口腔鳞癌患者端粒酶催化亚基mRNA的定量检测及其意义

目的探讨端粒酶催化亚基基因(hTERT mRNA)在口腔鳞癌患者中的表达情况及其意义.方法采用实时定量PCR法(qRT-PCR)检测25例鳞癌患者口腔鳞癌组织及其切缘组织,10例正常人口腔黏膜中hTERT mRNA的表达情况并进行比较.结果口腔鳞癌组织中hTERT mRNA的表达量明显高于切缘组织和正常口腔黏膜(P＜0.05),而切缘组织与正常口腔黏膜中hTERT mRNA的表达量无区别(P＞0.05).结论口腔鳞癌中hTERT高表达,口腔切缘和正常口腔黏膜中低或无表达,提示hTERT mRNA活化是口腔癌变过程中的重要事件,hTERT mRNA可以作为检测口腔鳞癌及其切缘安全范围的一个客观量化指标.     

干扰LINC00308促进miR-634对前列腺癌细胞增殖与凋亡的影响

【摘要】 目的 研究干扰长链非编码RNA（lncRNA）LINC00308是否通过促进微小RNA（miRNA） 634影响前列腺癌细胞的增殖与凋亡。 方法 实时荧光定量PCR（qRT PCR）检测前列腺癌组织中LINC00308的表达。利用LINC00308小干扰RNA（si LINC00308）转染前列腺癌细胞PC 3M和DU145，构建干扰LINC00308的细胞，采用qRT PCR检测LINC00308和miR 634的表达水平，流式细胞术评估细胞的周期与凋亡，蛋白质印迹法（Western Blot）检测细胞核相关抗原Ki67（Ki67）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（Caspase3）蛋白的表达。starBase在线工具预测结合双荧光素酶报告实验分析LINC00308对miR 634的靶向调控。在PC 3M和DU145细胞中转染miR 634 mimic，利用上述方法检测miR 634在细胞增殖凋亡中的作用。 结果 前列腺癌组织中的LINC00308表达水平明显高于癌旁组织（P＜005）。干扰LINC00308显著提高PC 3M和DU145细胞的miR 634的表达水平、G0 G1期细胞比例、细胞凋亡率和Caspase3蛋白水平，明显降低S期细胞比例、Ki67蛋白水平（P＜005）。LINC00308靶向调控miR 634的表达。转染miR 634 mimic显著增加PC 3M和DU145细胞的G0 G1期细胞比例、凋亡率和Caspase3蛋白水平，明显减少S期细胞比例和Ki67蛋白水平（P＜005）。 结论 干扰LINC00308可以促进miR 634的表达，阻滞前列腺癌细胞周期，并诱导细胞凋亡。     

Ki67和P16在肾上腺皮质肿瘤组织中的表达

目的:联合检测肿瘤增殖抗原Ki67(Ki67)和抑癌基因P16(P16)在肾上腺皮质肿瘤中的表达,研究Ki67及P16与肾上腺皮质肿瘤的关系.方法:应用免疫组化方法检测77例.肾上腺皮质肿瘤(腺瘤70例、腺癌7例)及10例瘤旁正常组织标本中Ki67及P16的标记指数(Labeling Index,LI).结果:Ki67在正常肾上腺组织不表达,在腺癌表达最高,腺瘤次之;P16在正常肾上腺组织表达最高,腺瘤次之,腺癌最低,Ki67和P16在肾上腺皮质肿瘤表达的结果比较差异有统计学意义(P<0.001),且存在负相关关系(r=-0.736,P<0.05).Ki67的LI在肾上腺皮质腺瘤、腺癌的界定值为5%;P16的LI在肾上腺皮质腺瘤、腺癌的界定值为12%.结论:Ki67及P16的表达与肾上腺肿瘤显著相关,Ki67的LI>5%和P16的LI<12%时,提示为腺癌.联合检测Ki67和P16在肾上腺皮质肿瘤的表达,为难以判断良、恶性的肾上腺皮质肿瘤提供较为客观、简捷的诊断方法.     

Cdc6和Ki-67蛋白与口腔鳞癌的相关性研究

目的探讨细胞分裂周期蛋白6(Cdc6)和核蛋白抗原(Ki-67)在口腔鳞癌组织中的表达及临床意义。方法武汉大学人民医院采用免疫组织化学SP法检测42例口腔鳞癌组织和42例正常口腔黏膜组织中Cdc6和Ki-67蛋白的表达情况,研究口腔鳞癌组织中Cdc6、Ki-67与病理特征的相关性。结果 Cdc6和Ki-67在口腔鳞癌组织中的阳性表达率分别为76.19%、71.42%,在正常口腔黏膜组织中阳性表达率分别为11.90%、23.81%;Cdc6和Ki-67蛋白在口腔鳞癌中的表达与患者淋巴结转移、细胞分化程度和肿瘤TNM分期有关(P<0.05);两种蛋白在口腔鳞癌组织中的表达呈正相关(P<0.05)。结论 Cdc6和Ki-67蛋白的高表达与口腔鳞癌的发生、发展以及增殖密切相关,联合检测两者的表达有助于更深入地了解口腔鳞癌的发病机制,并为口腔鳞癌的诊治提供理论依据。     

肾上腺皮质腺癌、腺瘤中Ki67及脆性组氨酸三联体的表达及相关性研究

目的 通过检测肿瘤增殖抗原Ki67和脆性组氨酸三联体(FHIT)在肾上腺皮质肿瘤中的表达,探讨Ki67和FHIT与肾上腺皮质病变的关系.方法 应用免疫组织化学和荧光定量PCK检测肾上腺皮质腺癌、腺瘤中Ki67及FHIT的表达.结果 Ki67在肾上腺皮质腺癌中高表达,在腺瘤和瘤旁正常组织中低表达或不表达;FHIT在肾上腺皮质腺瘤和瘤旁正常组织中高表达,在腺癌中低表达.比较Ki67和FHIT在肾上腺皮质肿瘤中的表达结果,差异有统计学意义(P＜0.05),两者呈负相关关系.结论 Ki67和FHIT在肾上腺皮质腺癌发生和发展过程中有协同作用.联合检测Ki67和FHIT的表达可作为肾上腺皮质腺癌临床早期诊断的有效分子标记物.     

口腔黏膜白斑和口腔鳞癌中Bcl-2、CDK2AP 1的基因表达和临床意义

目的研究在口腔黏膜白斑和口腔鳞癌组织中Bcl-2和CDK2AP1 的表达情况及临床意义。方法运用免疫组织化学和实时荧光定量PCR技术对组织中Bcl-2、CDK2AP1 表达进行检测。结果在口腔正常黏膜组织、口腔黏膜白斑组织和口腔鳞癌组织中Bcl-2 蛋白细胞阳性率依次为（2.72±1.45）%、（19.29±8.18）%和（57.20±19.37）%;CDK2AP1 蛋白细胞阳性率依次为（62.68±11.07）%、（25.68±8.17）%和（7.87±2.18）%。Bcl-2和CDK2AP1 mRNA表达水平与蛋白表达水平一致。各组之间差异有统计学意义（P <0.05）。结论随着口腔病变恶性程度增高,在口腔正常黏膜、口腔黏膜白斑和口腔鳞癌中Bcl-2 表达水平上升,而CDK2AP1 表达水平降低,这2 个指标可能与口腔肿瘤的发生、发展及预后有关。     

眼睑基底细胞癌术后组织中ILK、Tmem16a与Ki67表达的关系及意义

目的 应用免疫组化方法检测眼睑基底细胞癌术后组织中整合素连接激酶（ILK）、Tmem16a蛋白（Tmem16a）及Ki67增殖指数（Ki67）的表达及相关性,探讨其关系及临床意义.方法 选择105例基底细胞癌术后蜡块组织作为观察组,选择76例基底细胞乳头状瘤术后蜡块组织作为对照组,选择76例正常鳞状上皮的蜡块组织作为正常对照组,应用免疫组化方法检测三组中ILK、Tmem16a和Ki67的表达并行相关分析.结果 三组中ILK、Tmem16a和Ki67表达的阳性率差别有统计学意义,观察组中ILK、Tmem16a、Ki67表达的阳性率与肿瘤体积、脉管侵犯及转移相关.Spearman相关分析显示观察组中ILK和Ki67、Tmem16a和Ki67的表达呈正相关.结论 眼睑基底细胞癌术后组织中ILK、Tmem16a、Ki67高表达,共同促进肿瘤的进展.ILK和Tmem16a可能通过促进Ki67表达的增殖指数发挥作用.     

HIF-1α与口腔白斑癌变的相关性研究

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在口腔白斑血管生成中的作用及其与口腔白斑术后复发的相关性与影响因素。方法免疫组化法检测口腔鳞状细胞癌、口腔白斑及口腔正常黏膜中HIF-1α的表达情况,荧光定量PCR法检测microRNA表达。结果与口腔正常黏膜相比,口腔白斑microRNA相对表达量显著增加,而口腔鳞癌与口腔白斑相比,microRNA相对表达量显著增加,两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HIF-1α在口腔白斑及白斑癌组织中过度表达,其可作为判断口腔黏膜组织发生白斑病变及白斑癌变的标志物之一。     

γ-干扰素、白细胞介素-10在口腔扁平苔藓上皮下结缔组织中的表达

目的 检测口腔扁平苔藓黏膜上皮下结缔组织中γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)的表达情况,初步探讨其在口腔扁平苔藓发生发展过程中的作用及意义.方法 应用PCR技术和荧光实时定量PER技术检测11例口腔扁平苔藓黏膜上皮下结缔组织和5例正常口腔黏膜上皮下结缔组织中IFN-γ、IL-10的表达情况.结果 荧光实时定量PCR检测结果显示,口腔扁平苔藓黏膜上皮下结缔组织中IFN-γmRNA的表达值实验组与时照组分别为0.2981±0.2064和0.0986±0.0894,扁平苔藓组织均高于正常口腔黏膜组织;IL-10 mRNA的表达值实验组与对照组分别为4.3218±4.4678和15.1156±9.1392,扁平苔藓组织均低于正常口腔黏膜组织,经检验差异有统计学意义(P<0.05).结论 与正常口腔黏膜组织相比,口腔扁平苔藓组织中具有促炎作用的IFN-γ表达水平增高,而具有抗炎作用的IL-10表达水平降低,提示抗炎症反应和促炎症反应在口腔扁平苔藓的发生发展过程中起到一定的作用.     

赖氨酸特异性去甲基化酶1在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的 检测赖氨酸特异性去甲基化酶1 (Lysine specific demethylase 1,LSD1)在食管鳞癌以及正常食管组织中的表达,并探讨LSD1与食管鳞癌临床特征、肿瘤增殖及凋亡等的关系.方法 免疫组化S-P染色法检测86例食管鳞癌组织及29例正常食管组织中LSD1、增殖相关抗原Ki67的表达情况,TUNEL检测食管鳞癌组织凋亡情况,并分析LSD1表达与患者临床资料、预后以及增殖和凋亡的关系.结果 LSD1在食管鳞癌组织中阳性率(89.5％)明显高于正常组织(51.7％),且与患者淋巴结转移相关(P＜0.05),并能明显影响患者的预后(P＜0.05),LSD1的表达与肿瘤增殖有关,但与凋亡无关.结论 LSDI在食管鳞癌中高表达且与患者预后相关,可能成为食管鳞癌中值得研究的治疗靶标.     

口腔鳞癌组织中脂肪酸合酶基因表达的实时定量研究

目的建立口腔鳞癌组织中脂肪酸合酶(FAS)基因表达的相对定量实时PCR(real-time quantitative,PCR)检测,探讨口腔癌中FAS表达的临床意义.方法利用实时定量PCR法测定18例口腔癌患者新鲜癌组织和口腔正常组织标本中FAS表达情况,结合内参照GAPDH基因进行相对定量分析.结果FAS在癌组织中高表达,鳞癌组织中FAS基因表达值为1.42±0.51(FAS/GAPDH),正常口腔组织中FAS基因表达值为1.23±0.50,两组间差异有统计学显著意义(P＜0.01).癌组织分化程度与FAS表达水平没有明显关系.结论实时定量PCR方法能够对口腔鳞癌组织FAS的表达水平进行定量分析,癌组织和口腔正常组织中的FAS表达有显著差异.     

实时定量PCR检测口腔组织中CD44 mRNA的表达

目的：研究细胞黏附分子CD44mRNA在口腔组织中的表达情况,探讨CD44与口腔鳞癌之间的关系.方法：应用实时定量PCR（real-time PCR,RT-PCR）检测17例正常口腔组织及14例口腔鳞癌组织中CD44mRNA的表达情况.结果：CD44 mRNA在口腔鳞癌组织中的表达显著低于正常口腔组织中的表达（P=0.038）;与正常口腔组织中CD44mRNA的表达水平相比较,其中有12例（86％）口腔鳞癌组织表达下调,2例（14％）口腔鳞癌组织表达上调.结论：口腔鳞癌组织中CD44mRNA的表达显著低于正常口腔组织中的表达,因此CD44的表达量可能与口腔鳞癌的发病及转移有关.     

Expression and clinical significance of transcription factor FoxO1 in human esophageal squamous carcinoma

目的 检测FoxO1在食管鳞状细胞癌组织中的表达水平,分析其与食管鳞状细胞癌各临床病理因素的关系.方法 应用实时荧光定量PCR SYBR Green荧光染料法,检测42例手术切除的食管鳞癌组织及配对的正常食管黏膜组织中FoxO1 mRNA的表达;免疫组化S-P法检测FoxO1蛋白的表达及组织学定位.结果 正常食管黏膜组织中FoxO1mRNA及蛋白均呈低表达,而食管鳞癌组织中FoxO1 mRNA及蛋白表达显著升高(P＜0.01).高分化食管鳞癌组织的相对表达量显著高于中低分化食管鳞癌组织(P＜0.01).食管鳞癌组织中FoxO1 mRNA及蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、TNM分期及有无淋巴结转移无明显相关性(P＞0.05).结论 FoxO1在正常食管黏膜组织和食管鳞癌组织中的表达存在明显差异,其表达水平与肿瘤分化程度密切相关.     

转录因子FoxO1在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的检测FoxO1在食管鳞状细胞癌组织中的表达水平,分析其与食管鳞状细胞癌各临床病理因素的关系。方法应用实时荧光定量PCR SYBR Green荧光染料法,检测42例手术切除的食管鳞癌组织及配对的正常食管黏膜组织中FoxO1 mRNA的表达;免疫组化S-P法检测FoxO1蛋白的表达及组织学定位。结果正常食管黏膜组织中FoxO1mRNA及蛋白均呈低表达,而食管鳞癌组织中FoxO1 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.01)。高分化食管鳞癌组织的相对表达量显著高于中低分化食管鳞癌组织(P<0.01)。食管鳞癌组织中FoxO1 mRNA及蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、TNM分期及有无淋巴结转移无明显相关性(P>0.05)。结论 FoxO1在正常食管黏膜组织和食管鳞癌组织中的表达存在明显差异,其表达水平与肿瘤分化程度密切相关。     

肾上腺皮质肿瘤Ki67表达和P16蛋白表达的相关性及意义

目的研究肿瘤增殖抗原Ki67和抑癌基因P16与肾上腺皮质肿瘤的关系。方法应用免疫组化方法检测68例肾上腺皮质肿瘤（腺瘤60例、腺癌8例）及9例瘤旁正常组织标本中Ki67及P16的标记指数（La—beling Index，LI）。结果Ki67在正常肾上腺组织不表达，在腺癌表达最高，腺瘤次之；P16在正常肾上腺组织表达最高，腺瘤次之，腺癌最低，Ki67和P16在肾上腺皮质肿瘤表达的结果相比较差异有显著性（P〈0．001），且存在负相关关系（r=-0．7136，P〈0．05）。Ki67的LI在肾上腺皮质腺瘤、腺癌的界定值（cut point）为4％；P16的LI在肾上腺皮质腺瘤、腺癌的界定值为12％。结论Ki67及P16的表达与肾上腺皮质肿瘤显著相关，肾上腺皮质肿瘤组织Ki67的LI〉4％和P16的LI〈12％时，提示为腺癌。联合检测Ki67和P16在肾上腺皮质肿瘤的表达对区别良、恶性肾上腺皮质肿瘤具有重要意义，可以作为早期诊断肾上腺皮质腺癌的生物学指标之一。     

口腔鳞状细胞癌中HLA-G mRNA的表达

目的:研究人类白细胞抗原-G(HLA-G) mRNA在口腔鳞癌组织中及正常口腔黏膜组织中的表达,并探讨其表达与临床病理学的关系.方法:用荧光定量RT-PCR技术检测25例口腔鳞癌组织和20例正常口腔黏膜组织的HLA-G mRNA的表达情况.结果:HLA-G mRNA在口腔鳞癌组织中的阳性表达率为64％ (16/25),在正常口腔黏膜组织中无表达(0/20).HLA-G mRNA表达水平在口腔鳞癌组织分化程度间的差异具有统计学意义(P＜ 0.05);但是在患者的年龄、性别、临床TNM分期、淋巴结转移等之间的表达量比较,差异均无统计学意义(P＞ 0.05).结论:HLA-G mRNA的表达与口腔鳞癌的免疫逃避有着密切关系,在口腔鳞癌的发生发展中起重要作用,可以在口腔鳞癌中作为一种预后免疫指标.     

长链非编码RNA LINC00672与肺癌预后的关联研究

目的 探索长链非编码RNA LINC00672在肺癌组织中的表达及其与患者预后的关系.方法 采用实时荧光定量PCR技术检测LINC00672在75对肺癌组织和癌旁正常组织中的表达,分析其在癌组织中的表达水平与肺癌患者临床分期和预后的关联.结果 LINC00672在肺癌组织中的表达显著低于癌旁正常组织(P=0.026),LINC00672高表达与低表达相比能显著降低肺癌患者的死亡率(死亡风险比=0.46;95%置信区间=0.23~0.95;P=0.036),延长患者中位生存期(34个月 vs 18个月,P=0.027).并且,LINC00672与肺癌预后的关联在低年龄组(<60 a)、吸烟者和非饮酒者中更为显著.进一步相乘交互作用分析显示LINCOO672与饮酒在肺癌死亡风险上具有显著的交互效应(P=0.049).然而,LINC00672的表达水平在不同分期、T、N、M患者来源的肺癌组织中的表达无显著性差异.结论 LINC00672与肺癌发生发展存在关联,可用于预测肺癌患者的预后.     

FOXQ1与E-cadherin蛋白在口腔鳞癌中的表达及临床意义

目的 探讨叉头框蛋白Q1(forkhead box Q1,FOXQ1)和上皮钙黏蛋白(epitheia cadherin,E-cadherin)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达情况及其临床意义。方法 应用免疫组化法检测69例口腔鳞癌组织和32例正常口腔黏膜组织中FOXQ1与E-cadherin的表达情况,并分析二者与口腔鳞癌临床病理参数的关系及二者的相关性。结果口腔鳞癌组织中FOXQ1的阳性表达率高于正常口腔黏膜组织(P＜0.05),E-cadherin的阳性表达率低于正常口腔黏膜组织(P＜0.05);FOXQ1和E-cadherin的表达水平与肿瘤的分化程度及临床分期密切相关,而与患者的年龄、性别、吸烟史及肿瘤直径无明显相关性;口腔鳞癌组织中FOXQ1与E-cadherin的表达呈负相关(r=-0.250,P＜0.01)。结论 FOXQ1与E-cadherin在口腔鳞癌发展过程中起作用,联合检测二者对口腔鳞癌的早期诊断及预后有一定的临床参考价值。     

Survivin、Ki-67在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织中的表达及意义

目的检测Survivin、Ki67在CIN及宫颈癌组织中的表达,探讨宫颈癌的发生、发展机制及Survivin与Ki67作为早期癌变生物学标志的可能性。方法采用免疫组织化学染色法（SABC法）,检测70例CIN宫颈标本（CINⅠ2 6例、CINⅡ21例、CINⅢ23例）和22例宫颈鳞癌组织切片中的Survivin和Ki67的表达,以14例正常宫颈组织作对照组。结果（1）Survivin阳性表达率与Ki67指数均为：宫颈癌高于CIN（P〈0.05）,CIN高于正常宫颈组织（P〈0.05）,且随CIN级别的升高而升高（P〈0.05）。而Survivin阳性表达率在宫颈癌与CINⅢ之间及CINⅠ与正常宫颈组织之间差异无统计学意义（P〉0.05）,Ki67指数在宫颈癌与CINⅢ之间差异无统计学意义（P〉0.05）。（2）Survivin和Ki67在CIN和宫颈癌组织中的表达均呈正相关关系（P1〈0.05,r1=0.89;P2〈0.05,r2=0.87）。结论Survivin可能通过抑制凋亡和促进增殖两方面的作用参与了宫颈癌的发生、发展;Survivin和Ki67可能作为一种预测CIN转归的有用指标。     

吲哚胺吡咯2,3-双加氧酶与肾细胞癌预后的预测(英文)

目的:探讨吲哚胺吡咯2,3-双加氧酶(IDO,一种具有免疫调节作用的酶)在肾细胞癌(RCC)患者中的作用。方法:在中南大学湘雅二医院诊断为RCC的患者40例,全部接受肾切除术。肾组织的免疫病理检查采用半定量方法评估。实时定量PCR(RT-qPCR)检测RCC与非肾癌肾组织IDO的mRNA水平。免疫组织化学的方法检测血管内皮细胞的IDO蛋白表达。同时依据IDO的mRNA水平计算出患者的Kaplan-Meier生存曲线。结果:RCC肿瘤组织中IDO mRNA的表达明显高于正常肾组织(P<0.001)。在RCC患者中,IDO高表达的患者比那些低IDO表达的患者具有明显较长的生存时间(P=0.01)。统计学分析显示:RCC肿瘤组织中IDO的水平和肿瘤增殖标志物Ki67之间呈负相关,IDO水平高的患者Ki67水平低,反之亦然(P<0.01)。结论:IDO可能作为预测RCC患者预后的生物标志物。