脂氧素与缺血/再灌注损伤

脂氧素(LX)是花生四烯酸的一类脂氧化酶产物,在多个器官的缺血/再灌注损伤中起着必不可少的作用。LX对多种炎性细胞的功能和多种炎症相关基因的表达有广泛的调节作用,能抑制中性粒细胞活化、聚集,抑制促炎因子的表达,促进炎性反应的及时消退,抑制缺血性损伤向炎症性损伤的转变,减轻脑、心脏、肾脏、胃、肠、肺等器官的缺血/再灌注损伤,LX类似物及LX受体激动剂等也可起到降低器官缺血/再灌注损伤的作用。     

LXA4在破骨细胞、单核细胞和B细胞中的作用

脂氧素(LX)是花生四烯酸的重要代谢产物,具有抗炎和促炎症消退的作用。本文分析了LXA4抑制破骨细胞生成并防止骨丢失,抑制单核细胞凋亡和促进固有反应激活型B细胞的增殖和迁移,指出LXA4在这三方面具有重要作用,可为LXA4用于骨质疏松、免疫性疾病的防治提供依据。     

脂氧素A_4及其受体对急性肺损伤Na~+-K~+-ATP酶的影响

目的研究脂氧素A_4及其受体对大鼠急性肺损伤Na~+-K~+-ATP酶的影响及机制。方法将大鼠随机分为7组:1对照组;2油酸(OA)组;3油酸+脂氧素A4(OA+LX)组;4OA+Alcohol组;5油酸+BML-111组(OA+BML-111组);6油酸+脂氧素A_4+BOC-2(OA+LX+BOC-2)组;7OA+DMSO组。机械通气1 h后处死,取肺组织测定Na~+-K~+-ATP酶α_1、β_1亚基蛋白表达和Na~+-K~+-ATP酶活性。结果与OA组比较,OA+LX组和OA+BML-111组肺组织Na~+-K~+-ATP酶β_1亚基蛋白表达明显增高(P0.05),Na~+-K~+-ATP酶活性明显增强(P0.05);与OA+LX组比较,BOC-2抑制Na~+-K~+-ATP酶的活性(P0.01)。结论脂氧素通过上调Na~+-K~+-ATP酶蛋白表达及活性减轻油酸诱导的大鼠急性肺损伤,其作用机制与脂氧素受体(ALX)相关。     

脂氧素对巨噬细胞RAW264.7的抗炎实验研究

目的 研究脂氧素(LX) A4和叔丁氧羟基-苯丙氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸(BOC-2)对LPS作用巨噬细胞RAW264.7存活的影响.方法 取对数生长期的巨噬细胞RAW264.7为研究载体,实验用不同浓度的脂多糖(LPS)在不同时间点处理细胞,观察LX A4和BOC-2对LPS作用巨噬细胞RAW264.7后的存活率.CCK-8法观察LPS对各组巨噬细胞RAW264.7的不良反应,Western blot法检测LX A4和BOC-2对LPS处理后巨噬细胞RAW264.7的Toll样受体4(TLR4)和pNF-κB p65蛋白水平,酶联免疫吸附(ELISA)法检测LX A4和BOC-2对LPS处理后巨噬细胞RAW264.7培养上清液中白细胞介素6(IL-6)水平.结果 在1 000 ng/mL浓度LPS组,作用时间6h,巨噬细胞RAW264.7内TLR4蛋白水平和pNF-κB p65蛋白水平显著高于其余各组(P＜0.05).在LPS作用下,LX A4组细胞存活率显著高于对照组(P＜0.05);BOC-2组在LPS作用后巨噬细胞RAW264.7的存活率显著低于无LPS作用(P＜0.05).在LPS作用下,LX A4组pNF-κB p65蛋白水平低于对照组及BOC-2组(P＜0.05),BOC-2组pNF-κB p65蛋白水平高于其余各组(P＜0.05).在LPS作用下,LX A4组IL-6的水平低于对照组及BOC-2组(P＜0.05).结论 LX A4能够抑制LPS对巨噬细胞RAW264.7的作用及TLR4/NF-κB信号通路的激活,有助减轻炎性反应.     

脂氧素对脂多糖诱导巨噬细胞炎症相关因子的影响及机制

目的：研究脂氧素（1ipoxin A4）对脂多糖（1ipopo-lysaccharide,LPS）诱导的小鼠巨噬细胞株RAW264.7中相关炎症因子如肿瘤坏死因子（TNF-α）、环加氧酶-2（COX-2）、前列腺素E2（PGE2）、血红素氧化酶-1（HO-1）和白介素-10（IL-10）的影响,并进一步探讨其内在分子机制。方法：以1mg／L LPS刺激体外培养的RAW264.7细胞作为炎症模型,分别用脂氧素A4或脂氧素A4和ZnPPIX干预LPS刺激的RAW264.7细胞24h后,收集培养上清并提取细胞总蛋白,酶联免疫法测定上清中TNF-α,IL-10和PGE2浓度,免疫印迹法检测细胞COX-2和HO-1的蛋白表达量,分光光度计分析HO-1的活性。结果：1mg／L LPS明显诱导TNF-α,COX-2和PGE,的生成,也适度增加IL-10及HO-1的产生;脂氧素A4可抑制LPS诱导的TNF-α（P〈0.01雠LPS组）,COX-2和PGE2（P〈0.01伽LPS组）的生成,却进一步增加IL-10（P〈0.01 vs LPS组）和HO-1表达量和活性（P〈0.01 vs LPS组）;ZnPPIX可减弱脂氧素A。对LPS诱导TNF-α（P〈0.05 vs LPS＋脂氧素A4组）,COX-2和PGE2（P〈0.05 vs LPS＋脂氧素A4组）的生成抑制作用,同时也下调IL-10的生成量。结论：脂氧素A4可抑制LPS诱导的巨噬细胞中致炎介质TNF-α,COX-2及PGE2的生成,同时也促进IL-10的产生,这种效应在一定程度上是通过上调HO-1表达和活性实现。     

乌司他丁对胰腺炎手术患者脂氧素及核因子кB基因表达的影响

目的 探讨乌司他丁对胰腺炎手术患者脂氧素及核因子кB基因表达的影响.方法 选择胰腺炎大手术成人患者30例,随机分为乌司他丁组(A组)和对照组(B组).乌司他丁组于术前、术后第1、2、3 d分别给予乌司他丁30万U+生理盐水100 ml静脉滴注,各组于手术结束时、术后第1、2、3 d抽取患者静脉血2 ml分离单核粒细胞,利用凝胶电泳迁移率变化分析(EMSA)的方法 测定核因子кB(NF-кB)、TNF-ɑ、IL-6、IL-8的活性,并利用聚合酶链反应方法 (PCR)测定其基因表达.结果 乌司他丁组有防止术后产生全身炎症反应综合征的作用,该药能有效促进脂氧素和抑制核因子кB基因表达,抑制TNF-ɑ、IL-6、IL-8等炎症介质的释放,从而产生对抗手术侵袭和防止术后并发症的作用.结论 乌司他丁对胰腺炎手术患者脂氧素、核因子кB、TNF-ɑ、IL-6、IL-8都有抑制作用,从而防止术后产生全身炎症反应综合征的作用机制.     

脂氧素在COPD中的变化及与肺功能的关系

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的脂氧素(LXA4)的变化,在COPD急性加重期、缓解期及健康对照组之间表达的差异,探讨脂氧素在COPD患者中的意义。方法采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunoabsorbent assay,ELISA)测定30例COPD急性加重期及缓解期患者与正常健康人30例血清中LXA4含量。结果 (1)血清LXA4COPD急性加重期组和缓解期组均与正常对照组有显著性差异(P<0.01),且COPD急性加重期组含量远低于缓解期组的含量(P<0.01);(2)COPD患者组血清LXA4与第一秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1/预计值%)呈正相关(r=0.9166,P<0.05)。结论脂氧素、白三烯可能参与COPD发生发展过程。脂氧素拮抗白三烯致气道阻塞效应,在COPD炎症消退中起重要作用。     

脂氧素A4及其类似物与巨噬细胞的相互作用促进炎症反应消退的研究进展

脂氧素A4(lipoxin A4,LXA₄)是花生四烯酸的产物之一,是内源性脂肪酸产生的天然促分解代谢分子,被誉为炎症因子的“刹车信号”,有强大的抗炎作用,但其代谢迅速,而LXA₄类似物相对更稳定,也具有一定的抗炎效果。对抗炎症的明星细胞——巨噬细胞,是天然免疫屏障的重要组分,和LXA₄一样,在炎症的消退中有着不可替代的作用。LXA₄及其类似物与巨噬细胞在抑制炎症反应的过程中有着千丝万缕的联系,本文就两者在炎症反应中的相互作用进行综述,为多种炎症相关疾病的治疗提供新思路。     

脂氧素A4调控肝癌细胞缺氧诱导因子-1α的表达

目的:探讨在营养剥夺环境下,脂氧素A4对肝癌细胞缺氧诱导因子-1α表达的影响及机制。方法:以Hanks平衡盐缓冲液对肝癌细胞系HepG2和BEL7402细胞进行营养剥夺培养8h,并联合脂氧素A4(100nmol/L)孵育8h,应用免疫蛋白印迹检测脂氧素A4对营养剥夺条件下,肝癌细胞缺氧诱导因子-1α和细胞因子信号转导抑制蛋白表达的影响。同时构建转染针对细胞因子信号转导抑制蛋白的siRNA,观察营养剥夺条件下,细胞因子信号转导抑制蛋白沉默前后,脂氧素A4对肝癌细胞缺氧诱导因子-1α表达的影响。结果:脂氧素A4能显著诱导HepG2和BEL7402肝癌细胞表达细胞因子信号转导抑制蛋白,但明显抑制Hanks平衡盐缓冲液诱导的缺氧诱导因子-1α表达。在应用siRNA沉默细胞因子信号转导抑制蛋白表达后,脂氧素A4在营养剥夺条件下对缺氧诱导因子-1α表达的抑制作用明显减弱。结论:在营养剥夺条件下,脂氧素A4通过诱导细胞因子信号转导抑制蛋白表达抑制肝癌细胞表达缺氧诱导因子-1α。     

脂氧素A4对心肌缺血再灌注损伤大鼠细胞因子和氧化应激的影响

目的 探讨脂氧素A4(LXA4)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠细胞因子和氧化应激的影响,明确其心肌保护作用.方法 72只雄性SD大鼠随机分成假手术一组(C1组)、假手术二组(C2组)、MIRI一组(I/R1组)、MIRI二组(I/R2组)、MIRI前用药组(LX1组)、MIRI后用药组(LX2组),每组12只.建立大鼠MIRI模型,各组于开胸前取血(T1)、实验结束后取血(T2)测IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、cTnI血清浓度,同时测定MPO、SOD活性、MDA含量及病理切片观察心肌炎性细胞浸润.结果 I/R1、LX1与C1组相比,I/R2、LX2与C2组相比,血清IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、cTnI浓度(均为T2),MPO、SOD活性和MDA含量显著增高;LX1组与I/R1组相比,LX2组与I/R2组相比,能显著降低血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、cTnI浓度(均为T2)及MPO活性、MDA含量,并显著提高血清IL-10浓度(T2),SOD活性(P＜0.01).MIRI各组心肌炎性细胞浸润明显增多,而LX各组心肌炎性细胞浸润明显减少.结论 在MIRI前、后应用LXA4均能抑制中性粒细胞浸润和活化,降低促炎细胞因子释放,促进抑炎细胞因子分泌,减轻组织氧化应激,对大鼠MIRI起明显的保护作用.     

脂氧素A4对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察脂氧素A4对大鼠肠缺血再灌注损伤（IR）的保护作用。方法择健康雄性SD大鼠30只,体重240～280g,采用抽签法随机分为3组,假手术组（C组）、肠IR组和脂氧素A4治疗组（L组）,每组10只。除C组外,其他两组大鼠分离肠系膜上动脉（SMA）后,通过夹闭SMA复制大鼠肠IR模型,缺血60min,然后开放SMA,再灌注120min,L组于开放SMA同时静脉内给予脂氧素A40．1mg／kg,所有大鼠在试验过程中均以09％氯化钠注射液10ml·kg^-1·h^-1持续输注。观察肠IR后肠黏膜的损伤程度,测定肠组织丙二醛（MDA）、髓过氧化物酶（MPO）、二胺氧化酶（DAO）活性、肿瘤坏死因子α（TNF—α）含量。结果与IR组比较,L组肠黏膜损伤程度较轻,能够反映肠黏膜损伤程度的DAO活性在肠组织中明显下降,过度氧化应激指标MDA、MPO在肠组织中明显升高,肠组织中TNF—α含量明显下降（P〈0．05）。结论脂氧素A4对大鼠肠IR损伤具有良好的保护作用,这种保护作用与减轻肠IR损伤后肠组织的过氧化应激、减少肠组织内中性粒细胞的聚集,降低肠组织中TNF—α含量有关。     

儿童腹腔镜精索静脉结扎术硬膜外麻醉和全身麻醉的比较

目的比较硬膜外麻醉和气管插管全身麻醉在儿童腹腔镜精索静脉结扎术中的应用效果。方法按可比条件选择40例在泌尿外科择期行手术的儿童,依家长对麻醉方式的要求及医生的选择,分为硬膜外麻醉组(E组,n=20)和气管插管全身麻醉组(I组,n=20)。对比观察2组患儿麻醉及术后恢复过程。结果2组患儿的麻醉诱导和维持满意,术中未出现体动,术后无知晓。2组患儿的术中血压、pH、SpO2均无明显变化。E组患儿气腹后、停气腹后心率明显减慢(P<0.05),呼吸频率明显加快(P<0.05),PaCO2、HCO3-均明显升高(均P<0.05)。I组的心率、呼吸、PaCO2、HCO3-均无明显改变。结论ASAⅠ级的患儿行类似腹腔镜精索静脉结扎术类的短时手术,在1.6kPa(12mmHg)气腹压力下,选择硬膜外麻醉是安全可行的。     

磁共振弥散张量成像对轻度脊髓型颈椎病的诊断价值

目的探讨3.0T磁共振DTI技术对无信号改变脊髓型颈椎病的诊断价值。方法选择21例健康志愿者作为对照组和42例无T2信号改变的脊髓型颈椎病患者行颈髓DTI成像,根据患者有无颈椎病体征将其分为阴性体征组（A组）和阳性体征组（B组）。分析各组表观弥散系数(ADC)、分数各向异性值(FA)、平行于颈髓长轴、前后径和左右径本征值λ₁、λ₂、λ₃值的变化。结果所有受检者DTI成像显示满意。对照组颈髓平均ADC值为（0.78±0.08）×10^-3mm²/s,FA值为0.72±0.03,λ₁、λ₂、λ₃值分别为（1.51±0.15）×10^-3、（0.42±0.09）×10^-3、（0.41±0.10）×10^-3mm²/s。A组FA值大于B组（P＜0.01）,B组ADC、λ₁、λ₂、λ₃值均大于A组（P＜0.05）;对照组与A组比较,ADC、FA、λ₁值无统计学差异（P＞0.05）,A组λ₂、λ₃值大于对照组（P＜0.05）;对照组FA值大于B组（P＜0.01）,B组ADC、λ₂、λ₃值大于对照组（P＜0.05）,而对照组和患者组间λ₁值无统计学差异（P＞0.05）。结论ADC、FA、λ₁、λ₂、λ₃值是检测脊髓型颈椎病早期颈髓微结构改变的敏感指标。     

粒径小于2.5微米可吸入颗粒物的危害

大量流行病学研究证明,心血管系统疾病和呼吸系统疾病的发病率、入院率、病死率与室外空气污染呈显著的正相关关系,特别与直径≤2.5μm和≤10 μm的颗粒物(相应地以PM25和PM10表示)浓度相关.PM25的粒径小、比表面积大,易于富集空气中的有毒有害物质,更容易富集重金属元素及挥发性有机物(VOC)、多环芳烃(PAH)...     

BACE1抑制剂分子水平高通量筛选体系的建立

目的 建立体外分子水平β?鄄分泌酶（BACE1）抑制剂高通量筛选体系。方法 采用均相时间分辨荧光法（HTRF）,通过优化反应时间、酶浓度、检测仪器等实验条件,建立BACE1抑制剂高通量筛选体系,根据待测样品对BACE1活性抑制程度筛选其抑制剂。结果 采用HTRF法建立了BACE1抑制剂高通量筛选体系,其中反应时间确定为6 h、BACE1浓度为670 U/L,采用VICTOR3酶标仪测得信噪比为649.6,信背比为44.6,Z′因子为0.91,变异系数小于10%,并筛选到一系列IC₅₀小于10^-6 mol/L的化合物。结论 采用HTRF法建立的BACE1抑制剂筛选体系灵敏度高、特异性和稳定性好,可用于BACE1抑制剂的高通量筛选。     

毛冬青甲素抗血栓形成的作用机制研究

临床观察毛冬青甲素对血栓性疾病有明显的疗效。药理实验证明毛冬青甲素能使大白鼠实验性血栓形成变小。目前认为 TXA_2和 PGI_2对血栓形成具有重要意义。为了探讨毛冬青甲素抗血栓的作用机制,本文主要研究了毛冬青甲素对大鼠动脉生成前列环素(PGI_2)样物质的影响。实验证明毛冬青甲素在体内和体外均有增强动脉生成前列环素样物质的作用,此可能是其抗血栓形成的作用机制之一。     

2-芳基咪唑并［1，2-a］吡啶-3-乙酰胺衍生物的合成与抗焦虑活性研究

目的 寻找水溶性较好、抗焦虑活性较强的新型化合物。方法 设计合成2-芳基咪唑并［1,2-a］吡啶-3-乙酰胺类化合物,通过体外苯二氮卓受体竞争结合实验及小鼠高架迷宫行为实验,评价化合物的体内外抗焦虑活性,分析化合物的构效关系。结果与结论 共合成28个新型化合物,通过¹H-NMR和 MS确证其结构,其中I8和I10水溶性良好。苯二氮受体竞争结合实验结果表明,化合物Ⅰ₁、Ⅰ₈、Ⅰ₁₀ 、Ⅰ₁₃ 、Ⅰ₁₉ 与苯二氮卓受体的亲和力与阳性对照药物Ro5-4864相当,在浓度为100 nmol/L时,其对放射性配体与受体结合的抑制率分别为87%、89%、85%、89%和76%,而Ro5-4864为82%。对水溶性及活性均较好的化合物Ⅰ₈和Ⅰ₁₀ 进行小鼠抗焦虑活性评价结果表明,其具有明显的体内抗焦虑作用。     

脂氧素A4和5-脂氧化酶在子宫内膜异位症患者外周血中的表达及意义

目的 探讨脂氧素A4和5-脂氧化酶在子宫内膜异位症患者外周血中的表达及其意义.方法 选择2012年2-9月于金华市人民医院因子宫内膜异位症行腹腔镜手术治疗的患者27例为内异组,同期选取因卵巢囊肿行手术治疗的患者30例为对照组.酶联免疫吸附实验测定血清脂氧素A4的水平,实时荧光定量PCR技术检测外周血白细胞5-脂氧化酶mRNA的表达水平,采用LSD-t检验比较2组间脂氧素A4、5-脂氧化酶mRNA的差异,脂氧素A4和5-脂氧化酶mRNA表达水平间的相关性采用直线相关分析.结果 内异组患者血清脂氧素A4水平为（330.78＆#177;48.62） pg/ml,较对照组（535.93＆#177;57.98） pg/ml明显降低（t=14.386,P＜0.05）;内异组患者白细胞中5-脂氧化酶mRNA表达水平为（1.54＆#177;0.54）,较对照组（2.32＆#177;0.81）明显降低（t=4.232,P＜0.05）.2组患者中脂氧素A4和5-脂氧化酶mRNA表达水平呈正相关（P＜0.05）.结论 脂氧素A4和5-脂氧化酶的表达下降可能参与了子宫内膜异位症的发生.     

聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子的药代动力学与组织分布研究

目的 研究聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子(PEG-rhG-CSF)在动物体内的药代动力学与组织分布.方法 猕猴给予不同剂量(30、100和300μg/kg)的PEG-rhG-CSF,酶联免疫吸附法(ELISA)测定猕猴血浆中PEG-rhG-CSF浓度;[(125)I]标记示踪法结合分子排阻色潜法观察PEG-rhG-...