HBx抑制RXRα表达对肝细胞癌DNMT3a表达的影响及初步机制研究

目的 探讨维甲酸X受体α(retinoid X receptor α,RXRα)在乙肝病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)上调肝细胞癌DNA甲基转移酶3a(DNA methyltransferases 3a,DNMT3a)表达中的作用及机制.方法 采用RT-PCR和Western blot检测12例正常肝组织、56例HBV阳性的肝细胞癌和癌旁组织中DNMT3a、RXRα的基因和蛋白表达变化;在培养的SMMC-7721细胞中,转染HBx基因和RXRα基因,观察对其DNMT3a表达的影响;在转染HBx基因的SMMC-7721细胞中,分别加入信号通路阻断剂,观察何种信号通路在HBx调节RXRα的表达中发挥作用.结果 与正常肝组织相比,肝癌组织与癌旁组织中DNMT3a的基因和蛋白表达量显著升高(P＜0.01),肝癌组织与癌旁组织中RXRα的基因和蛋白表达量显著降低(P＜0.01);在SMMC-7721细胞中,HBx的过表达使RXRα的蛋白表达量显著降低(P＜0.01),DNMT3a的蛋白表达量显著升高(P＜0.01),而RXRα与HBx共转染,则可降低HBx升高的DNMT3a蛋白表达量(P＜0.01);MKK/MEK抑制剂PD98059和p38 MAPK抑制剂SB203580可显著升高HBx下调的RXRα基因和蛋白表达(P＜0.01).结论 HBV产生的HBx蛋白可能通过MAPK信号通路,降低RXRα表达,引起促癌基因DNMT3a蛋白含量增加.     

黄芪多糖对糖尿病仓鼠脂代谢紊乱及心肌PPAR-α表达的影响

 目的 观察黄芪多糖（astragalus polysaccharides,APS）对糖尿病（diabetes mellitus,DM）仓鼠糖脂代谢和过氧化物酶体增生物激活体-α（proxisome proliferator activated receptors-α,PPAR-α）及其下游基因表达的影响,探讨其对DM心肌病变可能的干预机制。方法 45只仓鼠随机分为3组。正常对照组：健康仓鼠15只;DM组：链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病仓鼠15只;APS治疗组：STZ诱导糖尿病仓鼠15只,每天给予APS 2 g/kg,灌胃10周。分别检测3组仓鼠的血糖、血脂、胰岛素、C肽、心肌酶谱水平,心肌细胞超微结构,荧光定量RT-PCR法和Western blot法分别检测心肌PPAR-α及靶基因（FATP、ACS）mRNA和蛋白的表达。结果 DM组与正常组比较有明显的脂代谢紊乱;APS治疗组血糖、糖化血清蛋白、心肌酶谱和血脂水平较DM组明显下降,胰岛素和C肽水平无差异;APS治疗组心肌超微结构异常较DM组明显改善;APS组心肌组织PPAR-α、FATP和ACS的基因及蛋白表达较DM组显著增高。结论 APS可以通过影响PPAR-α表达部分改善糖尿病仓鼠心肌脂代谢紊乱。     

IL-1β对HepG2细胞核受体RXRα蛋白表达的影响

目的研究白细胞介素1β（interleukin 1 beta,IL-1β）诱导人肝癌细胞HepG2维甲酸X受体α（retinoid Xreceptor alpha,RXRα）蛋白核-胞浆转移现象及其基因水平变化。方法 IL-1β处理HepG2细胞,收集不同时间点RXRα总蛋白、胞浆蛋白、核蛋白及mRNA;同时用蛋白酶体抑制剂,MG132预处理HepG2细胞后IL-1β诱导细胞,收集细胞蛋白及mRNA,应用Western blot及实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,real-time PCR）检测RXRα总蛋白、胞浆蛋白、核蛋白及mRNA水平的变化。结果总胞核RXRα蛋白表达量降低（P〈0.05）,胞浆RXRα蛋白表达量增高（P〈0.05）,RXRαmRNA水平在6、12 h升高（P〈0.05）。MG132可以抑制IL-1β对细胞核、胞浆RXRα蛋白表达水平的变化。结论 IL-1β可以诱导HepG2细胞RXRα核-胞浆转移,RXRα核-胞浆转移可能与泛素-蛋白酶体降解途径相关。     

凝胶阻滞检测核蛋白-DNA结合方法的探讨

目的：探讨改良的凝胶阻滞法用于核蛋白-DNA结合的检测。方法：培养人真皮成纤维细胞，用维甲酸刺激不同时段，抽提其核蛋白，与32P-标记维甲酸反应元件（RARE）及维甲类X受体α、β（RXRα、β）抗体结合，进行凝胶阻滞分析。结果：细胞于不同状态可出现迁移率不同的条带，加入RXRβ抗体可产生新的上移条带。结论：改良后的凝胶阻滞法较简单灵敏，可用于核蛋白-DNA结合的检测。     

丹参酮IIA对急性重症肝炎小鼠p53的影响

目的研究丹参酮IIA（TSN）对小鼠急性重症肝炎模型p53调控肝细胞凋亡的影响,进一步阐明丹参酮IIA对肝脏保护作用的机理。方法将120只C57BL／6小鼠随机分为6组,每组20只：丹参酮IIA（大、中、小）剂量组、模型组、阳性药物对照组和正常对照组,分别予TSNIIA100mg／（kg·d）、30mg,／（kg·d）、10mg／（kg·d）、羧甲基纤维素钠（CMC）、N-乙酰半胱氨酸500rag／kg和CMC连续灌胃4天后进行急性重症肝炎模型处理;正常对照组予等量生理盐水处理。观察各组10只6、12、18、24、36、48h死亡率。其余10只用于在同一时间点处死行急性肝损伤的评定。结果丹参酮IIA（大、中、小）剂量组、模型组、阳性药物对照组的48h死亡率分别是100％、90％、80％、70％、80％。肝功能指标、肝脏坏死程度、凋亡小体数量、凋亡指数以及p53基因与p53蛋白。结论丹参酮IIA能够下调促凋亡基因p53,通过抑制p53蛋白的生成和促进其降解,减少细胞的凋亡。丹参酮IIA通过减轻肝脏的炎症反应和抑制肝细胞凋亡的双重机制实现对肝脏保护作用,且这种保护作用呈剂量依赖性关系。     

孕期和哺乳期大鼠肝脏胆酸和胆酸调控法尼醇X受体、小异二聚体伴侣受体和胆固醇7α-羟化酶的变化

目的：研究健康SD鼠在妊娠和哺乳期肝脏胆酸代谢基因的变化。方法取孕10、14、19 d及产后1、7、14、21 d的大鼠肝脏,检测胆酸水平和肝脏法尼醇X受体（FXR）、小异二聚体伴侣受体（SHP）、胆固醇7α‐羟化酶（Cyp7α1）的表达。用West‐ern blot法测Cyp7α1的蛋白表达情况。结果孕晚期健康大鼠,肝脏中胆酸及Cyp7α1表达不升高;哺乳期的大鼠,肝脏胆酸增加,FXR表达升高;在孕晚期及哺乳期靶基因SHP表达均高于对照组,且其表达高峰期是第孕19天,其值可达对照组的6倍之多。结论健康大鼠在产后肝脏胆酸合成增加,而孕期减少,可能与Cyp7α1、FXR及SHP表达有关。     

KCN基因对小鼠脂代谢的影响及其机制初探

目的研究钾离子电压门控通道(potassium voltage-gated channel,KCN)基因对小鼠脂代谢的影响及其相关信号通路,为治疗糖尿病的脂肪异常提供新的治疗靶点。方法采用KCN基因敲除的小鼠模型及对照C57BL/6野生小鼠动物模型,检测三酰甘油、胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇等脂代谢相关指标。HE染色观察小鼠肝脏组织脂肪变。Western blotting法测定小鼠肝脏组织腺苷酸激活蛋白激酶[adenosine 5'-monophosphate(AMP)-activated protein kinase,AMPK]通路相关蛋白的表达。结果 KCN基因敲除小鼠较野生型对照小鼠血清中三酰甘油、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇浓度均明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)高密度脂蛋白明显降低,肝脏HE染色显示基因敲除小鼠肝脏内脂滴的数目和体积均与野生型有明显差异,Western blotting结果显示KCN基因敲除小鼠肝脏组织中磷酸化蛋白激酶B(phosphate-protein kinase B,Phos-AKT)、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(phosphate-acetyl CoA carboxylase,Phos-ACC)、phos-AMPK浓度均较正常对照组小鼠表达量降低,phosACCα水平较正常对照组小鼠明显增高差异有统计学意义(P<0.05)。结论 KCN基因对小鼠血脂代谢有保护作用,其作用机制与AMPK的脂肪酸氧化有关。     

天麻粉改善脂肪乳剂灌胃大鼠肝脏脂肪变性的实验研究

目的研究天麻粉对脂肪乳剂灌胃大鼠肝脏脂肪变性的作用。方法采用雄性SD大鼠,以脂肪乳剂灌胃建立高血脂和脂肪肝模型。共28只大鼠随机分为4组,分别为基础饲料对照组、脂肪乳剂灌胃组、脂肪乳剂灌胃＋天麻粉250mg／kg和525mg／kg组,每组7只,疗程28d。实验前后测定大鼠体重、血清总胆固醇（CHO）、三酰甘油（TG）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）、谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）。实验结束后处死动物,取肝脏称重并计算肝指数。取肝组织固定、切片,H＆E染色进行病理学检查观察肝脏脂肪变性程度并照相。另取部分肝组织提取脂肪测定其中CHO和TG含量。结果脂肪乳剂灌胃28d后大鼠出现显著高脂血症,肝脏重量和肝指数显著增加;与基础饲料对照组比较,脂肪乳剂灌胃组7只大鼠均出现中、重度肝脏脂肪变性,肝脏CHO和TG含量增加以及肝功能损害。脂肪乳剂灌胃＋天麻粉525mg／kg组大鼠血清中CHO、LDL—C和TG水平较脂肪乳剂灌胃组分别降低24．6％、23．2％和30．4％,差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。脂肪乳剂灌胃＋天麻粉250mg／kg组大鼠肝脏重量和肝指数较脂肪乳剂灌胃组分别减少约15．4％和14．8％（P〈0．05）,脂肪乳剂灌胃＋天麻粉525mg／kg组则分别减少25．1％和24．2％（P〈0．01）。脂肪乳剂灌胃＋天麻粉250mg／kg组7只大鼠中有3例轻度和4例中度肝脏脂肪变性,较脂肪乳剂灌胃组有改善（P〈0．05）;脂肪乳剂灌胃＋天麻粉525mg／kg组7只大鼠肝脏脂肪变性均轻度,较脂肪乳剂灌胃组有极显著改善（P〈0．01）。与脂肪乳剂灌胃组比较．脂肪乳剂灌胃＋天麻粉250mg／kg组大鼠肝脏TG含量减少约19．0％（P〈0．05）;脂肪乳剂灌胃＋天麻粉525mg／kg组大鼠肝脏CHO和TG含量分别减少约21．2％（P〈0．05）和33.3％（P〈0．01）。相应的,天麻粉治疗后大鼠肝功能得到显著改善．脂肪乳剂灌胃＋天麻粉250mg／kg组大鼠血清ALT和AST水平较脂肪乳剂灌胃组分别下降20．1％和19．0％（P〈0．05）,脂肪乳剂灌胃＋天麻粉525mg／kg组则分别下降33．1％和28．3％（P〈0．01）。结论天麻粉在脂肪乳剂灌胃的大鼠中具有显著的降血脂、减少肝脏脂肪蓄积、减轻肝脏脂肪变性以及改善肝功能的作用。     

高迁移率族蛋白B1在糖尿病伴牙周炎患者牙周组织中的表达及与肝脏脂代谢的关系

摘要：目的 探讨高迁移率族蛋白B1（HMGB1）与其下游的晚期糖基化终产物受体（RAGE）,肿瘤坏死因子α（TNF⁃α）在糖尿病及牙周炎大鼠牙周组织中的表达,及与免疫代谢重要器官肝脏脂代谢之间的关系。方法 建立糖尿病（DM）、牙周炎（CP）、糖尿病复合牙周炎（DM+CP）大鼠模型。免疫组化染色检测牙周组织中HMGB1、RAGE、TNF-α 的表达,光谱法检测血清中的脂代谢相关指标和肝损生化指标,并进行统计学分析。结果 DM组大鼠牙周组织中HMGB1,RAGE表达显著性高于对照组（P<0.05）,TNF-α表达量与对照组无差异;CP组HMGB1及TNF-α表达显著性高于对照组,RAGE表达显著性低于DM及DM+CP组,与对 照组无显著性差异;DM+CP组大鼠牙周组织中HMGB1,RAGE,TNF-α表达均高于对照组。与对照组相比较,DM,CP,DM+CP组可见多项肝脏脂代谢指标异常,其中肝脏损伤指标ALT表达在3组中均显著性升高（P<0.05）。结论 HMGB1,RAGE参与糖尿病大鼠的牙周组织炎症进程,糖尿病导致牙周组织中HMGB1表达升高。在高血糖、牙周炎及高血糖复合牙周炎情况下,均能导致一定程度的肝脏代谢功能紊乱,HMGB1-RAGE为解释糖尿病与牙周炎互为易感的信号通路研究提供了一定的线索。     

高胆固醇摄入对新西兰兔胆汁酸代谢的影响

 目的 观察2周高胆固醇食物摄入对新西兰兔胆汁酸经典合成途径基因调节的影响。方法 20只新西兰兔随机分为对照组和高胆固醇组,分别喂饲普通兔粮及高胆固醇兔粮2周,测定实验前后血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）、胆汁酸（bile acid,BA）及肝脏胆固醇7α羟化酶（cholesteral 7α-hydroxylase,CYP7A1）活性及mRNA、小分子异源二聚体伴侣（short heterodimer partner,SHP）mRNA、胆盐输出泵（bile salt export pump,BSEP）mRNA和三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1（ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1）mRNA、胆固醇酯转移蛋白（cholesteryl-ester transfer protein,CETP）mRNA。结果 高胆固醇组TC、LDL、BA均较对照组升高（P<0.05）;高胆固醇组CYP7A1活性及mRNA均较对照组降低（P<0.05）;高胆固醇组SHP mRNA、BSEP mRNA均较对照组升高（P<0.05）;胆固醇组ABCA1 mRNA、CETP mRNA均较对照组升高。结论 高胆固醇摄入后肝脏FXR、LXR受体均被激活,CYP7A1活性下降,胆汁酸经典合成减少。     

马钱子治疗骨关节炎的潜在药物靶标

【摘要】 目的 探讨马钱子能否作为治疗骨关节炎(OA)的潜在药物靶标。 方法 在中药系统药理学技术平台（TCMSP）中根据口服生物利用度（OB）和类药性（DL）筛选出马钱子的化学成分及其相对应的靶基因;检索GeneCards、OMIM等数据库筛选OA疾病的相关靶点,应用Cytoscape3.7.2软件构建药物-活-成分-基因-疾病的网络,最后通过string平台构建蛋白相互作用网络,并筛选关键蛋白;同时对靶点基因作GO功能和KEGG通路富集分析。 结果 根据OB和DL筛选出13个马钱子主要活性成分,与马钱子治疗OA相关的靶基因17个;并筛选出10个关键蛋白和5条信号通路,而这些靶点和通路主要与镇痛、抗炎、核受体以及雌激素信号通路相关。 结论 马钱子治疗OA具有多途径、多成分、多靶点特点,核受体家族可能是马钱子治疗骨关节炎潜在药物靶标。     

基于网络药理学结合动物实验探究六味地黄丸治疗孤独症谱系障碍的作用机制

目的 采用网络药理学、分子对接技术结合动物实验探究六味地黄丸治疗孤独症谱系障碍（autism spectrum disorder,ASD）的潜在作用机制。方法 通过TCMSP数据库获取六味地黄丸的有效活性成分及对应的靶基因信息,通过GeneCards、OMIM、DrugBank数据库获取ASD疾病靶基因;将上述靶基因用韦恩图取交集后再用STRING数据库构建关键靶点PPI网络;用Metascape数据库对关键靶点进行GO功能和KEGG信号通路富集分析;用Autodock软件对核心靶点及六味地黄丸有效成分进行分子对接。动物实验验证：选用8只SPF级SD孕鼠,随机分为空白孕鼠组（1只）及模型孕鼠组（7只）,采用腹腔注射丙戊酸钠（valproate,VPA）造模。筛选符合ASD疾病模型的30只雄性仔鼠,随机分为模型对照组,维生素D组和中药高、中、低剂量组;同样筛选出空白仔鼠,为空白组,每组6只。中药低、中、高剂量组分别予六味地黄丸悬浮液0.75、1.5、3 g/kg灌胃;维生素D组予维生素D滴剂1 480 IU/kg灌胃;模型组、空白组予等量生理盐水灌胃。均干预1次/d,连续干预2周。采用三...     

基于网络药理学角度探讨当归四逆汤对子宫内膜异位症的干预机制

目的 基于网络药理学探讨当归四逆汤治疗子宫内膜异位症（EMS）的作用机制。方法 利用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）筛选当归四逆汤有效活性成分及潜在靶点，在Genecard、OMIM和TTD数据库中寻找EMS相关靶点基因取当归四逆汤靶点基因与EMS相关靶点基因共同靶点。通过Cytoscape 3.5.0软件构建“当归四逆汤活性成分-潜在靶点-EMS”网络图。运用String数据库构建构建蛋白质互作（PPI）网络图。对潜在靶点基因进行基因本体（GO）富集分析和京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路分析。结果 数据库筛选的得到当归四逆汤有效活性成分151个，与EMS相关潜在作用靶基因71个，KEGG富集通路分析主要包括化学致癌受体激活，脂质和动脉粥样硬化通路等。结论 当归四逆汤具有多活性成分，能通过多靶点，多通路发挥EMS保护作用。     

冠心康对ApoE^（-/-）动脉粥样硬化小鼠PPARγ-LXRα-ABCA1信号通路的影响

目的：观察中药复方冠心康对载脂蛋白E（apolipoprotein E,ApoE）基因敲除（ApoE-/-）动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）小鼠三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ATP-binding cassette transporterA1,ABCA1）通路的影响。方法：70只ApoE-/-小鼠用高脂饲料喂养建立小鼠AS模型。14只C57BL/6J小鼠为正常对照组,给予普通饲料。70只ApoE-/-小鼠造模成功后随机分为5组,即模型组、高剂量冠心康组（生药浓度为3.456g/mL）、中剂量冠心康组（1.728g/mL）、低剂量冠心康组（0.864g/mL）和西药辛伐他汀组[3mg/（kg·d）]。每只小鼠灌胃0.5mL,每天1次。连续灌胃8周后取材,分离肝脏及主动脉。运用蛋白质印迹法检测各组小鼠过氧化物酶体增殖物激活型受体γ（peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ）、肝X受体α（liver X receptor α,LXRα）和ABCA1蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组小鼠主动脉、肝脏PPARγ、LXRα和ABCA1mRNA的表达。结果：与C57BL/6J小鼠比较,ApoE-/-小鼠的主动脉、肝脏的PPARγ、LXRα、ABCA1mRNA的表达明显增高;与模型组小鼠比较,高、中剂量冠心康与辛伐他汀在不同程度上下调了主动脉、肝脏的PPARγ、LXRα、ABCA1mRNA的表达（P〈0.05）,而以高剂量冠心康的作用最为突出。低剂量组无明显改变（P〉0.05）。与C57BL/6J小鼠比较,ApoE-/-小鼠的主动脉、肝脏的PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白的表达明显增高;与模型组小鼠比较,各用药组主动脉、肝脏的PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白的表达量下降（P〈0.05）,而以冠心康高剂量组作用最为突出。结论：PPARγ-LXRα-ABCA1通路在ApoE-/-小鼠脂质代谢紊乱、炎症反应方面扮演重要角色。复方冠心康能改善ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化过程中的脂质代谢紊乱,抑制炎症反应的进展,可能与调控ApoE-/-小鼠的主动脉、肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1 mRNA及蛋白的表达有关。     

黄连解毒汤对高脂血症大鼠血脂代谢及其相关基因表达的影响

目的：观察黄连解毒汤对高脂血症大鼠血脂代谢及其相关基因表达的影响。方法：将50只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、立普妥（阿托伐他汀）组和低、高剂量黄连解毒汤组。除正常对照组外,其他组大鼠喂饲高脂饲料建立高脂血症大鼠模型。连续给药8周后,检测血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、三酰甘油（triacylglycerol,TAG）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（high—density lipoprotein cholesterol,HDL—C）水平,并检测各组大鼠肝脏脂蛋白脂酶（lipoprotein lipase,LPL）和肝脂酶（hepatic lipase,HL）活性;利用逆转录聚合酶链反应技术检测各组大鼠肝脏组织低密度脂蛋白受体（low—density lipoprotein receptor,LDLR）和过氧化物体增殖物活化受体γ（peroxisome proliferator—activated receptor γ,PPAR γ）mRNA的表达水平。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠血清TC、TAG和LDL—C水平显著升高．HDL-C水平显著降低;肝脏LPL、HL活性和LDLR、PPARγmRNA表达水平明显下降。黄连解毒汤组血脂水平均较模型组有不同程度的改善,肝脏LPL、HL活性和LDLR、PPARγ mRNA表达水平明显升高。结论：黄连解毒汤可能是通过提高肝脏脂代谢酶的活性,促进肝脏LDI。R和PPARγmRNA的表达来调节脂质代谢紊乱的。     

复方降脂3号对高胆固醇血症新西兰白兔胆固醇-胆汁酸代谢的影响

目的：探讨复方降脂3号对胆固醇-胆汁酸代谢的影响。方法：24只新西兰白兔分为正常对照组、模型组和复方降脂3号组,每组8只。模型组和复方降脂3号组予高胆固醇饮食诱导高血脂,并给予相应药物灌胃。治疗4周后,检测白兔外周血清总胆固醇、胆汁酸水平,酶联免疫吸附测定法检测肝脏胆固醇7α-羟化酶（cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1）活性,实时荧光定量聚合酶链式反应法检测CYP7A1、法尼酯X受体（farnesoid X receptor,FXR）靶基因胆盐输出泵（bile saltexport pump,BSEP）和短异源二聚体伴侣（small heterodimer partner,SHP）受体mRNA表达情况。结果：模型组胆固醇和胆汁酸水平较正常对照组明显升高（P〈0.01）;肝脏CYP7A1活性降低,mRNA表达下降（P〈0.01）;BSEP和SHP mRNA表达明显增加（P〈0.01）。与模型组比较,复方降脂3号组胆固醇水平明显下降（P〈0.01）;肝脏CYP7A1活性升高,mRNA表达增加（P〈0.01）;BSEP和SHP mRNA表达明显下降（P〈0.01）。复方降脂3号组胆汁酸含量与模型组比较,差异无统计学意义。结论：复方降脂3号可能通过上调CYP7A1表达和抑制BSEP、SHP mRNA表达,促进肝脏内胆固醇合成胆汁酸,继而降低血清胆固醇水平。     

大黄对心肌缺血再灌注损伤引起的胰岛素抵抗的改善作用

目的观察大黄是否对由于心肌缺血再灌注损伤导致的胰岛素抵抗有改善作用。方法成年雄性家兔20只,随机分为两组：心肌缺血再灌注组（对照组）和大黄治疗组（实验组）。实验组0．5％大黄液5ml灌胃,1次／d,连续5d,对照组等量0．9％氯化钠注射液灌胃,1次／d,连续5d。建立大鼠在体心肌缺血再灌注模型。测定血清葡萄糖、胰岛素、C肽及TNF-α值。结果实验组血清葡萄糖、胰岛素、C肽及TNF-α值较对照组均明显降低（P〈0．05）。结论大黄对心肌缺血再灌注损伤导致的胰岛素抵抗有改善作用。     

七氟醚诱导肝损伤大鼠模型microRNA-214的表达变化及其损伤机制探讨

目的 通过七氟醚诱导肝损伤大鼠模型探讨七氟醚对肝脏凋亡、炎症因子的影响及其可能作用机制。方法 将16只SD大鼠随机分为对照组和七氟醚组，采用RT-PCR检测七氟醚组肝脏组织中microRNA-214（miR-214）的表达水平。应用Olympus自动化学分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）的水平；应用RT-PCR检测TNF-α、IL-4、IL-6、MCP-1在肝脏组织中的表达。Western blotting检测Bax和Bcl-2的表达。应用生物信息学方法对miR-214进行靶基因预测及信号通路分析。结果 七氟醚组与对照组miR-214表达水平比较，七氟醚组高于对照组（P <0.05）；与对照组比较，七氟醚组的肝脏系数升高（P <0.05）；与对照组比较，七氟醚组血清ALT和AST水平升高（P <0.05）；与对照组比较，七氟醚组TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量升高而IL-4相对表达量降低（P <0.05），MCP-1相对表达量差异无统计学意义（P >0.05）；与对照组比较，七氟醚处理组Bcl-2/Bax比值下降（P <0.05）；通过miRanda和TargetScan数据库预测miR-214的靶基因结果显示，两数据库靶基因数量分别是4 652和395个。通过韦恩图对2个数据库靶基因进行交集选取，结果共有319个相同的基因开展后续研究；DAVID平台的KEGG通路数据库分析miR-214的靶基因信号通路预测，利用P值进行排序选择，结果排在首位的为Natural killer cell mediated cytotoxicity通路。结论 七氟醚处理会使肝脏出现一定程度的损伤，而miR-214在这一过程中发挥着重要作用。     

激活视黄醇类X受体抑制轻度氧化低密度脂蛋白诱导的小鼠巨噬细胞系RAW264.7增殖

目的 探讨激活视黄醇类X受体(RXR)对轻度氧化低密度脂蛋白(LoxLDL)诱导巨噬细胞增殖的影响及其作用机制.方法 饥饿处理后的小鼠巨噬细胞系RAW264.7经LoxLDL(20μg/ml)刺激24 h诱导细胞增殖,干预组同时给予不同浓度的RXR特异性激动剂顺式维甲酸9(9-cisRA),四甲基偶氮唑蓝方法检测细胞活力,脱氧尿嘧啶核苷免疫组化方法检测细胞DNA合成,流式细胞仪PI单染法检测细胞凋亡,Western印迹方法检测Nur77和RARB蛋白表达.结果 LoxLDL诱导24 h后,细胞活力和DNA合成(A值)分别升高0.79±0.12和1.81±0.31,RXR的特异性配体9-cisRA能够显著抑制LoxLDL的作用,在10-8mol/L和10-7mol/L浓度分别使细胞活力下降到0.43±0.10和0.26±0.07(P＜0.05),DNA合成升高为1.14±0.43和0.72±0.06(P＜0.05),且对细胞凋亡没有影响.Western印迹检测表明,孤儿核受体Nur77蛋白表达在LoxLDL刺激后显著升高5倍以上,9-cisRA显著下调Nur77表达,同时上调下游靶基因RARB蛋白表达.结论 激活核受体RXR能够显著抑制LoxLDL刺激引起的巨噬细胞增殖,其机制可能与调控RXR/Nur77异源二聚体及其下游靶基因RARβ有关.     

精神分裂症与多巴胺D4基因和5-羟色胺2A受体基因的关联分析

目的探讨湖南地区汉族人群多巴胺D4受体（DRD4）基因和5-羟色胺2A（5-HT2A）受体基因与精神分裂症遗传易感性的关系及其相互作用对精神分裂症的影响。方法81例精神分裂症患者单一用氯氮平治疗6—8周，利用阳性与阴性症状量表（PANSS）评定氯氮平的疗效，并根据量表的减分率将患者分为有效和无效两组。采用聚合酶链式反应（PCR）及限制性片段长度多态性（RFLP）技术检测患者组和对照组DRIM基因48bp可变串联重复（VNTR）多态性及5-HT2A受体基因T102C多态性的基因型及等位基因的频率。结果有效组患者DRIM＊3／5基因型（DRIM＊3／5）频率（40．3％）明显高于对照组（23．9％）。DRIM＊3等位基因携带者中，精神分裂症5-HT2A受体基因的A2等位基因频率（50．0％）显著高于对照组（30．0％）；非DRD4＊5／5携带者中，精神分裂症5-HT2A受体基因的A2／A2基因型（22．0％）及A2等位基因频率（48．8％）显著高于对照组（5．0％；32．5％）。结论DRD4基因48bpVNTR多态性可能与精神分裂症的某些亚型（对氯氮平有效者）遗传易感性相关。DRD4基因和5-HT2A受体基因可能存在交互作用，DRD4＊非5／5基因型及携带DRIM＊3等位基因者可能影响5-HT2A受体基因A2等位基因及A2／A2基因型与精神分裂症关系。