痛泻要方破壁饮片对大鼠离体结肠平滑肌收缩的影响

目的研究痛泻要方传统中药饮片及破壁饮片水提液对大鼠离体结肠平滑肌收缩的影响。方法以不同质量浓度0、6、24、48和60mg(生药)/mL痛泻要方传统中药饮片及破壁饮片水提液、先加入10~(-4)mol/L乙酰胆碱(Ach)再加入60mg(生药)/mL痛泻要方传统中药饮片及破壁饮片水提液、先加入100mmol/L氯化钾(KCl)再加入60mg(生药)/mL痛泻要方传统中药饮片及破壁饮片水提液、先加入1μmol/L阿托品(Atr)再加入60mg(生药)/mL痛泻要方传统中药饮片及破壁饮片水提液,分别作用于大鼠离体结肠平滑肌,于PowerLab8/30生物机能系统记录大鼠离体结肠平滑肌收缩张力、频率和振幅。结果质量浓度为24、48、60mg(生药)/mL痛泻要方传统中药饮片及破壁饮片水提液可显著抑制大鼠离体结肠平滑肌自发性收缩张力(P0.05),作用呈剂量浓度依赖性,但对频率和振幅无明显影响;60mg(生药)/mL痛泻要方传统中药饮片及破壁饮片水提液,可显著抑制Ach、KCl诱导所致大鼠离体结肠平滑肌收缩张力、频率和振幅(P0.05),同时可拮抗Atr诱导所致大鼠离体结肠平滑肌松弛的张力、频率和振幅(P0.05),使大鼠离体结肠平滑肌恢复正常运动。结论痛泻要方破壁饮片水提液可有效抑制大鼠离体结肠平滑肌自发运动收缩张力;可显著抑制Ach、KCl诱导所致大鼠离体结肠平滑肌收缩,对抗Atr诱导的大鼠离体结肠平滑肌松弛,其作用效果与传统中药饮片一致。     

痛泻要方加减引经药防风对肠易激综合征大鼠内脏敏感性及脑肠轴不同靶点脑肠肽的影响

目的:研究痛泻要方加减防风对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)大鼠内脏敏感性及脑肠轴不同靶点脑肠肽的影响。方法:将新生SD大鼠随机分为正常组、模型组、痛泻要方缺防风组、痛泻要方全方组,和痛泻要方倍用防风组,每组10只,除正常组外,其余各组采用母子分离结合乙酸灌肠法,复制腹泻型肠易激综合征大鼠模型,造模后各组灌胃给予相应药物,连续2周,检测粪便含水量和腹壁撤退反射(AWR),采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测5-羟色胺(5-HT)和P物质(SP)的含量,通过免疫组化法检测促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)的表达。结果:与模型组比较,各实验组均能显著降低粪便含水量、最小容量阈值和血浆、下丘脑、结肠中的5-HT,SP含量,减少CRH的表达(P0.05,P0.01)。痛泻要方全方组和痛泻要方倍用防风组大鼠粪便含水量,5-HT和SP含量及CRH的表达量较痛泻要方缺防风组明显减低,AWR评分明显升高,差异具有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:防风具有增强痛泻要方抑制腹泻型肠易激综合征的内脏高敏感性和调节脑肠轴不同靶点中的脑肠肽的效应。     

痛泻要方破壁饮片对内脏高敏感小鼠胃肠影响的研究

目的:观察痛泻要方破壁饮片对小鼠内脏高敏模型的影响,与传统饮片进行疗效对比,探讨破壁饮片复方应用于临床的可行性。方法:通过蓖麻油致小鼠腹泻模型、压力应激致小鼠胃肠运动过速模型、芥子油致小鼠内脏疼痛模型、冰醋酸致小鼠扭体模型、小鼠结肠钢珠排出模型观察痛泻要方破壁饮片对小鼠胃肠的影响。结果:痛泻要方破壁饮片能延长蓖麻油致小鼠腹泻排出希便的潜伏期,减少压力应激致小鼠的排便数量,有效缓解芥子油所致结肠疼痛和醋酸致小鼠扭体次数,延长小鼠结肠钢珠的排出时间。结论:痛泻要方破壁饮片可有效改善小鼠内脏高敏模型的胃肠道症状,疗效稳定,说明临床应用破壁饮片复方是可行的。     

痛泻要方对腹泻型肠易激综合征模型大鼠肠道5-HT受体信号传导系统的影响

目的:从肠道5-HT受体信号传导途径探讨痛泻要方对IBS-D模型大鼠内脏高敏感性影响的作用机制。方法:采用随机数字表法,将32只雄性SD大鼠随机分为3组:空白对照组,模型对照组,痛泻要方组。采用0.5%醋酸灌肠法来建立IBS-D内脏高敏感大鼠模型。痛泻要方组予痛泻要方灌胃(大鼠每日生药用量9 g/kg),干预2周。2周后用western blot法测定小肠和结肠黏膜组织中5-HTR1、2、3的表达。结果:模型对照组近端小肠、远端小肠、近端结肠和远端结肠的5-HT1R蛋白表达与空白对照组比较差异有统计学意义(P0.05),痛泻要方组和模型对照组相比差异有统计学意义(P0.05),与空白对照组相比差异无统计学意义(P0.05)。模型对照组近端小肠、远端小肠、近端结肠和远端结肠的5-HT2R蛋白表达与空白对照组相比差异有统计学意义(P0.05)。痛泻要方组和模型对照组相比差异无统计学意义(P0.05),与空白对照组相比差异有统计学意义(P0.05)。模型对照组近端小肠、远端小肠、近端结肠和远端结肠的5-HT3R蛋白表达与空白对照组相比差异有统计学意义(P0.05)。痛泻要方组和模型对照组相比差异有统计学意义(P0.05),与空白对照组相比远端结肠差异无统计学意义(P0.05)。结论:痛泻要方能够使IBS-D模型大鼠的内脏高敏感性降低,其机制可能是通过下调5-HT1R、5-HT3R的表达来降低模型大鼠的内脏高敏感性。     

逍遥散对肠易激综合征大鼠5-羟色胺及5-羟色胺转运体作用研究

目的:观察逍遥散对肠易激综合征模型大鼠结肠黏膜5-羟色胺(5-HT)、5-HT转运体(SERT)的调节作用,研究其作用机制.方法:48只大鼠随机分为正常组、模型组、逍遥散低、中、高剂量组和阳性对照组,以心理应激联合免疫诱导致敏法建立肠易激综合征(IBS)模型,评估球囊结直肠扩张引起腹部收缩反射(AWR)的最小容量阈值,以反映内脏敏感性;采用酶联免疫法测定结肠黏膜5-HT、SERT水平.结果:与正常组比较,模型组大鼠引起AWR的最小容量阈值、结肠黏膜SERT水平明显降低,结肠黏膜5-HT水平明显升高(P＜0.01),而逍遥散能降低结肠黏膜5-HT水平,升高结肠黏膜SERT水平(P＜0.05或P＜0.01).结论:逍遥散的作用机制可能是通过调节IBS大鼠5-HT信号系统,减弱神经元兴奋性,从而提高内脏痛阈,消除肠道过敏.     

痛泻安肠方对腹泻型肠易激综合征模型大鼠NGF/PLC-γ/TRPV1信号通路表达的干预效应

目的观察神经生长因子(NGF)/激活磷脂酶C-γ(PLC-γ)/瞬时受体电位香草酸亚型-1(TRPV1)信号通路在腹泻型肠易激综合征模型大鼠的表达变化及痛泻安肠方的干预效应。方法采用冰醋酸灌肠、球囊直肠扩张联合夹尾刺激的方法制备腹泻型肠易激综合征模型,造模成功后,将60只SD大鼠按随机数字表法分为模型组、痛泻安肠方低剂量组、痛泻安肠方中剂量组、痛泻安肠方高剂量组、得舒特组5组,另有空白组10只。观察各组大鼠治疗前后腹壁撤退反射(AWR)评分、粪便Bristol分级评分和含水量;采用Western Blot检测结肠NGF、PLC-γ、TRPV1蛋白表达,采用Real-Time PCR检测结肠NGF、PLC-γ、TRPV1 mRNA的表达。结果模型组大鼠较空白组内脏敏感性阈值下降(P0.05或P0.01),粪便Bristol分级评分和含水量均明显升高(P0.01);治疗后,痛泻安肠方低、中、高剂量组与得舒特组大鼠内脏敏感性阈值升高(P0.05或P0.01),粪便Bristol分级评分和含水量降低(P0.01),结肠NGF、PLC-γ、TRPV1蛋白表达下降(P0.05或P0.01),PLC-γ、TRPV1 mRNA表达降低(P0.01)。结论痛泻安肠方能降低腹泻型肠易激综合征大鼠内脏高敏感性,其机制可能是通过下调结肠NGF、PLC-γ、TRPV1蛋白表达,降低结肠PLC-γ、TRPV1 mRNA表达,上调内脏敏感性而实现的。     

痛泻要方对内脏高敏性大鼠结肠5-HT、5-HT_4受体表达影响的研究

目的：通过对内脏高敏性大鼠肠道敏感性、5-HT、5-HT4受体蛋白表达的影响,研讨痛泻要方对内脏高敏性大鼠干预作用。方法：采用乳鼠结肠刺激方法复制内脏高敏性大鼠IBS模型,以直肠内球囊扩张时行为学及腹壁收缩情况代表其内脏敏感性,观察各组大鼠肠道内扩张引起的腹部抬起和背部拱起的容量阈值和不同容量下扩张期间腹壁收缩次数,及其对结肠组织中5-HT、5-HT4受体蛋白表达的影响,观察痛泻要方对其干预作用。结果：经乳鼠结肠刺激方法复制内脏高敏性模型后,大鼠肠道敏感性增加强,5-HT蛋白表达增高,5-HT4受体蛋白表达降低;经痛泻要方干预后,大鼠肠道敏感性、5-HT表达降低,5-HT4受体蛋白表达增强。结论：痛泻要方可降低内脏高敏性大鼠肠道敏感性,其作用机理与降低内脏高敏性大鼠结肠5-HT表达,增强5-HT4受体蛋白表达,从而提高内脏痛阈值,降低肠道过敏性有关。     

痛泻要方破壁饮片对小鼠胃排空、小肠推进及转运的影响

目的观察痛泻要方破壁饮片对小鼠胃排空、小肠推进及转运的影响,并探讨痛泻要方影响胃肠道的作用机制。方法采用酚红排空法观察痛泻要方破壁饮片不同剂量对小鼠胃排空、小肠推进以及小肠转运的影响。结果痛泻要方破壁饮片各剂量组均能明显降低小鼠胃肠蠕动,减缓小鼠的小肠推进速度。与空白组相比,痛泻要方破壁饮片能够显著降低小鼠胃酚红排空率(P0.05),升高小鼠胃残留率(P0.05),降低小鼠小肠酚红推进率(P0.05),抑制小鼠小肠转运(P0.05),实验结果有显著性差异。结论痛泻要方破壁饮片可有效抑制小鼠胃排空、小肠推进及小鼠小肠转运功能。     

痛泻要方对肝郁脾虚证IBS-D大鼠SCF/c-Kit信号系统的影响

目的:观察痛泻要方对肝郁脾虚证腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠血清5-羟色胺(5-HT)和结肠组织P物质(SP)、干细胞因子(SCF)和受体酪氨酸激酶c-Kit mRNA表达水平的影响,探讨痛泻要方对IBS-D的疗效及可能的作用机制。方法:将24只SD雄性大鼠随机均分为空白组、模型组和痛泻要方组。除空白组外的2组采用番泻叶灌胃联合慢性束缚应激法建立肝郁脾虚证IBS-D模型,造模28d后予痛泻要方灌胃治疗14d。采用ELISA法检测大鼠血清5-HT和结肠SP水平,qPCR法检测结肠SCF、c-Kit表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠血清5-HT、结肠SP、SCF、c-Kit水平明显升高(P0.01);与模型组比较,痛泻要方组结肠SP、SCF、c-Kit和血清5-HT水平明显降低(P0.01)。结论:痛泻要方可能通过SCF/c-Kit信号系统降低大鼠血清5-HT、结肠SP水平来改善肝郁脾虚证IBS-D症状,发挥治疗作用。     

痛泻要方对寒冷-束缚肠易激综合征模型大鼠作用的实验研究

目的:探讨痛泻要方对寒冷-束缚肠易激综合征模型大鼠的作用及机制.方法:将SD成年大鼠随机分成正常组、模型对照组、得舒特组、痛泻要方低浓度组、痛泻要方中浓度组、痛泻要方高浓度组.观察大鼠的粪便性状、颗粒数及含水量、血浆SP及VIP含量的变化.结果:模型对照组大鼠粪便颗粒数比正常组显著增多,P＜0.05.痛泻要方组及得舒特组能抑制模型大鼠排便,痛泻要方低剂量组与模型组对照组比较P＜0.01,痛泻要方中、高剂量组及得舒特组与模型组对照组比较P＜0.05;模型对照组大鼠粪便含水量比正常组显著增多,P＜0.01.痛泻要方低剂量组显著降低大鼠粪便含水量,痛泻要方中、高剂量组及得舒特组对大鼠粪便含水量的影响无显著差异;模型对照组SP含量较正常组升高,但无显著性,P＞0.05,痛泻要方低、中剂量组SP含量与正常组比较无统计学意义;各组间血浆VI含量无显著差异,P＞0.05.结论:痛泻要方能抑制排便次数,减少粪便含水量,降低结肠动力,痛泻要方对寒冷-束缚肠易激综合征模型大鼠有治疗作用.     

疏肝健脾方对腹泻型肠易澉综合征大鼠血浆及结肠组织5-HT、SP、VIP的影响

[目的]观察疏肝健脾方对腹泻型肠易激综合征大鼠血浆及结肠组织5-羟色胺（5-HT）、P物质（SP）和血管活性肠肽（VIP）的影响。[方法]将60只SD大鼠按随机数字表法随机分为正常组、模型组、得舒特组、疏肝健脾方低、中、高剂量组,使用乙酸灌肠加束缚的方法建立腹泻型肠易激综合征（D—IBS）大鼠模型,应用免疫组化法检测5-HT、SP及VIP。[结果]疏肝健脾方可以明显降低大鼠的粪便含水量（P〈0．05）;疏肝健脾方中、高剂量组腹部撤退反射（AWR）评分在不同扩张容量下均较模型组明显降低（P〈0．05）;疏肝健脾方可以降低大鼠血浆中5-HT和结肠组织中sP的含量,而血浆中SP、VIP及结肠组织中VIP含量无显著变化。[结论]疏肝健脾方可以改善大鼠的腹泻及内脏的高敏感性,并对5-HT及SP有调节作用,提示疏肝健脾方可以有效治疗D—IBS,并与调节胃肠激素有关。     

四逆痛泻方治疗腹泻型肠易激综合征作用机制的实验研究

目的：通过动物实验探讨四逆痛泻方治疗腹泻型肠易激综合征（IBS-D）的作用机制。方法：将实验动物随机分为正常组、模型组、匹维溴铵组、四逆痛泻方高剂量组和四逆痛泻方低剂量组。除正常组外均采用番泻叶冲剂灌胃及夹尾刺激建立IBS-D大鼠模型。实验结束后检测血清5-HT、IL-1β的含量及结肠组织VIP的含量。结果：模型组大鼠血清中5-HT、IL-1β的含量及结肠组织VIP的含量明显高于正常组（P〈0．05）。各治疗组大鼠血清中5-HT、IL-1β的含量及结肠组织VIP的含量均低于模型组（P〈0．05）。结论：四逆痛泻方通过降低5．HT、IL．1B和VIP的含量,使肠道的动力和敏感性及水和电解质的代谢恢复正常．恢复胃肠道的功能．从而达到治疗IBS-D的目的。     

痛泻要方对肠易激综合征作用机制的实验研究

目的探讨痛泻要方对内脏高敏感性肠易激综合征(IBS)模型大鼠的疗效和作用机制。方法采用结肠慢性刺激法制作内脏高敏感性的IBS大鼠模型。将实验动物分为正常组,模型组,阳性对照(得舒特)组,痛泻要方低、高剂量组。观察各组大鼠肠道内扩张引起腹部抬起和背部拱起的容量阈值和大鼠肠道内不同容量下扩张期间腹壁收缩次数,检测5-羟色胺(5-HT)、P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)水平。结果与模型组相比,各治疗组大鼠行为学和电生理指标均有明显改善;各治疗组模型大鼠5-HT、SP水平明显下降,CGRP水平增加,且有一定的量效关系。结论痛泻药方能降低内脏高敏感性IBS模型大鼠血清5-HT、血浆SP水平,增加CGRP水平,大剂量痛泻药方疗效优于得舒特。痛泻药方的作用机制可能是通过降低模型大鼠血清5-HT、血浆SP水平,减弱背角神经元兴奋性,从而提高内脏痛阈、消除肠道过敏而达到治疗目的。     

痛泻要方对内脏高敏感大鼠肠道肥大细胞及细胞因子表达的影响

目的观察痛泻要方对内脏高敏感大鼠肠道肥大细胞（mast cell,MC）及细胞因子表达的影响,探讨痛泻要方治疗内脏高敏感的作用及其机制。方法采用随机数字表法将30只成年雄性SD大鼠随机分成空白对照组、模型组及中药治疗组,每组10只,模型组及中药治疗组以结直肠扩张联合束缚刺激建立大鼠内脏高敏感模型,以腹部收缩反射（abdominal withdrawal reflex,AWR）评估大鼠内脏敏感性,模型构建成功后第2日中药治疗组予痛泻要方4 g/（kg·d）灌胃4周,模型组予以等量生理盐水灌胃4周,空白对照组大鼠不予任何刺激。4周后采用甲苯胺蓝染色法计数回盲部结肠黏膜MC,采用E LISA法检测血清及肠黏膜IL-4、IL-9表达,Western blot法检测肠黏膜蛋白酶激活受体-2（PAR-2）蛋白表达。结果与空白对照组大鼠比较,模型组大鼠内脏敏感性升高,回盲部MC增多,血清及肠黏膜中IL-4、IL-9及PAR-2蛋白表达水平升高（P〈0.05）;与模型组比较,中药治疗组大鼠内脏敏感性显著降低,MC数量减少,肠黏膜PAR-2蛋白表达下降（均P〈0.05）,大鼠肠黏膜IL-4及血清IL-9表达水平亦明显降低（P〈0.05）。结论痛泻要方可能通过作用于MC相关细胞因子,减少MC脱颗粒,从而降低内脏高敏感。     

痛泻要方对内脏高敏性大鼠结肠MC活化与5-HT相关性影响的研究

目的:通过对内脏高敏性大鼠结肠MC密度、5-HT表达及二者相关性的影响,研讨痛泻要方对内脏高敏性大鼠结肠MC活化的干预作用.方法:采用乳鼠结肠刺激方法复制内脏高敏性大鼠IBS模型,以免疫组织化学方法和甲苯胺蓝改良法进行结肠双重复染法,观察痛泻要方对结肠组织MC形态学、密度的影响,及其与5-HT表达之间关系,并观察痛泻要方对其二者相关性的影响.结果:经乳鼠结肠刺激方法复制内脏高敏性模型后,结肠中MC颗粒增多,MC周边5-HT表达增强,二者有明显相关性,经痛泻要方干预后,结肠中MC形态改善、数量降低,5-HT表达降低,对二者相关性具有明显调节作用.结论:痛泻要方可改善内脏高敏性大鼠肠道MC活化程度,并抑制MC释放5-HT,从而降低5-HT表达.     

肠激安方对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠黏膜超微结构及ZO-1、CLDN1 表达的影响

目的探讨肠激安方对腹泻型肠易激综合征（IBS-D）大鼠结肠黏膜超微结构及上皮细胞闭锁小带蛋 白（ZO-1）和紧密连接蛋白（CLDN1）表达的影响。方法将40 只SPF 级新生SD 大鼠随机分为正常组、模型 组、匹维溴铵组（18 mg·kg-1）和肠激安方高（33.48 g·kg-1）、低（16.74 g·kg-1）剂量组,共5 组,每组8 只,采用 三因素（母婴分离+醋酸刺激+束缚）结合的方法,复制IBS-D 大鼠模型。模型复制结束后,给予匹维溴铵和肠 激安方连续灌胃14 d。用腹部回缩反射（AWR）评价内脏高敏状态,透射电镜（TEM）观察结肠黏膜超微结构的 变化,采用免疫组化（IHC）、实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）法分析结肠组织ZO-1 和CLDN1 的表 达。结果与模型组比较,匹维溴铵组、肠激安方高剂量组、肠激安方低剂量组大鼠AWR 内脏敏感性评分降 低（P＜0.05,P＜0.01）;透射电镜观察结肠黏膜超微结构的结果显示,IBS-D 模型组紧密连接不完整,部分有 断裂,缝隙连接增宽,给予药物干预后,各组大鼠结肠黏膜中破坏的紧密连接结构得到一定程度的修复;与模 型组比较,匹维溴铵组和肠激安方高、低剂量组结肠组织中ZO-1 和CLDN1 的mRNA 相对含量升高（P＜ 0.05,P＜0.01）,ZO-1、CLDN1 的平均光密度（IOD）值升高（P＜0.05,P＜0.01）。结论肠激安方可改善IBS-D 模型大鼠结肠黏膜超微结构异常,上调结肠黏膜上皮细胞ZO-1 和CLDN1 的表达。     

艾灸及其生成物对腹泻型肠易激综合症模型大鼠内脏痛和结肠水液代谢的影响

目的：探讨艾灸治疗腹泻型肠易激综合征（IBS-D）的作用机制及起效因素。方法：40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、温和灸组、无烟温和灸组、艾烟组,直结肠球囊刺激制备IBS-D模型,观察大鼠一般状况,腹部撤回反射（AWR）评分评估内脏痛,免疫组化检测结肠Claudin-1、AQP3、AQP8、Na+/K+-ATPase蛋白表达。结果：与正常组比较,IBS-D模型大鼠AWR 评分和结肠Claudin-1、AQP3、AQP8、Na+/K+-ATPase蛋白表达显著降低（P＜0.01）,粪便稀软,部分肛门周围鼠毛沾染稀便。综合疗效：温和灸、无烟温和灸、艾烟干预后,IBS-D模型大鼠粪便性状等大体情况改善,AWR 评分不同程度降低（P＜0.05或P＜0.01）,除Na+/K+-ATPase外,结肠Claudin-1、AQP3、AQP8表达不同程度升高（P＜0.05或P＜0.01）,综合疗效：温和灸>无烟温和灸>艾烟。结论：温热刺激、光辐射、艾烟3 者相结合对IBS-D 模型大鼠内脏痛和结肠水液代谢的改善效应最好,其中温热刺激、光辐射可能发挥了更为主要的作用。     

痛泻要方加减引经药防风对肠易激综合征大鼠水液代谢和5-HT系统的调控作用

目的:探讨引经药防风对痛泻要方调控腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠水液代谢和5-羟色胺(5-HT)信号系统的影响。方法:将40只IBS-D SD大鼠随机分为模型组,痛泻要方缺防风组(26 g·kg^-1),痛泻要方全方组(30 g·kg^-1)和痛泻要方倍用防风组(34 g·kg^-1),另取10只正常SD大鼠作为正常组,除正常组外,其余各组采用母子分离联合乙酸灌肠法,建立腹泻型肠易激综合征大鼠模型,造模后各组灌胃给予相应药物,连续14 d,观察并计算腹泻指数和粪便含水量,微量法检测肠黏膜Na^+-K^+-ATP酶活性,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测5-HT的含量,化学发光法检测单胺氧化酶-A(MAO-A)活性,通过免疫组化法检测结肠中水通道蛋白4(AQP4)的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测下丘脑和结肠中5-HT受体3(5-HT3R),5-HT受体4(5-HT4R)和5-HT转运体(SERT)的蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠的粪便含水量,5-HT含量,MAO-A酶活性,5-HT3R表达均显著升高(P<0.01),肠黏膜Na^+-K^+-ATP酶活性,AQP4,5-HT4R和SERT表达均显著降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠的腹泻指数和粪便含水量、下丘脑与结肠中的5-HT含量,MAO-A酶活性,5-HT3R蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01),但痛泻要方缺防风组5-HT3R蛋白表达未见明显差异,各给药组肠黏膜Na^+-K^+-ATP酶活性,AQP4,5-HT4R和SERT表达均明显增加(P<0.05,P<0.01);与痛泻要方缺防风组比较,痛泻要方全方组和痛泻要方倍用防风组大鼠腹泻指数和粪便含水量,5-HT含量及MAO-A酶活性,5-HT3R的蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01),Na^+-K^+-ATP酶活性和SERT的蛋白表达明显增加(P<0.05,P<0.01)。结论:防风可增强痛泻要方改善IBS-D水液代谢、调控5-HT信号系统多靶点的效应,进一步证实了防风的引经增效作用。     

5-羟色胺与其受体亚型在肝郁脾虚证大鼠的表达及逍遥散的影响

目的:探讨慢性束缚应激肝郁脾虚证大鼠5-羟色胺(5-HT)与其受体亚型的表达变化及逍遥散的干预作用。方法:将175只雄性SD大鼠随机分为正常组(N)、7 d模型组(7 M)、7 d逍遥散组(7 XYS)、14 d模型组(14 M)、14 d逍遥散组(14 XYS)、21 d模型组(21 M)、21 d逍遥散组(21 XYS),以慢性束缚应激结合孤养方法制作肝郁脾虚证大鼠模型并用逍遥散进行干预。造模7 d、14 d、21 d结束后,应用放射免疫分析法测定下丘脑、结肠组织5-HT含量,实时荧光定量PCR方法检测下丘脑、结肠组织5-HTR1AmRNA表达,基因芯片检测下丘脑、胃和结肠组织5-HT受体相关基因的表达变化(其中结肠组织基因芯片检测7 d和21 d大鼠),并用实时荧光定量PCR方法验证5-HT受体相关基因差异表达结果的可靠性。结果:①与正常组比较:21 d模型组大鼠下丘脑5-HT含量、5-HTR1AmRNA表达降低(P0.01),21 d模型组大鼠结肠组织5-HT含量升高(P0.01),7 d、14 d、21 d模型组大鼠结肠组织5-HTR1AmRNA表达均显著升高(P0.01)。逍遥散对下丘脑、结肠组织5-HT和5-HTR1AmRNA的异常表达均有改善作用(P0.01或P0.05)。②基因芯片结果显示,5-HTR1A、5-HTR2A、5-HTR2C、5-HTR3A、5-HTR4、5-HTR5A、5-HTR5B等基因在模型组大鼠下丘脑或胃或结肠组织出现了显著上调或下调表达,逍遥散能逆转这些基因的异常表达;实时荧光定量PCR方法检测这些差异基因的表达结果与基因芯片检测结果基本一致,证实了基因芯片数据结果的可靠性。结论:5-HT及其受体5-HTR1A、5-HTR2A、5-HTR2C、5-HTR3A、5-HTR4、5-HTR5A、5-HTR5B是肝郁脾虚证的重要物质基础,其参与了肝郁脾虚证的脑肠轴调控;逍遥散通过脑肠轴途径调节5-HT及其受体的表达可能是其防治肝郁脾虚证的机制之一。