不明原因早闭经患者的免疫学检查与临床应用

在纯化人卵巢抗原的基础上，建立了检测血清抗卵巢抗体、游离卵巢抗原及其特异免疫复合物的ＥＬＳＡ方法。发现早闭经患者这三项指标的阳性率都有显著升高。提示抗卵巢抗体可能参与卵巢免疫损伤。     

抗卵巢抗体检测在不孕症诊断中的应用

<正>用TritonX-100自人卵巢组织匀浆中提取得卵巢抗原(OAg),建立了检测抗卵巢抗体(AoAb)的ELISA法。发现卵巢功能早衰、不孕症、流产患者AoAb水平与检出率均显著高于正常生育妇女。研究结果提示,AoAb具有潜在的抗生育作用。自身免疫系统将患者卵巢组织作为抗原而引起的自身免疫反应,从而产出抗卵巢抗体(AoAb)。近年来证实AoAb可多方面影响卵巢功能,体内若存在AoAb可导致不孕,这类情况占不孕患者的10%～30%以上,而且医学教育网搜集整理在不孕患者中AoAb的检出率明显高于     

免疫性不孕不育的研究进展

在我国已婚夫妇中约有10%～15%的人因各种原因导致不孕不育,其中30%～40%与免疫性抗体有关。本文拟就在：1.抗精子抗体（AsAb）,男女体内都可能存在抗精子抗体;2.抗子宫内膜抗体（EMAb）,抗子宫内膜抗体是子宫内膜异位症的标志抗体;3.抗卵巢抗体（AOAb）,在六、七十年代已发现卵巢存在特殊抗原,近年来报道抗卵巢自身免疫可影响卵巢的正常发育和功能;4.抗透明带抗体：透明带（ZP）,是被覆在卵细胞周围的一层嗜酸性的明胶样基质,由卵细胞及其外围的卵泡细胞卵子的生长发育过程中共同分泌而成;5.抗心磷脂抗体（ACA）,被认为是预测高危妇女是否流产的较为敏感的指标;6.抗丈夫淋巴细胞抗体（APLA）APLA的产生不足,使得免疫系统容易对胚胎产生免疫攻击,母体对胎儿产生强烈的排斥现象,怀孕早期可出现RSA,怀孕晚期则可出现妊娠高血压疾病,胎儿宫内生长受限,甚至出现胎死宫内,最终导致流产。现对这些自身免疫抗体的近期研究做一综述。     

自身免疫性卵巢衰退小鼠动物模型的建立

临床上发现部分卵巢早衰者有自身免疫反应过强现象，外周血可测得抗卵巢抗体（ＡＯＡ）的存在。亦有报道病理检测部分闭经或月经不调患者之卵巢，发现有淋巴细胞浸润，诊断为自身免疫性卵巢炎。鉴于人体在体研究的限制性，故设计建立小鼠自身免疫性卵巢衰退动物模型，拟产生相似于人类疾病的病理及功能障碍，提供深入研究之手段。材料与方法一．小鼠卵巢抗原的制备及主动免疫（一）小鼠卵巢抗原的制备　取ＢＡＬＢ／ｃ小鼠（鼠龄３～６个月，体重３０克左右）卵巢组织，生理盐水漂洗去除血液成份后在少许ＴｒｉｓＨｃｌ缓冲液中将组织剪碎…     

120例习惯性流产患者的抗卵巢抗体的检测

目的 探讨抗卵巢抗体（AOV）与习惯性流产的关系。方法 采用酶联免疫吸附法（ELISA）抽取120例习惯性充产患者的血清,进行免疫学检查,检测IgG抗AOV抗体并以50例无不良妊娠史妇女为对照。结果 在120例习惯性流产患者中,抗卵巢抗体者40例,发病率为33．3％（40／120）,无不良妊娠史妇女中,抗卵巢抗体患者占2例,发病率为4％（2／50）,两者相比,差异有显著性（P＜0．01）。结论 抗卵巢抗体与习惯性流产有密切联系。     

卵巢癌腹水免疫复合物解离抗原制备单克隆抗体

本文从卵巢上皮癌腹水免疫复合物中,解离出患者的自身抗原(OC_(41))免疫小鼠,取其脾细胞用于融合,经ELISA、PAP及流式细胞计等方法筛选和鉴定,获得2株杂交瘤细胞系,分别命名为COC_(41)D和COC_(41)E,2种细胞诱生小鼠腹水,ELISA测定抗体滴度达2×10~5和1×10~5。免疫组化分析表明,COC_(41)D和COC_(41)E与卵巢上皮癌具有较高的特异性,阳性率分特为70.2％和52.5％。本研究表明,应用腹水免疫复合物解离抗原有可能获得特异性较高的单克隆抗体。     

SmB/B''抗原表位的基因免疫诱导多谱系抗体的生成

目的 研究SmB/B’抗原表位的基因免疫诱导自身抗体的产生的可能性。方法 构建SmB/B’抗原表位的真核表达载体,利用基因免疫的方法免疫同系Balb/c小鼠,用免疫印迹法测定抗SmB/B’抗体及多谱系抗体,用免疫荧光法检测抗核抗体核型。结果SmB/B'自身抗原表位为基础的基因免疫正常小鼠诱导了多种抗核抗体的产生,除抗SmB/B’抗体外,还包括抗SS-A、SS-B、rRNP、Scl-70,这些抗体可与细胞的多种成分相结合。结论 抗SmB/B’抗体可由自身SmB/B’的抗原表位诱生,并可进一步诱导多种抗核抗体的生成。     

小鼠ZP2抗体的制备及其免疫活性研究

目的制备抗小鼠ZP2（mZP2）抗体并研究抗血清的免疫活性。方法利用Rosetta宿主菌诱导表达mZP2重组蛋白,电泳
分离重组ZP2蛋白,切胶制备免疫抗原;利用乳化抗原主动免疫新西兰雄兔制抗血清;通过ELISA测定抗体应答水平;以免疫组
化测定抗血清特异性;通过精卵结合实验检测抗血清对小鼠卵子结合顶体反应后精子的影响。结果ELISA结果说明用重组蛋
白免疫新西兰雄兔诱发产生了抗血清。免疫组化实验证明抗血清与小鼠卵巢透明带发生了特异性反应,精卵结合实验显示抗
ZP2抗体能抑制顶体反应后精子与卵子结合。结论重组mZP2蛋白诱发产生了抗ZP2抗体,抗体能抑制顶体反应后的精子与
卵子结合。
     

免疫组织化学在卵巢上皮性肿瘤诊断及鉴别诊断中的作用

近年随着单克隆新抗体的涌现及原有抗体开拓的新用途,免疫组织化学在卵巢肿瘤及卵巢转移性肿瘤的病理诊断领域日趋重要。现结合世界卫生组织（WHO）卵巢组织分型（1999）。将其免疫组织化学表这特性以及在卵巢原发癌和转移癌鉴别诊断中的作用做一专题讲座。     

人胎儿卵巢免疫原性的研究

目的 :比较成人卵巢、胎儿卵巢免疫原性的差异 ,以及培养前后胎儿卵巢免疫原性的变化。方法 :对成人及培养前后胎儿卵巢的冰冻切片用HLA -ABC及HLA -DR单克隆抗体进行免疫组织化学染色 ,观察其阳性细胞形态及分布并计数。结果 :成人卵巢内HLA -ABC及HLA -DR抗原含量显著多于胎儿卵巢 (P <0 0 0 1) ,且培养后胎儿卵巢HLA -DR抗原含量显著低于培养前 (P <0 0 1) ,随培养天数的增加HLA -DR抗原含量逐渐减少 (P <0 0 1)。结论 :胎儿卵巢的免疫原性低于成人卵巢 ,且培养后进一步降低。以培养一段时间的胎儿卵巢作为移植供体 ,必将提高临床卵巢移植的成功率。     

育泡饮对小鼠自身免疫性卵巢损伤保护作用的实验研究

目的探讨中药复方育泡饮对实验性自身免疫性卵巢早衰(POF)小鼠卵巢功能的影响。方法以成熟的SD雌性大鼠卵巢组织制备卵巢抗原,皮下多点注射免疫BALB/C雌性小鼠,建立卵巢早衰模型。在3次免疫后连续灌服中药复方,以强的松为阳性对照,酶联免疫法检测外周血雌二醇水平(E2)、卵泡刺激素(FSH)、外周血抗卵巢抗体(AoAb),IL-4、IL-10,观察卵巢的形态学变化,并计数各级卵泡及黄体数目。结果POF小鼠外周血E2下降,FSH升高,AoAb阳性,IL-4、IL-10明显提高,卵巢内有大量淋巴细胞浸润,各级卵泡及黄体数目减少。育泡饮能提高体内E2水平,减缓POF小鼠外周血FSH升高,抑制AoAb产生,降低IL-4与IL-10水平,减轻卵巢内淋巴细胞浸润,使各级卵泡及黄体数增加,育泡饮高剂量组比中剂量、低剂量组作用显著。结论育泡饮能减轻卵巢自身免疫性炎症损伤,对自身免疫性卵巢早衰具有治疗作用。     

抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体死亡受体5嵌合抗体的构建及其真核表达

目的构建以人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体死亡受体5(DR5)为抗原的鼠/人重组嵌合抗体。方法采用基因工程技术,扩增和克隆抗DR5嵌合抗体的轻、重链表达载体,共转染二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞(CHO-dhfr-),筛选稳定分泌表达抗DR5嵌合抗体的细胞株。采用ELISA和Western bloting法鉴定抗体的人源性和抗体-抗原结合活性,四唑盐/吩嗪硫酸甲酯比色法检测抗体的生物学活性。结果获得了稳定表达和分泌抗人DR5的嵌合抗体(anti-DR5mV-hH)的重组细胞;与人DR5蛋白具有高的特异性结合活性;能使体外培养的人髓性白血病Jurkat细胞和人结肠癌HCT116细胞的存活率分别下降到73.15%和77.30%。结论抗DR5嵌合抗体anti-DR5mV-hH具有抗肿瘤活性,为发展人源化抗体药物的研究奠定了基础。     

益肾调肝汤对排卵障碍卵巢功能的免疫调节

目的通过研究益肾调肝汤对排卵障碍患者血抗卵巢抗体的影响来探求该药对此类患者卵巢功能免疫调节作用。方法对60例排卵障碍患者分别采用中药益肾调肝汤及克罗米芬进行周期性治疗,3个周为1疗程;测定每例治疗前、排卵后或一疗程后的血抗卵巢抗体、血雌二醇（E2）、孕激素（P）值。结果中药组治疗后排卵率与西药组差异无统计学意义（P〉0.05）,雌二醇及孕酮水平增高、AoAb吸光度（A）值及阳性率明显降低,且较西药组显著（P〈0.05）。结论中药益肾调肝汤促排卵疗效肯定,与克罗米芬功效相当,中药还可明显降低排卵障碍患者血抗卵巢抗体,能更多方面的调节免疫内分泌,从免疫学角度证实中药在促进卵泡发育、诱发排卵方面优于西药。     

抗精子抗体与不孕的研究现状

近年来对免疫性不孕的研究,发现与不孕有关的自身抗体分两类:非器官特意性自身抗体和器官特异自身抗体.所谓非器官特异性自身抗体是指针对存在于不同组织的共同抗原的抗体.如抗磷脂抗体(APA)、抗核抗体(ANA)、抗DNA抗体等.所谓器官特异性自身抗体是指针对某个特异性器官组织自身抗原的抗体,如抗精子抗体(AsAb)、抗子宫内膜抗体(AEA)、抗卵巢抗体(AOA)和抗甲状腺抗体、抗平滑肌抗体等[1].     

胎儿与成人卵巢免疫原性的比较

目的 :比较胎儿卵巢、成人卵巢免疫原性的差异 ,并观察培养前后胎儿卵巢免疫原性的变化。方法 :对培养前后胎儿卵巢及成人卵巢的冰冻切片用人白细胞抗原 (HLA DR)单克隆抗体进行免疫组织化学染色 ,观察其阳性细胞形态及分布并计数。结果 :胎儿卵巢内HLA DR抗原含量显著少于成人卵巢 (P <0 .0 0 1) ,且培养后胎儿卵巢HLA DR抗原含量显著低于培养前 (P <0 .0 1) ,随培养天数的增加HLA DR抗原含量逐渐减少 (P <0 .0 1)。结论 :胎儿卵巢的免疫原性低于成人卵巢 ,且培养后进一步降低。以培养一段时间的胎儿卵巢作为移植供体 ,可能提高临床卵巢移植的成功率。     

抗幽门螺杆菌蛋黄免疫球蛋白IgY的制备及生物活性的研究

目的:从免疫了幽门螺杆菌(Hp)抗原的母鸡蛋黄中提取抗Hp-IgY。方法:用超声破碎的Hp抗原免疫21周龄罗曼产蛋母鸡,取免疫后所产鸡蛋卵黄,利用水稀释法加硫酸铵盐析方法,提纯IgY,ELISA间接法检测抗体效价,Bradford法检测抗体蛋白含量,SDS-PAGE法检测其相对分子质量及纯度。结果:母鸡初次免疫后第7天,抗体效价即渐渐升高,约第45天达到高峰;蛋黄抗体经纯化后,抗Hp-IgY蛋白纯度可达90%以上,含量为6.25 g/L。结论:用超声破碎的Hp抗原免疫母鸡,盐析法提纯免疫母鸡产蛋黄中的抗Hp-IgY,可获得高纯度及高效价的抗Hp的特异性蛋黄抗体。     

抗精浆免疫抑制物等抗生育抗体与不孕不育关系

用间接酶联免疫吸附测定法检测２０对生育夫妇和２８对不孕不育夫妇血清和精浆中抗精子抗体、抗精浆免疫抑制物抗体、抗子宫内膜抗体、抗卵巢抗体，结果不孕不育男性血清和精浆中抗精子抗体阳性率（分别为２８％和３５％）与生育组间有非常显著性差异，抗精浆免疫抑制物抗体阳性率（分别为２１％和２５％）与生育组间有显著性差异．不孕不育女性血清中抗精子抗体阳性率（为２１％）与生育组间无显著性差异，抗精浆免疫抑制物抗体、抗子宫内膜抗体、抗卵巢抗体阳性率（分别为２５％，２５％，２１％）与生育组间具有显著性差异．不孕和流产夫妇血清、精浆中含有１种以上抗体阳性率为７８％，提示血清和精浆中抗生育抗体的产生与不孕不育有密切关系     

卵巢早衰抗卵巢抗体和抗透明带抗体及其分类

目的　探讨卵巢早衰 (POF)患者血清中抗卵巢抗体 (AoAb)、抗透明带抗体 (AZpAb)水平及其分类情况 ,研究免疫性卵巢早衰的发病机理。方法　用酶联免疫法测定卵巢早衰、抗精子抗体 (ASAb)阳性不孕妇女和不明原因不孕症妇女血清中AoAb ,AZpAb并对其进行分类。结果　POF患者、ASAb阳性不孕妇女组及不育患者组血清中AoAb、AZpAb均比正常妇女组高 (P <0 0 1)。在抗体的分类证明 ,各组抗体以IgG为主 ,IgA ,IgM也有一定的比例。结论　POF与自身免疫异常密切相关 ,该结果对于深入研究和预防自身免疫性卵巢早衰有重要意义     

免疫印迹法检测抗ENA抗体结果分析

抗ENA抗体是针对核内可提取性核抗原（eX—tractable nuclear antiger,ENA）的一种自身抗体。不同的自身免疫性疾病其抗ENA抗体阳性率有明显差异,有的特异性很高。本组对疑为自身免疫性疾病、风湿病患者采用免疫印迹法（IBT）检测抗ENA多肽抗体。     

小鼠卵巢巨噬细胞的免疫组化研究

目的：探讨卵巢内巨噬细胞在卵巢微细结构中的分布特征。方法：用抗巨噬细胞表面的F4/80抗原的单克隆抗体对小鼠卵巢组织中巨噬细胞进行免疫组化染色后观察。结果：巨噬细胞主要分布在卵巢的卵泡膜层、卵巢皮质和髓质的间质、闭镇卵泡和黄体组织中。排卵前卵巢表面包膜层出现大量的巨噬细胞，而妊娠期黄体中巨噬细胞骤减。结论：巨噬细胞可能在不同的卵巢结构中对卵巢的生殖内分泌起不同的调节作用。