参麦注射液对大鼠脑出血后迟发性神经细胞损伤的保护作用

目的:观察参麦注射液对大鼠脑出血后迟发性神经细胞损伤的保护作用。方法:采用Rosenberg法复制大鼠脑出血模型,观察脑出血后大鼠海马CA1区神经细胞病理形态结构、神经细胞线粒体DNA缺失、C-myc基因、PDGFA基因表达及参麦注射液的防治作用。结果:参麦注射液减少大鼠脑出血后海马CA₁区锥体细胞凋亡数目,抑制血肿周围脑组织线粒体DNA片段缺失,参麦注射液对出血早期C-mycmRNA的表达无明显影响,但可使PDGFAmRNA表达明显下调并时限延长。结论:参麦注射液可能通过调节PDGF表达对脑出血后迟发性神经细胞损伤修复有保护作用。     

参麦注射液对脑出血后大鼠神经细胞保护作用的实验研究

目的:研究参麦注射液对脑出血大鼠神经细胞的保护作用及其机制。方法:将50只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、参麦组,模型组和参麦组组内分1 d3、d、5 d7、d四个时间点,立体定位仪定位注射胶原酶Ⅶ造大鼠脑出血模型,观察大鼠脑出血后神经病理体征、血肿周围区、术侧海马区和皮层区病理形态结构的改变,以及参麦注射液处理后对其的影响;将培养8 d后生长良好的神经细胞随机分为正常组、模型组、参麦组,正常组不做任何处理,其余两组均分别在缺氧后30min1、h、3 h6、h和12 h五个时间点造神经细胞缺氧损伤模型,参麦组在缺氧前24 h及缺氧后加入参麦注射液(1∶50),相差显微镜下观察神经细胞形态学的变化,并测定DNA裂解率。结果:与模型组比较,参麦组大鼠神经病理体征减轻明显,血肿吸收更完全,术侧海马区、皮层区和血肿周围区细胞受损较轻,细胞结构完整,参麦组培养神经细胞在缺氧损伤后形态学改变明显比模型组轻,DNA裂解率少,二者有显著性差异(P<0.05)。结论:参麦注射液可能通过促进血肿吸收、抑制细胞凋亡而对脑出血后大鼠神经细胞发挥保护作用。     

参麦注射液对脑出血大鼠神经细胞凋亡相关基因表达影响的实验研究

目的 :观察参麦注射液对大鼠脑出血后神经细胞凋亡相关基因的影响。方法 :采用Rosenberg法复制大鼠脑出血模型 ,测定脑出血后大鼠海马CA₁区神经细胞病理形态结构及其Bcl-2基因、Bax基因表达 ;结果 :参麦注射液减少大鼠脑出血后海马CA₁区锥体细胞凋亡数目 ,显著增加Bcl-2基因表达 ,降低Bax基因表达 ,使BaxmR NA/bcl-2 mRNA比率下降。结论 :参麦注射液能调节凋亡基因 ,减少大鼠脑出血后神经细胞的凋亡。     

参麦注射液对脑出血大鼠脑组织HSP70表达的影响及其神经保护作用机制的实验研究

目的:观察参麦注射液对脑出血大鼠血肿中心区、缺血半暗带区、术侧海马区和皮层区HSP70表达的影响。方法:将50只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、参麦组共4组,模型组和参麦组内又分为1d、3d、5d、7d共4个时间点,立体定位仪定位注射胶原酶VII造大鼠脑出血模型。评估各组大鼠神经系统病态,并进行爬杆计分,电镜观察脑出血后的神经细胞的病理改变,免疫组织化学法检测各组大鼠脑出血后不同时间点血肿中心区、血肿周围区、术侧海马区及皮层区神经细胞HSP70的表达,以及参麦注射液对其的影响。结果:正常组及假手术组大鼠未见明显的病态,模型组和参麦组均出现不同程度的病态体征;电镜观察显示,正常组和假手术组神经细胞结构正常,模型组细胞器不完整,出现了凋亡小体,而参麦组细胞器较完整,凋亡小体较少;正常组和假手术组大鼠海马区和皮层区神经细胞有少量的HSP70阳性信号表达,模型组缺血半暗带区、术侧海马区和皮层区HSP70的表达1d时增多,3d时达到高峰,5d时表达下降,至7d时仍有少量表达,与模型组相比较,参麦组各时间点的HSP70表达增多,差异有统计学意义(P0.01)。结论:参麦注射液可能通过增加HSP70的表达,抑制细胞凋亡,增加神经细胞耐缺氧能力而发挥神经保护作用。     

腺苷A1受体介导参麦注射液对肢体缺血再灌注损伤大鼠海马组织的保护作用

【目的】观察腺苷A1受体是否介导参麦注射液对肢体缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用。方法60只大鼠随机分为对照组、模型组、参麦注射液组、参麦注射液+腺苷A1受体拮抗剂组、溶剂对照组。采用双侧股动脉夹闭的方法建立大鼠肢体缺血再灌注损伤模型,对照组大鼠不夹闭股动脉,其他操作同造模大鼠。参麦注射液组大鼠在造模后即刻腹腔注射参麦注射液,模型组大鼠在造模后即刻腹腔注射等量0.9%氯化钠注射液,参麦注射液+腺苷A1受体拮抗剂组大鼠在造模前30 min腹腔注射腺苷A1受体拮抗剂,造模后即刻腹腔注射参麦注射液。溶剂对照组大鼠只在造模前30 min注射二甲亚砜。大鼠肢体缺血再灌注48 h后处死,观察海马组织的脑水含量,采用尼氏染色观察大鼠海马CA1区神经元损伤情况,采用Western blot法观察大鼠海马组织中Bcl-2和Bax蛋白表达量。结果与对照组比较,模型组大鼠的海马组织脑水含量明显增高(P0.05),Bcl-2/Bax比率明显减小,海马CA1区正常细胞数量明显减少(P0.05)。与模型组比较,参麦注射液组大鼠海马组织脑水含量明显减少(P0.05),海马CA1区正常细胞数量明显增多,Bcl-2/Bax比率明显升高(P0.05)。与参麦注射液组比较,参麦注射液+腺苷A1受体拮抗剂组大鼠海马组织脑水含量明显增加,Bcl-2/Bax比率明显降低,海马CA1区正常细胞数量明显减少(P0.05)。结论参麦注射液对肢体缺血再灌注损伤大鼠海马组织具有保护作用;腺苷A1受体可能介导了参麦注射液对肢体缺血再灌注损伤大鼠海马组织的保护作用。     

脑溢安对出血性中风大鼠神经细胞凋亡的影响

目的:探讨脑溢安颗粒剂对出血性中风大鼠神经细胞凋亡的影响。方法:用立体定位注射胶原酶方法,采用细胞形态学,DNA 裂解率及流式细胞仪技术,观察脑溢安颗粒剂对出血性中风大鼠海马 CA_1区及皮质神经细胞凋亡的影响。结果:脑出血大鼠海马 CA_1区及皮质均出现凋亡的神经细胞,脑溢安颗粒剂能减少上述区域神经细胞的凋亡。结论:脑溢安颗粒剂具有对抗出血性中风大鼠神经细胞凋亡的作用。     

黄芪多糖对大鼠脑缺血再灌注后迟发性神经元死亡影响的实验研究

目的:观察黄芪多糖(APES)对大鼠脑缺血再灌注后海马CA1区迟发性神经元死亡(DND)的形态学影响,并探讨黄芪多糖对脑缺血损伤的保护机制。方法:用重复双侧颈总动脉夹闭方法制作不完全前脑缺血再灌注动物模型。于造模后3天取材,HE染色及原位DNA末端标记法观察模型组和APES治疗组动物脑缺血再灌注后海马神经细胞迟发性神经元死亡的情况。结果:造模后3天,模型组海马锥体细胞出现广泛的细胞坏死,以CA1区和齿状回最明显。TUNEL染色法显示模型组CA1区坏死神经元的邻近部位以及齿状回可见大量特征性阳性颗粒的凋亡细胞,治疗组坏死及凋亡细胞明显少于模型组(P<0.05)。结论:黄芪多糖减少缺血再灌注对神经细胞的损害,对缺血再灌注后神经元迟发性死亡具有保护作用。     

黄芪多糖对大鼠脑缺血再灌注后迟发性神经元死亡影响的实验研究

目的：观察黄芪多糖（APES）对大鼠脑缺血再灌注后海马CA1区迟发性神经元死亡（DND）的形态学影响，并探讨黄芪多糖对脑缺血损伤的保护机制。方法：用重复双侧颈总动脉夹闭方法制作不完全前脑缺血再灌注动物模型。于进模后3天取材，HE染色及原位DNA末端标记法观察模型组和APES治疗组动物脑缺血再灌注后海马神经细胞迟发性神经元死亡的情况。结果：进模后3天，模型组海马锥体细胞出现广泛的细胞坏死，以CA1区和齿状田曩明显。TUNEL染色法显示模型组CA1区坏死神经元的邻近部位以及齿状田可见大量特征性阳性曩粒的凋亡细胞，治疗组坏死及凋亡细胞明显少于模型组（P〈0．05）。结论：黄芪多糖减少缺血再灌注对神经细胞的损害，对缺血再灌注后神经元迟发性死亡具有保护作用。     

参麦注射液对脑出血大鼠缺氧诱导因子1-α表达的影响

目的:研究参麦注射液对脑出血大鼠血肿周围区缺氧诱导因子1-α(Hypoxia inducible factor 1-α,HIF1-α)表达的影响及其意义。方法:将50只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、参麦组4组,模型组和参麦组组内又分为1、3、5、7天共4个时间点,立体定位仪定位注射胶原酶VII造大鼠脑出血模型,观察大鼠脑出血后神经病理体征改变,免疫组织化学法检测血肿周围区HIF1-α的表达,以及参麦注射液治疗后的影响。结果:与模型组相比较,参麦组大鼠神经病理体征减轻明显(P<0.01);正常组和假手术组脑组织神经细胞无HIF1-α表达,而模型组血肿周围区HIF1-α的表达1天时增多,3天时达到高峰,5天时表达下降,至7天时仍有少量表达,与模型组相比较,参麦组各时间点的HIF1-α表达要少,二者有显著性差异(P<0.01)。结论:参麦注射液可能通过促进血肿吸收、抑制血肿周围区HIF1-α表达而发挥神经保护作用。     

枸杞多糖对离体缺血性脑损伤后PARP-1和AIF的影响

目的:探讨枸杞多糖(LBP)对原代培养的大鼠海马神经元氧糖剥夺损伤后调亡通路PARP-1/AIF的影响。方法:以原代培养的新生大鼠海马神经元为研究对象,用无糖培养液结合物理性缺氧建立氧糖剥夺损伤模型。Hoechst 33342染色法、Annexin V-FITC/PI法检测原代培养的新生大鼠海马神经细胞的凋亡;化学比色法测定神经细胞NAD含量的变化;琼脂糖凝胶电泳法检测DNA Ladder;免疫蛋白印迹技术和实时荧光定量PCR技术检测凋亡相关因子PARP-1、AIF和Endo G的蛋白和mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组可显著降低神经细胞NAD的含量;神经元出现明显的DNA梯度;Hoechst 33342和Annexin V-FITC/PI法检测显示神经细胞凋亡率明显升高;出现大量的DNA断裂片段;PARP-1和AIF的蛋白水平明显上调,Endo G蛋白水平明显下调;PARP-1、AIF和Endo G的mRNA水平明显上调。与模型组比较,枸杞多糖治疗组(10、20、40 mg/L)和尼莫地平组可显著提高海马神经细胞NAD的含量;DNA梯度有不同程度的缓解;显著降低神经细胞的凋亡率;对DNA梯度有不同程度的缓解;明显抑制PARP-1和AIF蛋白表达,增强Endo G蛋白的表达;明显抑制PARP-1,AIF和Endo G mRNA表达。结论:枸杞多糖通过抑制PARP-1/AIF凋亡通路对氧糖剥夺再灌注损伤的新生大鼠海马神经元发挥保护作用。     

血管通对实验性动脉粥样硬化家兔血管壁血小板衍化生长因子A、B及c－myc基因表达的影响

本实验采用斑点印迹杂交和原位杂交技术，进一步探讨血管通对与血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增生相关基因表达的影响。结果表明，高脂组家兔血管壁血小板衍化生长因子（ＰＤＧＦ）－Ａ的ｍＲＮＡ呈高表达，杂交阳性颗粒主要分布在动脉粥样硬化（ＡＳ）斑块边缘区及新生斑块区的ＳＭＣ胞浆内，而血管通组家兔血管壁ＰＤＧＦ－ＡｍＲＮＡ表达水平明显低于高脂组；高脂组血管斑块组织ｃ－ｍｙｃ的ｍＲＮＡ表达水平亦比正常组高，血管通组血管壁ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达水平下降。上述结果初步说明血管通可能是通过影响血管壁ＰＤＧＦ－Ａ、ｃ－ｍｙｃ的ｍＲＮＡ表达水平，以抑制ＶＳＭＣ增生，阻止ＡＳ形成。     

蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠神经细胞凋亡与 Bax Bcl-2蛋白表达的作用研究

目的：通过观察大鼠脑出血后神经细胞凋亡与Bax、Bcl-2蛋白表达的动态变化及蛭龙活血通瘀胶囊的干预作用。探讨蛭龙活血通瘀胶囊可能的脑保护作用。方法：将大鼠随机分为假手术组、模型组、蛭龙活血通瘀胶囊低、中、高剂量组。采用自体血注入法制备脑出血大鼠模型。采用TUNEL法测定凋亡细胞的表达,免疫组化法测定Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果：与模型组比较,蛭龙活血通瘀胶囊低、中、高剂量组的Bax蛋白及凋亡细胞表达明显下降,而Bcl-2蛋白的表达明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01）。与低剂量组比较,中、高剂量组各时间点的Bax蛋白及凋亡细胞表达均明显下降,而Bcl-2蛋白的表达明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：蛭龙活血通瘀胶囊能明显促进Bcl-2表达,抑带】Bax表达,减少细胞凋亡,对脑出血大鼠具有明显的脑保护作用,且存在一定量效关系。     

针刺对实验性脑出血大鼠脑神经细胞与心肌超微结构损伤的保护作用

[目的]探讨实验性脑出血后心肌病理学改变及针刺的干预作用。[方法]采用自体血注射至尾状核区的脑出血大鼠模型,应用不同的针刺方法并通过电镜与光镜观察出血周围区及心肌形态学改变。[结果]脑出血可引发心肌和毛细血管损伤,针刺可改善脑出血周围区及心肌超微结构损伤。[结论]针刺对实验性脑出血大鼠脑神经细胞与心肌超微结构损伤具有保护作用。     

下法对脑出血大鼠神经细胞凋亡的影响

目的：探讨中医下法对实验性脑出血大鼠神经凋亡细胞的保护作用。方法：雄性SD大鼠随机分为对照组、脑出血组、大黄治疗组、番泻叶治疗组,采用自体血缓慢注射法制作大鼠急性脑出血（intracerebral hemorrhage,ICH）模型,观察大鼠神经症状评分和脑组织病理学改变,以及大黄、番泻叶对神经细胞凋亡影响。结果：①脑出血组、大黄治疗组、番泻叶治疗组的神经症状评分较对照组大鼠显著增高（P〈0．01）;大黄治疗组、番泻叶治疗组较脑出血组显著降低（P〈0．01）;大黄治疗组较番泻叶治疗组显著降低（P〈0．05）。②病理观察结果显示：脑出血组、大黄治疗组、番泻叶治疗组脑组织均发生了不同程度的损伤,大黄治疗组、番泻叶治疗组与脑出血组比较,脑组织病理损伤减轻,正常神经元细胞数目显著增加。（3）大黄治疗组、番泻叶治疗组发生表达的TUNEL阳性细胞较脑出血组均显著减少（P〈0．05）。结论：中医下法对实验性脑出血损伤神经细胞凋亡具有神经保护作用。     

“百会透曲鬓”针刺法对脑出血模型大鼠脑组织IL-6蛋白表达影响的实验研究

目的:通过观察"百会透曲鬓"针刺法对脑出血急性期大鼠模型脑组织中白介素-6(IL-6)蛋白表达的影响,研究本针刺法对脑出血后继发性脑损伤的神经保护机制,从而指导临床实践。方法:选用60只雄性Wistar大鼠,随机分为空白组、模型组、针刺组、西药组(脑复康)。分别于脑出血急性期大鼠模型造模成功后6h,2天,7天三个时间点并完成相应治疗,治疗后进行神经功能学评分,然后处死大鼠,取大鼠脑组织,用免疫组化分析法(IHC)检测脑组织中IL-6蛋白表达的平均灰度值,在光镜下观察脑组织形态学变化。结果:针刺治疗能减少神经功能缺损评分,造模后2天及7天后,针刺组与模型组比较有显著性差异(P0.01);针刺治疗能降低IL-6阳性细胞平均灰度值,造模后2天及7天后,针刺组与模型组比较有显著性差异(P0.01);光镜下脑组织病理改变结果显示,针刺组与模型组有差异。结论:"百会透曲鬓"针刺法可明显改善大鼠的神经功能学评分,有利于脑出血后肢体运动功能的恢复。在脑出血急性期,针刺"百会透曲鬓"穴可以通过下调IL-6的蛋白表达,减轻脑出血后炎性反应导致的继发性脑损伤程度,从而改善脑组织缺血缺氧状态及保护受损伤的神经元细胞。     

黄竹清脑颗粒对痰热腑实证脑出血大鼠急性期脑组织中Caspase-3表达的影响

目的:探讨黄竹清脑颗粒对痰热腑实证脑出血模型大鼠急性期脑组织中半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3)表达的影响.方法:采用SD大鼠自体粪便灌胃配合胶原酶Ⅶ-肝素混合液立体定位注射的方法复制痰热腑实证脑出血大鼠模型,免疫组化法测定大鼠脑组织中Caspase-3表达的变化.结果:①黄竹清脑颗粒可明显减轻痰热腑实证脑出血大鼠喉...     

抵当丸对脑出血后血肿周围组织血流灌注的干预研究

目的观察脑出血大鼠血肿周围组织血流的动态变化,探讨抵当丸对血肿周围组织血流灌注的影响。方法雄性Wistar大鼠50只,随机分为对照组、假手术组、脑出血Ⅰ组和脑出血Ⅱ组（治疗组）,脑出血组分为12h、24h、72h、7d4个亚组,采用自体血尾状核注入法制备脑出血模型,各时相点应用CT灌注对血肿周围组织血流动力学参数包括局部脑血流量（rCBF）、局部脑血容量（rCBV）及对比剂平均通过时间（MTT）,进行定量测量,同时按Bederson评分法进行动物行为评分。结果脑出血Ⅰ组、Ⅱ组rCBF、rCBV明显低于正常对照组、假手术组（P〈0.05）,Bederson评分明显高于正常对照组、假手术组（P〈0.05）;脑出血Ⅱ组各时相点rCBF、rCBV明显高于脑出血Ⅰ组（P〈0.05）,Bederson评分除术后7d低于脑出血Ⅰ组（P〈0.05）,其余各时相点无统计学意义（P〉0.05）。结论脑出血后血肿周围组织存在低灌注状态;抵当丸能显著改善脑出血后血肿周围组织血流灌注,对神经功能的改善有促进作用。     

醒神喷鼻液对脑出血大鼠血小板活化的影响

目的探讨醒神喷鼻液对脑出血大鼠脑损害及血小板活化的影响。方法用胶原酶Ⅶ造成大鼠脑出血模型,采用喷鼻给药,观察醒神喷鼻液对脑出血大鼠神经症状评分及血小板膜糖蛋白CD62P、CD63表达的影响,并与模型组比较。结果醒神喷鼻液组能减轻脑出血大鼠神经症状积分,降低血小板CD62P、CD63表达率,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05～0.001)。结论醒神喷鼻液能抑制血小板的活化,减少血小板的聚集和黏附,降低神经症状积分,对脑出血大鼠脑损害有保护作用。     

醒脑静联合依达拉奉治疗蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛

目的：观察醒脑静联合依达拉奉治疗蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛的疗效。方法：42例蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛患者随机分为治疗组21例,对照组21例。对照组给予常规疗法,治疗组在对照组基础上加用醒脑静和依达拉奉。观察治疗前后主要临床症状、体征、头颅CT、迟发性脑血管痉挛、MCV平均血流速度及神经功能评分变化。结果：治疗组在脑血管痉挛、脑梗死、MCV平均血流速度及神经功能评分方面均优于对照组（P〈0.05）。结论：醒脑静联合依达拉奉治疗蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛有明显疗效。