四种苦豆子生物碱对巨噬细胞产生肿瘤坏死因子α的影响

目的：研究苦参碱（matrine MT)、氧化苦参碱（oxymatrine OMT)、槐果碱（sophocarpine SC)、槐定碱（sophoridine SRI)四种苦豆子生物碱对小鼠腹腔巨噬细胞产生肿瘤坏死因子的影响,来探讨它们的抗炎、调节免疫作用机理。方法：用LPS刺激体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞,使之剂量依赖性地产生肿瘤坏死因子,观察四种苦豆子生物碱对巨噬细胞产生肿瘤坏死因子影响。结果：在一定剂量范围内,四种苦豆子生物碱均能剂量依赖性地抑制巨噬细胞经LPS刺激产生TNFα。结论：四种苦豆子生物碱均抑制小鼠腹腔巨噬细胞生成TNFα,这可能是它们抗炎、免疫调节作用的机制之一。     

苦豆子总碱及四种生物单碱体外触杀阴道毛滴虫的实验研究

目的 :探索苦豆子总碱、苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、槐定碱体外触杀阴道毛滴虫的作用 ,为治疗滴虫性阴道炎寻找更为有效的中草药。方法 :将苦豆子总碱及其四种生物单碱稀释为 4 0 0、 2 0 0、 10 0、 5 0 μg/ml的不同浓度对体外培养的阴道毛滴虫进行杀虫实验 ,并与对照药(甲硝唑 )比较 ,确定疗效。结果 :苦豆子总碱、氧化苦参碱在高浓度 (4 0 0 μg/ml)时对阴道毛滴虫的生长、繁殖有一定的抑制作用 ;槐果碱、槐定碱无抑制作用 ;苦参碱 4 0 0、 2 0 0、 10 0 μg/ml对阴道毛滴虫具有明显的触杀作用 ,与甲硝唑比较两者差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;与其他四种生物碱各个浓度比较均有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论 :苦参碱有明显的触杀阴道毛滴虫的作用 ,是一种高效具有开发价值的生物碱。     

四种苦豆子生物碱对巨噬细胞上清液中环氧化酶活性的影响

目的:研究苦参碱(matrine MT)、氧化苦参碱(oxymatrine OMT)、槐果碱(sophocarpine SC)、槐定碱(sophoridine SRI)4种苦豆子类生物碱对环氧化酶活性的影响.方法:用LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生PGE2,放免法测定4种生物碱对给予外源性花生四烯酸AA后其产物PGE2的含量来反映生物碱对环氧化酶-2(COX2)的影响;用A23187刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生6-Keto-PGF1a,放免法测定4种生物碱对给予外源性花生四烯酸AA后其产物6-Keto-PGF1a含量反映生物碱对环氧化酶-1(COX1)的影响.结果:4种生物碱对COX1均有一定的抑制作用,且具有剂量-效应关系.除MT外,其余3种生物碱对COX2均有明显的抑制作用,且具有良好的剂量-效应关系.结论:除MT为COX1选择性抑制剂外,其余三种苦豆子生物碱均具有COX2选择性抑制作用.     

苦豆子总碱及4种单体生物碱对幽门螺杆菌的体外抑菌作用研究

目的 探讨苦豆子总碱、苦参碱、苦参素、槐定碱、槐果碱体外抑制幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)的作用.方法 选用5种苦豆子生物碱,纸片扩散法粗测抑菌浓度范围;依据粗测范围,液体倍比稀释法测定5种生物碱的最小抑菌浓度(MIC).结果 苦豆子总碱的MIC为32 mg/ml,在体外对Hp有一定的抑制作用.苦参碱、苦参素的MIC为64 mg/ml,槐定碱的MIC为128 mg/ml,体外抑菌活性微弱.槐果碱在体外对Hp无明显抑制作用.结论苦豆子总碱有可能成为替代抗生素的抗Hp候选药物.     

HPLC同时测定苦豆子中槐定碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱的含量

目的：建立同时测定苦豆子中槐定碱、氧化槐果碱及氧化苦参碱含量的HPLC测定法。方法：色谱柱为Phenomenex Gemini C₁₈(46 mm×250 mm,5 μm),以甲醇(A)-02%磷酸水(B)为流动相,检测波长205 nm,流速1 mL·min^-1,柱温30 ℃。结果：在线性范围内3个对照品的标准曲线呈良好的线性关系(r≥0999 7)。平均回收率分别为1000%,970%,970%。结论：可通过HPLC同时测定苦豆子中槐定碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱的含量,并可用该方法进行苦豆子药材的质量控制。     

RP-HPLC法测定苦豆子总碱中苦参碱与氧化苦参碱、槐果碱与氧化槐果碱含量

目的:建立测定苦豆子总碱中氧化型生物碱与还原型生物碱含量的反相高效液相色谱法。方法:采用C18键合硅胶反相柱,以乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾水溶液(三乙胺2.0 m L/L)为流动相,梯度洗脱,检测波长205 nm,柱温30℃,流速1.0 m L/min。结果:氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱分离良好,氧化苦参碱平均回收率为99.10%,RSD为1.15%;苦参碱平均回收率为98.76%,RSD为1.64%;氧化槐果碱平均回收率为100.12%,RSD为1.86%;槐果碱平均回收率为98.35%,RSD为2.01%。结论:所建立的测定苦豆子总碱中氧化型与还原型生物碱含量方法专属性强,灵敏度高,能有效控制苦豆子总碱质量。     

苦豆子种子中生物碱的分离及lehmannine的结构确定

目的：研究苦豆子种子中生物碱的分离及槐果碱转移氢化制备苦参碱的研究。方法：利用离子交换,萃取和柱层,并结合转移氢化增大不同生物碱理化性质差异进行分离。结果：从苦豆子种子中分得5种生物碱,其结构经元素分析,IR,MS,1HNMR和13CNMR光谱鉴定为氧化苦参碱,氧化槐定碱,苦参碱,槐定碱和lehannine,结论：首次从苦豆子种子中分和lehmannine。     

苦豆子抗内毒素效应的实验研究

目的:研究苦豆子中提取的苦豆子总碱及氧化苦参碱、槐定碱、槐果碱对内毒素肺损伤小鼠模型的干预作用及其作用机制。方法:以清开灵注射液作为本研究的阳性对照药物。分别连续3天腹腔注射给予ICR小鼠各个生物碱及清开灵,均末次给药后1 h腹腔注射LPS(E.coil,055∶B5)9 mg/kg造成小鼠内毒素性肺损伤,观察小鼠一般状况、白细胞数量、肺W/D比值、肺组织病理形态学改变,以及免疫组织化学法检测肺组织CD14和清道夫受体(SR-A)的表达,放免法检测血清肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量。结果:预防性给予内毒素肺损伤小鼠苦豆子总碱和三种苦豆子单体碱,均不同程度改善了模型鼠的一般状况,并可不同程度地升高外周血白细胞,降低肺脏W/D比值,减轻肺组织病理改变,降低模型鼠肺组织CD14表达,增加SR-A表达,降低血清中TNF-α和IL-6的水平。结论:苦豆子总碱和三种苦豆子单体碱可不同程度地减轻内毒素肺损伤小鼠的病理损害,它们的抗内毒素机制可能与调节LPS的识别受体,并进而影响下游炎症因子表达有关。     

复方苦参注射液中4种生物碱在大鼠体内组织分布研究

目的:建立LC-MS法测定大鼠血浆和其他组织中苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱的浓度,研究复方苦参注射液在大鼠体内心、肝、脾、肺、肾等12个脏器组织的分布。方法:在血浆和组织样品中加入内标,用氯仿提取,以甲醇:10 mmolNH4Ac-0.02%HCOOH-水=90:10(v:v);CN柱分离,LC-MS法检测健康大鼠给予复方苦参注射液后3个时间点(15min、1h、4h)的血浆及组织样品中4种生物碱的浓度。结果:在给药后3个时间点,苦参碱和槐果碱在各组织中的分布量依次为:肝>肾/脾>肌肉/肠>肺/胃>心/脑>脂肪/子宫>睾丸;氧化苦参碱和氧化槐果碱在各组织中的分布量依次为:肾/肺>肌肉>肠/胃>心/脾>子宫>脂肪/睾丸>脑/肝;随着时间的推移,苦参碱和槐果碱浓度下降速度明显缓于氧化苦参碱和氧化槐果碱;苦参碱和槐果碱在肝脏分布最多,而氧化苦参碱和氧化槐果碱在肝脏分布最低。结论:复方苦参注射液4种生物碱在组织脏器中的分布,氧化态和非氧化态存在较大差异,尤其在肝脏,氧化苦参碱、氧化槐果碱浓度很低,而苦参碱、槐果碱浓度很高;而且在各组织中苦参碱和槐果碱的浓度显著高于氧化苦参碱和氧化槐果碱,与血浆中的分布相反,说明苦参碱和槐果碱相对于氧化苦参碱和氧化槐果碱而言主要分布于组织脏器中。     

苦豆子不同提取物对小鼠急性毒性的“谱-毒”关系研究

目的建立苦豆子提取物HPLC化学指纹图谱,测定苦豆子在不同提取物对小鼠的半数致死量(LD_(50)),分析其"谱-毒"关系。方法采用75%乙醇回流法(ER)、水煎煮法(WD)、75%乙醇超声法(EU)和水超声法(WU)分别制备苦豆子提取物,并建立其HPLC指纹图谱,测定不同提取物的LD_(50);运用指纹图谱相似度评价系统软件分析不同提取方法下苦豆子提取物化学成分与LD_(50)之间的关系。结果 ER、WD、EU、WU 4种提取方法制备的苦豆子提取物LD_(50)分别为38.397、24.994、18.536、19.957g/kg;苦豆子提取物对小鼠脏器的眼观病变主要表现在肝、肾,其中以ER提取物毒性最大。苦豆子提取物HPLC 10个共有峰可分为2类,第4、10号峰及氧化苦参碱、氧化槐果碱与LD_(50)呈显著负相关。结论构建了苦豆子"谱-毒"关系分析方法,其未鉴定出的第4、10号峰及氧化苦参碱和氧化槐果碱为毒性反应的主要化学成分。     

犀角地黄汤合消风散对慢性皮炎湿疹模型小鼠血清LTB4、LTC4水平的影响

目的：观察犀角地黄汤合消风散对慢性皮炎湿疹模型小鼠血清LTB4、LTC4水平的影响。方法：50只小鼠随机分为5组,致敏小鼠,实验组采用犀角地黄汤合消风散煎剂给药17天,末次激发后24h处死小鼠,使用酶联免疫吸附试验对小鼠血清LTB4、LTC4进行检测。结果：犀角地黄汤合消风散中药干预1、2组LTB4检测结果分别为0.282ng/ml、0.313ng/ml,与模型组相比有非常显著和明显的差异（P〈0.001和P〈0.05）,LTC4检测结果中药干预组分别为1.509ng/ml、1.602ng/ml,与模型组比较显著的差异（P〈0.01）。结论：犀角地黄汤合消风散对慢性皮炎湿疹模型小鼠血清LTB4、LTC4水平有显著的调节作用。     

复方苦豆子栓剂的制备及临床应用

目的：介绍复方苦豆子栓剂的制备方法并观察其临床疗效。方法：以苦豆子、蛇床子、黄柏及土茯苓等药材为处方成分，用回流提取法提取有效成分后，以甘油明胶作为基质制备阴道栓，同时进行抑菌试验及临床疗效观察。结果：各项鉴别检查符合《中国药典》规定，临床治疗宫颈糜烂、慢性宫颈炎、阴道炎80例，治愈35例，好转41例，无效4例，治愈率为43．8％，总有效率为95．0％。结论：该制剂制备工艺简单，临床疗效佳，抑菌效果明显，是治疗妇科炎症的有效剂型。     

芒果苷对花生四烯酸代谢产物的影响

目的:研究芒果苷对花生四烯酸(AA)代谢产物的影响,以阐明其抗炎机理。方法:分别以反相高效液相法和放射性免疫法测定大鼠胸腔渗出液中性白细胞中白三烯B4(LTB4)、LTC4S水平和6-酮-前列腺素1a(6-keto-PGFla)含量。结果:高、中剂量的芒果苷可明显降低6-keto-PGFla的含量;而高、中、低剂量的芒果苷对LTB4、LTC4的水平则无影响。结论:芒果苷的抗炎机制可能与其抑制花生四烯酸代谢通路中6-keto-PGFla的释放有关。     

平喘宁对哮喘豚鼠白三烯B4、可溶性细胞间粘附分子-1含量的影响

目的观察平喘宁对哮喘豚鼠白三烯B4(LTB4)、可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)含量的影响,探讨其治疗哮喘的相关生物学机制。方法以卵蛋白致敏复制豚鼠哮喘病模型,观察豚鼠引喘潜伏期的变化;运用酶联免疫吸附反应技术(ELISA)测定豚鼠血清中的LTB4和支气肺泡灌洗液(BALF)sICAM-1的含量。结果平喘宁给药后,豚鼠的引喘潜伏期显著延长;平喘宁能显著降低哮喘豚鼠血清中LTB4和支气管肺泡灌洗液(BALF)中sICAM-1含量,与哮喘模型组比较,P<0.05或P<0.01。结论平喘宁具有明显平喘作用,其作用机制与降低哮喘豚鼠血清中LTB4和BALF中sICAM-1的含量有关。     

喘宁软胶囊对多形核粒细胞生成和释放白三烯的抑制作用

目的：探讨喘宁软胶囊（简称喘宁）平喘作用机制。方法：分别采用生物检定法、HPLC法、免疫ELISA法离体测试大鼠多形核粒细胞（PMNs)生成和释放慢反应物质（SRS－A）、白三烯B4（LTB4）、白三烯C4（LTC4）。结果：在离体试验中，喘宁0．1，0．4，1．6，6．4g/L浓度及喘宁4g/kg ig 20d所得血清能明显抑制大鼠PMNs生成和释放SRS－A；喘宁0．025，0．05，0．1g/L及0．1，0．4，1．6g/L浓度呈量效关系分别抑制大鼠PMNs生成和释放LTB4，LTC4。结论：初步证明喘宁有平喘作用，其机制与抑制花生四烯酸（AA）生成和释放白三烯有关。     

茄根酸性组分对胸膜炎大鼠血清中白三烯B4含量的影响

目的:探明茄根酸性组分的抗炎机理。方法:制备大鼠胸膜炎模型,测定血清中白三烯B4含量。结果:茄根酸性组分对胸膜炎大鼠血清中白三烯B4含量有显著降低作用。血清中白三烯B4含量分别为:模型对照组3.0354±0.1770×10-6g/L、空白对照组0.8857±0.4162×10-6g/L(P<0.01)、地塞米松组1.3211±0.6118×10-6g/L(P<0.01)、茄根酸性组分高剂量组1.6340±0.4498×10-6g/L(P<0.05)、茄根酸性组分低剂量组2.0694±0.5690×10-6g/L。结论:实验表明茄根酸性组分对于脂氧酶代谢产物LTB4具有抑制作用,抑制5-脂氧酶活性是其可能的抗炎机理之一。     

归脾汤对抑郁模型大鼠血清T3 T4和海马神经元形态的影响

目的:观察归脾汤对抑郁模型大鼠血清T3(三碘甲腺原氨酸)、T4(四碘甲腺原氨酸)和海马形态学影响,初步探讨其防治抑郁症的可能机制。方法:40只W istar雌性大鼠分为对照组、模型组、盐水组、中药组。应用慢性不可预见性中等强度刺激复制抑郁症动物模型。Open-field法检测大鼠行为学得分,放免法测定血清中T3和T4含量,电镜观察海马形态学变化。结果:与对照组比较,模型组和盐水组大鼠的体重、行为学得分、血清T3和T4含量均有显著性差异,海马损伤明显,而中药组上述指标均无明显差异。结论:归脾汤的抗抑郁机制与其维持正常的T3、T4分泌及海马形态有关。     

针刺老年大鼠"足三里""关元"穴对NO、SOD、MDA以及免疫影响的实验研究

目的：探讨针刺抗衰老的作用机理,方法：针刺老年大鼠的“足三里”“关元”穴,观察对脑、心、肝、肾组织中一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醇（MDA）变化以及对单核巨噬系统吞噬功能的影响。结果：针刺能调节脑心肝肾组织中NO的含量;能提高脑心肝肾组织中抗氧化能办,使SOD的含量增高,MDA的含量降低;能提高单核巨噬系统的吴噬指数,结论：针刺“足三里”“关元”穴有明显抗衰作用。     

苦参总碱对血管内皮细胞增殖和迁移的抑制作用

 目的探讨苦参总碱对血管内皮细胞(ECV304)增殖和迁移的影响。方法采用MTT比色法分析测定苦参总碱对血管内皮细胞(ECV304)增殖的影响;流室系统检测生理剪切流场下(1.5Pa)血管内皮细胞(ECV304)。结果用0,0.5,0.75,1,2.5,5g·L^-1苦参提取物培养ECV304细胞24h后,其增殖抑制率分别是0,6.97%,11.37%,29.27%,35.43%,39.26%。在生理剪切流场下,苦参总碱可显著抑制ECV304细胞的迁移(P<0.01)。结论苦参提取物抑制内皮细胞(ECV304)增殖和迁移。