高效液相色谱法测定人血清中氨苄西林、丙磺舒的浓度研究

目的:建立测定人血清中氨苄西林、丙磺舒浓度的高效液相色谱法。方法:(1)氨苄西林,以诺氟沙星为内标,血清样品用0.6%的高氯酸沉淀蛋白后进行测定;色谱柱为HigginsTMC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为有机相(甲醇-乙腈-异丙醇,100∶2∶5,v/v):水相(0.01 mol/L磷酸二氢钾,pH3.5)=23∶77;检测波长210 nm;流速1.0 ml/min;柱温30℃。(2)丙磺舒,以缬沙坦为内标,血清样品用乙腈沉淀蛋白后进行测定;色谱柱为HigginsTMC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为有机相(甲醇-乙腈,400∶275,v/v):水相(乙酸-水,1∶60,v/v)=77∶23;检测波长280 nm;流速1.0 ml/min;柱温30℃。结果:氨苄西林在0.14~11.2μg/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.999 5),最低检测限为0.14μg/ml;丙磺舒在0.20~16.0μg/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.999 1),最低检测限为0.20μg/ml。结论:高效液相色谱法操作简便、灵敏、专一性好,适用于人体药动学研究。     

单步萃取-HPLC法同时测定人血清中艾司唑仑及阿普唑仑浓度

目的 建立RP-HPLC法同时测定人血清中艾司唑仑、阿普唑仑浓度.方法 血清样品采用二氯甲烷单步萃取,采用U1timate XB-C18(250.0 mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇∶水=66∶34,流速为1.0 mL/min,检测波长为223 nm,柱温为30℃,2-氨基-2氯-5硝基二苯酮为内标物.结果 艾司唑仑、阿普唑仑的线性范围分别为62.5 ～3 130.0μg/L(r =0.9995)和30.5 ～3 050.0μg/L(r =0.9998),最低检测限分别为20.8μg/L和20.3μg/L,日内精密度和日间精密度良好,回收率较高.结论 该法操作简便,结果准确可靠.可满足临床快速检测的需要.     

RP-HPLC法同时测定固肠止泻丸中盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的含量

目的:建立固肠止泻丸中盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的含量测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱:Waters Symmetry C18柱(3.9mm×150mm,5μm);流动相:磷酸盐缓冲液[0.05mol/L磷酸二氢钾-0.05mol/L庚烷磺酸钠(1∶1),含0.2%三乙胺,并用磷酸调节pH值至3.0]-乙腈(70∶30);流速:1.0ml/min;检测波长:265nm。结果:盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的线性范围分别为0.017020～0.136200mg/ml(r=0.9999)和0.008464～0.067710mg/ml(r=0.9998),平均回收率(n=9)分别为98.24%和98.31%。结论:本方法简便、灵敏、准确,可用于完善固肠止泻丸的质量控制。     

高效液相色谱-蒸发光散射法测定黄芪中单糖和双糖的含量

目的采用高效液相色谱-蒸发光散射法建立黄芪中单糖和双糖含量的测定方法。方法色谱柱为Waters X BridgeTM氨基柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(70∶30),流速为1.0mL/min,柱温为30℃。蒸发光散射检测器参数:雾化器温度为50℃,漂移管温度为90℃,气体流量为1.60L/min,增益值为1.0。结果果糖、蔗糖和麦芽糖分别在0.10~0.90μg(r=0.999 9)、1.00~9.00μg(r=0.999 6)、0.25~2.25μg(r=0.999 4)范围内其对数值与峰面积的对数值呈良好的线性关系;平均回收率分别为97.97%(RSD=1.56%)、97.82%(RSD=1.53%)、97.36%(RSD=1.59%)。结论所建立的高效液相色谱-蒸发光散射法简单、准确、重复性好,可用于黄芪中单糖和双糖的含量测定。     

健康成人血清中叶黄素和β-胡萝卜素的HPLC法测定

目的：采用高效液相色谱（HPLC）建立同时测定健康成人血清中叶黄素和β-胡萝卜素的方法．方法：血清经蛋白沉淀,正己烷萃取,氮气吹干及流动相溶解等预处理过程后,进行高效液相色谱分析．采用DiscoveryC18色谱柱（150mm×4．6mm．d．,5μm）,以乙腈-甲醇为流动相进行梯度洗脱,检测波长为450nm．结果：叶黄素和β-胡萝卜素在0．1～10．0mg／L范围内与峰面积呈良好线性关系,相关系数r分别为0．9996,0．9985（P〈0．05）．叶黄素和β-胡萝卜素的平均加样回收率在93．0％-103．9％之间,相对标准偏差（RSD）分别为1．19％和2．70％,分析周期在25min以内．结论：该方法灵敏度高,重现性好,是定量测定血清中叶黄素和β-胡萝卜素定量测定的可靠方法之一．     

新型二维高效液相色谱测定人血清伏立康唑浓度方法的建立与应用

目的建立全自动二维高效色谱法(2D-HPLC)测定血清中伏立康唑的浓度并应用于临床。方法第一维色谱柱为ASTON SC2柱(4.6mm×25mm,5μm),流动相为20mmol/L磷酸铵∶乙腈∶甲醇=3∶1∶1(V∶V∶V,磷酸调pH=5.4),流速1.2mL/min;第二维色谱柱为SHIMADZU C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为10mmol/L醋酸铵(三乙胺调pH7.0)∶10mmol/L醋酸铵(三氟乙酸调pH3.0)∶甲醇∶乙腈=30∶10∶10∶50(V∶V∶V∶V),流速1.0mL/min;中间柱为ASTON SH柱(3mm×10mm,5μm),辅助流动相为纯水。样品由一维色谱柱萃取,经中间柱捕获并转移至第二维色谱柱分析,检测波长256nm,柱温40℃,进样量200μL。结果伏立康唑在0.28～22.56μg/mL范围内线性关系良好,r=0.999 9,最低定量限为0.28μg/mL,方法回收率为99.01%～104.62%,提取回收率为85.81%～89.82%,日内、日间精密度RSD均小于9%。结论该方法操作简单、准确、灵敏,符合血清样品的测定要求,适用于伏立康唑临床血药浓度测定。     

高效液相色谱法测定螺旋藻中的β-胡萝卜素

通过对流动相、精密度、稳定性、重现性、回收率的考察和研究,采用高效液相色谱法(HPLC)测定了市售螺旋藻片中β-胡萝卜素的含量。建立了螺旋藻中β-胡萝卜素的分析方法:色谱柱为Agilent XDB-C8(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇:氯仿=75:25(V/V),流速为1.0m L/min,检测波长为450nm。得出以下结果:β-胡萝卜素在1.05μg/m L~105μg/m L内线性关系良好(R2=0.9996),(RSD=3.85%(n=5),简便快速地测定了螺旋藻中的β-胡萝卜素。     

高效液相色谱法测定菟丝子中绿原酸、对-香豆酸和金丝桃苷的含量

[目的]建立同时测定菟丝子中绿原酸、对-香豆素和金丝桃苷的含量的高效液相色谱法,为菟丝子的质量标准建立提供依据。[方法]色谱柱为依利特ODS C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-0.05%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速为1 m L/min,检测波长为360 nm。[结果]在此色谱条件下,3种成分可完全分离。绿原酸、对-香豆素和金丝桃苷的线性分别为2.00~100μg/m L(r=0.999 3),6.25~100μg/m L(r=0.999 1),0.50~50μg/m L(r=0.999 1)。平均回收率分别为100%(RSD=3.2%)、102%(RSD=1.7%)和102%(RSD=3.1%)。[结论]该方法简便可行,重复性好,可用于菟丝子的质量评价。     

HPLC-荧光法测定兔血浆中羟基喜树碱的浓度

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定兔血浆中羟基喜树碱含量的方法。方法采用HPLC-荧光法,检测器激发波长为363 nm,发射波长为550 nm,Lichrospher C18色谱柱,流动相为乙腈-0.075 mol/L醋酸铵缓冲液(pH 6.4)(32∶68,含0.2%三乙胺),流速1.0 mL/min,采用内标法测定浓度。结果兔血浆样品中羟基喜树碱与内标(喜树碱)峰分离良好,内源性杂质不干扰样品峰,最低检测浓度为1.0μg/L。HCPT浓度范围在2.832~5 800μg/L间呈线性相关,回归方程为Y=0.008 596 0.004 282C,相关系数为r=0.999 2,相对回收率分别为100.0%~105.0%,日内和日间变异均小于15.0%。结论本实验方法具有专属性,且灵敏、可靠,适用于HCPT类制剂给药后血药浓度的检测,有助于深入研究HCPT在体内的药代动力学特征。      

HPLC法测定自发性腹膜炎患者腹腔积液中安妥沙星的方法学及其药动学研究

目的 建立一种高效液相色谱法检测肝硬化自发性腹膜炎患者腹腔积液安妥沙星的浓度，同时研究其药动学特征。方法 收集6名肝硬化自发性腹膜炎患者服用盐酸安妥沙星片400 mg后0,0.5,1,1.5,2,2.5,3,4,6,8,12,24,36,48,72 h的腹腔积液，加入内标氧氟沙星，甲醇沉淀蛋白，采用内标法测定安妥沙星含量。色谱柱条件：Phenomenex C18柱(150 mm×4.6 mm, 5μm);流动相为0.05 mol/L KH₂PO₄缓冲液-乙腈85∶15(0.05 mol/L KH₂PO₄缓冲液含0.005 mol/L乙烷磺酸钠，0.007%乙二胺四乙酸二钠，磷酸调pH=2.4);柱温30℃,检测波长297 nm,流速1.0 ml/min,进样量20μl。结果 腹腔积液中安妥沙星在0.125～20μg/ml范围内与安妥沙星和内标物的峰面积之比呈良好的线性关系(R²=0.999 6),定量下限0.125μg/ml,低、中、高浓度质控样品的日内精密度RSD 0.96%...     

反相高效液相法测定二黄消炎片中5种异喹啉类生物碱的含量

目的 建立同时测定二黄消炎片中5种原小檗碱类生物碱(小檗碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀)含量的测定方法.方法 采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定.色谱柱:YMC-Pack ODS-AM(4.6 mm×250.0 mm,5μm);流动相:以0.1％ (v/v)甲酸水溶液-乙腈流动相梯度洗脱;流速:0.4 mL/min;进样量:10 μL;检测波长:345 nm;柱温:27℃.结果 二黄消炎片中5种生物碱成分的色谱分离行为良好,小檗碱、巴马汀、黄连碱、药根碱及表小檗碱的线性范围分别为1.526 4～5.342 4(r=0.999 9)、0.403 2～1.411 2(r=0.999 6)、0.309 7～1.083 9(r=0.999 8)、0.111 2～0.389 2(r=0.999 8)、0.162 2～0.567 7(r=0.999 6)μg,平均回收率分别为98.69％、98.66％、98.67％、98.67％、98.67％.结论 反相高效液相色谱法可行性高,专属性强,准确性高,重现性好,可作为二黄消炎片质量控制的参考依据之一.     

HPLC法测定复方选净散中水杨酸和苯甲酸的含量

目的采用HPLC法测定复方选净散中水杨酸和苯甲酸的含量。方法采用Diamonsil C18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇-0．05mol／L磷酸氢二钠溶液（用磷酸调pH至3．9）（55：45）,柱温为30℃,流速为0．8mL／min,检测波长233am,以外标法峰面积定量。结果水杨酸、苯甲酸分别在0．0359-0．2993mg／mL（r=0．9998）,0．0358～0．2980mg／mL（r=0．9993）范围内有良好的线性关系,平均回收率分别为100．14％（RSD=0．77％）和99．95％（RSD=0．95％）（n=9）。结论本方法简便、准确,可快速测定复方选净散中水杨酸和苯甲酸的含量,可为质量控制提供依据。     

高效液相色谱法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的溶出度

目的:用高效液相色谱法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的溶出度。方法:采用转篮法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的溶出度,以高效液相色谱法定量。色谱柱为RP-C18柱(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相为0.033 mol/L,磷酸二氢钾-乙腈(60∶40);流速为1.0 mL/min;检测波长265 nm;进样量为10μL。结果:盐酸小檗碱在0.992~9.920μg/mL范围内有良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为100.2%,RSD=0.38%(n=9),3批样品45 min溶出度均在75%以上。结论:高效液相法测定溶出度简便、准确、灵敏度高,可用于复方黄连素片中盐酸小檗碱溶出度的测定。     

高效液相色谱法测定百咳静颗粒(儿童型)中黄芩苷的含量

目的 建立高效液相色谱法测定百咳静颗粒(儿童型)中黄芩苷含量的方法.方法 色谱柱为Gimini ODS(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.03 mol/L醋酸铵(含0.25%甲酸)(体积比20:80),流速为1.0 ml/min,柱温为40℃,检测波长为316 nm,进样量为20μL.结果 黄芩苷...     

高效液相色谱法测定珍菊降压片中盐酸可乐定的含量

目的：建立以高效液相色谱法（HPLC）测定珍菊降压片中盐酸可乐定含量的方法。方法：采用Diamonsil C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,流动相为0.22%辛烷磺酸钠-甲醇-磷酸（560∶440∶1,用1 mo/L氢氧化钠溶液调节pH至3.0）,检测波长为220 nm,流速为1.0 ml/min,进样量为20μl,柱温为室温。结果：盐酸可乐定在1.0～10.0μg/ml范围内成良好的线性关系（r=0.999 9,n=6）,平均回收率为99.4%,RSD为0.93%。结论：本方法精密、准确,可用于珍菊降压片中盐酸可乐定的质量控制。     

高效液相色谱法测定橘红痰咳液中柚皮苷的含量

目的建立测定橘红痰咳液中柚皮苷含量的高效液相色谱（HPLC）法。方法色谱柱：Phenomenex-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相：甲醇-醋酸-水（38.0∶0.5∶62.0）;检测波长：283 nm;流速：1.0 mL/min;柱温：40℃。结果柚皮苷在89.6～896.0μg之间,线性关系良好（r=0.999 9）,加样回收率为98.25%,RSD=1.43%（n=6）。结论该方法操作简便、准确,具有很好的重现性和稳定性,可以用于橘红痰咳液的质量控制。     

高效液相色谱法测定蜂王浆含片中10-羟基-2-癸烯酸的含量

目的研究蜂王浆含片中10-羟基-2-癸烯酸的含量测定。方法采用高效液相色谱法进行测定。选用ODS柱(5mm×245mm,5μm),甲醇-0.03mol/L盐酸溶液-水(55∶10∶5)为流动相,流量为1.0mL/min,检测波长为210nm。结果 10-羟基-2-癸烯酸在0.110～0.660μg之间线性关系良好,相关系数r=0.999 6,回收率为100.12%,RSD为1.36%。结论方法灵敏、简便、准确,可用于本制剂的测定和质量控制指标。     

异硫氰酸苯酯法测定清开灵注射液中氨基酸的含量

目的 建立准确测定清开灵注射液中氨基酸含量的方法.方法 采用异硫氰酸苯酯为衍生化试剂,清开灵注射液衍生化反应后,进行HPLC分析.色谱柱为Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相A为0.1 mol/L醋酸钠-乙腈(pH 6.5) (93∶7),流动相B为乙腈-水(4∶1),梯度洗脱,流速为1 mL/min;检测波长为254 nm.结果 该方法可以对清开灵注射液中20种氨基酸准确定量,其浓度在0.019 ～24.855 g/L范围内,线性关系良好(r=0.999 7～0.999 9).方法重复性的RSD(％)在0.766％ ～4.49％之间;20种氨基酸的加样回收率在92.2％ ～ 106.8％之间.结论 该方法准确、可靠、灵敏,可用于清开灵注射液中氨基酸的含量测定.