织Trx-1的表达,并观察各组对应各时点胰腺和肺组织病理学改变的变化。结果：①A组大鼠胰腺和肺组织病理损伤在各时点比C组明显加重（P〈O．01）;②A组肺组织Trx-1各时点表达较C组明显增强（Pd0．01）;③在第24小时,A组血清淀粉酶较C组显著升高（Pd0．01）;④A组胰腺病理损伤与血清淀粉酶、肺损伤评分、肺免疫组化评分呈正相关（rx=0．374,P=0．046;rx=0．452,P=0．027;n=0．500,P=0．013）。结论：在ANP肺组织损伤程度与胰腺组织损伤程度密切相关。在ANP肺损伤组织中Trx-1表达显著增加,肺组织Trx-1过度表达与急性胰腺炎相关性肺损伤关系密切。     

RIP1在急性胰腺炎胰腺腺泡细胞凋亡中的作用探讨

目的：探讨细胞凋亡在急性胰腺炎炎症中的作用及受体相互作用蛋白（RIP ）的调控作用。方法将30只C57小鼠分为3组：对照组、急性水肿性胰腺炎（AEP）组、急性坏死性胰腺炎（ANP）组。AEP组连续注射雨蛙素（50μg／kg）13次;ANP组连续注射雨蛙素（50μg／kg）13次,另注射1次脂多糖（15 mg／kg）;对照组注射等量生理盐水7次。末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记法观察胰腺腺泡细胞凋亡,实时荧光定量PCR法检测RIP1 mRNA的表达,蛋白质免疫印迹法检测RIP1蛋白的表达。结果成功建立AEP及ANP小鼠模型。与对照组比较,2个胰腺炎模型组均存在细胞凋亡,且与AEP组比较,ANP组小鼠细胞凋亡减少,差异有统计学意义（P＜0．05）。与对照组比较,AEP组RIP1 mRNA及蛋白表达均升高,而ANP组降低,差异均有统计学意义（ P＜0．05）。结论 RIP1参与急性胰腺炎的发病过程,可能与调控腺泡细胞凋亡有关。     

川芎嗪对急性坏死性胰腺炎大鼠肠黏膜的保护作用

目的：探讨微循环障碍在急性坏死性胰腺炎大鼠中的作用，同时观察川芎嗪对急性坏死性胰腺炎肠黏膜损害的干预效应。方法：SD大鼠192只，随机分为对照组（C组）、胰腺炎组（P组）、川芎嗪治疗组（T组），每组64只。采用放射性生物微球技术在制模后0．5，2，6h及12h分别测定肠血流量；对胰腺、肠组织进行病理评分并观察肠组织的MPO活性、白细胞浸润情况。结果：P组与C组相比：P组各时相肠的血流量均明显降低（P〈0．01）；病理改变及白细胞浸润明显加重；肠组织MPO活性明显增加（P〈0．01）。T组与P组相比：T组2h起肠血流量较P组均明显增加（P〈0．01）；各时相病理改变及白细胞浸润明显减轻；组织MPO活性明显下降（P〈0．05或P〈0．01）。肠组织血流量与肠组织MPO活性间呈显著负相关，与肠组织损伤程度呈显著负相关。结论：微循环障碍在急性坏死性胰腺炎时肠组织损伤中起着重要的作用。川芎嗪可以改善微循环，减轻胰腺及肠黏膜损害。     

丹红注射液对急性胰腺炎血 D-二聚体和 C-反应蛋白的影响及临床疗效观察

目的：观察使用丹红注射液治疗急性胰腺炎前后,血中D-D及CRP 变化情况,从而探讨丹红注射液对急性胰腺炎患者血中D-D及CRP 影响,并观察其临床疗效。方法：选取本院86例急性胰腺炎患者,随机分为两组,对照组33例采用常规治疗;治疗组53例,在对照组治疗的基础上,给予丹红注射液静脉滴注。两组患者在确诊后即刻及治疗1d、3d、5d、7d时抽取静脉血,分别检测血D-二聚体（ D-D）及C-反应蛋白（ CRP ）含量,同时检测两组血常规白细胞计数、动脉血氧分压及血淀粉酶检查。并分析两组生存率、重症患者肠鸣音恢复时间、住院时间以及半年复发率的百分比。结果：治疗后两组间D-D、CRP、白细胞计数、动脉氧分压、血淀粉酶方面具有统计学意义（P＜0．05）。在肠鸣音恢复时间、住院时间之间存在明显差异（ P＜0．01）,两组半年复发率具有明显差异（ P＜0．01）,对照组5例,治疗组2例,但两组生存率无明显差异（ P＞0．05）,对照组为30例,治疗组为49例。结论：丹红注射液可明显降低血D-D及CRP ,改善血液流变性,增加胰腺血流量,明显改善胰腺微循环,是治疗急性胰腺炎的有效方法之一。     

急性胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡分析方法的比较

目的探讨牛磺胆酸钠所诱导的急性胰腺炎急性期胰腺细胞凋亡现象的特点和作用。方法大鼠造模、分组、取材后采用电镜定性检测，DNA末端原位染色法检测（TUNEL）和流式细胞仪定量检测（FCM）。结果①电镜检测：对照组胰腺腺泡细胞超微结构正常；水肿组自噬空泡形成，凋亡细胞和凋亡小体出现。坏死组早期凋亡和坏死可以并存，且凋亡现象较水肿组明显：②TUNEL检测：除了在3h时段坏死与对照组间差异非常显著（P〈0．01）、水肿与对照组间差异显著（P〈0．05）外，其余组间差异均无显著性，但以坏死组凋亡现象最为明显：③FCM检测：TUNEL与FCM检测结果呈正相关。结论凋亡只是一种代偿，可能减轻病情的严重程度，但他只是在一定限度内发挥着积极作用。     

大黄素对重症急性胰腺炎大鼠腺泡细胞凋亡的影响

目的: 探讨大黄素对重症急性胰腺炎大鼠腺泡细胞凋亡的影响。方法: SD大鼠30只,随机分为对照组、胰腺炎组和大黄素组,5%牛磺胆酸钠1 ml/kg制作大鼠重症急性胰腺炎模型,大黄素组为模型制作完成时及3 h后腹腔内注射大黄素2.5mg/kg,观察12 h后各组大鼠血清淀粉酶、IL-6和腺泡细胞凋亡情况。结果: 大黄素组血清淀粉酶、IL-6值低于胰腺炎组(P<0.01),细胞凋亡指数增加(P<0.01),病理损害减轻。结论: 大黄素促进重症急性胰腺炎大鼠腺泡细胞凋亡,减少淀粉酶和IL-6释放,减轻胰腺病理损害。     

重症急性胰腺炎急性期细胞因子及胰腺腺泡细胞凋亡的动态变化

目的 本研究通过重症急性胰腺炎（SAP）大鼠血清淀粉酶、TNFa、IL－6、胰腺腺泡细胞凋亡指数及胰腺组织学变化程度作用的动态观察，以进一步了解治疗SAP的作用机理。方法 用chetty法制做大鼠SAP模型，动态测定术后0h、24h、30h、36h各组血清TNFa、IL－6浓度，并取得胰组织做病理学检查；同时，应用TUNEL技术分析大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的变化。结果 研究发现SAP组30、36h时血清TNFa、IL－6水平明显升高，腹水量明显增加，胰组织病变程度明显加重；胰腺腺泡细胞凋亡指数较SAP组胰腺腺泡细胞凋亡指数明显升高。结论 重症急性胰腺炎（SAP）胰酶及炎症介质的释放及胰腺腺泡细胞凋亡在其病情发展起一定的作用。     

白细胞介素1受体拮抗剂诱导急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡机制的研究

目的:从胰腺腺泡细胞凋亡的角度探讨白细胞介素1受体拮抗剂(IL-1Ra)干预急性胰腺炎的可能机制。方法:72只SD大鼠,随机分为胰腺炎组、IL-1Ra干预组、对照组,每组24只,各组造模后在1,2,6和12 h 4个时间点分别检测6只大鼠。干预组分别于制模前12,6,2 h及制模时各注射IL-1Ra 1 mg/100 mg体质量,胰腺炎组仅同时注射等量生理盐水。应用细胞凋亡原位标记(TUNEL)染色、免疫组化技术等检测胰腺细胞凋亡及凋亡调控基因Bax,Bcl-2,Fas,FasL的蛋白表达。结果:干预组1,2,6和12 h胰腺细胞凋亡指数显著高于胰腺炎组相应时间点(均P<0.01);对照组见较弱的Bax、Fas的表达,干预组各时间点胰腺细胞Bax、Fas染色阳性率明显高于胰腺炎组(均P<0.01);对照组未见Bcl-2表达,干预组各时间点胰腺细胞Bcl-2染色阳性率与胰腺炎组相比无显著差异性(均P>0.05);胰腺炎组、干预组中均没有见到胰腺腺泡细胞中FasL表达,但是在间质中均可见浸润的炎性细胞FasL免疫组化染色阳性。结论:IL-1Ra干预急性胰腺炎的机制可能不仅限于对炎症反应的抑制,它可能是通过上调凋亡调控基因Bax和Fas/FasL系统的表达,诱导胰腺腺泡细胞的凋亡从而减轻胰腺炎的严重程度。     

急性坏死性胰腺炎肺损伤大鼠高迁移率族蛋白B1的表达及意义

目的:观察急性坏死性胰腺炎(ANP)肺损伤大鼠血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达,探讨HMGB1在急性坏死性胰腺炎并发急性肺损伤(ALI)中的意义及机制。方法:将100只SD大鼠随机分成假手术组(SO组)和模型组(ANP组)。各组分别在6h、12h、24h、36h、48h采用酶联免疫吸附法测定血清中HMGB1,同时行动脉血气分析,观察胰腺和肺组织病理形态学的改变。结果:ANP组血清HMGB1从12h开始明显上升,48h达到高峰,与SO组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。随着胰腺损伤的逐渐加重,肺损伤程度也在逐渐加重,PaO2进行性下降,PaCO2进行性升高。结论:血清HMGB1的增高与急性坏死性胰腺炎致ALI病情严重程度呈正相关。     

生长抑素对重症胰腺炎胰腺细胞凋亡的影响

目的　探讨生长抑素治疗大鼠急性坏死性胰腺炎时对胰腺细胞凋亡和调控基因bax及bcl- 2的影响。方法　以牛胆酸钠诱导SD大鼠急性坏死性胰腺炎模型 ,并应用TUNEL法染色和免疫组化SABC法检测胰腺组织中基因bax及bcl- 2蛋白表达及生长抑素治疗后对胰腺细胞凋亡及凋亡调控基因bax及bcl- 2蛋白表达的影响。结果　TUNEL法染色显示生理盐水治疗组胰腺细胞凋亡指数显著低于生长抑素治疗组 ,免疫组化SABC法检测生长抑素治疗组胰腺细胞bax染色阳性率高于生理盐水治疗组 ,但无统计学意义 ;生理盐水治疗组胰腺细胞bcl- 2染色阳性率明显高于生长抑素治疗组。结论　生长抑素治疗急性坏死性胰腺炎的机制之一可能是诱导损伤的胰腺细胞凋亡以减轻胰腺炎症反应 ,细胞凋亡机制可能与生长抑素抑制bcl- 2的表达有关而与促进bax的表达无关。     

生长抑素对大鼠坏死性胰腺炎腺泡细胞凋亡的影响

目的: 研究生长抑素对急性坏死性胰腺炎(ANP)胰腺腺泡细胞凋亡的影响.方法: 将90只SD大鼠随机分为3组:假手术组、坏死组和生长抑素治疗组,用改良十二指肠闭襻法诱导急性坏死性胰腺炎模型.分别切取3组大鼠的胰腺标本行病理组织学检查,荧光显微镜下观察细胞凋亡及流式细胞光度术定量观察凋亡情况.结果: 坏死组组凋亡少见,以细胞坏死为主;生长抑素治疗后可减轻胰腺腺泡细胞的坏死,增加其凋亡的发生.结论: 胰腺炎腺泡细胞中存在细胞凋亡现象,细胞凋亡与坏死呈负相关,生长抑素可减轻胰腺炎病理损害促进其凋亡发生.     

白细胞介素-1受体拮抗剂在急性胰腺炎中作用及机制探讨

目的 从胰腺腺泡细胞凋亡的角度探讨白细胞介素-1受体拮抗剂（IL-1Ra）在急性胰腺炎中的作用及机制。方法 用牛磺胆酸钠建立大鼠急性坏死性胰腺炎模型,IL-1Ra腹腔注射诱导胰腺腺泡细胞凋亡,并应用细胞凋亡原位标记检测(TUNEL) 染色、免疫组化等技术检测胰腺细胞凋亡及Fas/FasL的蛋白表达。结果 干预组1、2、6、12 h胰腺细胞凋亡指数显著高于胰腺炎组相应时间点(均P <0.01);对照组见较弱的Fas的表达,干预组各时间点胰腺细胞Fas染色阳性率明显高于胰腺炎组(均P < 0.01) ;胰腺炎组、干预组中均没有见到胰腺腺泡细胞中FasL 表达,但是在间质中均可见浸润的炎性细胞FasL免疫组化染色阳性。结论 IL-1Ra减轻急性胰腺炎的机制可能不仅限于对炎症反应的抑制,它可能是通过上调凋亡调控基因Fas/ FasL系统的表达,诱导胰腺腺泡细胞的凋亡从而减轻胰腺炎的严重程度。     

急性胰腺炎时环氧化酶-2表达与腺泡细胞凋亡

目的探讨急性胰腺炎(AP)时环氧化酶-2(Cox-2)表达与腺泡细胞凋亡的关系。方法 SD大鼠30只,随机分为假手术组(A组)、急性水肿性胰腺炎组(B组)和急性出血坏死性胰腺炎组(C组)。采用逆行胰胆管穿刺注射法复制急性水肿性与出血坏死性胰腺炎模型。检测造模后12 h各组的血清淀粉酶活性、腹水量、胰腺组织大体病理改变及评分、镜下病理改变与评分、腺泡细胞凋亡指数(AI)及Cox-2蛋白表达情况。结果①C组血清淀粉酶活性、腹水量、大体及镜下病理评分、Cox-2阳性率显著高于B组(P<0.01),AI显著低于B组(P<0.01)。②B、C组中AI与大体及镜下病理评分均呈显著负相关关系(P<0.05)。③B、C组中Cox-2表达与AI均呈显著负相关关系(P<0.01)。结论 AP时腺泡细胞凋亡是机体的一种自我保护机制,Cox-2过度表达可能通过抑制腺泡细胞凋亡加重胰腺病变。