芳香开窍对缺血再灌注大鼠水通道蛋白-4mRNA表达的影响

目的 :观察芳香开窍药对脑组织水通道蛋白 4 (AQP - 4 )的影响 ,以探讨芳香开窍法对缺血性中风的治疗作用机理 ,为临床运用芳香开窍法提供实验依据。方法 :Pulsinelli的 4vo法建立大鼠全脑缺血再灌注模型 ,采用半定量RT -PCR方法检测大鼠脑组织中AQP - 4mRNA的表达。结果 :模型组AQP - 4mRNA表达显著增加 ,其次是尼莫通组 ,芳香开窍中药组轻微增加。结论 :AQP - 4可能参与缺血性脑血管病脑水肿的发生和发展过程 ,AQP - 4抑制剂可减轻脑水肿。芳香开窍药可降低AQP - 4表达 ,从而减少脑水肿 ,这可能是其芳香开窍的机理之一。     

芳香开窍对缺血再灌注大鼠水通道蛋白—4mRNA表达的影响

目的：观察芳香开窍药对脑组织水通道蛋白4(AQP—4)的影响，以探讨芳香开窍法对缺血性中风的治疗作用机理，为临床运用芳香开窍法提供实验依据。方法：Pulsinelli的4vo法建立大鼠全脑缺血再灌注模型，采用半定量RT一PCR方法检测大鼠脑组织中AQP-4mRNA的表达。结果：模型组AQP-4mRNA表达显著增加，其次是尼莫通组，芳香开窍中药组轻微增加。结论：AQP—4可能参与缺血性脑血管病脑水肿的发生和发展过程，AQP—4抑制剂可减轻脑水肿。芳香开窍药可降低AQP—4表达，从而减少脑水肿，这可能是其芳香开窍的机理之一。     

芳香开窍对缺血再灌注大鼠水通道蛋白－4mRNA表达的影响

目的：观察芳香开窍药对脑组织水通道蛋白4(AQP-4)的影响，以探讨芳香开窍法对缺血性中风的治疗作用机理，为临床运用芳香开窍法提供实验依据。方法：Pulsinelli的4vo法建立大鼠全脑缺血再灌注模型．采用半定量RT—PCR方法检测大鼠脑组织中AQP一4mRNA的表达。结果：模型组AQP-4mRNA表达显著增加，其次是尼莫通组，芳香开窍中药组轻微增加。结论：AQP-4可能参与缺血性脑血管病脑水肿的发生和发展过程，AQP-4抑制剂可减轻脑水肿。芳香开窍药可降低AQP-4表达，从而减少脑水肿，这可能是其芳香开窍的机理之一。     

全脑缺血再灌注大鼠脑组织水通道蛋白-4mRNA的表达及药物对其影响

目的观察实验药物对大鼠脑组织水通道蛋白-4(AQP-4)mRNA表达的影响,探讨芳香开窍药对缺血性中风的作用机理,为临床上运用芳香开窍法提供实验依据。方法按Pulsinelli的4-VO法改良后建立大鼠全脑缺血再灌注模型,采用半定量RT-PCR方法检测大鼠脑组织中AQP-4mRNA表达。结果芳香开窍中药能降低缺血再灌注大鼠脑组织含水量;模型组AQP-4mRNA表达显著增加,其次是尼莫通组,芳香开窍中药组轻微减少。结论AQP-4可能参与缺血性脑血管病脑水肿的发生发展过程,AQP-4抑制剂可减轻脑水肿。尼莫通对AQP-4mRNA表达影响不大,芳香开窍药可降低AQP-4表达,从而减少脑水肿,这可能是其芳香开窍的机理之一。     

芳香开窍法对全脑缺血再灌注大鼠脑水肿及超氧化物歧化酶、丙二醛水平的影响

目的:观察芳香开窍药对脑水肿大鼠脑组织SOD、MDA水平的影响,以探讨芳香开窍法对缺血性中风的治疗作用机理,为临床上运用芳香开窍法提供实验依据。方法:采用pulsinelli的4vo法建立大鼠全脑缺血再灌注模型,检测脑组织水含量以及超氧化物歧化酶及丙二醛水平。结果:①芳香开窍中药能降低缺血再灌注大鼠脑组织含水量,与模型组及尼莫通组比较具有显著性意义(P<0.01);②芳香开窍药能提高缺血再灌注大鼠脑组织SOD水平,与模型组及尼莫通组比较具有显著性意义(P<0.01);③芳香开窍中药能降低缺血再灌注大鼠脑组织 MDA含量,与模型组及尼莫通组比较具有显著性意义(P<0.05)。结论:芳香开窍药能降低缺血性脑水肿,其机制可能通过减少脑组织MDA含量及升高SOD水平有关,这可能是其芳香开窍法的机理之一。     

电针对脑缺血再灌注大鼠水通道蛋白-4的调节作用

目的:探讨电针、脑水肿和水通道蛋白-4(AQP4)之间的变化关系。方法:选用健康SD雄性大鼠,阻塞大鼠大脑中动脉(MCAO),制作缺血性脑水肿模型,分为正常对照组、模型组和电针处理组,电针处理组电针人中、百会,0.8—1.0mA,电针30分钟。,用神经功能缺损评分、免疫组化、western blot和RT-PCR分别观察大鼠神经功能缺损程度、AQP4蛋白和mRNA在脑组织中表达变化。结果:MCAO12h后,AQP4蛋白和mRNA的表达开始上升,随着梗塞时间的延长,AQP4表达逐渐增加,在72h均达到高峰。而电针组能够明显减轻大鼠神经功能缺损程度,降低AQP4蛋白和mRNA的表达。结论:电针可减轻脑缺血后脑水肿导致的神经功能缺损程度,促进神经功能恢复。电针的这种保护作用可能与AQP4表达下调有一定的关系。     

红景天苷对大鼠缺血性脑水肿的影响

目的研究红景天苷(salidroside)对水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)在大鼠缺血性脑组织中表达的影响。方法采用线拴法制作大鼠局灶性脑缺血模型,实验分为模型组、假手术组、红景天苷组。通过光镜技术观察各组别脑水肿区的病理变化,干湿质量法检测脑含水量,采用原位杂交、免疫组化方法观察AQP4及其mRNA在脑组织中的表达,硫代巴比妥酸法和定磷法测定缺血脑组织中丙二醛(MDA)、Na ,K -ATPase活性。结果缺血后模型组的细胞及血管周围间隙明显扩大,部分细胞坏死,神经胶质细胞增生;大鼠穹隆下器官、脉络丛、大脑皮质、视上核、海马等部位AQP4及其mRNA的表达上调,48～72 h达峰值;脑组织含水量亦在72 h达高峰。红景天苷组脑组织形态结构无明显改变,脑组织含水量、MDA水平、AQP4及其mRNA的表达明显低于模型组;而Na ,K -ATPase活力明显高于模型组。结论红景天苷可抑制缺血性脑水肿组织中AQP4及其mRNA的过表达,防止脑水肿的发生。     

僵蚕天南星方对急性缺血性脑水肿大鼠水通道蛋白4表达的影响

目的:探讨僵蚕天南星方对急性缺血性脑水肿大鼠水通道蛋白4(AQP4)表达的影响及其作用机制。方法:将大鼠随机分为3组:假手术组、模型组、僵蚕天南星方组,采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,观察缺血2 h再灌注24 h、48 h、72 h、96 h 4个不同时间点,采用Zausinger评分法观察大鼠神经功能改变,干湿重法测定脑组织含水量,HE染色观察脑组织病理学变化,免疫组织化学法观察大鼠大脑皮层AQP4的表达情况。结果:与模型组比较,僵蚕天南星方组神经功能评分较高(P0.01),脑组织缺血性病理学损伤均明显改善,脑含水量降低(P0.01),AQP4蛋白表达量减少(P0.05)。结论:僵蚕天南星方能够改善脑缺血-再灌注损伤大鼠的神经功能缺损,可减轻脑缺血损伤引起的脑水肿,其机制可能与降低AQP4蛋白的表达有关。     

电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠水通道蛋白-4的调节作用

目的:探讨电针、脑水肿和水通道蛋白-4(AQP4)之间的变化关系。方法:选用健康SD雄性大鼠,阻塞大鼠大脑中动脉(MCAO),制作缺血性脑水肿模型。动物分为正常对照组、模型组和电针处理组,每组大鼠36只。电针处理组电针“水沟”“百会”穴,0.8-1.0mA,疏密波,电针30min。用CV染色法测定脑水肿肿胀率,用IgG免疫组化法测定脑组织中的IgG来反映血脑屏障(BBB)的通透性,采用免疫组化和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分别观察AQP4蛋白和mRNA在脑组织中表达的变化。结果:MCAO12h后,模型组脑水肿所引起的缺血侧脑半球开始肿胀,IgG开始外渗,AQP4蛋白和mRNA的表达开始上升,随着梗塞时间的延长,肿胀和外渗逐渐加重,AQP4的表达进一步增多,在72h均达到高峰。而电针能够明显减轻脑水肿所引起的缺血侧脑半球的肿胀,减少IgG外渗,降低AQP4蛋白和mRNA的表达。结论:电针可减轻脑缺血后脑水肿肿胀率,同时改善BBB的损伤程度。电针的这种保护作用可能与AQP4表达下调有一定的关系。     

肉苁蓉苯乙醇总苷对高原脑水肿大鼠水通道蛋白4的影响

目的:观察肉苁蓉苯乙醇总苷预防给药对高原脑水肿模型大鼠的作用。方法:大鼠随机分为正常对照组、模型组、大花红景天口服液组(1.78 m L·kg-1·d-1),肉苁蓉苯乙醇总苷低、中、高剂量组(75、150、300 mg·kg-1·d-1),每组12只,灌胃预防给药10 d,第8天起除正常对照组外其余各组置于模拟海拔5000 m高原环境72 h建立高原脑水肿模型,观察各组大鼠脑组织病理改变,检测脑组织干湿比、脑组织水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP4)的表达变化。结果:与正常对照组(脑组织干湿比为:4.65±0.10)相比,模型组大鼠脑组织干湿比(5.14±0.16)显著升高,脑组织AQP4表达增加(模型组表达为正常组的2.21±0.46倍)。肉苁蓉苯乙醇苷能够降低脑组织含水量(低中高剂量组依次为:4.68±0.08,4.66±0.10,4.66±0.18),且能降低高原脑水肿大鼠脑组织水通道4mRNA(低中高剂量组依次为正常组的:1.20±0.30,1.03±0.17,1.12±0.33倍)和蛋白的表达,改善高原脑水肿大鼠脑水肿病理改变。结论:肉苁蓉苯乙醇苷能够预防高原脑水肿的发生,可能与其抑制水通道4的表达有关。     

活血化瘀中药对脑出血大鼠脑组织 含水量及AQP4表达的影响

目的:观察活血化瘀药对脑出血大鼠脑组织含水量及AQP4表达的影响,以期从分子水平探讨其治疗出血性脑水肿的机制。方法:将80只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,活血高、低剂量组(10.4,2.6 g.kg-1),采用自体不凝血注入尾状核法制作大鼠脑出血模型,组织干湿重法计算脑含水量,免疫组织化学法和real-timePCR法检测脑组织AQP4蛋白和基因的表达。结果:模型组大鼠各时间点病灶侧脑含水量、血肿周围组织AQP4蛋白和基因的表达均明显高于假手术组(P<0.01);活血高、低剂量组大鼠病灶侧脑含水量及血肿周围组织AQP4的表达与同一时间点模型组相比均明显降低,活血高、低剂量组间也有统计学意义。结论:活血化瘀药能够减轻脑出血后脑水肿,其机制可能与降低AQP4表达有关。     

大黄鞣质对大鼠创伤性脑损伤继发脑水肿抑制作用的研究

目的观察大黄鞣质对SD大鼠创伤性脑损伤继发脑水肿的抑制作用并探讨其作用机制。方法采用Feeney自由落体坠击法制备大鼠创伤性脑损伤模型,腹腔注射大黄鞣质,测定给药后大鼠脑组织含水量、血管通透性及SOD水平的变化,采用免疫组织化学法和蛋白质免疫印迹法测定大鼠脑组织AQP4和GFAP表达的变化。结果与模型组相比,给药组大鼠脑组织含水量显著下降(P0.05),脑组织SOD水平显著提高(P0.05),血管通透性明显下降(P0.05);免疫组化法检测给药组大鼠AQP4和GFAP的阳性细胞数减少,颜色变浅,阳性细胞表达评分明显低于模型组各亚组(P0.01);蛋白印迹免疫试验法检测给药组AQP4和GFAP的阳性表达下降,其表达量与模型组相比,差异有统计学意义(P0.01)。结论大黄鞣质对大鼠创伤性脑损伤继发脑水肿的抑制作用与降低血管通透性、增加SOD水平和降低水通道蛋白AQP4和GFAP的表达有关。     

丹红注射液对脑缺血再灌注大鼠脑水肿的影响

目的:研究丹红注射液对脑梗死脑缺血再灌注大鼠脑水肿的影响。方法:采用大鼠大脑中动脉闭塞法制作局灶性脑缺血再灌注模型。应用干-湿比重法测定脑含水量,免疫组化SABC法测定水孔蛋白4(AQP4)的表达,化学比色法测定脑组织中的Na-K-ATP酶活性。结果:模型组AQP4蛋白表达升高;予丹红注射液的治疗组AQP4蛋白的表达下降;模型组脑组织匀浆Na-K-ATP酶活性明显低于正常对照组,予丹红注射液的治疗组则明显高于模型组。结论:脑组织缺血区AQP4蛋白表达的上调和Na-K-ATP酶活性降低可能与脑水肿的发生发展有一定的关系,丹红注射液有抑制脑水肿发生的作用。     

通腑醒神胶囊对MCAO大鼠脑AQP-4mRNA表达的影响

目的 研究通腑法通腑醒神胶囊（TFXSJN）对大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）模型脑组织AQP-4 mRNA表达的影响。方法 采用线栓法制作大鼠MCAO模型，2h后拔线造成缺血再灌注损伤。观察拔线后12h、1d、2d、3d及7d不同时间点大鼠神经行为评分、脑组织AQP4 mRNA的表达水平，以及各组大鼠在1d、3d及7d时脑梗死体积及脑含水量变化。结果 TFXSJN治疗后能明显减轻大鼠在1d、2d、3d及7d时的神经功能评分，脑含水量3d时及3d、7d的脑梗死体积，与模型组相比有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；TFXSJN组及模型组大鼠脑组织右侧AQP-4 mRNA的表达在12h时已经明显升高，与左侧假手术及正常组相比均具有统计学意义（P〈0．05）。结论 AQP-4 mRNA表达的上调可能与缺血性脑水肿的形成密切相关，而TFXSJN通腑法能够调节缺血再灌注损伤后AQP4m RNA表达的失衡状态，减轻缺血后脑水肿和脑梗死体积，减轻缺血性神经损伤，而调节AQP-4 mRNA基因的异常表达可能是TFXSJN通腑法治疗缺血性中风的分子机制之一。     

五苓散对腹泻模型大鼠结肠AQP4及AQP4mRNA表达的影响

目的:观察五苓散对腹泻模型大鼠结肠AQP4及AQP4mRNA表达的作用,揭示五苓散止泻作用的机理。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组、腹泻模型组、氢氯噻嗪组、口服盐液组、五苓散低、中、高剂量组7组,观察大鼠腹泻状态并测体重等。分别于第4天上午、第7天上午取大鼠结肠,免疫组化法检测AQP4蛋白的表达,原位杂交方法检测AQP4 mRNA的表达。结果:腹泻模型组、口服盐液组、五苓散低剂量组结肠AQP4及AQP4mRNA表达明显下调,氢氯噻嗪组、五苓散中剂量组AQP4及AQP4mRNA表达下调但明显高于模型组,五苓散高剂量组结肠AQP4及AQP4mRNA表达下调不明显。结论:AQP4及AQP4mRNA表达下调是番泻叶致大鼠腹泻的机制之一,上调腹泻模型大鼠结肠AQP4及AQP4mRNA表达是五苓散的止泻机理之一,但与剂量相关,5.4g/kg灌胃效果较好。     

麝香、冰片对全脑缺血再灌注大鼠脑组织氨基酸类神经递质的影响

目的：探讨芳香开窍药麝香、冰片对全脑缺血再灌注大鼠脑组织氨基酸类神经递质的影响。方法：Pulsinelli的4vo法建立大鼠全脑缺血再灌注模型，采用高效液相色谱法检测脑组织谷氨酸、天门冬氨酸、甘氨酸及γ－氨基丁酸。结果：芳香开窍药可降低缺血区脑组织中的Asp，提高GABA、Gly的含量。结论：芳香开窍药可降低脑缺血时的兴奋性神经 递质Asp和升高抑制性递质GABA、Gly，以对抗兴奋性氨基酸的毒性，从而保护脑缺血后继发神经元的损伤，这可能是其芳香开窍机理之一。     

麝香配伍冰片对缺血再灌注损伤后血脑屏障的影响

目的 研究大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障的损伤及麝香配伍冰片对血脑屏障的影响.方法 采用大脑中动脉线栓法建立脑缺血2 h再灌注24 h、48 h模型,比较各组神经功能评分,用实时荧光定量PCR方法 检测各组脑组织情况.结果:再灌注24 h时麝香配伍冰片组、麝香组、尼莫同组积分下降明显,再灌注48h时麝香配伍冰片组、安宫牛黄丸组积分较相应模型组积分下降明显(均P ＜0.01);麝香配伍冰片组、安宫牛黄丸组可显著降低脑组织中ICAM-1 mRNA、LFA-1 mRNA的表达(P ＜0.01),冰片组ICAM-1 mRNA和再灌注48h时LFA-1mRNA也有明显降低(P ＜0.05);麝香配伍冰片组、安宫牛黄丸组、冰片组脑组织MMP-9 mRNA表达均受到明显抑制;三组TIMP-1 mRNA表达明显升高,再灌注24h时麝香组也有相同变化趋势;麝香配伍冰片组、安宫牛黄丸组、冰片组脑组织AQP-4 mRNA的表达受到明显抑制.结论麝香配伍冰片可以通过抑制ICAM-1 mRNA、LFA-1 mRNA、MMP-9 mRNA和AQP-4 mRNA 的表达,提高TIMP-1 mRNA的表达来减轻血脑屏障损伤,这可能是芳香开窍药醒脑开窍的机理.     

中风康对局灶性脑缺血大鼠脑组织AQP-4 mRNA表达的影响

目的探讨中风康对局灶性脑缺血大鼠脑组织水通道蛋白mRNA(AQP-4mRNA)表达的影响.方法采用线栓法复制局灶性脑缺血大鼠模型,于脑缺血12,24,48,72,96 h观察模型大鼠AQP-4 mRNA表达的动态变化,并在脑缺血48 h观察中风康对AQP-4 mRNA表达及脑水肿的影响.结果与假手术组比较,局灶性脑缺血12h,模型组脑组织AQP-4 mRNA表达开始增加,至72 h达到高峰(P＜0.01),与48 h模型组比较,各治疗组脑组织AQP-4 mRNA表达和脑组织含水量均有不同程度降低(P＜0.05或P＜0.01).结论中风康可降低脑梗塞大鼠脑组织AQP-4 mRNA表达,减轻脑水肿.     

电针调控AQP4、ZO-1的表达对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响＊

目的 探讨电针“水沟穴”、“百会穴”是否可以通过调控AQP4、ZO-1的表达从而减轻脑缺血再灌注大鼠血脑屏障损伤。方法 选用健康的雄性SD大鼠随机分为5组：正常对照组（NC）、MCAO模型组（M）、电针组（EA）、AQP4 siRNA组（siRNA）和空载质粒组（EP）。采用改良后的Longa线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型，电针组于模型构建成功后5 min针刺大鼠的“水沟穴”和“百会穴”，并接电针，AQP4 siRNA组和空载质粒组右侧脑室缓慢注入AQP4 siRNA表达质粒和不含AQP4 siRNA的空载质粒。采用神经功能缺损评分观察各组大鼠神经功能缺损程度，CV染色法测定各组大鼠脑半球肿胀率及脑水肿情况，Western blot技术测定各组大鼠AQP4、ZO-1蛋白含量，RT-PCR测定各组大鼠AQP4、ZO-1mRNA含量。结果 与NC组相比较，M组及EP组大鼠神经功能缺损程度及脑水肿程度较重，AQP4蛋白及mRNA表达明显上升，ZO-1蛋白及mRNA表达明显下降；与M组及EP组相比较，EA组及siRNA组大鼠神经功能缺损程度及脑水肿程度较轻，AQP4蛋白及mRNA表达显著下降，ZO-1蛋白及mRNA表达显著上升。结论 电针可以有效抑制AQP4的表达及ZO-1的降低，从而改善血脑屏障的损伤，减少脑水肿的产生，促进神经功能恢复。调控AQP4、ZO-1的表达可能是电针“水沟穴”和“百会穴”改善脑缺血再灌注后脑水肿及血脑屏障损伤的作用机制之一。     

荆芥、防风对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜AQP4和AQP8表达的影响

探讨荆芥、防风对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)大鼠结肠黏膜水通道蛋白(aquaporin,AQP)4和AQP8表达的影响。SD雄性健康大鼠共35只,随机分为正常组、模型组和风药(荆芥、防风免煎颗粒1∶1)低、中、高剂量组(6,12,24 g·kg~(-1)·d~(-1)),每组7只。除正常组外,其余组大鼠均采用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液连续自由饮用复制UC大鼠模型,造模10 d后予以灌胃给药,正常组和模型组均予以生理盐水,连续灌胃10 d,实验期间观察大鼠一般状况,分别于10 d后结束实验时采集结肠组织,测量各组大鼠结肠长度,评估结肠黏膜损伤指数(CMDI)及结肠病理变化评分,ELISA法检测血清IL-1和IL-8含量变化,免疫组化法检测结肠组织内AQP4和AQP8蛋白表达情况,PCR法检测结肠黏膜AQP4和AQP8 mRNA的表达情况。与正常组比较,模型组大鼠结肠长度明显短缩(P0.01),CMDI及病理评分显著增加(P0.01),血清IL-1和IL-8含量明显增加(P0.05),免疫组化结果显示蛋白表达较低,颜色为淡黄色或棕色,AQP4和AQP8 mRNA表达明显降低(P0.01);与模型组比较,风药组CMDI及病理评分、血清IL-1和IL-8含量明显降低(P0.01,P0.05),免疫组化结果显示蛋白表达较强,颜色为棕褐色或深褐色,结肠长度及AQP4和AQP8 mRNA表达增加(P0.01,P0.05)。荆芥和防风对UC模型大鼠症状及病理组织有明显的改善作用,促进肠黏膜修复,其机制可能与上调结肠AQP4和AQP8表达相关。