醒脑静注射液对大鼠脑出血模型血脑屏障通透性及相关蛋白的影响

目的 观察醒脑静注射液对脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)大鼠血脑屏障通透性及其相关蛋白表达的影响。方法 将27只雄性SD大鼠随机分为假手术组9只和模型组18只,采用右侧尾状核微量注射胶原酶Ⅶ的方法制备大鼠脑出血模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组和醒脑静组,每组9只。连续给药3天后,采用伊文思蓝(evens blue,EB)法观察各组大鼠血脑屏障通透性;透射电镜观察脑组织的超微结构并分析计算星形胶质细胞足突的水肿面积;免疫组化法检测脑组织水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测脑组织AQP4、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、闭合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白(tight junction protein,ZO-1)的表达。分别比较假手术组与模型组、模型组与醒脑静组血脑屏障的EB渗透程度、足突水肿面积以及血脑屏障相关蛋白的表达。结果(1)与假手术组相比,模型组大鼠脑出血后血脑屏障EB渗透性增加;与模型组相比,醒脑静组大鼠脑组织血脑屏障EB渗透性降低。(2)与假手术组相比,模型组大鼠脑组织中星形胶质细胞足突水肿面积明显增加,星形胶质细胞和血管内皮细胞结构明显被破坏,AQP4、VEGF蛋白表达升高(P 0. 05);与模型组相比,醒脑静组大鼠脑出血后脑组织水肿减轻,星形胶质细胞以及血管内皮细胞的结构有所改善,AQP4、VEGF蛋白表达显著降低(P 0. 05)。(3)与假手术组相比,模型组大鼠脑组织Occludin、ZO-1表达降低(P 0. 05);与模型组相比,醒脑静组大鼠脑组织Occludin、ZO-1蛋白表达升高(P 0. 05)。结论 醒脑静注射液可通过减轻星形胶质细胞足突水肿,改善血脑屏障结构和相关蛋白表达,降低血脑屏障通透性可能是其减缓脑出血后脑组织损伤的作用机制。     

对羟基苯甲醇对MCAO/R模型大鼠血脑屏障的保护作用研究

目的:研究天麻酚性成分对羟基苯甲醇(4-hydroxybenzyl alcohol)对血脑屏障的保护作用。方法:雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、对羟基苯甲醇20mg/kg组、对羟基苯甲醇10mg/kg组。采用线栓法复制大鼠脑缺血再灌注(MCAO/R)模型,通过神经学评分观察大鼠神经功能缺失症状;采用伊文思蓝渗透法观察血脑屏障通透性;运用Western Blot技术检测血脑屏障相关蛋白AQP-4、Claudin-5及Occludin的表达。结果:大鼠脑缺血2h再灌注24h后,对羟基苯甲醇20mg/kg、10mg/kg均对模型大鼠的神经功能缺失症状具有改善作用,能够降低缺血侧脑组织中伊文思蓝的含量,降低AQP-4蛋白的表达,对紧密连接蛋白(Claudin-5、Occludin)的表达无明显影响。结论:天麻酚性成分对羟基苯甲醇对大鼠脑缺血再灌注损伤后血脑屏障具有保护作用,作用机制可能与其降低AQP-4蛋白的表达有关。     

脑疏宁对创伤性脑损伤大鼠脑组织MMP-2/9表达的影响

目的:观察中药脑疏宁对创伤性脑损伤大鼠基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响。方法:采用免疫组化方法检测脑组织MMPs蛋白的表达,测定脑组织含水量及伊文思蓝(EB)含量,电镜下观察血脑屏障超微结构改变。结果:创伤组大鼠伤侧脑组织含水量、伊文思蓝(EB)含量及伤灶周围基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平均明显高于假手术组(P<0.01);血脑屏障结构破坏。脑疏宁组脑组织含水量、EB含量及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平均明显低于创伤组(P<0.05,P<0.01);血脑屏障结构较为完整。结论:脑疏宁可通过改善血脑屏障损伤减轻创伤性脑水肿,其保护血脑屏障的作用可能是通过抑制MMP-2和MMP-9蛋白表达实现的。     

局灶性脑缺血模型病理学改变及复方白术颗粒对其影响

目的:阐述局灶性脑缺血动物模型病理学改变及药物对其影响。方法:采用单侧大脑中动脉热凝闭法建立大鼠急性脑缺血模型。HE、Luxol 坚牢蓝 PAS 染色,光镜及电镜超微结构观察,并观察复方白术颗粒对大鼠实验性缺血性脑损伤的影响。结果:动物模型脑缺血区光镜可见神经细胞呈缺血性改变;电镜下神经元、神经纤维、神经突触及血脑屏障有不同程度病理改变;复方白术颗粒可减轻其损伤程度,同时减轻血脑屏障星形细胞足突、神经元胞浆及神经轴突、树突水肿。结论:建立了稳定的 Wistar 大鼠脑缺血动物模型,光镜、电镜有肯定的病理改变,复方白术颗粒对其缺血脑组织有保护作用。     

藏荆芥提取物对脑出血大鼠AQP-4及NGF表达的影响

目的:研究藏荆芥提取物治疗脑出血模型大鼠脑水肿和脑血肿的作用,并探讨其可能的机制。方法:采用胶原酶注射尾状核法建立脑出血大鼠模型,随机分为正常组、假手术组、模型组、藏荆芥高、中、低剂量(6.4,3.2,1.6 g·kg~(-1))组、尼莫地平组。各组大鼠自给药开始计时,7 d后观察大鼠行为,通过Longa评分法对各组大鼠进行神经行为学评分;之后处死大鼠,取大鼠出血侧大脑半球测定湿重,烘干后测定干重,通过多田公式计算大鼠脑含水量;取大鼠脑组织并制作成切片,观察切片测定大鼠的脑血肿体积;并采用免疫荧光法检测大鼠脑部的水通道蛋白-4(aquaporin-4,AQP-4)和神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的表达情况。结果:藏荆芥提取物可以明显减轻脑出血大鼠的神经行为学评分(P0.05,P0.01),藏荆芥大剂量组可以明显减轻脑水肿(P0.05,P0.01),但对血肿的清除并无明显作用。与模型组比较,藏荆芥使大鼠脑部AQP-4的表达显著降低以及NGF的表达明显增加(P0.05)。结论:藏荆芥提取物能改善脑出血模型大鼠的神经行为,有减轻脑出血模型大鼠脑水肿的作用,藏荆芥通过抑制大鼠脑部AQP-4的表达,促进NGF的表达,从而治疗大鼠的脑出血。     

心脑通络液对MCAO大鼠脑水含量及AQP-4蛋白表达的影响

目的:研究心脑通络液对MCAO大鼠脑水含量及AQP-4蛋白表达的影响,探讨其对减轻缺血性脑损伤后脑水肿抑制机制,为心脑通络液的临床应用开发提供理论依据。方法:将健康SD大鼠随机分成5组。用线栓法制备MCAO大鼠模型,分别在造模成功后24h和7d实验。采用干湿比重法进行脑组织含水量测定;采用免疫组化法检测脑组织AQP-4蛋白表达。结果:心脑通络液能显著降低大鼠脑缺血后脑组织含水量,减轻缺血导致的脑组织水肿;心脑通络液各剂量组对缺血24h和7d脑组织中AQP-4蛋白表达有不同程度降低,尤以心脑通络液高剂量组表现最为明显。结论:心脑通络液能够显著降低脑组织含水量,减轻脑组织水肿;心脑通络液能通过抑制脑组织AQP-4蛋白表达,减轻脑水肿,保护血脑屏障,起到脑保护的作用。     

黄芪多糖对C17.2神经干细胞定向分化的调控作用

目的:观察黄芪多糖(APS)对C17.2神经干细胞体外定向分化的调控作用。方法:建立C17.2神经干细胞的体外培养体系及分化模型,设置APS干预组及PBS对照组。诱导分化4 d后通过细胞免疫荧光染色的方法检测2组细胞中神经干细胞的标志性蛋白巢蛋白(Nestin)、星形胶质细胞的标志性蛋白胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、少突胶质细胞的标志性蛋白髓鞘碱性蛋白(MBP)及神经元的标志性蛋白神经元特异性核心抗原(NeuN)的表达水平。结果:与PBS对照组比较,APS干预组细胞的Nestin及GFAP蛋白表达水平明显下调,MBP及NeuN蛋白表达水平明显上调差异有统计学意义(P 0.05)。APS下调了分化模型中的细胞Nestin蛋白的表达水平;APS下调了GFAP蛋白的表达水平,上调了MBP及NeuN蛋白的表达水平。结论:APS可抑制C17.2神经干细胞向星形胶质细胞的定向分化,促进向少突胶质细胞及神经元的定向分化,APS可抑制C17.2神经干细胞的干性维持,促进其进入分化状态,有可能成为治疗神经退行性疾病的潜在药物。     

醒脑静注射液保护大鼠脑缺血-再灌注损伤及血脑屏障的作用研究

目的:对醒脑静注射液通过改善血脑屏障的通透性进而保护大鼠脑缺血-再灌注损伤的作用进行研究。方法:采用大脑中动脉阻塞法(MACO)建立大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤模型,以神经功能评分、脑梗死体积和脑组织形态学综合评价10、15 mL/kg醒脑静注射液腹腔注射对大脑缺血-再灌注损伤的保护效应,通过静脉注射伊文思蓝考察醒脑静注射液对大鼠血脑屏障通透性的影响,采用免疫组化和Western blot考察脑紧密连接蛋白ZO-1的表达。结果:经神经功能评分、梗死体积分析及HE染色分析脑组织形态学特征,表明以10、15 mL/kg剂量醒腹腔注射脑静注射液能显著减轻大鼠脑缺血-再灌注的损伤,对血脑屏障通透性考察发现醒脑静注射液组大鼠脑内伊文思蓝含量显著低于模型组,且脑紧密连接蛋白ZO-1表达显著高于模型组。结论:醒脑静注射液能逆转大鼠脑缺血-再灌注损伤对血脑屏障的破坏,降低血脑屏障通透性,从而减轻脑组织在缺血-再灌注中的损伤。     

脉络宁对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响研究

目的研究脉络宁(玄参、牛膝、石斛、金银花等)对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响,初步探讨其可能的机制。方法 72只成年健康雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,依达拉奉对照组,脉络宁高、中和低剂量组。脑缺血再灌注大鼠模型采用线栓法阻断大脑中动脉缺血2 h后再灌注24 h的方式建立。TTC法测定脑梗死体积;伊文思蓝法检测血脑屏障通透性;Western blot法检测脑微血管内皮细胞紧密连接相关蛋白紧密连接蛋白-1和闭合蛋白的表达。结果脉络宁能显著降低缺血再灌注大鼠脑梗死体积,明显降低血脑屏障通透性,可使紧密连接蛋白-1和闭合蛋白的表达增加。结论脉络宁可降低脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性的机制可能与上调脑微血管内皮细胞间连接蛋白紧密连接蛋白-1和闭合蛋白的表达有关。     

补阳还五汤对大白鼠血脑屏障影响的实验研究

观察补阳还五汤对百日咳菌液致大白鼠急性脑水肿时血脑屏障(BBB)与细胞超微结构的影响。结果表明,补阳还五汤可明显地减少脑水肿时鼠脑组织蛋白、Evan′s Blue含量,显著减轻脑组织的蓝染范围与程度,轻度减轻左侧大脑皮质脑毛细血管周围星形胶质细胞突与神经元内线粒体水肿,显著减少脑毛细血管内皮细胞(VEC)内吞饮小泡的转运,右侧脑组织含水量亦较对照组显著地减少(p<0.05)。提示补阳还五汤有保护VEC与BBB的功能。     

茅莓总皂苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑水肿及血-脑脊液屏障变化的影响

目的：研究茅莓总皂苷(TSRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑水肿及血脑屏障通透性的影响。方法：采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,在大鼠脑缺血2 h再灌注6,24,48,72 h分别测定脑含水量和伊文思蓝含量的变化及茅莓总皂苷各剂量组的影响。结果：与模型组比较茅莓总皂苷各剂量组均能不同程度降低脑含水量和伊文思蓝含量。结论：茅莓总皂苷各剂量组显著降低缺血2h再灌注6,24,48,72 h脑水肿和其对血脑屏障通透性,这可能是其减轻I/R时脑水肿的机制之一。     

下法对脑出血大鼠神经细胞凋亡的影响

目的：探讨中医下法对实验性脑出血大鼠神经凋亡细胞的保护作用。方法：雄性SD大鼠随机分为对照组、脑出血组、大黄治疗组、番泻叶治疗组,采用自体血缓慢注射法制作大鼠急性脑出血（intracerebral hemorrhage,ICH）模型,观察大鼠神经症状评分和脑组织病理学改变,以及大黄、番泻叶对神经细胞凋亡影响。结果：①脑出血组、大黄治疗组、番泻叶治疗组的神经症状评分较对照组大鼠显著增高（P〈0．01）;大黄治疗组、番泻叶治疗组较脑出血组显著降低（P〈0．01）;大黄治疗组较番泻叶治疗组显著降低（P〈0．05）。②病理观察结果显示：脑出血组、大黄治疗组、番泻叶治疗组脑组织均发生了不同程度的损伤,大黄治疗组、番泻叶治疗组与脑出血组比较,脑组织病理损伤减轻,正常神经元细胞数目显著增加。（3）大黄治疗组、番泻叶治疗组发生表达的TUNEL阳性细胞较脑出血组均显著减少（P〈0．05）。结论：中医下法对实验性脑出血损伤神经细胞凋亡具有神经保护作用。     

续命汤对局灶性脑缺血中风大鼠紧密连接相关蛋白（Zo-1）和水通道蛋白4（AQP4）mRNA表达的影响

目的：观察续命汤对局灶性脑缺血中风大鼠紧密连接相关蛋白（Zo-1）和水通道蛋白4（AQP4）mR-NA表达的影响。方法：将清洁级SD大鼠分为分假手术组、模型组、尼莫地平组、续命汤低剂量组、中剂量组、高剂量组6组,通过栓线法制备局灶性脑缺血中风大鼠模型,观察并记录SD大鼠造模后神经功能评分、免疫组化法检测脑缺血大鼠脑组织紧密连接相关蛋白（Zo-1）和水通道蛋白4（AQP4）mRNA表达。结果：造模后大鼠神经行为学评分显著升高,Zo-1蛋白阳性表达降低,AQP4mRNA的表达增加,续命汤各治疗组能拮抗以上作用,以续命汤中、高剂量组为显著,其疗效优于或与尼莫地平组相当。结论：续命汤能减少Zo-1蛋白的损失,维持紧密连接复合体结构的完整性,抑制AQP4mRNA的过度释放与表达,减轻脑缺血和水肿,进而实现保护血脑屏障的作用。     

中风康对局灶性脑缺血大鼠脑组织AQP-4 mRNA表达的影响

目的探讨中风康对局灶性脑缺血大鼠脑组织水通道蛋白mRNA(AQP-4mRNA)表达的影响.方法采用线栓法复制局灶性脑缺血大鼠模型,于脑缺血12,24,48,72,96 h观察模型大鼠AQP-4 mRNA表达的动态变化,并在脑缺血48 h观察中风康对AQP-4 mRNA表达及脑水肿的影响.结果与假手术组比较,局灶性脑缺血12h,模型组脑组织AQP-4 mRNA表达开始增加,至72 h达到高峰(P＜0.01),与48 h模型组比较,各治疗组脑组织AQP-4 mRNA表达和脑组织含水量均有不同程度降低(P＜0.05或P＜0.01).结论中风康可降低脑梗塞大鼠脑组织AQP-4 mRNA表达,减轻脑水肿.     

脑清喷鼻微乳对急性脑梗死大鼠 血脑屏障通透性影响及其机制

目的: 观察脑清喷鼻微乳对急性脑梗死大鼠血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)超通透性影响及其相关分子机制。方法: 采用自身栓子法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO),筛选后随机分为对照组、模型组、脑清喷鼻微乳组,并给予药物干预。脑清喷鼻微乳组予脑清喷鼻微乳0.19 mL·kg^-1(相当于含麝香酮0.011 mg·kg^-1)滴鼻给药,每日3次,对照组与模型组给予相同时间点等量生理盐水滴鼻。每组于1,3,7 d 3个时相对大鼠进行神经功能缺损评分后,取材观察各时相大鼠大脑皮质缺血区神经元及内皮细胞形态,检测伊文思蓝(EB)、紧密连接蛋白-1(zonula occludins protins-1,ZO-1)、层黏连蛋白(laminin,LN)及水通道蛋白-4(aquaporin protein-4,AQP-4)含量。结果: 与同一时相正常组相比,模型组Bederson's评分、EB及AQP-4蛋白含量明显升高(P<0.05),ZO-1、Laminin蛋白含量显著降低(P<0.05),神经元坏死较多及内皮细胞损害严重。与同一时相模型组相比,脑清喷鼻微乳组Bederson's评分、EB及AQP-4蛋白含量明显降低(P<0.05),ZO-1,Laminin蛋白含量显著升高(P<0.05),神经元存活率较高及内皮细胞损害较轻。同组内不同时相相比较,脑清喷鼻微乳组Bederson's评分、EB及AQP-4蛋白含量逐渐降低(P<0.05),ZO-1蛋白含量逐渐升高(P<0.05),Laminin蛋白含量3 d后逐渐升高(P<0.05),1 d时神经元及内皮细胞水肿最严重,7 d时神经元变性坏死最多,内皮细胞基膜及细胞器缺损最为严重。结论: 脑清喷鼻微乳通过调控血脑屏障(BBB)3层结构中的主要蛋白ZO-1,Laminin及AQP-4蛋白的含量,调节BBB通透性,保护BBB结构及功能的完整性,减少神经元凋亡,减轻可逆性神经元损伤,促进神经功能的恢复。     

电针调控AQP4、ZO-1的表达对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响＊

目的 探讨电针“水沟穴”、“百会穴”是否可以通过调控AQP4、ZO-1的表达从而减轻脑缺血再灌注大鼠血脑屏障损伤。方法 选用健康的雄性SD大鼠随机分为5组：正常对照组（NC）、MCAO模型组（M）、电针组（EA）、AQP4 siRNA组（siRNA）和空载质粒组（EP）。采用改良后的Longa线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型，电针组于模型构建成功后5 min针刺大鼠的“水沟穴”和“百会穴”，并接电针，AQP4 siRNA组和空载质粒组右侧脑室缓慢注入AQP4 siRNA表达质粒和不含AQP4 siRNA的空载质粒。采用神经功能缺损评分观察各组大鼠神经功能缺损程度，CV染色法测定各组大鼠脑半球肿胀率及脑水肿情况，Western blot技术测定各组大鼠AQP4、ZO-1蛋白含量，RT-PCR测定各组大鼠AQP4、ZO-1mRNA含量。结果 与NC组相比较，M组及EP组大鼠神经功能缺损程度及脑水肿程度较重，AQP4蛋白及mRNA表达明显上升，ZO-1蛋白及mRNA表达明显下降；与M组及EP组相比较，EA组及siRNA组大鼠神经功能缺损程度及脑水肿程度较轻，AQP4蛋白及mRNA表达显著下降，ZO-1蛋白及mRNA表达显著上升。结论 电针可以有效抑制AQP4的表达及ZO-1的降低，从而改善血脑屏障的损伤，减少脑水肿的产生，促进神经功能恢复。调控AQP4、ZO-1的表达可能是电针“水沟穴”和“百会穴”改善脑缺血再灌注后脑水肿及血脑屏障损伤的作用机制之一。     

H NMR-based metabonomic analysis of the effect of optimized rhubarb aglycone on the plasma and urine metabolic fingerprints of focal cerebral ischemia–reperfusion rats

Ethnopharmacological relevance

The ischemia cerebrovascular disease is one of leading causes of death and long-term disability in modern society. Rhubarb is one of the common traditional Chinese medicine with many effects, and the main pharmacodynamic ingredients are aloe-emodin, rhein, emodin, chrysophanol and physcion. The five components are also known as rhubarb aglycone. Rhubarb aglycone has been confirmed to play a remarkable curative effect on cerebral ischemia, but the mechanism is not clear. In this study, ¹H NMR-based metabonomics approach has been used to investigate the protective effect of the optimized rhubarb aglycone on rats of cerebral ischemia–reperfusion.

Materials and methods

Male Wistar rats were divided into four groups: sham operation group, model group, Nimodipine group and the optimized rhubarb aglycone group. Based on ¹H-NMR spectra of plasma and urine, principal component analyses were performed to identify different metabolic markers and explore the changes of associated biochemical pathways. Behavior research and brain histopathology examinations were also performed.

Results

It was showed that the optimized rhubarb aglycone treatment improved neurological deficits, cerebral infarction and neuronal apoptosis. Principal component analysis scores plots demonstrated that the cluster of model rats was separated from those of sham operation group; rats of the optimized rhubarb aglycone group were classified from model group, but the optimized rhubarb aglycone group closed to the sham operation group. Optimized rhubarb aglycone regulated the associated amino acid, energy and lipid metabolisms disturbed in model rats.

Conclusion

Our results suggested that the optimized rhubarb aglycone had protective effect on rats of cerebral ischemia–reperfusion and explored the metabolic regulation mechanism. This work showed that the NMR-based metabonomics approach might be a promising approach to study mechanisms of traditional Chinese medicines.     

大黄对正常和烧伤小鼠肠道免疫分泌的影响

目的观察小鼠烧伤前后肠道免疫分泌的变化和大黄汤治疗对正常小鼠和烧伤小鼠肠道免疫分泌的促进作用;探讨大黄保护肠粘膜屏障的作用机理.方法实验用BALB/c小鼠.分为4组1组为对照组(n＝8);2组为正常小鼠饲喂10%大黄液12ml/kg,每6h1次(n＝11);3组为30%的全厚背部皮肤烧伤,不治疗(n＝7);4组为全厚皮肤烧伤,同3组,大黄治疗同2组(n＝9).24h后处死动物,灌洗肠道,收集肠液透析离心后作IgA检测和总蛋白,补体C3,高密度脂蛋白(HDL)测定.结果1、2、3和4组小鼠肠液中的IgA(mg/L)分别为93.5±13.7、150.8±44.6、43.4±21.5及59.8±19.3,说明在烧伤后肠液中IgA明显减少(P＜0.05).而应用大黄汤治疗后,无论正常小鼠和烧伤小鼠的肠道IgA均增加(P＜0.05),其他免疫相关物质如总蛋白、补体C3和HDL大黄治疗后也有显著增加.结论烧伤后小鼠肠液中的IgA明显减少.而大黄无论对正常小鼠和烧伤小鼠均具有明显的促进肠道免疫分泌的效果.这一作用是大黄的粘膜屏障保护作用的重要机制之一.     

大黄苷元联合溶栓对血栓栓塞性脑缺血大鼠微血管基底膜损伤的保护作用

目的:从大黄苷元联合尿激酶溶栓对脑缺血大鼠脑组织IgG,IV型胶原(CoLIV)和层粘蛋白(LN)变化的影响方面探讨其对脑缺血微血管基底膜损伤的保护作用。方法:大鼠随机分组,制备血栓栓塞性脑缺血动物模型,大鼠分别于缺血后3,6,9 h经导管由区域动脉溶栓;动脉给药后24 h,观察大鼠死亡率和脑组织颅内出血率,测定脑组织IgG,CoLIV和LN。结果:脑缺血9 h溶栓可引起大鼠死亡率和脑出血率增高,联合用药可使其降低。模型6 h和9 h组大鼠脑组织IgG水平增高、CoLIV和LN表达降低;各用药9 h组较模型组IgG降低、CoLIV和LN表达增强;联合用药9 h组分别较两单一用药组IgG降低、CoLIV和LN表达增强。结论:脑缺血延迟溶栓可造成脑微血管基底膜损伤,引起颅内出血率和死亡率增高;大黄苷元联合溶栓对微血管基底膜损伤具有保护作用,可降低溶栓后的颅内出血率和死亡率。