沥水调脂胶囊对氧化型低密度脂蛋白影响内皮细胞Bcl-2、Bax、p_(53)和caspase-3蛋白表达的调节

目的 :研究沥水调脂胶囊抑制氧化型低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞凋亡的机制。方法 :沥水调脂胶囊含药血清和ox LDL与人脐静脉内皮细胞 (hUVEC)共同孵育 15h ,用免疫荧光标记结合流式细胞仪分别测定Bcl 2、Bax、p53 和caspase 3蛋白表达量。结果 :发现ox LDL可使hUVECBcl 2蛋白表达降低 ,Bax、p53 和caspase 3蛋白表达量升高 ,而沥水调脂胶囊可使ox LDL对Bcl 2、p53和caspase 3的上述作用明显减弱 ,但对Bax未见明显影响。结论 :沥水调脂胶囊抑制ox LDL诱导的血管内皮细胞凋亡 ,可能是从正反两个方面、多条途径调节与凋亡密切相关的基因表达以及保护细胞结构功能有关。     

沥水调脂胶囊对氧化型低密度脂蛋白诱导内皮细胞凋亡的影响

目的：探讨沥水调脂胶囊血清对氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导内皮细胞凋亡的影响。方法：复制氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导血管内皮细胞凋亡模型，采用流式细胞术、形态学观察、DNA片段琼脂糖凝胶电泳等方法，观察沥水调脂胶囊含药血清对氧化型低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞凋亡的作用。结果：200μg/ml ox-LDL作用于培养的人脐静脉内皮细胞24h后，凋亡率明显升高，Hoechst33342染色，荧光显微镜上可观察到早、中、晚期各种典型的凋亡细胞，DNA电泳可见细胞凋亡特有的梯形条带。沥水调脂胶囊血清使内皮细胞凋亡率明显下降，DNA凋亡带减弱。结论：沥水调脂胶囊对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡有一定的抑制作用。     

白毛藤诱导人肺癌A549细胞凋亡及其作用机制的研究

目的：研究白毛藤诱导肺癌细胞凋亡的作用及其机制。方法：荧光显微镜观察不同浓度白毛藤诱导A549细胞凋亡的作用，RT—PCR检测Bcl—xl、p53基因表达量的变化。结果：白毛藤具有诱导A549细胞凋亡的作用，并且上调p53基因、降低Bcl—xl基因的表达。结论：白毛藤促进A549细胞凋亡，其机制可能与激活p53基因、抑制Bel—xl基因表达有关。     

沥水调脂胶囊对弱氧化型低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞c-jun、c-fos、c-myc mRNA表达的影响

目的：探讨沥水调脂胶囊抑制血管平滑肌细胞增殖的机制。方法：用消化法获取血管平滑肌细胞(VSMC)，DMEM培养，以甲醇除蛋白后的沥水调脂胶囊含药血清、弱氧化型低密度脂蛋白(mox-LDL)和vitE分组处理细胞，RT-PCR扩增c-jun、c-fos、c-myc，用凝胶成像分析仪分析琼脂糖电泳结果，与GAPDH对照进行半定量分析。结果：在处理后30min含药除蛋白血清和vitE对mox-LDL诱导VSMCc-jun、c-fos、c-myc mRNA表达均无明显影响，在1h、2h vitE组与对照纪比较均有明显差异(P＜0．05)。含药除蛋白血清组c-jun、c-fos在1h、2h与对照组比较无明显差异，c-jun则明显降低(P＜0．05)，与vitE的作用不相同。结论：降低JNK／SAPK途径信号途径可能是沥水调脂胶囊抑制VSMC增殖的机制之一。     

两种木贼提取物对高血脂大鼠内皮凋亡及p53、caspase-3表达干预

目的:观察木贼提取物对高血脂大鼠内皮细胞周期、凋亡及相关基因突变型p53、caspase-3蛋白的表达。结果:两种木贼提取物均能显著降低TG、VLDL水平;下调突变型P53、caspase-3基因蛋白表达,抑制内皮细胞凋亡;正丁醇提取剩余物升高HDL作用突出。     

蝙蝠葛酚性碱对小鼠脑缺血-再灌注脑组织Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的 研究蝙蝠葛酚性碱对小鼠脑缺血—再灌注后脑组织凋亡相关蛋白表达的影响。方法 采用免疫组织化学方法观察凋亡促进蛋白Bax、凋亡抑制蛋白Bcl—2的表达。结果 皮质于缺血复灌12h、海马CA，区于缺血复灌24h Bax表达明显增多，Bcl—2表达明显减少，蝙蝠葛酚性碱预防给药能抑制脑组织Bax的表达，并促进Bcl—2表达，减少脑细胞凋亡。结论 蝙蝠葛酚性碱能抑制缺血—再灌后脑组织损伤，使凋亡细胞减少，对脑缺血有一定的保护作用。     

黄芩苷对氧化低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞凋亡的防护作用

目的：研究黄芩苷抑制氧化低密度脂蛋白（oxLDL）诱导的血管内皮细胞凋亡及其介导机制。方法：应用大鼠模型，以低密度脂蛋白（LDL）体内诱导血管内皮细胞凋亡，并以黄芩苷进行干预，观察其对LDL诱导血管内皮细胞凋亡的影响。原位末端标记技术（TUNEL）法检测凋亡细胞，比色法测半胱天冬蛋白酶3（Caspase-3）的活性。结果：LDL组与氯化钠对照组比较，血管内皮细胞凋亡数显著增加，caspase-3酶活性显著增高，黄芩苷干预组与LDL组比较，凋亡细胞数显著减少，caspase-3酶活性下降。结论：LDL可能通过激活caspase-3使大鼠血管内皮细胞凋亡；黄芩苷可通过抑制caspase-3酶活性抑制LDL诱导的细胞凋亡。     

脂脉宁对香烟提取物诱导血管内皮-304细胞损伤的保护作用

目的观察脂脉宁药物血清对香烟提取物（CSE）诱导的血管内皮（VEC）-304细胞损伤的影响。方法将培养细胞分为CSE组、空白组、脂脉宁大剂量组、脂脉宁小剂量组。采用MTT、免疫组化和TUNEL等方法，观察各组细胞存活率和凋亡率、相关凋亡蛋白表达及氧化反应指标的变化。结果CSE组存活率最低，凋亡率最高，Wp53、p21、Bax、CaspaSe-3表达均明显升高，Bcl-2、mp53表达降低，超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）、总抗氧化能力（T-AOC）活性、谷胱甘肽（GSH）含量均降低，丙二醛（MDA）含量及-氧化氮合酶（NOS）活性升高，与空白组比较差异有统计学意义；脂脉宁大，小剂量组存活率明显升高，凋亡率降低，Wp53、p21，Bax、Caspase-3表达下调，Bcl-2、mp53表达上调；SOD、GSH-Px、T-AOC活性及GSH含量均升高，MDA含量及NOS活性降低，而脂脉宁大剂量组更明显。结论CSE诱导的VEC-304细胞凋亡与其过氧化反应密切相关，脂脉宁有抑制细胞凋亡及抗氧化作用。     

扶正消积胶囊对人肺癌细胞株A549增殖抑制及凋亡的影响

目的:研究扶正消积胶囊在体外对人肺癌细胞A549增殖抑制及凋亡的影响。方法:应用MTT法检测扶正消积胶囊对A549细胞增殖的影响,应用流式细胞仪检测扶正消积胶囊对A549细胞凋亡的影响,应用Western bolt检测扶正消积胶囊对A549细胞凋亡相关基因表达的影响。结果:与空白组比较,扶正消积胶囊作用A549细胞24h后,能显著抑制A549细胞的增殖,且这种抑制成浓度依赖关系。Annexin-V/PI双染法结果显示扶正消积胶囊能诱导A549细胞的凋亡,且呈现浓度依赖关系。Western bolt结果显示,扶正消积胶囊能上调Bax表达,下调Bcl-2表达,激活caspase-3、caspase-9、PARP的活性。结论 :扶正消积胶囊能有效抑制人胃癌细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制可能是通过激活caspase家族蛋白酶活性以及上调Bax、下调Bcl-2表达而实现的。     

木贼有效部位抑制氧化低密度脂蛋白致内皮细胞凋亡及Caspase-3的表达

目的探讨木贼有效部位抑制氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC-ECV304)凋亡的可能机制。方法体外ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞损伤,用木贼有效部位进行干预;采用流式细胞术检测细胞凋亡率及Caspase-3蛋白;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测内皮细胞Caspase-3mRNA表达。结果 ox-LDL可明显诱导内皮细胞凋亡,上调Caspase-3mRNA及Caspase-3蛋白表达,木贼有效部位干预后细胞凋亡率明显下降(P0.05),Caspase-3mRNA及Caspase-3蛋白表达明显下调(P0.01)。结论木贼有效部位通过对凋亡相关基因的调控最终抑制Caspase-3蛋白的表达来减少内皮细胞的凋亡。     

浅论周学海升降出入辨证理论及治法

在中医学发展史中有六经辨证、卫气营血辨证和三焦辨证,晚清医家周学海继承前人的学术思想,并结合自己的临床实践,提出了新的辨证体系--升降出入辨证.在他的代表作<读医随笔>中,他分别从病机、证候类型、治疗宗旨以及升降出入产生障碍的原因等方面阐述了升降出入辨证理论体系的形成,对中医理论和临床有着重大的意义.     

蒲公英采收、初加工、贮藏、包装环节的调查

目的:调查不同产地蒲公英的采收、初加工、贮藏、包装现状并进行有效成分的含量评价,了解蒲公英的多个产后环节,为规范化生产提供依据。方法:对多个产区和药材市场进行实地调研,辅以文献查阅和分析,通过实际生产和有效成分的含量综合,探讨影响蒲公英质量的各种因素。结果:归纳总结蒲公英采收、初加工方法、贮藏条件和包装方面的现状以及存在的问题,通过有效成分的含量比较对蒲公英进行了质量评价。蒲公英在生长旺盛期时,绿原酸、咖啡酸、多糖、总黄酮、总皂苷等有效成分的含量普遍较高。结论:蒲公英以人工栽培为主,采收期对蒲公英质量的影响较大。蒲公英市场需求大时,不能为了产量忽视质量。为控制和提升蒲公英的质量,需要从上述多个环节进行质量全过程控制系统的构建,并制定采后标准操作规程。     

七叶皂苷A～D体外转化规律研究

目的建立HPLC法同时测定七叶皂苷A~D量的方法,考察不同因素水平影响下七叶皂苷A~D的体外转化规律,并优化出最佳转化条件,为调控生产中七叶皂苷A~D的比例提供参考。方法采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.05%磷酸水溶液(34∶66)为流动相,柱温为35℃,体积流量为1.0 m L/min,检测波长为200 nm,外标法定量;以七叶皂苷A~D的转化率及有关物质的量为指标,通过单因素实验设计,考察p H值、温度、时间3个因素对七叶皂苷A~D体外转化的影响趋势,再采用中心组合设计-响应面法优选转化条件,利用Design Expert 8.0.5软件分析预测最佳转化条件并进行验证试验。结果七叶皂苷A~D分别在0.39~3.49 mg/m L(r=0.999 5)、0.28~2.55 mg/m L(r=0.999 5)、0.19~1.67 mg/m L(r=0.999 7)、0.07~0.59 mg/m L(r=0.999 7)与峰面积呈良好的线性关系;单因素实验表明,p H值、温度、时间对七叶皂苷A和B、C和D转化率的影响呈现相似的趋势,在p H值5.0~10.0,温度45~85℃,时间0.25~8 h时,七叶皂苷A、B部分转化成七叶皂苷C、D,其他条件下七叶皂苷A~D均转化为有关物质;中心组合设计-响应面法研究得到最佳转化条件为p H值6.9,温度54℃,时间7.4 h,在此条件下,七叶皂苷C、D转化率的综合评分为11.50%,与预测值的偏差5%。结论不同p H值、温度、时间影响下,七叶皂苷A~D的体外转化呈现出一定的规律,响应面法优选出的最佳转化条件稳定可行,可为调控生产中七叶皂苷A~D的比例提供科学的依据。     

荧光光谱法测定人体足三里经穴内、外钙、镁含量的实验研究

足三里经穴人们谓之保健穴,如结合其他经穴使用可主治多种疾病和疼痛。钙和镁是人体不可缺少的无机元素。钙是构成骨骼和牙齿的主要成分,还有维持神经的传导功能、肌肉的伸缩性、心动节律、毛细血管的正常渗透及酸碱平衡的作用,又是多种酶的激活剂,参与血液凝结过程。...     

利肝宁对肝纤维化大鼠血清HA、PCⅢ、Ⅳ-C、LN含量的影响

目的 通过观察利肝宁对猪血清诱发的大鼠肝纤维化模型血清胶原含量的影响，阐明本药治疗慢性肝病的机理。方法 猪血清诱发的大鼠肝纤维化模型，用利肝宁灌胃治疗，并用鳖甲煎丸、秋水仙碱作为对照组，观察各组对HA、PcⅢ、IV—C、LN的影响。结果 治疗各组均有不同程度的降低HA、PCⅢ、Ⅳ-C、LN的作用，而以利肝宁组效果最好。结论 利肝宁能够促进胶原降解，对实验性肝纤维化有明显的治疗作用。     

黄酮类化合物吸收、分布和代谢的研究进展

各种资料及相关实验表明,黄酮类化合物是一种非常重要的生理活性物质,有着很强的药理活性,是中草药的重要成分。笔者就近几年国内外关于黄酮类化合物的文献资料进行分析、归纳和总结,分别按胃、肠和肝脏几个主要吸收和代谢部位及其在体内的分布情况进行介绍。对于黄酮类化合物的吸收、分布和代谢的研究将为开发黄酮类新药打下坚实的理论基础。     

玛拉干·扎拉-乌布斯提取工艺的研究

目的:筛选玛拉干.扎拉-乌布斯总黄酮提取工艺的最佳工艺条件。方法:通过正交设计对玛拉干.扎拉-乌布斯总黄酮提取工艺的条件进行了优化。结果:玛拉干.扎拉-乌布斯总黄酮提取的最佳工艺条件为:药材每次加入12倍量75%乙醇回流提取,提取3次,每次2小时。     

脉诊寸关尺长度探讨

历代医家对寸关尺各部的长度有着不同的见解,其中以“脉取三寸,三部各为一寸”的观点得到了多数医家的认同。研究认为,三部总长度应根据人腕部桡动脉比较浅露肤表的一段长度来确定,在前臂中所占长度比例应与前臂在人身长中所占长度比例相适应;而各部的长度应按寸关尺分别反映人体上、中、下三段的身长比例来确定。按照上述原则计算,三部总长度以2寸最合理,寸关尺长度分别为6分、2分、12分。     

辛热药附子对类阳虚状态的干预实验研究

[目的]以氢化可的松诱导大鼠类阳虚状态为基础,用辛热药附子进行干预,通过检测肾上腺皮质、甲状腺功能、物质能量代谢、心肌酶、钙等相关指标,观察给药后大鼠生物学效应的改变,初步揭示辛热药附子的性-效特征,为辛热药药性理论的阐释提供参考。[方法]SD雄性大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、附子大、小剂量组;模型和附子大、小剂量组肌肉注射氢化可的松,正常组注射等量的生理盐水;造模两周后,正常和模型组眼眶取血并继续造模,附子大、小剂量组开始灌胃,7 d后各组腹股静脉取血,对相关指标进行测定。[结果]附子大剂量对类阳虚大鼠的17-羟皮质类固醇(17-OHCS)、甘油三酯(TG)、钙(Ca)有纠正作用;附子小剂量对类阳虚大鼠的17-羟皮质类固醇(17-OHCS)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)、肌酸激酶(CK)、钙(Ca)有纠正作用。[结论]附子大、小剂量组都不同程度的纠正了类阳虚状态,附子小剂量尤为突出。