调经助孕方对雄激素致不孕大鼠排卵作用的影响

目的:观察调经助孕方对雄激素致不孕大鼠排卵的促进作用。方法:采用9 d龄雌性大鼠注射丙酸睾丸酮建立雄激素致不孕大鼠模型,随机分为模型组及中药组,并另设正常对照组;自81 d龄起,中药组灌胃调经助孕方,模型组与正常组灌胃等量蒸馏水,连续30 d。采用阴道涂片测定大鼠动情周期及排卵率,采用ELISA法测定卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)、雌激素(E2)、脱氢表雄酮(DHA)。结果:模型组大鼠表现为动情间期延长,且丧失正常性周期;中药组动情周期出现周期性变化,排卵恢复率为66.7%,两组差异有统计学意义(P0.05)。模型组大鼠FSH、LH和E2含量明显低于正常组(P0.05),DHA、T含量明显高于正常组(P0.05);与模型组比较,中药组大鼠FSH、LH和E2含量明显升高(P0.05),DHA、T含量明显降低(P0.05)。结论:调经助孕方能够明显提高雄激素致不孕大鼠的排卵率,改善大鼠生殖内分泌轴功能。     

补肾调经方对雄激素诱导无排卵大鼠血清生殖激素及子宫、卵巢性激素受体水平的影响

目的探讨补肾中药治疗无排卵性疾病的作用机理、作用环节和作用部位.方法建立雄激素致无排卵大鼠模型,分为中药组、模型组,并设正常对照组,观察血清生殖激素、卵巢和子宫重量指数及其形态学变化,分析雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)在卵巢和子宫的表达强度.结果补肾中药可升高卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)水平,降低催乳素(PRL)水平,改善病理状态下的卵巢及子宫的形态结构,使卵巢和子宫ER、PR表达增强.结论提示补肾中药可通过对垂体、卵巢和子宫的调节而促进卵泡和子宫发育.     

助孕胶囊对多囊卵巢综合征大鼠性激素含量及胰岛素样生长因子-1表达的影响

目的:探讨中药助孕胶囊(ZYJN)对多囊卵巢(PCO)大鼠的治疗作用并分析其可能的作用机制。方法:采用皮下埋植左旋18-甲基炔诺酮硅胶棒的方法制作动物模型,将大鼠随机分为模型组、助孕胶囊组、克罗米酚组、联合用药(助孕胶囊 克罗米酚)组及对照组,运用放免法测定血性激素水平的变化,光镜观察卵巢、卵泡发育情况,免疫组化法检测卵巢组织胰岛素样生长因-1的表达水平。结果:助孕胶囊可使PCO大鼠的颗粒细胞层增厚,卵泡膜细胞层变薄,血清T、LH水平均明显下降,并下调卵巢组织胰岛素样生长因子-1的表达。结论:助孕胶囊能够通过调整内分泌及影响卵巢胰岛素样生长因子-I的表达,在中枢及卵巢局部协调发挥作用,从而调整性腺功能,促进卵泡的发育成熟及排卵。     

雄激素致不孕大鼠卵巢血红素加氧酶蛋白的表达

目的:研究血红素加氧酶蛋白在雄激素致不孕模型大鼠卵巢的表达。方法:9日龄SD雌性大鼠颈背部皮下注射丙酸睾丸酮制造无排卵不孕模型,3~4月龄时选取动情前期断头处死,采用免疫组化法,观察并比较血红素加氧酶蛋白在ASR和正常大鼠卵巢的表达。结果:与正常组相比,HO-1和HO-2在ASR卵巢颗粒细胞表达减弱,在ASR泡膜细胞表达增强。结论:ASR无排卵的发生可能与血红素加氧酶两个亚型的表达异常有关。     

助孕胶囊对多囊卵巢大鼠血清性激素及卵巢肿瘤坏死因子α表达的影响

目的观察助孕胶囊对多囊卵巢(PCO)大鼠生殖内分泌激素、卵巢组织肿瘤坏死因子α表达的影响,探讨其对PCO模型大鼠可能的作用机制。方法采用孕激素联合人绒毛膜促性腺激素(HCG)造模法制备PCO模型大鼠。随机分为对照组、PCO模型组(模型组)、PCO模型组 助孕胶囊组(中药组)、PCO模型组 克罗米酚组(西药组),运用放免法测定血清性激素水平的变化;光镜观察卵巢、卵泡发育的影响,免疫组化学法检测卵巢组织肿瘤坏死因子α表达水平。结果助孕胶囊可使PCO大鼠的颗粒细胞层增厚,卵泡膜细胞层变薄,血清T、LH水平均明显下降,并下调卵巢组织肿瘤坏死因子α的表达。结论助孕胶囊能够通过调整内分泌及影响卵巢肿瘤坏死因子α的表达,在中枢及卵巢局部协调发挥作用,从而调整性腺功能,促进卵泡的发育成熟及排卵。     

补肾助孕方对LPD模型大鼠垂体GnRH受体信号转导系统的影响

目的 补肾助孕方是夏桂成教授治疗黄体功能不全的经验方,前期研究已表明该方对卵巢与子宫功能具有改善作用,但对其上游的垂体作用尚不明确,本研究通过观察补肾助孕方对大鼠垂体促性腺激素及促性腺激素释放激素(GnRH)受体信号系统的影响,探究其作用机制,寻找中医心-肾-子宫轴理论的现代科学依据。方法 采用米非司酮对SD雌鼠进行造模,并进行药物干预。采用ELISA法检测大鼠血清样本促黄体生成激素（LH）和促卵泡成熟激素（FSH）水平,qPCR法检测各组大鼠垂体FSHβ、LHβ基因转录水平。对大鼠垂体GnRH受体信号转导系统关键分子以及下游重要转录因子分别采用qPCR与Western blot方法检测其基因转录与蛋白表达水平。结果 补肾助孕方显著提高了由米非司酮诱导的血清低FSH水平与垂体GnRH受体低表达（P<0.05）,补肾助孕方组高、低剂量组中PKC、p38MAPK、JNK、ERK、PKA等关键信号转导分子以及c-Jun、Elk-1、Egr-1、CREB等转录因子的mRNA及蛋白表达均显著高于模型组（P<0.05）,但CAM及其下游的Nur77在各组间均无显著差异。结论 补肾助孕方能够通过调节垂体GnRH受体信号转导系统调节垂体促性腺激素的分泌水平,证明该方具有调节生殖轴整体功能的作用,阐释了中医心-肾-子宫轴理论与现代医学下丘脑-垂体-卵巢轴在内容上的一致性。      

胰岛素对卵巢卵泡膜细胞黄体生成素/人绒毛膜促性腺激素受体表达的影响

目的:研究胰岛素对猪卵巢卵泡膜细胞黄体生成素/人绒毛膜促性腺激素(luteinizing hormone/human chorionic gonadotropin ,LH /hCG)受体表达的影响.方法:采用细胞免疫组化及Western blot 法分别检测LH /hCG受体的蛋白表达水平.结果:细胞免疫组化结果显示促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)+黄体生成素(luteinizing hormone,LH)处理的细胞淡黄色着色且阳性细胞数少;而FSH+LH+胰岛素(insulin,INS)处理的细胞为深黄色着色,阳性细胞数多,FSH+LH+INS组光密度(0.353±0.013)与FSH+LH组(0.287±0.009)相比LH/hCG 受体表达明显增强,差异有显著性,P<0.01.Western blot结果显示FSH+LH+INS组(6598±388)LH/hCG 受体蛋白分别在6×103、5×103、3.5×103出现条带,而FSH+LH组(2237±395)仅在6×103处出现条带,两组比较,差异有显著性,P<0.01.结论:胰岛素可以增强卵泡膜细胞LH /hCG 受体的表达,这可能是PCOS合并高胰岛素血症患者卵泡发育停滞的原因之一.     

滋肾养心补血汤对卵巢储备功能低下模型大鼠性激素及排卵功能的影响

目的:观察滋肾养心补血汤对卵巢储备功能低下大鼠性激素水平及排卵功能的影响。方法:选取具有规律动情周期的大鼠60只,随机抽取15只为空白对照组,余45只制作卵巢储备功能低下模型。造模成功后将模型大鼠随机分为:模型对照组、滋肾养心补血汤组、补佳乐组。各组药物干预后检测血清促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、雌二醇(estradiol,E_2)水平及对卵巢组织窦卵泡和黄体计数。结果:与模型对照组比较,滋肾养心补血汤组能下调大鼠FSH、LH水平、上调大鼠E_2水平,能增加大鼠卵巢窦卵泡及黄体数目,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:滋肾养心补血汤可有效改善卵巢储备功能低下大鼠性激素水平和排卵功能。     

滋肾养心补血汤对卵巢储备功能低下模型大鼠性激素及排卵功能的影响

目的:观察滋肾养心补血汤对卵巢储备功能低下大鼠性激素水平及排卵功能的影响。方法:选取具有规律动情周期的大鼠60只,随机抽取15只为空白对照组,余45只制作卵巢储备功能低下模型。造模成功后将模型大鼠随机分为:模型对照组、滋肾养心补血汤组、补佳乐组。各组药物干预后检测血清促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、雌二醇(estradiol,E_2)水平及对卵巢组织窦卵泡和黄体计数。结果:与模型对照组比较,滋肾养心补血汤组能下调大鼠FSH、LH水平、上调大鼠E_2水平,能增加大鼠卵巢窦卵泡及黄体数目,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:滋肾养心补血汤可有效改善卵巢储备功能低下大鼠性激素水平和排卵功能。     

IGF-Ⅰ和TGF-β1 在多囊卵巢综合征大鼠卵巢中的表达及意义

目的 探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)在多囊卵巢综合征(PCOS)发病机制中的作用.方法 40只雌性Wistar大鼠随机分为PCOS组和对照组,每组各20只.PCOS组应用来曲唑{1-[双-(4-氰基苯基)甲基]-1,2,4-三氮唑}灌胃制备PCOS大鼠模型,对照组不作任何处理.阴道涂片观察大鼠动情周期变化;运用放免法测定大鼠血清黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)和睾酮(T)水平;光镜观察卵巢、卵泡发育情况;免疫组化法观察卵巢组织中IGF-Ⅰ和TGF-β1的表达.结果 PCOS组大鼠失去规律性动情周期变化.血清T、LH浓度高于对照组(P<0.05),血清E2、FSH、P浓度低于对照组(P<0.05).IGF-Ⅰ在PCOS组颗粒细胞的表达明显强于对照组(P<0.05),TGF-β1在PCOS组卵泡膜细胞和间质细胞的表达明显强于对照组(P<0.05).结论 来曲唑诱导的大鼠动物模型是较好的PCOS模型.IGF-Ⅰ和TGF-β1与PCOS的发病密切相关.     

调经汤治疗卵巢早衰的药效学研究

目的:观察调经汤对卵巢早衰大鼠卵巢功能的影响。方法:将60只雌性成熟未交配Wistar大鼠,随机分为正常组、模型组、阳性药物(雌二醇)对照组、调经汤高、中、低剂量组,腹腔注射顺铂溶液制作大鼠卵巢早衰动物模型,观察大鼠动情周期、血清性激素FSH、E2和LH的变化及卵巢组织的病理改变。结果: 模型组和阳性药物对照组大鼠无稳定的动情周期,调经汤高、中剂量组逐渐恢复规律的动情周期。模型组血清E2水平含量降低,血清FSH和LH含量均升高,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,调经汤高中低剂量组血清FSH水平含量明显降低、E2含量明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);血清LH含量水平降低,差异无统计学意义(P>0.05)。模型组大鼠卵巢萎缩,卵泡生长少,闭锁卵泡增加,部分被纤维组织代替,黄体数量少,子宫内膜明显变薄。调经汤高、中、低剂量组能不同程度的增多卵泡数量和黄体数目,子宫内膜也有所增厚。结论:调经汤能有效改善顺铂诱导的模型大鼠卵巢功能。     

中药结合激素对卵巢早衰大鼠血清AMH及VEGF影响

目的：研究中药结合雌孕激素对卵巢早衰模型大鼠血清AMH及VEGF的影响。方法：建立免疫性卵巢早衰大鼠模型,造模成功者随机分为模型对照组、纯中药组、纯西药组和中西医结合组,每组各10只,另设空白对照组。空白及模型对照组予蒸馏水灌胃,纯中药组予育肾养血方汤剂灌胃．纯西药组予补佳乐及安宫黄体酮灌胃,中西医结合组予育肾养血方联合补佳乐及安宫黄体酮灌胃,14d后用ELISA法检测大鼠血清AMH、VEGF水平。结果：中西医结合组大鼠血清AMH、vEGF均高于纯中药组或纯西药组（P〈0．001）。结论：中西医结合方案在提高卵巢早衰模型大鼠血清AMH、VEGF方面。疗效明显好于纯中药组或纯西药组。     

外源性雌激素及二仙汤对雷公藤多苷诱导大鼠卵巢早衰防治作用的比较研究

目的：比较外源性雌激素和二仙汤对雷公藤多苷诱导的卵巢早衰的防治作用。方法：将雌性sD大鼠随机分为空白对照组、模型组、雌激素组和二仙汤组。应用雷公藤多苷制备卵巢早衰大鼠病理模型,空白组与模型组均灌胃给予生理盐水,雌激素组和二仙汤组分别灌胃给予雌激素和二仙汤。干预21d后,检测大鼠子宫、卵巢和肾上腺脏器系数,应用放免法检测血清雌激素（E2）、黄体生成素（LH）和卵泡刺激素（FSH）的水平。结果：外源性雌激素能够显著增加子宫、卵巢和肾上腺脏器系数（P〈0．05,P〈0．01）,能够恢复卵巢早衰大鼠E2水平（P〈0．05）,而LH和FSH无明显变化;二仙汤组大鼠卵巢和肾上腺脏器系数显著增加（P〈0．05,P〈0．01）,子宫脏器系数和血清性激素水平无明显变化。结论：外源性雌激素能够改善雷公藤多苷片诱导的卵巢早衰,疗效优于二仙汤。     

右归丸对雄激素致排卵障碍性不孕症大鼠的影响研究

目的：右归丸对雄激素致排卵障碍性不孕大鼠的影响,以进一步探讨右归丸治疗不孕症的作用机理。方法：将31只9日龄SD雌性大鼠随机分为空白对照组,模型组,右归丸组,于颈背下注射丙酸睾丸酮建立ASR大鼠模型,第80天开始灌服右归丸制剂,5周后取材,检测大鼠体重、卵巢和子宫指数;观察卵巢和子宫形态学,用放免法检测血中FSH、LH和E2水平。结果：右归丸可降低雄激素致排卵障碍性不孕大鼠的体重趋势,提高卵巢和子宫的指数（P〈0.01）;提高卵泡数和黄体数,减少病理性囊性卵泡,子宫腺体明显增多,（P〈0.01）;提高大鼠血清内FSH、LH以及E2水平（P〈0.05）。结论：右归丸可增加雄激素致排卵障碍性不孕症大鼠的卵巢、子宫的相对重量,促进卵泡的生长发育,增加FSH、LH以及E2水平,表明右归丸可通过调节下丘脑—垂体—卵巢轴,从而促进卵泡的生长发育及排出。     

女禛汤治疗阴虚内热型卵巢储备功能下降临证经验初探

目的 探讨女禛汤治疗阴虚内热型卵巢储备功能下降（diminished ovarian reserve,DOR）的临床疗效。方法 70例DOR患者,用EXCEL软件生成随机序列数,按照1：1的比例,分为女禛汤治疗组和坤泰胶囊对照组。两组均从月经第5天开始服药,至下次月经来潮第一天停药。3个月为一个疗程。随访6个月。治疗前后监测中医证候评分及血清内分泌指标[血清卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone,FSH）、黄体生成素（luteinizing hormone,LH）、雌二醇（estradiol,E₂）、抗苗勒管激素（anti-Mullerian hormone,AMH）和抑制素B （inhibin B,INHB）浓度]、窦卵泡计数（antral follicle count,AFC）等。结果 两组均可有效改善阴虚内热型卵巢储备功能下降患者的中医证候,降低中医证候评分,降低月经第2~4 d血清FSH、FSH/LH浓度,提高血清AMH浓度和AFC数量,女禛汤治疗组优于坤泰胶囊对照组。结论 女禛汤可以通过提高卵巢反应性,从而改善卵巢储备功能。     

雌孕激素替代治疗联合六味地黄丸在肾阴虚型卵巢早衰治疗中的作用

目的探讨雌孕激素替代治疗联合六味地黄丸在肾阴虚型卵巢早衰治疗中的价值。方法选择肾阴虚型卵巢早衰病人164例,分为4组,A组41例,采用常规的雌孕激素替代治疗;B组43例,采用六味地黄丸治疗;C组40例,采用雌孕激素及六味地黄丸联合治疗;D组40例,不用药。分别于治疗或观察3个周期和6个周期后进行中医症候评分及血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌激素(E2)水平测定。结果A、B、C组在治疗3、6个周期后,与D组比较,FSH、LH水平均明显下降(P＜0.01),E2水平明显升高(P＜0.01),且与治疗前相比差异有统计学意义(P＜0.01)。A、B、C组在治疗3、6个周期后临床症状积分均较治疗前明显降低(P＜0.01)。D组在观察3、6个周期后FSH、LH的下降水平、E2上升水平及中医症候积分与观察前相比差异均无统计学意义(P>0.05)。A、B、C组在治疗后的总有效率均达到75%以上,明显高于D组的17.50%(P＜0.01),C组在治疗后总有效率最高,达82.5%。结论雌孕激素与六味地黄丸均可有效改善肾阴虚型卵巢早衰病人的性激素水平和临床不适症状,两者联合效果更好,值得临床借鉴。     

补肾调经汤治疗多囊卵巢综合征所致不孕临床研究

目的:观察补肾调经汤治疗多囊卵巢综合征肾虚证所致不孕的临床疗效。方法:将89例多囊卵巢综合征肾虚证所致不孕患者按照随机分组法分为治疗组46例和对照组43例。对照组给予常规西药治疗,治疗组在对照组基础上加补肾调经汤治疗。两组患者疗程均为3个月经周期。比较两组患者临床疗效、激素水平、排卵情况、妊娠情况、卵巢体积、子宫内膜厚度和不良反应情况。结果:治疗组有效率为93.48%,对照组有效率为69.77%,两组比较,差异有统计学意义(P0.05);两组患者雌二醇(estradiol,E_2)、卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)治疗后水平较治疗前无明显变化,差异无统计学意义(P0.05),而促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)治疗后较治疗前显著减少,差异有统计学意义(P0.05),治疗组LH治疗后显著低于对照组,而E_2、FSH治疗后水平较对照组无明显变化,差异无统计学意义(P0.05);治疗组排卵率为89.13%,对照组排卵率为72.09%,两组比较,差异有统计学意义(P0.05);治疗组妊娠率为86.96%,对照组妊娠率为55.81%,两组比较,差异有统计学意义(P0.05);两组卵巢体积治疗后较治疗前显著减少,差异有统计学意义(P0.05);子宫内膜厚度较治疗前显著增加,差异有统计学意义(P0.05);治疗组卵巢体积显著小于对照组,差异有统计学意义(P0.05);子宫内膜厚度显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:补肾调经汤治疗多囊卵巢综合征肾虚证所致不孕临床疗效显著,补肾调经汤能够明显提高治疗疗效,降低LH水平,提高患者排卵和妊娠,增加子宫内膜厚度,减小卵巢体积,且未见明显不良反应。     

补肾活血汤在多囊卵巢综合征促排卵中的疗效

目的补肾活血汤在多囊卵巢综合征促排卵方案中的疗效。方法将120例多囊卵巢综合征不孕患者随机分为西药组和中药组各60例,西药组给予枸橼酸氯米芬促排卵治疗,中药组在西药组基础上加用补肾活血汤,监测两组治疗后卵泡大小、排卵率、妊娠率及流产率的变化。结果中药组治疗后卵泡增大、排卵率及妊娠率增高、流产率降低与西药组治疗后比较均有统计学意义(P﹤0.05)。结论补肾活血汤能较好地促进卵泡发育、软化卵巢包膜、诱发排卵。     

菟丝子总黄酮对大鼠卵巢储备功能减退的改善作用

【目的】探讨菟丝子总黄酮通过卵泡刺激素(FSH)-环磷酸腺苷(c AMP)信号轴对大鼠卵巢储备功能减退的改善作用。【方法】从68只雌性SD大鼠中抽取10只为正常组,其余构建卵巢储备功能减退模型。将成功建模的48只大鼠随机分为抑制剂组、模型组、抑制剂+菟丝子总黄酮组、菟丝子总黄酮组,每组12只。抑制剂组灌胃H-89 0.1 mg/kg,抑制剂+菟丝子总黄酮组灌胃H-89 0.1 mg/kg+菟丝子总黄酮530.1 mg/kg,菟丝子总黄酮组灌胃菟丝子总黄酮530.1 mg/kg,模型组、正常组灌胃等体积生理盐水,均连续4周,每周休息1 d。给药4周后,称取各组大鼠卵巢湿质量,计算卵巢指数,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测大鼠血清性激素水平,苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢组织形态学变化,ELISA法检测卵巢组织中cAMP含量,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测卵巢组织卵泡刺激素受体(FSHR)、蛋白激酶A(PKA)及磷酸化PKA(p-PKA)表达。【结果】模型组大鼠进食、二便、毛色、动情周期出现异常,卵巢萎缩明显,卵泡数量、黄体减少;与模型组比较,抑制剂组大鼠进食、二便、毛色、动情周期异常情况更严重,卵巢萎缩更明显,卵泡与黄体数量更少,而抑制剂组+菟丝子总黄酮组、菟丝子总黄酮组大鼠进食、二便、毛色、动情周期,卵巢、卵泡与黄体数量明显改善。与正常组比较,抑制剂组、模型组、抑制剂+菟丝子总黄酮组、菟丝子总黄酮组的左侧和右侧卵巢湿质量及卵巢指数降低,FSH、FSH/LH、E;水平升高,卵巢组织中cAMP含量降低,FSHR、p-PKA蛋白相对表达量降低(P<0.05);与抑制剂组比较,模型组、抑制剂+菟丝子总黄酮组、菟丝子总黄酮组的左侧和右侧卵巢湿质量及卵巢指数升高,FSH、FSH/LH、E;水平降低,卵巢组织中cAMP含量升高,FSHR、p-PKA蛋白相对表达量升高(P<0.05);与模型组比较,抑制剂+菟丝子总黄酮组、菟丝子总黄酮组的左侧和右侧卵巢湿质量及卵巢指数升高,FSH、FSH/LH、E;水平降低,卵巢组织中c AMP含量升高,FSHR、p-PKA蛋白相对表达量升高(P<0.05);与抑制剂+菟丝子总黄酮组比较,菟丝子总黄酮组的左侧和右侧卵巢湿质量及卵巢指数升高,FSH、FSH/LH、E;水平降低,卵巢组织中cAMP含量升高,FSHR、p-PKA蛋白相对表达量升高(P<0.05)。【结论】菟丝子总黄酮可能通过FSH-cAMP信号轴改善大鼠卵巢储备功能减退。