人参皂苷Rg1对转化生长因子-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化的影响

目的：探讨人参皂苷Rg₁(Rg₁) 对转化生长因子-β₁(TGF-β₁)诱导的肾小管上皮细胞转分化(TEMT)的作用及对细胞外基质(ECM)的影响。方法：将体外培养的正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)分为空白对照组，10 mg·L^-1 TGF-β₁刺激组及不同剂量的Rg₁干预组(10,20,40 mg·L^-1)。应用形态学、免疫组化技术、酶联免疫吸附法、荧光定量PCR,Western 蛋白印迹等观察Rg₁对TGF-β₁诱导的NRK52E细胞转分化的作用及对ECM主要成分胶原Ⅰ(Col-Ⅰ)和纤维粘连蛋白(FN)的影响。结果：与空白对照组相比，NRK52E培养3 d后，TGF-β₁刺激组细胞形态学发生明显改变。免疫组织化学和Western 蛋白印迹结果显示α-SMA的表达显著增加而E-cadherin的表达明显减少(P<0.05)；RT-PCR结果示α-SMA，Col-Ⅰ和FN的mRNA表达明显增高(P<0.05)；细胞培养上清液Col-Ⅰ和FN的含量也显著增加(P<0.05)；与TGF-β₁刺激组相比，各Rg₁干预组均不同程度的改善了TGF-β₁刺激的细胞形态学改变；有效抑制了α-SMA的表达，部分恢复了E-cadherin的下调(P<0.05)； Col-Ⅰ和FN的含量亦明显减少(P<0.05)。结论：TGF-β₁可以诱导大鼠TEMT，刺激ECM成分Col-Ⅰ和FN的升高。Rg₁呈剂量依赖性地明显地抑制TGF-β₁刺激的NRK52E细胞的转分化和ECM的增加。     

人参皂苷Rg2对失血性休克犬血流动力学的影响及抗脂质过氧化作用

目的 :观察人参皂苷Rg₂对失血性休克犬血流动力学的影响及抗氧化作用。方法 :复制杂种犬失血性休克失代偿期病理模型 ,动脉放血至平均动脉压 (MBP)在 5.33kPa以下 ,然后给予Rg₂0.5,1mg·kg_-1,参麦(SM) 100mg·kg^-1,iv。观察 6h。结果 :人参皂苷Rg₂ 能明显升高失血性休克失代偿期犬MBP、左室内压 (LVSP)和左室内压最大变化速率 (±dp/dt) ;增强血清超氧化物歧化酶 (SOD)的活性 ,降低血清丙二醛 (MDA)含量 ;提高休克犬的存活率。结论 :人参皂苷Rg₂ 能明显改善失血性休克犬血流动力学多项指标 ,激活机体抗氧化能力 ,作用强于SM。     

人参皂苷Rg3对肿瘤放疗患者外周血淋巴细胞的体外免疫增强作用

 目的 观察人参皂苷Rg₃(Rg₃)对肿瘤化疗患者外周血淋巴细胞的免疫增强作用。方法 分离纯化肿瘤化疗患者外周血淋巴细胞,与不同浓度Rg₃共培养48h或72h后用流式细胞仪进行各项指标测定,观察Rg₃对淋巴细胞增殖率、细胞膜表面分子表达率及Th1/Th2细胞的影响。结果 Rg₃能增强ConA诱导的淋巴细胞增殖,增加HLA-DR,HLA-ABC,CD₃-CD₅₆₊₁₆等分子表达,使CD₄⁺/CD₈⁺及Th1/Th2向免疫增强的方向漂移。结论 Rg₃能增强肿瘤化疗患者外周血淋巴细胞的免疫功能,包括特异性和非特异性免疫。     

人参皂苷Rg1对PD模型大鼠纹状体多巴胺含量的影响及其机制探讨

目的：研究人参皂苷Rg₁对6-羟基多巴(6-OHDA)制备的去卵巢(OVX)帕金森病(PD)模型大鼠纹状体(Str)多巴胺(DA)含量的影响及其机制探讨。方法：应用6-OHDA制备OVX的PD模型大鼠，腹腔注射Rg₁(10 mg·kg^-1)或侧脑室同时给予雌激素受体(ER)拮抗剂ICI 182,780(2.4 ng·kg^-1)，连续用药14 d，观察阿朴吗啡诱导的大鼠旋转行为。应用高效液相色谱法(HPLC)检测纹状体(Str)内DA及其代谢产物二羟基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)含量的变化。结果：人参皂苷Rg₁可明显改善PD模型大鼠单侧旋转行为(P<0.01)，此作用可被ICI 182,780所阻断。Rg₁给药组可显著提高损毁侧Str DA及其代谢产物含量(P<0.01)。应用ICI 182,780可阻断Rg₁的神经保护作用，损毁侧Str DA及其代谢产物含量较Rg₁给药组明显降低(P<0.01)。结论：人参皂苷Rg₁对6-OHDA所致的去卵巢PD模型大鼠黑质多巴胺能神经元有一定保护作用，此作用与ER途径的激活有关。     

人参皂苷Rb1，Rg1和Re调控Raf-CREB，Akt-CREB，CaMKⅡ-CREB信号转导通路的体外研究

目的：研究人参皂苷中的主要有效单体Rb₁,Rg₁和Re对神经营养因子细胞信号转导通路的影响。方法：建立以0.6 mmol·L^-1的皮质酮作用于SH-SY5Y细胞24 h的损伤模型,加入Rb₁（120,60,20 μmol·L^-1）,Rg₁（120,80,40 μmol·L^-1）和Re（120,80,40 μmol·L^-1）,CCK试剂盒检测Rb₁,Rg₁和Re对皮质酮诱导SH-SY5Y细胞损伤的存活率;利用脂质体转染的方法将含有CREB-Luc报告基因的质粒分别和含有hRaf,hAkt,hcAMP,hCaMK基因的质粒转染入人胚肾细胞（HEK293细胞）,加入有效浓度人参皂苷Rb₁,Rg₁和Re后,用双荧光素酶报告基因系统和Western blotting方法检测CREB的表达情况。结果：CCK的测试结果表明人参皂苷Rb₁（60 μmol·L^-1）,Rg₁（80 μmol·L^-1）和Re（80 μmol·L^-1）对SH-SY5Y细胞具有明显的保护作用;报告基因检测方法显示加入Rb₁和Rg₁调控后Raf-CREB,Akt-CREB通路中CREB报告基因活性明显增强,加入Re调控后Raf-CREB,CaMKⅡ-CREB通路中CREB报告基因活性明显增强。Western blotting结果显示,Rb₁和Rg₁调控后Raf-CREB,Akt-CREB通路中CREB蛋白表达明显增强,Re调控后Raf-CREB,CaMKⅡ-CREB通路中CREB蛋白表达明显增强。结论：人参皂苷中的主要有效单体Rb₁,Rg₁和Re对皮质酮所致SY5Y细胞受损具有明显保护作用,其作用机制可能与调节神经营养因子细胞信号转导通路上游的Raf-CREB,Akt-CREB,CaMKⅡ-CREB通路有关。     

人参皂苷Rg3诱导膀胱癌细胞系EJ的凋亡作用

目的：探讨Rg3抑制膀胱癌细胞的作用及其诱导凋亡的机制。方法：用一定质量浓度的Rg3 处理膀胱癌细胞系EJ细胞,MTT法检测细胞增殖活力和抑制率50%的时候药物的浓度(IC₅₀)；Hoechst33258荧光染色观察凋亡细胞的形态；流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡率；免疫细胞化学观察caspase-3的表达变化；琼脂糖凝胶电泳测定DNA梯状带。结果：Rg3抑制EJ细胞生长,呈浓度依赖关系,Rg3处理细胞48 h的IC₅₀为125.5 mg·L^-1；经150 mg·L^-1Rg3处理细胞24 h和48 h后,观察到典型的凋亡细胞形态,即染色质凝集、核片段化、凋亡小体、核内致密的颗粒状荧光及caspase-3的表达增加；并呈时效依赖关系；用75 mg·L^-1Rg3处理细胞24,48,150 mg·L^-1的Rg3处理细胞48 h后,Rg3诱导了细胞凋亡和调节细胞周期,S期和G₂/M期的细胞比率增加,G₀/G₁的细胞比率下降；凋亡率从对照组的(1.05±0.17)%分别上升到(8.41±0.98)%,(18.57±2.20)% 和(33.98±1.64)%,琼脂糖凝胶电泳检测出典型的DNA梯形条带,其效应随药物浓度的增加和作用时间的延长而增强。结论：Rg3可通过诱导EJ细胞凋亡而发挥其抑制细胞增殖的作用。     

人参皂苷Rg1、Rb1对脂多糖体外诱导肠上皮屏障损伤的保护作用

目的 基于人髓系白血病单核细胞（THP-1）与肠上皮细胞（Caco-2）共培养体系,研究人参皂苷Rg₁和人参皂苷Rb₁对脂多糖（LPS）诱导的THP-1细胞炎症因子释放的影响,及其对THP-1细胞活化致Caco-2细胞炎性损伤的保护作用。方法 首先制备THP-1与Caco-2细胞共培养微流控芯片,实验分为空白组、LPS组和给药组。空白组细胞正常培养;LPS组在上层Caco-2细胞形成单层屏障后,在下层THP-1细胞中加入LPS（1 mg·L^-1）;给药组在LPS组的基础上在THP-1细胞中分别加入33 mg·L^-1的人参皂苷Rg₁和人参皂苷Rb₁。THP-1细胞与Caco-2细胞共培养24 h后采用异硫氰酸荧光素-葡聚糖（FITC-Dextran）示踪法检测下层芯片通道中的FITC-Dextran荧光值。THP-1细胞实验分为空白组、LPS组、给药组。空白组THP-1细胞正常培养;LPS组在THP-1细胞中加入LPS（1 mg·L^-1）;给药组在LPS组的基础上分别加入相应剂量的人参皂苷Rg₁和人参皂苷Rb₁（11、33、100 mg·L^-1）。细胞培养24 h后细胞增殖与活性检测（CCK-8）检测THP-1细胞活性,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测THP-1细胞炎性细胞因子白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达。Caco-2细胞实验分为空白组、LPS组、给药组。空白组Caco-2细胞正常培养;其他组将第二部分THP-1细胞实验中对应组的细胞上清置换于Caco-2细胞中,继续培养24 h后CCK-8检测Caco-2细胞活性,Real-time PCR检测Caco-2细胞炎性细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α及紧密连接蛋白封闭蛋白（Occludin）表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Caco-2细胞紧密连接蛋白Occludin的表达。结果 在THP-1与Caco-2细胞共培养体系中,与LPS组比较,人参皂苷Rg₁和Rb₁均能有效保护LPS诱导肠上皮屏障通透性升高（P<0.01）。Rg1和Rb1拮抗LPS诱导的THP-1细胞IL-6、IL-1β、TNF-α炎性细胞因子表达升高（P<0.05）。经Rg₁和Rb₁处理的THP-1细胞上清与Caco-2细胞共培养后,与LPS组比较,显著降低Caco-2细胞IL-6、IL-8、TNF-α炎性细胞因子表达（P<0.01）,上调紧密连接蛋白Occludin表达。结论 在THP-1与Caco-2细胞共培养体外模拟肠道上皮屏障功能模型中,人参皂苷Rg₁和Rb₁通过调节THP-1细胞释放炎性细胞因子,进而调控Caco-2细胞的炎性反应和细胞屏障完整性,在LPS诱导的体外肠上皮屏障损伤中发挥保护作用。     

人参皂苷Rg2对大鼠化学性心肌缺血的影响

目的 :观察人参皂苷Rg2 对化学性心肌缺血的保护作用。方法 :采用异丙肾上腺素、亚硝酸钠、垂体后叶素制备大鼠心肌缺血模型 ,iv给予人参皂苷Rg₂2.5～10.0mg·kg^-1,观察心电图及心肌病理变化。结果 :人参皂苷Rg₂ 能明显抑制心电图S T段J点偏移 ,减小心肌坏死面积 ,降低肌酸激酶 (CK)、过氧化脂质 (MDA)含量 ,升高超氧化物歧化酶 (SOD)。结论 :人参皂苷Rg₂ 对大鼠心肌缺血有明显改善作用。     

胃肠舒对糖尿病大鼠胃窦平滑肌细胞线粒体的影响

目的 :研究中药胃肠舒对糖尿病(diabetes mellitus, DM)大鼠胃窦平滑肌细胞线粒体形态、结构、功能和蛋白的影响,探讨胃肠舒促胃肠运动的线粒体动能调控机制。 方法 :选择体重150~170 g的SD大鼠随机分为4组:正常对照组、DM组、DM+胃肠舒Ⅰ组(750 mg·kg^-1)、DM+胃肠舒Ⅱ组(1 500 mg·kg^-1)。透射电子显微镜检测线粒体形态、结构的变化,流式细胞术检测线粒体跨膜电位的变化,荧光测定法检测线粒体呼吸链的变化,Western Blot检测线粒体蛋白的变化。 结果 :胃肠舒能改善DM大鼠胃窦平滑肌细胞线粒体的形态、结构,增强呼吸链功能,线粒体跨膜电位和ATP含量增高,细胞色素C氧化酶(cytochrome C oxidase, COX)活性增强,活性氧自由基(ROS)释放减少,凋亡蛋白家族Bcl-2表达上调,Bax表达下调。 结论 :胃肠舒促胃肠运动可能与改善平滑肌的线粒体动能系统有关。     

外源性表皮生长因子对马兜铃酸-Ⅰ所致细胞增殖抑制作用的影响

目的：探讨加入外源性表皮生长因子(EGF)能否改善马兜铃酸-Ⅰ(AA-Ⅰ)引起的细胞增殖抑制作用。方法：以体外培养的人近端肾小管上皮细胞系(HK-2)为研究对象，在正常培养组(对照组)、AA-Ⅰ(10 mg·L^-1)刺激组(AA组)和不同时机加入EGF处理组之间比较各项指标变化;用倒置显微镜对细胞形态进行观察；台盼蓝染色后细胞计数法观察细胞增殖反应；流式细胞仪分析细胞周期变化情况。结果：与对照组相比，AA-Ⅰ对细胞的毒性作用呈浓度和时间依赖性增强，AA-Ⅰ(10 mg·L^-1)刺激24，48 h后对存活细胞的细胞周期分析可见G₀/G₁期细胞比例分别减少31.4%和87.4%，而G₂/M期细胞比例逐渐增高达对照的1.32倍和3.73倍(均P<0.05)。EGF(20 μg·L^-1)刺激24 h后细胞数达对照组的1.36倍(P<0.05)，细胞周期中G₀/G₁期细胞比例减少9.7%，S和G₂/M期细胞比例分别增高2.9%和6.7%，表明EGF具有促进细胞周期的作用。与AA-Ⅰ组相比，无论预先(preEGF)、同时(EGF)或刺激后(postEGF)加入EGF，AA-Ⅰ所致的细胞增殖抑制现象并没有得到改善，也未能明显改善其导致的细胞周期异常。结论：AA-Ⅰ(10 mg·L^-1)能够显著抑制损伤后存活HK-2细胞的增殖，使细胞周期阻滞于G₂/M期；外源性EGF(20 μg·L^-1)能够明显促进正常细胞增殖，但不同时机加入EGF均不能改善AA-Ⅰ所致的细胞增殖抑制作用。     

参乌胶囊对微泵恒速灌注叠氮钠致痴呆大鼠行为学及胆碱能系统的影响

该研究的目的是利用线粒体细胞色素C氧化酶抑制剂叠氮钠致痴呆动物模型,观察参乌胶囊对模型大鼠学习记忆障碍的改善作用及其机制.应用SD大鼠皮下埋植Alzet微泵,连续恒速给予叠氮钠(1 mg· kg-1·h-1)共30 d造模.手术后24 h开始给药,参乌胶囊低、中、高剂量组(干粉0.45,0.9,1.8g· kg-1)每日灌胃给药1次.应用水迷宫、避暗试验检测动物学习记忆能力.放射免疫法测定大脑皮层和海马胆碱乙酰基转移酶(ChAT)活性,羟胺比色法检测乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,放射配基结合试验测定M-胆碱能受体结合力.结果显示,微泵恒速灌注叠氮钠导致模型大鼠水迷宫游出时间及距离延长,避暗潜伏期缩短、错误次数增加.模型大鼠大脑皮层和海马ChAT活性降低,海马区AChE活性升高,皮层和海马M-胆碱能受体结合力明显下降.参乌胶囊灌胃给药能够明显减少模型大鼠水迷宫游出时间及距离,延长避暗潜伏期、减少错误次数;并且降低模型大鼠脑内AChE活性,升高ChAT活性及M-胆碱能受体结合力.实验结果表明,参乌胶囊明显改善线粒体缺陷致痴呆模型大鼠学习记忆能力,其药理作用机制与改善脑内胆碱能系统功能相关.提示参乌胶囊可干预线粒体缺陷这一AD早期的病理改变,进而拮抗其后出现的AD特征性病理变化,对于AD的治疗具有重要的应用价值.     

绞股蓝皂苷A通过调节线粒体功能改善ox-LDL诱导的EA.hy926细胞损伤的机制研究

目的探讨绞股蓝皂苷A(GpA)通过保护线粒体功能对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导过后血管内皮细胞(ECs)(EA.hy926)损伤的保护作用。方法采用ox-LDL诱导ECs(EA.hy926)损伤模型,GpA组予GpA处理24 h。使用Elisa法检测ATP含量;使用紫外分光光度法检测线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、复合物Ⅱ、复合物Ⅲ、复合物Ⅳ及复合物Ⅴ活性发生的变化;同时应用免疫印迹(Western Blotting)检测视神经萎缩蛋白1(OPA1)以及线粒体分裂蛋白1(Fis1)表达的变化情况。结果与正常组对比,模型组的ATP含量降低,与模型组对比GpA组的ATP含量升高。与正常组对比,模型组的呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ的活性有明显的降低。与模型组对比GpA组的呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ的活性有所升高。与正常组对比,模型组Fis1的表达发生了上调,与模型组对比GpA组Fis1的表达发生了下调。与正常组对比模型组OPA1的表达发生了下调,与模型组对比GpA组OPA1的表达发生了上调。结论 GpA可能通过影响线粒体能量代谢及融合裂解对ox-LDL诱导的EA.hy926发挥保护作用进而防治动脉粥样硬化(AS)。     

川芎嗪在逆转心肌细胞肥大过程中对心肌细胞线粒体结构和功能的影响

目的探讨心肌肥大过程中有关心肌细胞线粒体结构和功能的改变,以及川芎嗪的保护作用。方法提取和培养乳鼠心肌细胞,并与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)共培养72、96h。通过BCA法检测细胞总蛋白含量,倒置显微镜拍摄并测量细胞直径,反映心肌细胞增殖情况;通过荧光显微镜测量线粒体内膜膜电位,酶标仪检测线粒体单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)活性,分光光度计检测线粒体细胞色素C氧化酶(cytochromec oxidase,COX)活性和线粒体损伤百分率等反映心肌细胞线粒外膜结构和内外膜功能的损伤。在此基础上给予川芎嗪与对照药缬沙坦,分析其对心肌细胞重构中线粒体结构和功能的药理作用。结果在72、96h时,模型组较空白组心肌细胞总蛋白含量均增加(P<0.01),心肌细胞直径均增大(P<0.01)。在该增殖过程中,心肌细胞MAO活性和线粒体外膜损伤百分率均显著升高(P<0.01),COX线粒体细胞活性和线粒体膜电位均显著减低(P<0.01)。与模型组同期比较,川芎嗪在72、96h时能显著减少心肌细胞总蛋白质含量及心肌细胞直径,并显著降低心肌细胞MAO活性,提高线粒体COX活性,改善线粒体外膜损伤百分率和内膜膜电位,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论在心肌肥大过程中,存在线粒体的结构和功能的损害;川芎嗪在逆转AngⅡ所引起的心肌细胞肥大的过程中具有保护心肌细胞线粒体结构和功能的作用。     

左（口）右（山）酮对大鼠心肌线粒体氧化损伤的保护作用

 目的 研究3种穿心草左（口）右（山）酮(xanthone,Xan)对心肌线粒体氧化损伤的保护作用。方法 采用抗坏血酸和硫酸亚铁为线粒体损伤诱导剂,探讨Xan对线粒体的膨胀、脂质过氧化及膜流动性的影响。结果 3种Xan不同程度地减少受伤线粒体的膨胀作用及阻止脂质过氧化的形成,增加膜脂质流动性,维护线粒体结构和功能的完整,作用强度依次为Xan-Ⅰ＞Xan-Ⅲ＞Xan-Ⅱ。结论 3种Xan对心肌线粒体氧化损伤均有不同程度的保护作用,作用机制可能与其清除自由基、抗脂质过氧化作用有关,而左（口）右（山）酮活性强弱可能与其苯环上酚羟基和甲氧基的数量及位置相关。     

黄芪皂苷Ⅳ对急性心肌梗死大鼠心肌胶原含量的影响

 目的研究黄芪皂苷Ⅳ(xylose-glucose-cyclo-astragenol,XGA)对急性心肌梗死(MI)大鼠心肌胶原代谢的影响及机制。方法125只Wistar大鼠随机分组,其中108只手术结扎左冠状动脉(手术组),存活者随机分为缺血组(8只)和XGA组(64只);9只列入假手术组(8只存活),8只列入正常组。给予XGA组不同剂量和不同作用时间的XGA,观察血清Ⅲ型前胶原氨基端肽(P-Ⅲ-NP)、Ⅰ型前胶原羧基端肽(Ⅰ-CTP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和内皮素(ET)的变化,Masson染色观察心肌组织胶原情况,免疫组化法观察心肌组织MMP-2、MMP-9及TIMP-1的表达。结果缺血组大鼠血清P-Ⅲ-NP、Ⅰ-CTP、AngⅡ及ET的含量均明显高于正常组和假手术组(P<0.01),心肌缺血区和非缺血区的MMPs/TIMP比值则明显下降(P<0.01)。给予不同剂量XGA后,除0.5mg·kg^-1剂量组外,其余各组血清P-Ⅲ-NP、Ⅰ-CTP、AngⅡ、ET含量均较缺血组明显下降(P<0.05),同时5和10mg·kg^-1剂量组心肌MMPs/TIMP比值较缺血组明显增加;且上述变化与XGA剂量呈剂量依赖性。给予缺血大鼠XGA10mg·kg^-1,除血清ET水平和心肌MMPs/TIMP比值在治疗7d后与缺血组变化不大外(P>0.05),其余各组血清指标较缺血组明显下降(P<0.01),心肌MMPs/TIMP比值较缺血组明显增加(P<0.01),且上述变化与XGA用药时间呈时间依赖性。结论XGA可减少心肌胶原合成,增加心肌胶原降解,且具有一定的量效和时效关系。     

清肺口服液对人喉癌细胞感染呼吸道合胞病毒后ICAM-1表达水平的影响

目的探讨清肺口服液对人喉癌细胞（Hep-2）感染呼吸道合胞病毒（RSV）后细胞间黏附分子-1（I-CAM-1）表达水平的影响。方法分时段以清肺口服液含药血清,利巴韦林含药血清及空白血清干预RSV感染的体外培养的Hep-2细胞,48h时及72h后收集各组细胞上清,采用酶联免疫吸附试验法（ELISA法）测定各组人喉癌细胞ICAM-1表达变化。结果 48h时及72h后病毒模型组ICAM-1的表达明显高于清肺口服液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组及利巴韦林Ⅱ、Ⅲ组;空白血清组与病毒模型组无显著差异。清肺口服液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组与利巴韦林Ⅱ、Ⅲ组比较,无显著差异。清肺口服液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组之间比较,无显著差异。72h后各组ICAM-1的表达与48h相比,无显著差异。结论清肺口服液可降低Hep-2感染RSV后ICAM-1的过度表达,减轻炎症反应,提前给药更可获得良好的效果,这可能是清肺口服液抗病毒的机制之一。     

高胆固醇血症在阿尔兹海默病发生中的作用及藏药柳茶提取物的治疗效应

目的:观察高胆固醇血症在阿尔兹海默病(AD)发生中的作用及藏药柳茶提取物的疗效。方法:SD大鼠随机分为:Ⅰ正常对照组、ⅡAD模型组、Ⅲ高胆固醇血症合并AD组、Ⅳ柳茶治疗组。观察动物一般情况;检测血清和脑组织匀浆中总胆固醇含量;观察海马及皮层组织神经元纤维缠结、β淀粉样蛋白沉积及神经元丢失情况;检测脑组织中胆固醇代谢关键酶APOE、CYP46a1的表达及tau蛋白磷酸化水平。结果:Ⅳ组动物精神状态显著好于Ⅱ、Ⅲ组。Ⅱ组血清胆固醇含量与正常对照组无显著性差异,Ⅲ组显著高于Ⅱ组(P0.05);Ⅳ组含量低于Ⅲ组。与Ⅰ组相比Ⅱ、Ⅲ组脑胆固醇含量显著升高,Ⅲ组更为明显;柳茶治疗后Ⅳ组脑胆固醇水平下降,与Ⅲ组相比有显著性差异(P0.05)。Ⅱ组APOE mRNA表达量增加,与Ⅰ组相比P0.01,而Ⅲ组表达量高于Ⅱ组,Ⅳ组表达量则下降至接近正常水平。Ⅱ、Ⅲ组CYP46a1mRNA表达量均显著少于正常对照组(P0.01),经柳茶治疗后Ⅳ组表达量显著升高(P0.01)。与Ⅰ组相比Ⅱ、Ⅲ组tau磷酸化水平升高,尤以Ⅲ组更为明显,Ⅳ组则有所降低。结论:高胆固醇血症能促进AD的发生发展,柳茶提取物可有效降低AD动物血和脑中胆固醇含量,改善脑组织中病理形态学变化。其作用机制可能与调节APOE和CYP46a1mRNA的表达有关。     

女贞子对正常大鼠肝脏COX活性的影响及其DNA甲基化调节机制的初步研究

探讨女贞子对大鼠肝脏细胞色素c氧化酶(cytochrome c oxidase,COX)活性的影响及可能的DNA甲基化机制。实验采用女贞子的水提物按2.0 g·kg~(-1)和6.0 g·kg~(-1)灌胃大鼠30 d,处死大鼠后,取肝脏测定COX活性、COX的亚基之一COX4I1蛋白浓度、测定Cox4i1,Dnmt3a,Tet1基因mRNA表达水平、TET1和DNMT3A的蛋白水平以及检测Cox4i1DNA甲基化频率。结果显示女贞子低剂量和高剂量能显著性升高COX的活性和COX4I1的浓度(P0.05);有降低TET1蛋白和DNMT3A的蛋白表达量的趋势;但未显著改变Cox4i1,Dnmt3a,Tet1基因mRNA表达。与空白对照组相比,女贞子高剂量组甲基化频率有降低的趋势但未达到显著水平。该研究表明:女贞子对大鼠肝脏的COX酶活性有促进作用,其可能通过促进COX4I1的蛋白量增加实现;女贞子对DNMT3A的蛋白表达有降低趋势,其可能是Cox4i1DNA甲基化频率有降低趋势的原因。女贞子对于DNMT3A和TET1的蛋白表达可能有同向调节作用,具体机制仍不明确。     

川芎嗪、缬沙坦及曲美他嗪对乳鼠肥大心肌细胞线粒体结构和能量代谢的影响

目的通过大鼠原代心肌细胞培养,探讨心肌肥大过程中有关心肌细胞线粒体结构和功能的病理改变以及川芎嗪、缬沙坦和曲美他嗪对其的药理作用。方法分离和培养大鼠原代心肌细胞,并与血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）共培养72h、96h。BCA法检测细胞总蛋白含量,倒置显微镜拍摄并测量细胞直径,反映心肌细胞增殖情况;荧光显微镜测量线粒体内膜膜电位（ΔΨm）、酶标仪检测线粒体单胺氧化酶（MAO）活性、分光光度计检测线粒体细胞色素C氧化酶（COX）活性和线粒体损伤百分率,高效液相色谱法检测心肌细胞内ATP、ADP、AMP含量,反映心肌细胞线粒体结构和功能的损伤情况。在此基础上给予川芎嗪、缬沙坦和曲美他嗪,观察对心肌细胞重构中线粒体结构和功能的药理作用。结果在细胞肥大过程中,心肌细胞MAO活性和线粒体外膜损伤百分率均显著升高（P〈0.01）,线粒体COX活性和线粒体ΔΨm均显著减低（P〈0.01）,ATP、ADP含量显著减少（P〈0.01）,AMP含量显著增加（P〈0.01）。川芎嗪能抑制AngⅡ引起的心肌细胞蛋白质合成增加和细胞直径增大,改善线粒体外膜损伤,提高线粒体内膜膜电位及COX活性,降低MAO活性（72h时P〈0.01,96h时P〈0.05）,增加ATP、ADP含量、降低AMP含量。缬沙坦能抑制AngⅡ引起的心肌细胞蛋白质合成增加和细胞直径增大,改善线粒体外膜损伤,提高线粒体内膜膜电位（P〈0.05）及MAO活性（72h时P〈0.01,96h时P〈0.05）,增加ATP、ADP含量、降低AMP含量（P〈0.01）。曲美他嗪能在72h升高线粒体膜电位（P〈0.05）,增加ATP、ADP含量（P〈0.05）。结论在心肌肥大过程中,存在线粒体结构和功能损害。川芎嗪和缬沙坦在逆转心肌细胞肥大过程中具有保护心肌细胞线粒体结构和功能的作用,曲美他嗪无显著逆转心肌细胞重构作用,对能量代谢的改善作用亦有限。     

银杏叶提取物对肝纤维化大鼠肝脏TGF-β1及其受体表达的影响

目的:观察银杏叶提取物(GbE)对肝组织TGF-β1及其受体表达的影响。方法:采用CCl4诱导大鼠肝纤维化,同时分别以200、100、50mg/kg.d的GbE进行干预,6周后取肝组织,采用免疫组化法测定肝组织TGF-β1及其受体TβRⅠ、Ⅱ、Ⅲ蛋白的表达。结果:模型大鼠肝组织TGF-β1及其受体TβRⅠ、Ⅱ、Ⅲ蛋白表达较正常组明显增高,GbE各剂量组肝组织TGF-β1及其受体表达也较模型组显著下降。结论:GbE可能通过降低TGF-β1及其受体的表达,抑制CCl4诱导的大鼠肝纤维化的发生及发展。