密鳞牡蛎中牛磺酸的提取

目的 建立一种从水产品中提取天然牛磺酸的简便方法。方法 采用水煮溶出浸取,盐型离子交换树脂分离,使脱盐和牛磺酸的业制同时进行。结果 建立了一套完整的提取牛磺酸的方法,产品纯度可达到９８．５％,可做为食品添加剂使用。结论 本法为从水产品中提取天然牛磺酸的优良方法,可以推广使用。     

天然牛磺酸对大鼠肝纤维化组织学及血清学的影响

[目的]观察天然牛磺酸对大鼠肝纤维化的影响。[方法]采用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,Wistar大鼠随机分正常对照组、模型组、合成牛磺酸组、天然牛磺酸组,应用免疫组化及放射免疫等方法研究天然牛磺酸对大鼠肝组织纤维化的影响。[结果]天然牛磺酸较模型组相比能显著改善大鼠肝组织纤维化程度(P<0.05),促进活化HSC凋亡,提高SOD含量,降低MDA及TGF-β1的含量以及降低血清中ALT,HA,PCⅢ和LN的水平(均P<0.01);天然牛磺酸组促进HSC凋亡优于合成牛磺酸组(P<0.01)。[结论]天然牛磺酸具有一定的抑制肝纤维化作用。     

天然牛磺酸联合中药对肝星状细胞的影响

目的探讨天然牛磺酸联合中药对肝星状细胞的影响。方法体外培养大鼠肝星形细胞(HSC-T6),将其分成空白对照组、天然牛磺酸组、中药组、天然牛磺酸联合中药组、秋水仙碱组,按各组要求往细胞孔内加入相应的含药血清,培养孵育48 h后,用四氮噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞的吸光度值,用流式细胞仪检测各周期细胞的DNA含量及细胞凋亡情况。结果秋水仙碱组、天然牛磺酸组、中药组、天然牛磺酸联合中药组HSC-T6细胞光密度值(OD)均显著低于空白对照(P0.05);天然牛磺酸联合中药组对HSC-T6细胞增殖抑制率明显高于天然牛磺酸组和中药组(P0.05);天然牛磺酸组和中药组对HSC-T6细胞增殖抑制率与秋水仙碱组比较差异均无统计学意义(P0.05);天然牛磺酸联合中药组与秋水仙碱组对HSC-T6细胞增殖抑制率比较差异有统计学意义(P0.01);秋水仙碱组、天然牛磺酸组、中药组、天然牛磺酸联合中药组HSC-T6细胞G0/G1期DNA百分比均显著高于空白对照组(P0.05);天然牛磺酸组、中药组、天然牛磺酸联合中药组和秋水仙碱组HSC-T6细胞S期、G2/M期DNA百分比均显著低于空白对照组(P0.05);天然牛磺酸联合中药组HSC-T6细胞G0/G1期DNA百分比高于天然牛磺酸组和中药组(P0.05);天然牛磺酸联合中药组HSC-T6细胞S期、G2/M期百分比均低于天然牛磺酸组和中药组(P0.05);天然牛磺酸联合中药组HSC-T6细胞G0/G1期DNA百分比高于秋水仙碱组(P0.05);天然牛磺酸联合中药组HSC-T6细胞S期和G2/M期DNA百分比均低于秋水仙碱组(P0.05);空白对照组HSC-T6细胞晚期凋亡率为(7.346±0.836)%,低于秋水仙碱组、天然牛磺酸组、中药组、天然牛磺酸联合中药组的(19.647±1.009)%、(24.178±0.996)%、(23.882±1.105)%和(31.533±1.002)%(P0.05);天然牛磺酸联合中药组HSC-T6细胞晚期凋亡率高于天然牛磺酸组和中药组(P0.05);天然牛磺酸组、中药组HSC-T6细胞晚期凋亡率均高于秋水仙碱组(P0.05);天然牛磺酸联合中药组HSC-T6细胞晚期凋亡率明显高于秋水仙碱组(P0.01)。结论天然牛磺酸联合中药具有抑制HSC-T6细胞增殖而对肝纤维化进程有干预作用,促进HSC-T6细胞凋亡的作用,且天然牛磺酸联合中药的干预能力强于天然牛磺酸、中药及秋水仙碱。     

吸光光度法测定牡蛎中牛磺酸

建立一种相对简便的测定海产品中牛磺酸的方法。方法根据在一定的条件下，牛磺酸与乙酰丙酮和甲醛反应生成带色的配合物。建立了测定牛磺酸的吸光光度法。结论吸光光度法是测定牡蛎中牛磺酸含量的较好方法，春成本低，干扰少。用于样品分析，结果满意。     

基于光学结构识别技术的化学知识库构建

目的：构建了一种从科研文献提取关键信息建立化学知识库的流程。方法：使用名称转化技术和光学结构识别软件提取化合物结构,使用文献管理软件EndNote X8获取文献题录信息,使用机器学习工具ChemDataExtractor和人工注释方法提取文献内信息,使用计算模拟平台Pipeline Pilot 7.5获取可预测属性,关联开源数据库ChEMBL获取已知生物活性。结果：成功建立起一种合理、高效的化学知识库构建策略,并采用该策略构建了北京大学海洋天然产物库PKU-MNPD。结论：提出了一种化学知识库的数据汇聚策略,提高了化学知识库构建效率,并且基于原始文献使得构建的数据库内容准确、全面、易于检索。     

吸光光度法测定牡蛎中牛磺酸

目的建立一种相对简便的测定海产品中牛磺酸的方法。②方法根据在一定的条件下，牛磺酸与乙酰丙酮和甲醛反应生成带色的配合物，建立了测定牛磺酸的吸光光度法。③结果该方法的样品前处理过程较为简便，所测得的牡蛎中牛磺酸含量与采用氨基酸测定仪测定的结果接近，相对标准偏差不大于４．０％，回收率为９２．８％～９８．９％．④结论吸光光度法是测定牡蛎中牛磺酸含量的较好方法，其成本低，干扰少。用于样品分析，结果满意。     

微波辅助萃取技术提取中药有效成分研究

微波辅助提取(microwave-assisted extraction,MAE)又称微波萃取,是指使用适合的溶剂在微波反应器中从天然药用植物、矿物、动物组织中提取各种化学成分的技术和方法。微波法用于成分提取最早始于1986年,Ganzler等首次用微波法从土壤、种子、食物中提取出各类化合物。在国内,微     

牛磺酸对大鼠肝星状细胞的影响

目的探讨天然牛磺酸对大鼠肝星状细胞的影响.方法采用HSC-T6细胞株为模式细胞,传代培养,MTT法观察天然牛磺酸对HSC-T6细胞增殖的影响,胶原晶格收缩法观察其对HSC-T6细胞收缩的影响,ELISA法观察其对HSC-T6细胞分泌Ⅰ型胶原(CoI)、纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响.结果天然牛磺酸中、高剂量组对HSC-T6细胞抑制率分别为29.72%,33.04%,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.01);各剂量组较对照组均能显著抑制HSC-T6收缩(P＜0.05或P＜0.01),抑制作用与剂量呈依赖关系;中、高剂量组较对照组相比能显著抑制HSC-T6分泌CoI、FN、TGF-β1(P＜0.05或P＜0.01).结论天然牛磺酸可抑制HSC-T6增殖、收缩、分泌CoI、FN、TGF-β1.     

应用高效液相色谱法测定母乳化奶粉中的牛磺酸

牛磺酸作为新型营养强化剂添加在第二代母乳化奶粉中。作者应用高效液相色谱法对母乳化奶粉中的牛磺酸进行定量分析，样品经1％偏磷酸提取→钠柱分离→柱后OPA衍生→荧光检测器检测定量。操作简便、快速，提取完全，牛磺酸出峰时间8．738min，回收率99．5％，变异系数2．19％，最低检出量20ng，为一个较理想的定量方法。     

人脑组织牛磺酸的测定方法

①目的建立一种快速、简易组织中牛磺酸的测定方法。②方法根据美国Ｂｅｃｋｍａｎ－６３００型氨基酸自动分析仪锂柱（０．４ｃｍ×１０ｃｍ）１３０ｍｉｎ程序生理组织和生理体液分析法以及牛磺酸的特性，建立了测定生理组织中牛磺酸的１０ｍｉｎ短程序测定法。③结果该方法重复性好，变异系数小，在牛磺酸浓度为１．８μｍｏｌ／Ｌ时，峰位置和峰面积的变异系数（ＣＶ值）分别为０．０６％和１．９０％（ｎ＝７），明显低于规定的技术指标（１．０％和２．５％）。④结论该法时间短，茚三酮和缓冲液用量少，成本低，可用于测定生理组织中牛磺酸的含量。     

超滤膜分离技术在植酸酶浓缩中的应用

目的 利用超滤法在低温下操作,生物活性物质不易失活的特点,探讨超滤法代替薄膜蒸发法浓缩植酸酶发醇液的技术可行性,以降低能耗。方法 采用截留分子量为２００００的ＰＵ－２０Ｋ－ＰＳ管式超滤膜系统浓缩１～５批次的植酸酶发醇液,测定浓缩倍数、浓缩收率和截留率并观察超滤过程的膜通量及其变化。结果 植酸酶的浓缩倍数为６．５３倍,浓缩收率为９９．６９％,截留率为９９．９３％,系统可以在植酸酶的工艺条件下连续浓缩〉１０ｈ,且经过简单清洗后,膜通量基本恢复。结论 用ＰＵ－２０Ｋ－ＰＳ管式超滤膜系统缩植酸酶发醇液在技术上可行。     

阴茎癌及其癌旁组织中癌基因ras产物P21蛋白的表达

探讨阴茎癌及其癌旁组织中癌基因ｒａｓ产物Ｐ２１蛋白表达的临床意义。方法 用免疫组化ＡＢＣ法检测３２例阴茎癌、３２例癌旁组织和１６例正常阴茎组织的癌基因ｒａｓ产物Ｐ２１蛋白。结果 ２８例癌组织，８例癌旁组织中有Ｐ２１蛋白表达，而１６例正常阴茎组织中２１阴性。Ｐ２１蛋白和病理分级、临床分期呈正相关表达、即随分级和分期的上升阳性增强，并且癌旁组织Ｐ２１蛋白表达阳性者显示早期复发和转移的不良预后。结论 Ｐ     

牛磺酸对小鼠脾细胞DNA损伤的影响

目的探讨牛磺酸对紫外线所致小鼠脾细胞ＤＮＡ损伤的影响。②方法小鼠饲料中分别添加牛磺酸、维生素Ｃ（ＶｉｔＣ）和维生素Ｅ（ＶｉｔＥ）喂养１１２ｄ后,荧光法（ＦＡＤＵ法）检测小鼠脾细胞ＤＮＡ链的断裂程度,并与对照组比较。③结果紫外线照射前,小鼠脾细胞ＤＮＡ链断裂程度各组间差异无显著性（Ｆ＝０．８７５６,Ｐ＞０．０５）;紫外线照射后,牛磺酸、ＶｉｔＣ,ＶｉｔＥ各组脾细胞ＤＮＡ双链剩余率高于对照组,差异均有显著性（Ｆ＝２０．４５,ｑ＝３．０１～４．０８,Ｐ均＜０．０５）。④结论牛磺酸可减轻紫外线对小鼠脾细胞ＤＮＡ分子的损伤。     

闽产木立芦荟多糖的分离纯化及初步分析

目的 分离纯化及初步分析产木立芦荟中的多糖。方法 芦荟经沸水提取，醇沉，Sevage法去除蛋白质，Sephadex G-200柱色谱分离纯化，制得闽产木立芦荟多糖，以硫酸－苯酚法测定其总糖含量。结果 闽产木立芦荟多糖经紫外吸收光谱扫描具有多糖特征吸收峰，未见核酸和蛋白质吸收峰，多糖含量可达89．7％，初步分析由D－甘露糖和D－葡萄糖等单糖组成。结论 从闽产木立芦荟中可提取分离纯度较高的杂多糖。     

含绿色荧光蛋白和HyTK基因双顺反子腺病毒载体的构建及鉴定

目的构建一种带有绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）和潮霉素磷酸转移酶和ＨＳＶ－ＴＫ的融合基因（ＨｙＴＫ基因）的新型腺病毒载体，用于简便、快速地了解自杀基因在恶性肿瘤中的转染效率和提高疗效。方法利用脑炎心肌炎病毒的内部核糖体进入位点（ｉｎｔｅｒｎａｌｒｉｂｏｓｏｍｅｅｎｔｒｙｓｉｔｅ，ＩＲＥＳ），将ＧＦＰ的ｃＤＮＡ与ＨｙＴＫ真核表达载体重组，构建获得含ＧＦＰ和ＨｙＴＫ基因真核表达载体，在Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导下转染ＣＯＳ－７细胞，检测其表达后进一步克隆获得含ＧＦＰ和ＨｙＴＫ基因双顺反子腺病毒载体。结果构建含绿色荧光蛋白和ＨｙＴＫ基因双顺反子腺病毒载体，显示该载体可获得ＨｙＴＫ基因及ＧＦＰ的良好表达。结论含绿色荧光蛋白和ＨｙＴＫ基因双顺反子腺病毒载体的构建为ＨｙＴＫ基因治疗恶性肿瘤用于临床提供了新的治疗工具及随访检测手段。     

拔除第1恒磨牙后矫治方法的初探

①目的探讨因重度龋坏不能保留第１恒磨牙的临床矫治方法。②方法对８例病人采取拔除第１恒磨牙后，进行Ｅｄｇｅｗｉｓｅ技术矫治。③结果８例病人均取得满意疗效，第２恒磨牙未萌出前拔除第１恒磨牙病人较萌出后拔除者牙合关系好。④结论将重度龋坏不能保留的第１恒磨牙作为减数拔牙对象，可少拔除健康牙齿，且早拔除有利于良好牙合关系的建立     

血清乙肝病毒X基因的检测方法及意义

目的 探讨血清乙肝病毒（ＨＢＶ）Ｘ基因的检测方法及肝病患者Ｘ基因检测的意义。方法 通过ＰＣＲ扩增法探讨ＨＢＶ Ｘ基因的检测方法,对扩增产物的序列进行测序分析,并对３０例肝癌及３２例肝硬化患者血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ与Ｘ基因进行检测。结果经琼脂糖电泳与序列分析表明,扩增产物与Ｘ基因序列一致。血清学检测显示,２例肝癌与２例肝硬化患者血清中Ｘ基因检测阳性,但ＨＢｓＡｇ检测阴性。结论 应用ＰＣＲ法能在血清中扩增出完整Ｘ基因片段,为研究Ｘ基因的序列变化与肝癌发生的关系提供了一个有效途径。部分肝病患者血清ＨＢｓＡｇ阴性,但在血清中能检出Ｘ基因,提示肝组织中存在Ｘ基因整合。     

缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨缺血预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法在大鼠肝脏持续６０ｍｉｎ缺血及３０ｍｉｎ再灌注之前,先进行５,１０,１５ｍｉｎ的缺血及等长时间的再灌注。于再灌注３０ｍｉｎ完成时取标本测定肝功能、抗氧化酶、脂质过氧化物及形态学研究。结果持续６０ｍｉｎ缺血及３０ｍｉｎ再灌注后,肝功能明显受损,抗氧化酶活力显著下降,肝组织大片坏死;５ｍｉｎ的缺血预处理能明显改善肝功能、提高抗氧化酶活力,减少肝细胞坏死;１０ｍｉｎ效果次之;１５ｍｉｎ反而加重肝脏损害。结论５ｍｉｎ的缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,它可能为肝脏缺血再灌注损伤的防治提供一种简单有效的新方法     

”微岛“原代培养新生大鼠中脑腹侧多巴胺能神经元

目的 探讨“微岛”原代培养中脑腹侧多巴胺能神经元的方法,研究不同培养液维持多巴胺能神经元存活和生长的效果,及多巴胺能神经元与其他神经元在“微岛”上的共培养,为多巴胺能神经元的相关研究提供一种新的细胞模型。方法 利用神经细胞不能粘附于琼脂糖上生长的原理,先用琼脂糖制成非粘附性底物,再将胶原喷洒其上形成粘附性的“岛”样底物,接种神经胶质细胞形成微岛样饲养层后,将大鼠中脑腹侧神经元接种于“微岛”上生长。结果 中脑腹侧多巴胺能神经元可在“微岛”上生长,即使单个神经元也生长良好。在共培养时,能与其他神经元形成突触联系。结论 确定适于“微岛”原代培养中脑腹侧多巴胺能神经元的培养条件,该培养法可为多巴胺能神经元的相关研究提供一种新的细胞模型。     

大鼠皮质神经元的体外培养和纯化

目的：探讨大鼠皮质神经元分离纯化的有效方法。方法：取胎鼠大脑皮质细胞，分别在不同的培养液中进行原代培养，利用相差显微镜对培养的细胞进行动态观察；并以免疫细胞化学技术对神经元进行染色。结果：在相差显微镜下可见加用N2添加剂和胎牛血清培养的神经元生长良好，胞体形态多样，突起数目多，长度长，与邻近神经元的胞体或突起形成接触，而胶质细胞则大量死亡，神经元纯化率达94％以上，未加用N2添加剂培养的神经元胶质细胞大量存在，神经元纯化率达50％左右。结论：N2添加剂和胎牛血清联合应用可使大鼠皮质神经元得到良好的生长和有效纯化。