肿瘤坏死因子受体相关因子6基因多态性对中风风痰瘀阻证发生风险及炎性反应过程的影响

目的探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)基因多态性与中风不同证型遗传易感性以及炎性反应相关数量性状的关联。方法本研究采用病例-对照设计,纳入中风风痰瘀阻证者311例、气虚血瘀证者284例、性别年龄相匹配的对照组605例。采用实时荧光定量PCR(RTPCR)方法检测了TRAF6 mRNA表达水平,运用Sequenom Mass ARRAY i PLEX平台对TRAF6基因rs5030411、rs5030416两个多态性位点进行基因分型,采用酶联免疫吸附实验法(ELISA)测定炎性细胞因子血清水平。用PLINK、SPSS软件进行统计学分析。结果中风风痰瘀阻证、气虚血瘀证患者的TRAF6 mRNA表达水平均显著高于对照组(P0.050)。TRAF6基因rs5030416多态性与中风风痰瘀阻证的易感性存在统计学关联(P=0.030),rs5030411多态性与中风易感性无统计学关联(P0.050)。携带rs5030411 CT基因型的风痰瘀阻证患者的白细胞介素-1b(interleukin-1b,IL-1b)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)血清水平显著高于其他基因型携带者。风痰瘀阻证患者的IL-1b、IL-6血清水平显著高于对照组(P0.050)。结论 TRAF6基因rs5030416多态性可能影响中风风痰瘀阻证的发生,而rs5030411多态性可能参与调节风痰瘀阻证的炎性反应过程。     

Toll样受体4基因多态性与汉族男性中风证型关联性研究

目的 探讨中国南方汉族人Toll 样受体4基因(TLR4)多态性rs1927914、rs10759932和rs11536889与中风证型（风痰瘀阻证、气虚血瘀证）易感性、基因表达水平、细胞因子及血脂代谢的相关性。方法 采用病例对照研究方法,将559例中风患者按中医辨证分气虚血瘀型组（248例）及风痰瘀阻型组（311例）,另设一性别、年龄相匹配健康对照组（605例）。所有研究对象均来自汉族。采用Sequenom Mass ARRAY 技术对TLR4基因的rs1927914、rs10759932和rs11536889进行基因分型检测,实时荧光定量PCR（qPCR）检测TLR4信使核糖核酸(mRNA)表达水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6（IL-6)、白细胞介素-8（IL-8)、白细胞介素-12（IL-12)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α）水平,HITACHI日立7600全自动生化分析仪测定总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL）水平。结果 rs10759932的等位基因频率在中风气虚血瘀型男性病例与男性对照组之间的分布存在统计学差异（P<0.05）。rs1927914（显性模型:OR=0.65, 95% CI=0.43-0.96, Padj=0.031）、rs10759932（显性模型:OR=0.64, 95% CI=0.41-0.99, Padj=0.046）位点多态性与男性中风气虚血瘀证易感性显著关联。携带rs10759932位点TT基因型的中风气虚血瘀型患者的IL-8血清水平显著低于CC+CT者（P<0.01）。rs11536889多态性与中风气虚血瘀型男性患者的TG水平 (加性模型:P_adj=0.021, 显性模型:P_adj=0.013)、HDL (显性模型:P_adj=0.032)显著关联。结论 TLR4基因多态性影响汉族男性中风气虚血瘀证的发生及炎性反应和血脂代谢病理过程。      

MYD 88基因多态性与缺血性中风风痰瘀阻证患者MRI表现的相关性研究

目的探讨MYD88(髓样分化因子)基因多态性位点rs7744与缺血性中风风痰瘀阻证MRI表现的相关性。方法收集缺血性中风风痰瘀阻证患者631例作为研究对象,进行头颅核磁影像检查采集病变部位、病灶大小、数目、对周围组织影响等信息,采用Sequenom Mass ARRAY技术对MYD88基因单核苷酸多态性位点(SNP)rs7744进行基因分型检测。使用PLINK软件进行相关统计分析。结果 (1)MYD88基因多态性位点rs7744不同基因型携带者与发病部位在脑叶、放射冠、丘脑及小脑均无统计学关联(均P0.05);与基底节区有统计学关联(均P0.05);与脑干有统计学关联(加性模型、隐性模型、等位基因模型均P0.05)。(2)MYD88基因多态性位点rs7744不同基因型携带者与发生大梗死、小梗死无统计学关联(均P0.05);与中梗死有统计学关联(加性模型、显性模型、等位基因模型均P0.05)。(3)MYD88基因多态性位点rs7744不同基因型携带者与病灶多发以及病灶对周围组织影响无统计学关联(均P0.05)。结论 MYD88基因位点rs7744多态性与缺血性中风风痰瘀阻证的发生相关,与MRI成像显示病灶发生在基底节区、脑干有统计学关联,与发生中梗死有统计学关联。     

KDR基因rs2305948、rs2239702多态性与缺血性中风、冠心病痰瘀证凝血功能的关联性研究

目的探讨激酶插入结构域受体(KDR)基因多态性与缺血性中风(IS)痰瘀证、冠心病(CAD)痰瘀证及凝血功能的关联性。方法共纳入缺血性中风痰瘀证患者550例、冠心病痰瘀证患者550例、正常对照人群550例,分为3组。采用MassARRAY SNP基因分型实验技术进行基因分型检测,使用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测外周血KDR基因mRNA表达水平,通过凝固法检测血浆中凝血功能指标。采用PLINK软件进行遗传关联分析,采用拟和优度χ~2检验进行哈温平衡(HWE)分析。基因型频率分布的组间比较,采用χ~2检验。应用多因素非条件Logistic回归模型对各遗传模型(加性模型、显性模型、隐性模型)与疾病的关联进行分析,采用线性回归分析各位点多态性与凝血标志物水平的关联。结果 IS痰瘀证患者的KDR基因mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.001),而CAD痰瘀证患者的KDR基因mRNA表达水平显著高于对照组(P=0.007)。KDR基因rs2305948、rs2239702多态性与IS痰瘀证、CAD痰瘀证发生风险的关联差异无统计学意义(均为P>0.05)。KDR基因rs2305948多态性与IS痰瘀证患者的D二聚体(D-D)、凝血酶原时间活动度(PTA)的相关性具有统计学意义(P<0.05),KDR基因rs2239702多态性与IS痰瘀证患者的活化部分凝血酶原时间(APTT)显著相关(P<0.05)。KDR基因rs2305948多态性与CAD痰瘀证患者APTT水平的相关性具有统计学意义(P<0.05),rs2239702多态性与CAD痰瘀证患者凝血酶时间(TT)水平显著相关(P<0.05)。结论 KDR基因表达水平可能影响IS痰瘀证、CAD痰瘀证的发生,且KDR基因rs2305948、rs2239702遗传多态性可能影响IS痰瘀证、CAD痰瘀证的凝血功能。     

结合眼底血管特征研究2种中医证型缺血性中风患者的2年期复发风险

目的  构建结合眼底血管特征的不同中医证型的缺血性中风复发风险评估模型。方法  采用前瞻性观察研究, 共纳入425例符合纳入标准的缺血性中风患者并随访2 a, 采集与中风相关的临床风险因素、中医证型及眼底血管特征参数信息, 采用生存分析法比较气虚血瘀证和风痰阻络证缺血性中风患者的复发风险, 运用单因素分析辨识中风复发的核心危险因素和眼底血管特征, 分别建立2个证型的多因素Logistic复发风险评估模型。结果  2个证型的复发风险比较, 风痰阻络证较气虚血瘀证高(P＜0.05)。气虚血瘀证缺血性中风复发风险评估模型受试者ROC曲线下面积值为0.799 6, 风痰阻络证缺血性中风复发风险评估模型值为0.719 3。结论  风痰阻络证缺血性中风患者复发风险较气虚血瘀证高, 建立识别不同证型缺血性中风复发的风险因素模型可以为临床提供有针对性的预防策略。      

TLR7/8基因多态性与江苏省汉族人群哮喘发病风险及严重度的关系

目的 探讨Toll样受体7、8(TLR7/8)单核苷酸多态性在江苏省汉族人群中与哮喘发病危险性和哮喘相关表型的关系.方法 收集哮喘患者318例为哮喘组,正常人352例为对照组.挑选TLR7 rs5935436,TLR8rs3761623和rs3764880三个多态位点,采用多重PCR结合标签阵列单碱基技术(SNPstream)进行基因分型.采用ELISA法测定血浆总IgE水平.结果 rs5935436 T等位基因是男性哮喘的保护因素,rs5935436 T等位基因分布频率在男性对照组中大于男性哮喘组(5.50％比0.74％,校正OR=0.126,95％CI=0.016 ～0.995,P=0.049).男性无过敏性鼻炎的哮喘患者中rs3761623 G等位基因分布频率明显升高(校正OR=3.782,95％CI=1.022～14.045,P=0.047),而女性有过敏性鼻炎的哮喘患者中rs5935436 CT/TT基因型分布频率明显降低(校正OR=0.180,95％ CI =0.041～0.902,P=0.037).rs3761623 AA基因型和rs3764880 GG基因型与女性哮喘患者的低FEV1％有关,并且与女性哮喘患者的严重度分级呈正相关.单倍型分析也有相同结果.结论 TLR7/8单核苷酸多态性与哮喘密切相关,而且与性别有关,这对于筛选哮喘高危人群和哮喘预防有重要意义.     

中风病发病时中医证候特点浅析*

[目的]比较分析缺血性、出血性中风起病时的证候特点。[方法]采用量表法,按标准操作规程搜集资料并进行数据统计分析。[结果]缺血、出血性中风起病时各证型的构成比例分别是风痰瘀阻证58.8%、41.2%,气虚血瘀证26.0%、29.0%,痰热腑实证21.1%、26.0%,阴虚风动证11.8%、16.9%,痰热内闭证6.2%、16.8%,痰湿蒙神证1.7%、9.9%。[结论]缺血性中风以风痰瘀阻证起病为多,出血性中风以痰热内闭证、痰湿蒙神证起病的发生率明显高于缺血性中风,符合出血性中风较缺血性中风病情凶险的特点。     

中风病发病时中医证候特点浅析

[目的]比较分析缺血性、出血性中风起病时的证候特点。[方法]采用量表法,按标准操作规程搜集资料并进行数据统计分析。[结果]缺血、出血性中风起病时各证型的构成比例分别是风痰瘀阻证58.8%、41.2%,气虚血瘀证26.0%、29.0%,痰热腑实证21.1%、26.0%,阴虚风动证11.8%、16.9%,痰热内闭证6.2%、16.8%,痰湿蒙神证1.7%、9.9%。[结论]缺血性中风以风痰瘀阻证起病为多,出血性中风以痰热内闭证、痰湿蒙神证起病的发生率明显高于缺血性中风,符合出血性中风较缺血性中风病情凶险的特点。     

年龄与首次发作急性缺血性脑中风始发状态中医证候分布相关性的聚类分析

[目的]探讨年龄与首次发作急性缺血性脑中风始发状态中医证候分布的相关性。[方法]对120例首次发作急性缺血性脑中风始发状态患者的证候指标从年龄角度进行指标聚类分析,依据中医理论及临床,对聚类结果进行比较分析。[结果]1首发急性缺血性脑中风始发状态的四诊信息分为气虚痰热证、风痰阻络证、痰热瘀阻证、血瘀证、痰热证;2中青年组首发急性缺血性脑中风始发状态的四诊信息分为气虚痰热证、痰热瘀阻证、热极生风证、血瘀证、痰热证;老年组首发急性缺血性脑中风始发状态的四诊信息分为痰热瘀阻证、气虚痰热生风证。[结论]首发急性缺血性脑中风始发状态的五种证型中均不同程度的包含有痰、热、瘀等邪实,体现了中风急性期以邪实为主要表现的特征,且随年龄的增长,患者正气亏虚的表现愈加显著。     

超燃冲压发动机凹腔内补氧的强化点火试验

目的采用病例-对照研究方式,探讨中国汉族人群中rs12740374基因多态性与缺血性脑卒中的相关关系。方法应用连接酶(LDR)的方法对所有受试者(778例缺血性脑卒中患者及602例对照)进行基因型分型,分析两组间rs12740374位点基因型频率的差异及该位点基因多态性与患者血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度的关系。结果卒中组和对照组均检出了GG、GT、TT 3种基因型。运用logistic回归校正多种混杂因素后,结果发现rs12740374基因多态性与缺血性脑卒中无明显关系。携带rs12740374等位基因T的受试者,血清平均LDL-C水平均较GG型受试者低,但差异无统计学意义。结论中国汉族人群中rs12740374位点与缺血性脑卒中之间可能无明确关联;rs12740374可能与不同基因型受试者的LDL-C差异有关。     

SNAPC3 gene rs12093 polymorphism is significantly associated with ischemic stroke wind syndrome

Objective: To investigate whether The small nuclear RNA activating complex polypeptide 3 (SNAPC3) gene rs12093 polymorphism is associated with ischemic stroke (IS) and Traditional Chinese Medicine (TCM) syndromes of IS. Methods: This study enrolled 774 patients with ischemic stroke (IS) and 793 normal controls. Massarray technology was used for genotyping. And genetic association analysis was estimated by PLINK program. Results: ①SNAPC3 gene rs12093 polymorphism was significantly associated with the risk of ischemic stroke wind syndrome of IS [OR=0.76, 95％CI(0.58-0.99), P=0.047 in dominant model)]. ②After adjusting age and gender, SNAPC3 gene rs12093 polymorphism and the score of ischemic stroke wind syndrome(Padj=0.037 in additive model;Padj=0.009 in recessive model), the correlation is statistically significant. ③After adjusting age and gender, platelet (PLT) (Padj=0.024 in addiction model; Padj=0.039 in dominant model)and thrombin time(TT)(Padj=0.042 in dominant model) were significantly associated with rs12093 polymorphism in patients with ischemic stroke wind syndrome. Conclusion: SNAPC3 gene rs12093 polymorphism may affect the occurrence of ischemic stroke wind syndrome.     

TLR8基因多态性与中国东北地区汉族肺结核病的关联性分析

目的：探讨Toll样受体8(TLR8)基因的4个位点单核苷酸多态性（SNP）与我国东
北地区汉族人群结核病的关联性,分析其基因型频数分布在肺结核病与其他肺病间的差异。方法
：采用病例-对照的研究方法。选择中国东北地区368例汉族肺结核病患者 (病例组)和355
例汉族其他肺病患者 (对照组)为研究对象。应用连接酶特异检测技术检测2组患者TLR8基因4个位
点rs3764880、rs3761624、rs3788935和rs3764879的基因型,比较2组患者等位基因频数分布差异,
计算其危险系数(OR),并比较不同性别患者组间基因型频数分布的差异。 结果 ： TLR8基因
rs3764880、rs3761624、rs3788935和rs3764879位点等位基因型频数在2组间分布差异无统计学意义(P>0.05);不同性别的2组患者T
LR8基因4个位点等位基因频数分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论：TLR8基因位点rs37
64880、rs3761624、rs3788935和rs3764879的SNP在我国东北地区汉族肺结核患者与其他肺病
患者中的分布相同,提示上述TLR8基因4个位点的SNP与结核病的发生无关联性。     

Polymorphisms of TLR7 and TLR8 associated with risk of asthma and asthma-related phenotypes in a southeastern Chinese Han population

Objective:To evaluate the effects of polymorphisms in TLR7 and TLR8(as potential candidate genes) on asthma risk and asthma-related phenotypes.Methods:We consecutively recruited 318 unrelated adult asthmatic patients and 352 healthy volunteers from the same area of southeast China.Genotyping of each selected SNP was performed using multiplex PCR in conjunction with tagged array single base extension technology.We conducted case-control and case-only association studies between the selected SNPs in TLR7 and TLR8 and asthma or asthma-related phenotypes.Results:The T allele of rs5935436 SNP in TLR7 was protective from developing asthma in males (adjusted ORs=0.126,95% CIs=0.016-0.995).The CT/TT genotype of rs5935436 was less frequent in female asthmatics with allergic rhinitis (adjusted ORs=0.18,95% CIs=0.04-0.90).The homozygote AA of rs3761623 and GG of rs3764880 were positively associated with lower FEV1% and asthma severity in female asthmatics.These results were confirmed by haplotype analysis.Conclusion:TLR7 and TLR8 polymorphisms may play an important role in the pathogenesis of asthma that is gender-dependent.This could be clinically useful,both for identifying patients at risk of asthma and for preventing its occurrence.     

ADAM33基因多态性影响慢性阻塞性肺疾病气道炎症

目的探讨解整连蛋白和金属蛋白33（ADAM33）基因多态性与COPD气道炎症的关系。方法利用引物序列特异性聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）的方法检测312例COPD患者4个位点（T2、T1、S2、Q-1）的基因型。同时检测患者诱导痰中细胞数及分类,以及肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、IL-8、血管内皮生长因子（VEGF）的含量,采用t检验分析基因型与炎症反应的关系。结果 T2位点GG基因型携带者较AA和AG基因型携带者诱导痰内细胞总数及TNF-α含量明显升高（P〈0.01和P〈0.05）。T1位点GG基因型携带者较AA和AG基因型携带者诱导痰淋巴细胞数量明显升高（P〈0.05）,但AA和AG基因型携带者诱导痰中IL-8含量较高（P〈0.05）。Q-1位点GG基因型携带者较AA和AG基因型携带者诱导痰中VEGF和IL-8含量明显升高。S2位点GG基因型携带者较CC和CG基因型携带者诱导痰液细胞总数明显升高（P〈0.05）,前者诱导痰中IL-8含量明显增加（P〈0.01）。结论 ADAM33基因多态性可能通过促进气道炎症而参与COPD的病理过程。     

金属硫蛋白基因多态性与2型糖尿病的关系

目的 :探讨金属硫蛋白 (metallothionein,MT)基因多态性与中国汉族人群中 2型糖尿病 (T2 DM)发病之间的关系。方法 :采用 PCR技术和限制性片段长度多态性 (RFL P)的方法检测 4 1名糖尿病患者和 5 3名正常对照者的金属硫蛋白基因家族中的 MT4基因 (rs6 6 6 6 36 ) 2 0 1 G→ A突变 ,统计各组对象的突变频率。结果 :MT4基因 (rs6 6 6 6 36 ) 2 0 1 G→ A突变型等位基因 (A)频率在糖尿病组和正常对照组中差异有显著性(P<0 .0 5 ,OR=2 .335 ) ;AA,GA和 GG三种基因型频率分布差异也有显著性 (P<0 .0 5 ) ;不同基因型的相对风险分析 ,GA基因型携带者患 2型糖尿病的风险是 GG基因型的 3.4 6 2倍 (OR=3.1 6 2 ,95 % OR CI=1 .389～8.6 2 9)。结论 :MT4突变型等位基因与 2型糖尿病的发生有显著的关联性 ,基因突变使 2型糖尿病的发病风险增加     

青海地区藏族 FGFR2基因多态性与乳腺癌的相关性研究

目的：探讨成纤维细胞生长因子受体2（FG FR2）基因rs2981582、rs1219648和 rs2420946位点基因多态性与青海地区藏族乳腺癌的相关性。方法采用病例对照研究的方法,收集青海地区210例藏族乳腺癌患者及230例藏族体检健康女性的外周血标本,提取基因组DNA ,以Taqman‐MGB探针PCR法及测序方法对两组标本的FGFR2基因 rs2981582、rs1219648和rs2420946位点进行统计分型,分析其与青海地区藏族乳腺癌发病风险的关系。结果藏族乳腺癌患者rs 2981582位点CC、CT、T T频率分别为40．48％、39．05％、20．47％,健康对照组为36．09％、48．69％、15．22％,藏族乳腺癌患者rs1219648位点GG、AG、AA频率分别为24．76％、26．19％、49．05％,健康对照组为23．91％、47．39％、28．70％,藏族乳腺癌患者rs2420946位点CC、CT、T T频率分别为29．05％、45．24％、25．71％,健康对照组为30．87％、51．74％、17．39％。两组rs2981582和 rs2420946各基因型位点基因型频率差异均无统计学意义（P＞0．05）,但存在于 rs1219648位点的AA基因型其频率差异有统计学意义（P＜0．05）,与GG基因型比较,AA基因型携带的女性发生乳腺癌的危险性增加[OR＝1．65,95％ CI＝（1．01,2．69）]。结论 FGFR2 rs1219648 AA基因型与青海地区藏族女性乳腺癌发病风险有关。     

脂联素基因启动子区多态位点与罗格列酮治疗2型糖尿病疗效的相关性

目的研究编码脂联素的ADIPOQ基因启动子区单核苷酸多态性rs266729及rs16861194位点与罗格列酮治疗2型糖尿病疗效的相关性。方法选取103例新诊断的2型糖尿病患者,予罗格列酮口服48周,检测治疗前后与糖脂代谢相关的临床指标,并对患者进行rs266729及rs16861194位点基因分型。结果 rs266729位点少数等位基因(G)频率为22.0%(40/182),CC基因携带者56例,CG基因携带者30例,GG基因携带者5例;rs16861194位点少数等位基因(G)频率为15.2%(28/184),AA基因携带者66例,AG基因携带者24例,GG基因携带者2例。治疗后在rs16861194位点AG+GG基因携带者的空腹胰岛素水平(FIns)和稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)显著高于AA基因携带者(P值分别=0.0069和0.0104)。多元逐步回归分析显示,rs16861194位点(标准偏回归系数=2.01,P=0.0075)、治疗前的HOMA-IR(标准偏回归系数=0.37,P=0.0002)及体质指数(标准偏回归系数=0.19,P=0.0155)对罗格列酮治疗48周后的HOMA-IR具有独立预测作用。结论 ADIPOQ基因启动子区rs16861194位点与罗格列酮治疗2型糖尿病48周后胰岛素抵抗的改善有关。     

脂联素及其受体基因多态性与结直肠癌发生的相关性研究

目的： 研究脂联素及其受体基因多态性与结直肠癌易感性之间的关系。方法： 370例结直肠癌患者为实验组,370例健康体检者设为对照组。每例取全血3 ml,裂解红细胞后提取DNA。用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR RFLP）位点检测技术,检测脂联素基因多态性位点（rs266729、rs822395、rs822396、rs2241766、rs1501299）及其受体基因多态性位点(rs12733285、rs1342387)的基因型,比较两组各位点的基因型分布频率。结果： ① 实验组脂联素受体基因rs12733285位点CC、CT、TT基因型频率分别为91.89%、8.11%、0.0%,对照组分别为86.49%、13.51%、0.0%,两组基因型比较差异有统计学意义（χ2=5.61,P=0.018）。② 实验组脂联素受体基因rs1342387位点GG、AG、AA基因型频率分别为48.65%、38.92%、12.43%,对照组分别为37.84%、46.49%、15.68%,两组基因型分布频率差异有统计学意义（χ2=8.87, P=0.012）。③ 与CC基因型相比,脂联素受体基因rs1277285位点的CT基因型与结直肠癌的发生风险呈负相关（校正后OR＝0.56, 95% CI＝0.35～0.91）。与GG基因型相比,脂联素受体基因rs1342387位点的AG和AA基因型的个体可降低结直肠癌的发病风险（AG vs GG：校正后OR＝0.66, 95% CI＝0.48～0.90;AA vs GG：校正后OR＝0.62, 95% CI＝0.39～0.98;AG/AA vs GG：校正后OR＝0.65, 95% CI＝0.48～0.87）;④. 脂联素基因5个多态性位点的基因型频率在两组间差异无统计学意义（P均>0.05）。结论： 脂联素受体基因（rs12733285、rs1342387）的多态性可能与结直肠癌发病有关,脂联素受体基因多态性的检测为大肠癌的诊断及治疗提供了新的方法。