Livin表达与口腔鳞状细胞癌上皮间质转化的关系及其临床意义

  目的  探讨Livin蛋白和上皮间质转化(EMT)相关蛋白Vimentin、E-cadherin在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的表达,探讨三者表达的相关性及其临床意义。  方法  应用免疫组化EliVision法检测56例OSCC组织及56例癌旁组织中Livin、Vimentin、E-cadherin的表达,并分析三者表达的相关性及其与OSCC患者临床病理特征的关系。进一步应用Western blotting检测10例新鲜OSCC组织中Livin、Vimentin、E-cadherin蛋白的表达水平。  结果  Livin在OSCC组织中的阳性率为67.9%,明显高于癌旁组织中Livin的阳性率(16.1%),且Livin表达与OSCC的淋巴结转移及TNM分期相关。E-cadherin、Vimentin在OSCC组织中的阳性率分别为44.6%、50.0%,Livin与E-cadherin表达呈负相关,与Vimentin表达呈正相关。Western blotting检测结果显示Livin高表达的OSCC组织中,E-cadherin呈低表达,Vimentin呈高表达。  结论  Livin表达可促进OSCC侵袭转移,这种促进作用可能是通过表达Livin从而激活上皮间质转化(EMT)发生实现的。      

子宫颈腺癌中ILK与E-Cadherin蛋白表达的关系

目的探讨子宫颈腺癌组织中整合素连接激酶（ILK）与E-Cadherin的表达关系。方法采用免疫组织化学方法检测106例子宫颈腺癌组织中和22例慢性子宫颈炎组织中ILK与E-Cadherin的表达。结果106例子宫颈腺癌组织ILK的阳性表达率为86.8%,高于慢性子宫颈炎组织（P〈0.01） E-Cadherin蛋白表达率为58.5%,低于慢性子宫颈炎组织81.8%（P〈0.05）。ILK在子宫颈腺癌病理分级,G3组阳性表达率均明显高于G1组（P〈0.05）。E-Cadherin表达与子宫颈腺癌组织类型有关,透明细胞腺癌阳性表达率低于子宫颈内膜腺癌和子宫内膜样腺癌（P〈0.05）。ILK阳性表达强度与E-Cadherin的阳性表达强度呈负相关（P〈0.05）。结论ILK与E-Cadherin在子宫颈腺癌组织中的表达密切相关,E-Cadherin低表达与ILK增强表达在子宫颈腺癌的发生发展中起重要作用,三者可能作为子宫颈腺癌恶性化的分子标志。     

子宫颈鳞癌组织中PARP-1、Caspase-3、survivin和Bax的表达及其临床意义

目的：探讨聚ADP核糖聚合酶-1（PARP-1）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3) 、存活素（survivin）和Bcl-2家族的前凋亡蛋白（Bax）在子宫颈鳞癌组织中的表达及其与宫颈癌临床病理特征的关系,为宫颈癌早期诊断和治疗奠定实验基础。方法：采用免疫组织化学技术检测60例子宫颈鳞癌、40例宫颈原位癌和20例癌旁正常宫颈上皮（NCE）标本中PARP-1、Caspase-3、survivin和Bax的表达率,分析其表达与宫颈鳞癌的临床分期、病理类型及有无淋巴结转移的关系。结果：PARP-1在子宫颈鳞癌、原位癌和NCE中的阳性表达率分别为68.33%、62.50%和25.00%;Caspase-3为43.33%、47.50%和70.00%;survivin为95.00%、92.50%和5.00%;Bax为31.67%、32.50%和75.00%。PARP-1和survivin在子宫颈鳞癌组及宫颈原位癌组阳性表达率低于NCE组（P<0.01）;Caspase-3和Bax在子宫颈鳞癌组及宫颈原位癌组阳性表达率高于NCE组（P<0.01）。PARP-1、survivin和Bax的阳性表达率与临床分期、病理类型和有无淋巴结转移均有关联（P<0.01）;而Caspase-3阳性表达率与上述指标无关联（P>0.01）。子宫颈鳞癌组织中PARP-1与Caspase-3、survivin与Bax表达阳性率均呈负相关关系（r=－0.71,P=0.043;r=－0.63,P=0.038）。结论：PARP-1、survivin在子宫颈癌组织中表达水平上调和Caspase-3、Bax表达水平下调可能在子宫颈鳞癌浸润和转移中起重要作用。     

宫颈鳞癌中RECK与MMP-9的表达及意义

目的:探讨宫颈鳞癌中逆转录富含半胱氨酸蛋白（RECK）和基质金属蛋白酶（MMP）-9的表达及意义。方法:应用免疫组织化学法,检测20例正常子宫颈组织及70例子宫颈鳞状细胞癌中RECK和MMP-9的表达。结果:RECK蛋白在正常宫颈组织、子宫颈鳞癌组织中表达的阳性率分别为95.00%和31.43%,差异有统计学意义（P<0.01）;有淋巴转移组的阳性率较无淋巴转移组明显降低（P<0.01）。MMP-9在正常宫颈组织、子宫颈鳞癌组织中表达的阳性率分别为25.00%和80.00%,差异亦有统计学意义（P<0.01）;MMP-9表达在宫颈鳞癌有淋巴转移组的阳性率较无淋巴转移组明显升高（P<0.01）。RECK及MMP-9在宫颈鳞癌中的表达呈负相关关系（P<0.01）。结论:RECK在宫颈鳞癌中表达减少或缺失可能是通过上调MMP-9的表达从而促进宫颈鳞癌的侵袭与转移,RECK和MMP-9与宫颈鳞癌的浸润转移密切相关。     

人结肠癌组织中VM、EMT及Wnt通路关键蛋白表达的相关性分析

目的：本研究探讨结肠癌组织中VM、EMT和Wnt通路关键蛋白表达的相关性。方法：选取200例结肠癌患者的组织标本,利用免疫组化测定VM、EMT的两种标记蛋白（Vimentin、E-cadherin）及Wnt通路调节蛋白β-catenin的表达,并探讨其相关性。结果：200例人结肠癌组织中有45例VM表达阳性,VM阳性患者肿瘤分化更差、分期更晚,更易发生复发转移,差异有统计学意义（P＜0.05）。VM阳性时Vimentin高表达（66.7%）,E-cadherin低表达(15.5%),差异有统计学意义(P<0．05)。同时VM阳性β-catenin为高表达（60.0%）,VM阴性β-catenin为低表达（8.4%）,差异具有统计学意义（P<0．05) 。β-catenin阳性的结肠癌组织中,Vimentin为高表达（72.5%）,而E-cadherin低表达（30.0%）,差异具有统计学意义(P<0．05)。结论：在结肠癌组织内存在VM现象,VM与EMT存在相关性。VM与Wnt通路存在相关性。结肠癌中Wnt通路活化可能促进EMT发生。     

MicroRNA-219-5p靶向E-钙黏蛋白调控上皮间质转化抑制肝癌细胞侵袭转移

目的  研究MicroRNA-219-5p（miR-219-5p）靶向E-钙黏蛋白（E-Cadherin）调控上皮间质转化（EMT）抑制肝癌细胞侵袭转移的分子机制。方法  首先通过生物信息学方法,寻找与E-Cadherin结合特异性最好、稳定性强的miRNAs。在30例肝癌组织和20例癌旁肝组织中,通过蛋白免疫印迹法（Western blot）检测E-Cadherin的表达水平;实时荧光定量PCR检测（qRT-PCR）miR-219-5p表达,分析两者之间的相关性。在高转移和低转移的肝癌细胞株中,qRT-PCR检测miR-219-5p表达,Western blot检测E-Cadherin、N-cadherin表达。采用Lipofectamine 2000将miR-219-5p 模拟子（mimic）、抑制子（inhibitor）、阴性对照组（negative contral）转染到肝癌HepG2细胞系,qRT-PCR检测miR-219-5p表达,Western blot检测E-Cadherin、N-cadherin的表达;Transwell方法检测miR-219-5p表达改变对肝癌细胞侵袭转移能力的影响。结果  生物信息学发现miR-219-5p与E-Cadherin结合最稳定,且特异性最好。肝癌组织中miR-219-5p低表达、E-Cadherin高表达,而癌旁组织中miR-219-5p高表达、E-Cadherin低表达。高转移细胞株中miR-219-5p高表达、E-Cadherin低表达而N-cadherin高表达,在低转移细胞株中miR-219-5p低表达、E-Cadherin高表达而N-cadherin低表达（P <0.05）。miR-219-5p水平表达增高,引起E-Cadherin表达下调,N-cadherin高表达;miR-219-5p表达下调,可引起E-Cadherin表达上调,N-cadherin低表达（P <0.05）;HepG2-miR-219-5p 模拟子细胞株中侵袭细胞计数为（24±3）个/高倍镜视野,明显低于对照组细胞株（P <0.05）。结论  miRNA-219-5p可通过靶向结合E-Cadherin,调控EMT信号通路,抑制肝癌细胞的侵袭转移。

     

子宫颈癌中VHL基因和HIF-1α表达及意义

目的探讨VHL基因和HIF-1α在子宫颈癌组织中的表达及其与子宫颈癌临床病理因素的关系。方法用免疫组织化学SP法检测130例子宫颈癌和20例子宫颈正常组织中VHL、HIF-1α表达情况,并统计分析子宫颈癌分化程度、临床分期、转移及预后的相关性。结果 VHL基因在130例子宫颈癌组织中的阳性表达率为43.1%,在20例子宫颈正常黏膜中的阳性表达率为95%(P<0.001);HIF-1α蛋白在130例子宫颈癌组织中的阳性表达率为71.5%,在20例子宫颈正常黏膜中的阳性表达率为25%(P<0.001);VHL基因的阴性表达与HIF-1α蛋白的阳性表达与子宫颈癌分化程度、分期、淋巴结转移及预后有关(P<0.05)。结论 VHL基因表达下调和HIF-1α蛋白表达上调在子宫颈癌的侵袭、转移中发挥重要作用。     

食管鳞癌组织中P-选择素和缺氧诱导因子1α的表达及其临床意义

目的:探讨P-选择素和缺氧诱导因子1((Hypox ia-inducib le factor 1,αH IF-1α)在食管鳞癌中的表达及其与食管癌临床生物学行为的关系。方法:采用SP免疫组化法检测10例正常食管粘膜和60例食管鳞癌组织中P-选择素和H IF-1α蛋白的表达,并分析其相关性。结果:P-选择素在正常食管粘膜的阳性表达率为40.00%,在鳞癌组织中为66.67%,二者无显著性差异。P-选择素在低分化食管鳞癌中的阳性表达率(87.50%)显著高于高/中分化组(59.09%),在浸润至全层的阳性率(83.33%)显著高于浸润至肌层组(55.55%),在淋巴结转移阳性组的阳性率(82.61%)显著高于淋巴结转移阴性组(56.76%)。H IF-1α在正常食管粘膜无表达,而在食管鳞癌组织中阳性表达率为61.67%,二者相比具有显著性差异;随着食管鳞癌肿瘤体积的增大、组织学分化程度的降低,H IF-1α的阳性表达率逐渐增高;H IF-1α在淋巴结转移阳性组的阳性表达率显著高于阴性组。食管鳞癌中P-选择素和H IF-1α的表达呈显著正相关。结论:P-选择素可能参与了食管鳞癌的组织分化、浸润和淋巴结转移。H IF-1α的高表达可能促进了食管鳞癌癌细胞的增殖,抑制其组织分化,并参与了淋巴结转移。H IF-1α和P-选择素在食管鳞癌发生发展过程中可能具有协同作用。     

UBQLN1诱导上皮-间质转化促进食管鳞癌细胞的迁移和侵袭

目的分析泛醌蛋白1（UBQLN1）及上皮-间质转化（EMT）标志分子在食管鳞癌（ESCC）组织中的表达及其相关性,探讨UBQLN1对ESCC细胞迁移和侵袭的影响。方法 RT-qPCR和western blot检测ESCC癌组织及对应癌旁组织中UBQLN1的mRNA和蛋白表达;RT-qPCR检测ESCC癌组织及对应癌旁组织中EMT标志分子（E-cadherin、N-cadherin、Vimentin）的mRNA表达;构建UBQLN1 siRNA和过表达重组质粒,分别转染ESCC细胞系EC9706、HET-1A和TE-1;采用划痕试验和Transwell试验检测各细胞的迁移和侵袭能力;RT-qPCR和western blot检测各组EC9706细胞中EMT标志分子的mRNA和蛋白表达。结果 ESCC癌组织中UBQLN1的mRNA和蛋白表达均高于癌旁组织（均P<0.05）;ESCC癌组织中E-cadherin mRNA的表达低于癌旁组织（P<0.05）,而N-cadherin和Vimentin mRNA的表达均高于癌旁组织（均P<0.05）;ESCC组织中UBQLN1与E-cadherin的mRNA表达呈负相关（r=-0.517 3,P<0.001）,而与N-cadherin和Vimentin的mRNA表达呈正相关（r=0.780 3、0.685 6,P<0.001）。下调UBQLN1表达增加EC9706、HET-1A和TE-1细胞中E-cadherin的表达,降低N-cadherin和Vimentin的表达,抑制其迁移和侵袭,而过表达UBQLN1下调E-cadherin的表达,上调N-cadherin和Vimentin的表达,促进细胞迁移和侵袭。结论 UBQLN1能诱导EMT,促进ESCC细胞的迁移和侵袭。     

Peroxiredoxin 1与EMT相关蛋白在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨过氧化物还原酶1( Prx1)与上皮细胞间质转化( EMT)相关蛋白在胰腺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法分别检测 Prx1、E-钙黏素( E-cadherin)、波形蛋白( Vimentin)在66例胰腺癌组织和11例正常胰腺组织中的表达,并分析三者之间的关系及与临床病理因素间的关系。结果 Prx1、E-cadherin和Vimentin分别在66例胰腺癌组织中的阳性表达率为69．70%(46/66)、40．91%(27/66)、56．06%(37/66);Prx1、E-cadherin和Vim-entin分别在11例正常胰腺组织中的阳性表达率为18．18%(2/11)、90．90%(10/11)、18．18%(2/11)。 Prx1、E-cadherin和Vimentin在胰腺癌组织中的表达均与TNM分期、淋巴结转移和肿瘤分化程度显著相关(P<0．05),而与性别、年龄、肿瘤大小、病变部位均无关;Prx1与神经侵犯显著相关( P<0．05),而E-cadherin和Vimentin与神经侵犯无关。 Prx1的表达与Vimentin表达呈正相关(P<0．05),Prx1和Vimentin的表达均与 E-cadherin表达呈负相关( P<0．05)。结论Prx1与EMT相关蛋白在胰腺癌组织中的表达呈显著相关性,并与其侵袭转移能力相关,提示Prx1的高表达可能为预测胰腺癌患者预后不良的辅助指标之一。     

抗精子抗体和抗子宫内膜抗体与不孕及流产的关系

目的　探讨抗精子抗体（ＡｓＡｂ）与抗子宫内膜抗体（ＥＭＡｂ）在不孕、流产中的作用及二者关系,进一步 揭示不孕、流产的病因。方法　采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）同时检测３４５例不孕、流产妇女血清中的ＡｓＡｂ与 ＥＭＡｂ,按ＡｓＡｂ检测结果分阳性组和阴性组,比较两组ＥＭＡｂ阳性率的差异。结果　原发不孕及自然流产妇女中, ＡｓＡｂ（－）组ＥＭＡｂ阳性率高达１６．６７％和１９．５１％,而ＡｓＡｂ（＋）组ＥＭＡｂ阳性率高达４３．６４％和４２．８６％,显著高于 ＡｓＡｂ（－）组（Ｐ＜０．０１,Ｐ＜０．０５）。继发不孕妇女中ＡｓＡｂ（－）组ＥＭＡｂ阳性率为１８．１８％,ＡｓＡｂ（＋）组ＥＭＡｂ阳性率 为３２．２％,二者无显著性差异（０．０１＞Ｐ＞０．０５）。结论原发不孕及自然流产妇女中因个体免疫反应差异使某些 人易对体内、外物质发生免疫反应而产生抗体,从而导致不孕或流产。     

气血与足月妊娠分娩关系的探讨

论述足月妊娠分娩的发动和维持依靠气的推动、温煦、气化、固摄功能和血的营养、濡润功能。顺利分娩既要气血充足，还要气顺血和。临床研究结果表明调补气血，是促进产程，预防难产的重要手段。实验研究结果阐明调补气血中药加强产力、促进产程主要是从改善产妇全身情况，提高机体抗应激、抗疲劳、耐缺氧能力，即所谓使产妇气血充足调和，充分发挥气血在分娩过程中的生理作用。     

水疗联合抚触对新生儿的生长发育、黄疸及睡眠的影响

目的探讨新生儿游泳联合抚触对新生儿的生长发育、黄疸及睡眠的影响。方法将经阴道顺产分娩的正常新生儿100例随机分为两组，观察组（水疗联合抚触组）50例，对照组（单纯沫浴组）50例。①测定两组10日、28日的体重、身长、上臂围；②观察记录胎便转黄时间，测定皿清胆红素；③记录24h睡眠时间。结果两组新生儿10日、28日体重、身长、上臂同增长有显著差异（P〈0．05），两组新生儿5日时，胎便转黄时间及黄疸指数比较均有显著性差异（P〈0．01），两组睡眠时间比较有统计学意义（P〈0．05），两组并发症比较无统计学意义（P〉0．05）。结论新生儿水疗联合抚触可促进新生儿的生长发育，能加速胎粪的早排出，减轻生理性黄疸程度，有效地降低新生儿高胆红素血症的发病率，提高睡眠质量。     

亚硝基脲类和亚硝基硫脲类的理化性质及致突变能力

本题选择N,N′-二甲基亚硝基脲(DMNU),N,N′-二乙基亚硝基脲(DENU),及其类似物N,N′-二甲基亚硝基硫脲(DMNTU)、N,N′-二乙基亚硝基硫脲(DENTU)为代表,测定了这些化合物的水解反应速度、脂溶性(HPLC的logk′值)、水解产物和致突变能力。证明了硫脲的脂溶性大于脲的脂溶性。DMNTU对TA100菌株的致突变能力最强,其它较弱。