RLF mRNA在不同阶段大鼠卵巢中的表达

目的 探讨松弛素样因子(RLF)在啮齿类动物的正常卵巢中有无表达以及与卵巢功能的关系，对RLF在大鼠卵巢动情周期、假孕模型中的表达进行研究。方法 采用RT-PCR方法。结果 在成年大鼠整个动情周期中都有RLF的表达，RLF的表达强度在动情前期、动情期卵巢较强，动情间期和动情后期卵巢较弱；未成年大鼠，激素处理使卵泡发育至窦前期、排卵前期时，RLF呈现持续的强表达，在黄体早期RLF的表达明显升高，而黄体中期、黄体晚期中RLF表达下降。结论 RLF与卵泡发育、排卵、黄体形成和退化密切相关。     

转录因子Ets-1在大鼠动情周期卵巢中的表达

目的检测转录因子Ets-1在大鼠动情周期卵巢组织中的表达规律，探讨其在卵泡发育、黄体形成及退化中的作用。方法分别在动情周期的不同时期收集大鼠卵巢标本，采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组化的方法观察Ets-1 mRNA在大鼠动情周期各不同时期表达水平的差异，以及Ets-1蛋白在大鼠动情周期卵巢组织中的表达分布情况。结果RT—PCR结果显示，Ets-1 mRNA在大鼠动情周期各不同时期均有表达，卵泡发育过程中Ets-1 mRNA表达逐渐增强，在动情前期表达最强，动情后期最弱；免疫组化结果显示，Ets-1蛋白在卵巢各级卵泡和黄体中表达，主要表达于卵母细胞、颗粒细胞和黄体细胞。结论Ets-1可能在大鼠动情周期中的卵泡发育、黄体生成及退化过程中起着重要的调节作用。     

米非司酮对大鼠动情周期影响的研究

目的研究米非司酮对大鼠动情周期的影响。方法观察实验组(灌胃法饲予米非司酮)和对照组(灌胃法饲予色拉油)给药前后大鼠动情周期各时相的变化。结果对照组给予色拉油前后大鼠动情周期无明显变化(P>0.05);实验组大鼠给药前后动情周期明显延长(P<0.01),给药后大鼠的动情间期、动情前期、动情期变化不大,但动情后期明显延长。结论米非司酮主要影响黄体的形成、功能维持及退化。     

长爪沙鼠动情周期血清激素水平与卵泡发育的动态研究

目的研究长爪沙鼠动情周期血清催乳素(PRL)、黄体生成素(LH)、促卵泡利激素(FSH)和雌二醇(E2)水平和卵泡黄体数量的变化。方法采用直接镜检法确定长爪沙鼠的动情周期,以ELISA法测定长爪沙鼠血清PRL、E2、FSH和LH水平,并观察动情周期各时相各级卵泡和黄体数量的变化情况。结果直接镜检法计数角化细胞统计阴道脱落细胞的类型及比例,确定长爪沙鼠动情周期的四个时相,发现长爪沙鼠动情周期各级卵泡数量各时相间均差异未见显著性。动情间期黄体数量较其他各时相显著减少(P0.05)。血清PRL和LH水平从动情前期至动情间期逐渐增高,至动情间期达峰值(P0.05),而血清E2和FSH水平均在动情前期最高(P0.05),在动情间期达到最低。结论长爪沙鼠动情周期各时相卵泡和黄体数量与各时相激素的变化密切相关,动情周期各时相卵泡数量差异未见显著性。动情周期中出现的血清FSH和E2峰值的时相与小大鼠一致,而PRL和LH出现峰值的时相与大小鼠有差异,为长爪沙鼠生殖生理特性的进一步研究提供了参考。     

离体培养的大鼠卵巢颗粒细胞和黄体细胞中松弛素样因子mRNA的表达及调节

目的:观察松弛素样因子(relaxin-like factor, RLF)mRNA在离体培养的大鼠卵巢颗粒细胞和黄体细胞中的表达,初步探讨影响其表达调控的可能机制.方法:离体培养来自健康Wistar大鼠卵巢的颗粒细胞和黄体细胞,分别加入血小板活化因子(PAF)、促性腺激素(FSH或hCG)、腺苷酸环化酶激动剂(Forscolin)、蛋白激酶C(PKC)激动剂佛波酯(PMA),以培养液作为对照.采用RT-PCR方法观察各组RLF mRNA的表达,每组设5个复孔.结果:离体培养的大鼠卵巢颗粒细胞和黄体细胞均有RLF mRNA的表达,颗粒细胞中加入PAF、FSH、Forscolin、PMA组RLF mRNA的表达均较对照组增强(P＜0.05或P＜0.01);黄体细胞中加入PAF、Forscolin、PMA组RLF mRNA的表达均较对照组增强(P＜0.05),但加入hCG组无明显变化.结论:大鼠卵巢颗粒细胞和黄体细胞RLF mRNA的表达受PAF的正性调节,蛋白激酶A(PKA)和PKC信号通路的激活可能促进RLF mRNA的表达.     

RLFmRNA在妊娠大鼠卵巢中的表达

目的:观察松弛素样因子(RLF)基因在妊娠大鼠卵巢中的表达,探讨RLF在大鼠妊娠中的作用.方法:采用RT-PCR方法.结果:妊娠第1天卵巢RLFmRNA高水平表达,妊娠第3天RLFmRNA水平最低,随着妊娠的进展,卵巢RLFmRNA的表达逐渐增加,至中期达到高水平,持续到妊娠后期.分娩前后RLFmRNA的水平出现波动,临近分娩RLFmRNA升高明显.结论:RLF参与妊娠的全过程.     

动情后期应用米非司酮对大鼠下丘脑弓状核和垂体β-内啡肽的影响

目的:探讨动情后期应用米非司酮对大鼠下丘脑弓状核和垂体β-内啡肽(β-EP)的影响. 方法:选择动情周期为4 d的大鼠40只,随机分为正常对照组(NC)和动情后期给药组(AM)各20只,采用免疫组化方法观察用药后的预期间情期和动情前期大鼠下丘脑弓状核和垂体β-EP的变化,以及卵巢和子宫内膜的形态学改变. 结果:①弓状核β-EP细胞计数显示:用药后在随后的预期间情期β-EP细胞数量高于对照组间情期数量(P<0.01),在随后的预期动情前期β-EP细胞数量亦高于对照组动情前期数量(P<0.01). ②垂体前叶β-EP细胞计数:用药后在随后的预期间情期β-EP细胞数量高于对照组间情期数量(P<0.05),在随后的预期动情前期β-EP细胞数量亦高于对照组动情前期数量(P<0.01). ③卵巢形态学变化:对照组间情期卵巢可见多个发育中的卵泡,直径较小,动情前期有数目较多的发育成熟的卵泡;动情后期给药组,在随后的预期间情期(24 h),发育中的卵泡少于对照组,直径较小,在预期的动情前期(48 h),发育卵泡仍然很少,直径较前变化不大,黄体较其他组大. ④对子宫内膜每横断面腺体数、腺腔直径、腺细胞高度和内膜厚度4参数的统计结果:动情后期给药组在随后的预期间情期(24 h),所有参数均高于对照组间情期(P<0.01);在随后的预期动情前期(48 h),所有数值均下降,子宫内膜厚度和腺细胞高度比对照组动情前期低(P<0.05);腺腔直径和腺体数与之无差异(P>0.05). 结论:动情后期单独应用米非司酮可影响大鼠下丘脑弓状核和垂体前叶β-EP神经元的数量,抑制相继的卵泡发育和延迟子宫内膜成熟. 动情后期应用米非司酮在一定剂量上影响性腺轴中枢部位,并可能进而影响卵巢和子宫内膜.     

生长期大鼠卵巢RLF mRNA的表达

目的：观察RLFmRNA在生长期大鼠卵巢中的表达，初步探讨RLF与卵泡发育的关系。方法：组织切片用苏木素-伊红（HE）染色，显微镜下观察卵泡发育情况；用逆转录聚合酶链方法（RT-PCR）观察RLFmRNA的表达趋势。结果：随着生长发育未成年大鼠大鼠卵巢中RLFmRNA的表达逐渐增强，青春前期达到高峰。结论：RLF可能参与雌性大鼠卵泡的发育过程。     

补肾化痰方对多囊卵巢综合征大鼠性激素及卵巢形态学的影响

目的:观察补肾化痰方对多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠性激素及卵巢形态学的影响。方法:采用皮下注射脱氢表雄酮造模法建立PCOS大鼠模型,60只造模大鼠随机分为模型对照组、二甲双胍组、补肾化痰方低剂量组、补肾化痰方高剂量组,另取15只大鼠为正常对照组,各组给予相应药物连续灌胃28 d。行阴道涂片、HE染色观察动情周期;用酶联免疫吸附测定法测定血清促黄体生成素、睾酮水平;行卵巢组织HE染色,光镜下观察卵巢组织形态学变化。结果:与对照组比较,模型组大鼠无规律的动情周期,血清促黄体生成素、睾酮水平升高,卵巢表面苍白、体积增大、黄体数目减少、呈多囊样改变。二甲双胍和补肾化痰方两个剂量组可明显降低模型大鼠血清促黄体生成素、睾酮水平,恢复大鼠动情周期,增加各级卵泡数目及黄体数目,改善卵巢形态学结构。与补肾化痰方低剂量组比较,补肾化痰方高剂量组降低睾酮水平更明显。结论:补肾化痰方可从总体上调节下丘脑-垂体-卵巢轴功能,降低多囊卵巢综合征大鼠促黄体生成素、睾酮水平,恢复大鼠动情周期,改善卵巢形态学结构。     

Peroxiredoxin Ⅵ mRNA在小鼠卵泡发育和卵巢衰老过程中表达

目的探讨Peroxiredoxin(PRDX)Ⅵ mRNA在小鼠卵泡发育和卵巢衰老过程中表达。方法分别选用C57BL/6j小鼠不同周龄、不同动情周期以及促性腺激素预处理卵巢,通过实时定量聚合酶链反应检测PRDXⅥmRNA表达。结果 PRDX Ⅵ mRNA在新生(3D)小鼠卵巢中表达为3周龄组的1.47倍、为6周龄组的3.89倍、为8月龄组的4.28倍(P<0.05);在小鼠动情前期卵巢中表达高于动情后期和动情间期(P<0.05);在促性腺激素预处理试验中,在孕马血清注射48 h后卵巢中表达是对照组的1.7倍,而人绒毛膜促性腺激素注射8、10及12 h后分别为对照组的0.44、0.41、0.54倍,而48 h后则为对照组的2.32倍(P<0.05)。结论 PRDX Ⅵ可能通过调节卵巢氧化应激压力而在卵泡发育和卵巢衰老中发挥重要调控作用。     

雌性大鼠动情周期杏仁基底核内nNOS阳性神经元的变化

目的研究雌性大鼠动情周期杏仁基底核内神经元性一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的表达变化。方法成年雌性大鼠32只被分成动情间期、动情前期、动情期和动情后期4组,冰冻切取脑片进行SABC免疫组织化学染色,并结合图像分析技术比较各组间杏仁基底核内nNOS阳性神经元的表达变化。结果①在杏仁核内,杏仁前区、杏仁基底核、杏仁外侧核及皮质内侧核是nNOS阳性细胞表达的主要区域,此外杏仁中央核及杏仁皮层核也有一定数量的nNOS阳性细胞表达。②杏仁基底核上的nNOS阳性细胞数在不同动情周期有明显变化:动情前期和动情后期明显多于动情期及动情间期。结论体内雌激素水平可能影响杏仁核内部分核团的nNOS阳性细胞的表达。     

雌性大鼠动情周期牙周组织中 ODF 与 IL-6 的节律表达

目的：探讨雌性大鼠动情周期牙周组织中破骨细胞分化因子（ODF）与白细胞介素-6（IL-6）的表达的节律性。方法：将48只9周龄雌性SD大鼠按动情周期不同阶段进行处死,免疫组化SP法检测不同动情周期磨牙牙周组织中ODF、IL-6表达变化情况。结果：大鼠动情周期不同阶段破骨因子ODF和IL-6均呈现规律性的波动,动情前期均呈现弱阳性,动情期均呈现强阳性,动情期与动情前期比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。动情后期和动情间期介于二者之间,丙两比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论：雌性大鼠牙槽骨破骨活动为动情期最活跃、动情前期最低下。这说明雌激素可能抑制破骨细胞的分化,从而一定程度的阻碍正畸牙移动的速率。这为临床女性患者选择正畸加力时期提供了理论基础。     

来曲唑诱导的多囊卵巢综合征大鼠卵巢组织中角质细胞生长因子的表达

目的:探讨角质细胞生长因子(KGF)在多囊卵巢综合征(PCOS)发病机制中的作用.方法:40只雌性SD大鼠随机分为2组,PCOS组应用来曲唑诱导大鼠PCOS模型,对照组不作任何处理.阴道涂片观察大鼠动情周期变化;应用放免法测定大鼠血清促黄体生成素(LH)、促卵泡刺激素( FSH)、雌二醇( E2)、孕酮(P)和睾酮(T)水平;取卵巢组织行HE染色和免疫组织化学SABC染色分别观察组织学变化及卵巢组织中KGF的表达.结果:PCOS组大鼠失去规律性动情周期变化,血清T、LH浓度高于对照组(P<0.05),血清P浓度低于对照组(P<0.05);PCOS组KGF在窦前卵泡膜细胞的表达明显强于对照组(P<0.05),在囊状卵泡膜细胞的表达明显弱于对照组(P＜0.05).结论:来曲唑诱导的大鼠动物模型是理想的PCOS模型;KGF与PCOS的发病密切相关.     

子宫内膜异位症大鼠血浆神经内啡肽特点及其对妊娠功能的影响

【目的】探讨血浆β-内啡肽(-βEP)水平对子宫内膜异位症(EMT)大鼠妊娠功能的影响。【方法】将雌性SD大鼠于第3个动情周期的动情期复制EMT模型,取造模成功大鼠20只,随机分为模型组和那曲酮(为阿片受体拮抗剂)组各10只,另设假手术组大鼠10只;那曲酮组于动情前期灌服那曲酮2 mg.kg-1.d-1,其他时间灌服等容积生理盐水,模型组和假手术组均灌服生理盐水,连续1个月;取血检测动情前期血清-βEP、促黄体生成素(LH)、催乳素(PRL)水平,在动情后期检测血清孕激素(P)水平以及妊娠功能指标。【结果】模型组大鼠动情前期血清-βEP、PRL水平升高,LH水平降低,动情后期血清P水平降低,与假手术组比较均具有显著性差异(P<0.05或P<0.01);那曲酮组大鼠动情前期血清-βEP、PRL水平降低,LH水平升高,动情后期血清P水平升高,与模型组比较均具有显著性差异(P<0.05或P<0.01);妊娠功能各指标中那曲酮组大鼠排卵数、孕育活胎数、受孕率、着床率均较模型组显著升高(P<0.05或P<0.01)。【结论】EMT模型大鼠血清-βEP水平升高是其妊娠功能障碍的原因之一,阿片受体拮抗剂可改善生殖内分泌状态而有效提高妊娠功能。     

去甲二氢愈创木酸对大鼠卵巢功能的影响

目的探讨血管生成抑制剂去甲二氢愈创木酸(nordihydroguaiaretic acid, NDGA)对有规律动情周期大鼠卵巢功能的影响.方法将有规律动情周期的雌性大鼠按不同的动情阶段随机分为NDGA组(N)和PBS组(P),隔日皮下注射16 d,观察给药前后血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、FSH和LH水平和给药后的交配情况及子宫和卵巢的形态学变化.结果 NDGA各组大鼠在给药后皆不能成功交配.免疫组化染色显示NDGA能显著抑制子宫内膜基质细胞增殖,减少内膜腺体数目,抑制腺上皮细胞增殖,抑制内膜血管增殖和减少微血管密度(MVD)(P<0.01).卵巢有成熟的黄体,但数目和面积比对照组显著减少,闭锁卵泡明显增多(P<0.01).血清E2显著降低,P在动情期和动情后期呈反向变化(P<0.01),FSH在动情期和动情后期明显升高(P<0.05),LH值与给药前比较没有统计学差异(P>0.05).结论长时间使用NDGA可以引起大鼠的卵巢功能紊乱.     

巨噬细胞集落刺激因子在多囊卵巢综合征大鼠卵巢中的表达及意义

目的建立非甾体类芳香化酶抑制剂（来曲唑）诱导雌性大鼠多囊卵巢综合征（PCOS）动物模型．观察巨噬细胞集落刺激因子（M—CSF）在PCOS大鼠卵巢中的表达,探讨其在PCOS发病机制中的作用。方法①选择6周龄SD清洁级雌性大鼠60只,随机分为实验组、实验对照组、空白对照组,每组各20只。应用来曲唑灌胃制备PCOS大鼠模型,观察三组大鼠动情周期的变化及双侧卵巢大体解剖及组织学改变。②放射免疫法测定血促黄体生成素（LH）、促卵泡激素（FSH）、雌二醇（E2）、孕酮（P）、睾酮（T）水平。③免疫组化法观察卵巢组织中M—CSF的表达。结果①PCOS组大鼠失去规律性动情周期变化,提示无排卵。②血清T、LH浓度高于对照组（P〈0．05）,血清P、E2浓度低于对照组（P〈0．05）。@实验组M—CSF在卵巢颗粒细胞和间质细胞的表达低于对照组（P〈0．05）。结论①来曲唑诱导的大鼠模型是理想的PCOS动物模型。②M—CSF参与了PCOS的发病机制。     

多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢中结缔组织生长因子及基质金属蛋白酶-9的表达

目的 探讨卵巢中结缔组织生长因子(CTGF)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达与多囊卵巢综合征的关系。方法 52只SPF级SD雌性大鼠(6周龄,具备规律动情周期)依照不同造模方式分为对照组和模型组,每组26只。对照组行羧甲基纤维素灌胃建模,模型组行等量来曲唑建模。分析研究对象动情周期不在出现固定规律,且具有连续性特征时,两组均采集其血清以及卵巢组织,采用放射免疫法(RIA)测定促黄体生成激素(LH)、促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E₂)、垂体泌乳素(PRL)、睾丸素等指标对大鼠内分泌改变情况进行评定分析;并应用免疫组织化学的方法使用CTGF一抗、二抗、三抗和MMP-9一抗、二抗、三抗来测定和分析两种因子在该疾病组织中的表达情况。结果 模型组PRL、LH、睾丸素、窦前卵泡卵泡膜胞浆中CTGF、黄体中MMP-9等表达高于对照组(P<0.05),FSH、E₂、卵泡基底膜内MMP-9表达水平均发生显著下降趋势(P<0.05)。结论 卵巢中结缔组织生长因子水平变化与该疾病中小卵泡过多表达或者排卵障碍之间存在一定关联性,MMP-9则与多...     

补肾助孕汤对雄激素致不孕大鼠的促排卵及卵巢IGF-1表达的影响

目的 探讨补肾助孕汤对雄激素致不孕大鼠(ASR)促排卵的作用机制.方法 选择9日龄SD龄雌性大鼠随机分为4组,正常对照组:皮下注射中性茶油;ASR模型组:皮下注射丙酸睾丸酮;中药组及西药组:ASR模型自81 d龄起,每天灌胃给药;连续28 d.采用阴道涂片测定大鼠动情周期及排卵率,采用ELISA法测定促卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)及孕酮(P)水平;采用免疫组织化学sp检测卵巢细胞胰岛素样生长因子(IGF-1)表达.结果 补肾助孕汤可明显增加大鼠卵巢组织各级卵泡及黄体数目,恢复排卵功能;提高血清中FSH、LH及P水平,并且降低卵巢细胞中IGF-1的表达.结论 补肾助孕汤可通过调节卵巢局部因子IGF-1及相应激素,促进卵泡生长发育及排出.     

伍用雌孕激素对雷公藤致雌鼠生殖系统损害的保护作用

目的观察雷公藤多苷伍用雌孕激素对雌鼠生殖系统的影响。方法将具有正常动情周期的雌性大鼠随机分为3组,以生理盐水组为对照,观察雷公藤多苷(TWP)组及TWP伍用激素替代治疗(TWP HRT)组大鼠子宫卵巢的重量、动情周期、血清雌激素(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)水平及卵巢子宫的病理变化。结果与对照组相比,TWP组大多动情周期延长或紊乱,E2降低(P<0.05),FSH及LH水平升高(P<0.05),卵巢及子宫重量明显下降(P<0.05),卵巢各级卵泡减少,子宫内膜变薄,腺体减少;TWP HRT组无明显改变。结论在TWP治疗的同时伍用HRT可减少TWP对雌鼠生殖系统的损伤,保护卵巢功能。     

IGF-Ⅰ和TGF-β1 在多囊卵巢综合征大鼠卵巢中的表达及意义

目的 探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)在多囊卵巢综合征(PCOS)发病机制中的作用.方法 40只雌性Wistar大鼠随机分为PCOS组和对照组,每组各20只.PCOS组应用来曲唑{1-[双-(4-氰基苯基)甲基]-1,2,4-三氮唑}灌胃制备PCOS大鼠模型,对照组不作任何处理.阴道涂片观察大鼠动情周期变化;运用放免法测定大鼠血清黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)和睾酮(T)水平;光镜观察卵巢、卵泡发育情况;免疫组化法观察卵巢组织中IGF-Ⅰ和TGF-β1的表达.结果 PCOS组大鼠失去规律性动情周期变化.血清T、LH浓度高于对照组(P<0.05),血清E2、FSH、P浓度低于对照组(P<0.05).IGF-Ⅰ在PCOS组颗粒细胞的表达明显强于对照组(P<0.05),TGF-β1在PCOS组卵泡膜细胞和间质细胞的表达明显强于对照组(P<0.05).结论 来曲唑诱导的大鼠动物模型是较好的PCOS模型.IGF-Ⅰ和TGF-β1与PCOS的发病密切相关.