三仁汤对肝纤维化模型大鼠血清炎症因子及血小板衍生生长因子的影响※

目的 观察三仁汤对肝纤维化模型大鼠血清中炎症因子及血小板衍生生长因子的影响。方法 将48只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、秋水仙碱组（给药剂量为1.0×10^-4 g·kg^-1）以及三仁汤低、中、高剂量组（给药剂量分别为4.1 g·kg^-1、8.2 g·kg^-1、16.4 g·kg^-1）,每组8只。除空白组外,其他组均采用每周前2 d以1.6 mL·kg^-1的0.5%二甲基亚硝胺腹腔注射来建立大鼠肝纤维化模型,在造模的同时,除空白组及模型组给予生理盐水灌胃外,其他组分别予相应药物灌胃给药干预,持续时间为4 w。HE染色、Masson染色观察肝脏病理改变情况,ELISA法检测TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、PDGF-BB水平。结果 与模型组比较,秋水仙碱组与三仁汤低、中、高剂量组肝脏炎症浸润呈现不同程度减少,肝细胞结构形态相对正常,肝细胞变性坏死减轻,肝纤维结缔组织减少,胶原纤维组织缩小。与模型组比较,三仁汤中、低剂量组及秋水仙碱组大鼠的肝重显著升高（P<0.001或P<0.01）;秋水仙碱组及三仁汤中、低剂量组大鼠的肝体比显著升高（P<0.001或P<0.01或P<0.05）;秋水仙碱组以及三仁汤低、中剂量组的IL-1β水平明显降低（P<0.05）;秋水仙碱组以及三仁汤低、中、高剂量组的IL-6水平显著降低（P<0.05）;三仁汤高剂量组的IL-10水平显著升高（P<0.05）;三仁汤低剂量组的TNF-α水平显著降低（P<0.01）;秋水仙碱组以及三仁汤低、中、高剂量组的PDGF-BB水平亦显著降低（P<0.001或P<0.01）。结论 三仁汤可改善肝脏纤维化程度,其机制可能与调节炎症因子及血小板衍生生长因子水平有关。     

基于NLRP3通路研究青梅复方对急性痛风性关节炎的干预作用及机制

目的 明确青梅复方对急性痛风性关节炎（AGA）大鼠的治疗作用，初步阐明其作用机制。方法 将40只雄性SD大鼠按体质量随机分为空白组、模型组、秋水仙碱组（0.3 mg·kg ^-1）、青梅复方低、高剂量组（200、400 mg·kg^-1），每组8只。模型组及给药组踝关节注射50 g·L^-1尿酸钠盐（MSU）溶液制备AGA大鼠模型，分别于造模前及造模后6、24、48 h测量大鼠踝关节肿胀指数，采用苏木素-伊红（HE）染色观察AGA大鼠关节组织病理变化，免疫组化检测大鼠关节组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）的表达，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠关节组织中NOD样受体蛋白3（NLRP3）通路及关键蛋白表达。结果 与空白组比较，模型组大鼠踝关节肿胀指数、滑膜增生及炎性浸润程度显著升高，且踝关节IL-1β、TNF-α、NLRP3蛋白表达及胱天蛋白酶-1（Caspase-1）的剪切体和前体蛋白的比值（Caspase-1 p20/Caspase-1）显著上调（P<0.01）。与模型组比较，青梅复方能够明显降低AGA大鼠踝关节肿胀指数，尤其以青梅复方低剂量效果显著（P<0.01）；同时青梅复方不仅抑制滑膜增生及炎性浸润（P<0.01），且显著下调关节组织中IL-1β、TNF-α、NLRP3蛋白水平及Caspase-1 p20/Caspase-1（P<0.01）。结论 青梅复方能够显著缓解AGA的关节肿胀及炎症浸润，其机制可能与抑制NLRP3信号通路有关。     

加味升降散通过介导RIP1/RIP3/MLKL通路抑制坏死性凋亡减轻糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化

目的 探讨加味升降散基于刺激受体相互作用蛋白（RIP）1/RIP3/混合谱系激酶结构域样假激酶（MLKL）通路对糖尿病肾病大鼠坏死性凋亡及肾纤维化的干预机制。方法 75只SD大鼠分为正常组、模型组、加味升降散低、中、高剂量组（4.365、8.73、17.46 g·kg^-1）和厄贝沙坦组（0.013 5 g·kg^-1），灌胃给药干预4周后，检测各组大鼠24 h尿蛋白定量（UTP），血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）水平，肾脏病理变化程度；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）法和免疫组化分别检测大鼠肾组织中IL-1β、TNF-α、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、转化生长因子-β₁（TGF-β₁）、核转录因子-κB（NF-κB）mRNA和蛋白表达水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测RIP1/RIP3/MLKL信号通路关键蛋白的表达水平。结果 与正常组比较，模型组大鼠肾脏间质纤维化明显，24 h UTP、IL-1β、TNF-α水平明显升高（P<0.05），肾组织中IL-1β、TNF-α、MCP-1、TGF-β₁、NF-κB mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05），RIP1、RIP3、磷酸化（p）-MLKL、MLKL蛋白表达量明显增多（P<0.05）；与模型组比较，加味升降散各剂量组及厄贝沙坦组大鼠肾脏间质纤维化水平均有不同程度改善，24 h UTP水平均有不同程度降低（P<0.05），血清中IL-1β、TNF-α含量明显降低（P<0.05），肾组织中IL-1β，TNF-α，MCP-1，TGF-β₁，NF-κB mRNA和蛋白表达水平明显下调（P<0.05），RIP1、RIP3、p-MLKL、MLKL蛋白表达量明显下调（P<0.05）。结论 加味升降散可以改善糖尿病肾病大鼠肾损伤，其机制可能与下调RIP1/RIP3/MLKL信号通路，阻止肾组织坏死性凋亡，抑制肾纤维化有关。     

痛风消停汤对AGA大鼠踝关节炎性因子表达的影响

目的:研究痛风消停汤对急性痛风性关节炎(AGA)大鼠受试踝关节滑膜组织炎性因子的影响。方法:60只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组,痛风消停汤低、中、高剂量组,每组10只。正常组常规喂养,其余各组采用尿酸钠(MSU)溶液注射法建立急性痛风性关节炎模型。造模前2日,正常组与模型组按20m L/kg予以生理盐水灌胃,秋水仙碱组0.3mg/kg灌胃,1日1次;痛风消停汤低、中、高剂量组分别按2g/kg、4g/kg、8g/kg体质量给予痛风消停汤灌胃,1日1次,直至造模后第7日,连续9日。实验结束后,检测血尿酸,采用ELISA法检测受试踝关节IL-1β、IL-6、TNF-α的含量,免疫组化法检测TGF-β及其受体(TGF-βR1)的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血尿酸、受试踝关节滑膜组织中IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显升高(P0.05);与模型组比较,痛风消停汤各组大鼠血尿酸、受试踝关节滑膜组织中IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显降低(P0.05),而痛风消停汤各组TGF-β1及TGF-βR1的表达较其他各组明显增强(P0.05)。结论:痛风消停汤治疗急性痛风性关节炎的机制可能与上调TGF-β1及TGF-βR1的表达、抑制IL-1β、IL-6、TNF-α的表达有关。     

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路调控自噬探讨当归四逆汤对痛风性关节炎大鼠的影响

目的 基于磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路,探讨当归四逆汤对痛风性关节炎（GA）大鼠自噬水平的影响。方法 60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组（0.3 mg·kg^-1）和当归四逆汤低、中、高剂量组（6.54、13.08、26.16 g·kg^-1）,每组10只,并分别给予相应药物灌胃,正常组、模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续7 d。于第5天给药1 h后向各组（正常组除外）大鼠右侧踝关节注射尿酸钠混悬液（50 g·L^-1）建立GA模型,正常组注射等体积的无菌生理盐水。观察大鼠踝关节肿胀情况;测定血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、IL-1β水平;观察踝关节病理形态变化;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测滑膜PI3K、磷酸化（p）-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ/Ⅰ（LC3Ⅱ/Ⅰ）、自噬效应蛋白（Beclin-1）、泛素结合蛋白（p62）表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测PI3K、Akt、mTOR、LC3、Beclin-1、p62 mRNA表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠关节肿胀指数显著升高（P<0.01）,血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高（P<0.01）,踝关节滑膜组织可见明显炎性细胞浸润和纤维组织增生,滑膜组织PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、p62蛋白表达显著升高（P<0.01）,PI3K、Akt、mTOR、p62 mRNA表达显著升高（P<0.01）,LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1蛋白和LC3、Beclin-1 mRNA表达降低（P<0.01）。与模型组比较,当归四逆汤中、高剂量组大鼠关节肿胀明显减轻（P<0.05）;血清中TNF-α、IL-6、IL-1β表达量显著明显降低（P<0.05）;踝关节滑膜组织未见明显炎性细胞浸润,纤维组织增生减轻;滑膜组织PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、p62蛋白表达量均明显降低（P<0.05）,PI3K、Akt、mTOR、p62 mRNA表达量亦明显降低（P<0.05）,而LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1蛋白和LC3、Beclin-1 mRNA表达量均明显上升（P<0.05）。结论 当归四逆汤可以抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,提高大鼠滑膜组织自噬水平,改善痛风性关节炎,并且以高剂量效果最佳。     

牡丹花总黄酮对痛风性肾病大鼠NLRP3炎症小体及炎症因子表达的影响

目的 探究牡丹花总黄酮对大鼠痛风性肾病模型保护作用的可能机制。为治疗痛风性肾病的药物研究提供科研数据支撑。方法 使用腺嘌呤合并乙胺丁醇复制大鼠痛风性肾病模型，大鼠随机每12只分为空白组、模型组、别嘌醇组（42 mg·kg^-1）、阳性药痛风舒片组（600 mg·kg^-1）、牡丹花总黄酮高、中、低剂量组（TFPF，260、130、65 mg·kg^-1）；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）含量，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠肾脏组织匀浆中转化生长因子-β₁（TGF-β₁）、IL-1β含量；苏木素-伊红（HE）染色观察肾脏组织细胞形态变化；原位末端标记法（TUNEL）观察肾脏组织细胞DNA损伤情况；免疫组化法观察肾脏NOD样受体蛋白3（NLRP3）、胱天蛋白酶-1（Caspase-1）、IL-1β蛋白表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肾脏组织中NLRP3、Caspase-1、核转录因子-κB（NF-κB）蛋白的表达量。结果 与空白组比较，模型组大鼠血清中TNF-α、MCP-1、IL-1β、IL-18含量均显著增加（P<0.01），模型组大鼠肾脏NLRP3、Caspase-1、NF-κB、IL-1β表达量均显著升高（P<0.01），肾组织细胞呈现胞质肿胀、细胞膜破裂，细胞核固缩断裂数量增加，模型组大鼠肾组织细胞TUNEL染色阳性率显著升高（P<0.01），大鼠肾组织匀浆中IL-1β、TGF-β₁的含量均显著上升（P<0.01）；与模型组比较，牡丹花总黄酮高、中剂量组可不同程度的降低大鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-18含量（P<0.05，P<0.01），牡丹花总黄酮高剂量组MCP-1含量明显降低（P<0.01），牡丹花总黄酮高、中剂量组明显降低肾组织匀浆中TGF-β₁含量（P<0.05，P<0.01），牡丹花总黄酮中剂量组肾组织匀浆中IL-1β含量显著降低（P<0.01）；HE染色显示牡丹花总黄酮各剂量组可不同程度的改善肾小管上皮细胞状态，减轻胞质肿胀，细胞核固缩的数量；降低肾组织细胞TUNEL染色阳性率（P<0.01），肾脏细胞DNA损伤减少；抑制肾脏组织细胞中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、NF-κB蛋白的表达（P<0.05，P<0.01）。结论 牡丹花总黄酮对痛风性肾病模型大鼠的肾脏保护作用与抑制炎症因子分泌相关，其抗炎作用机制可能是通过抑制NF-κB信号通路与NLRP3/Caspase-1通路的活化，从而下调IL-1β、IL-18等炎性因子表达、成熟及释放，遏制肾脏细胞程序性死亡的初始阶段细胞焦亡的发生，从而逆转痛风性肾病肾脏的炎症损伤。     

“黄芪-丹参”对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化及低氧诱导因子-1α表达的影响

[目的] 通过单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型探讨“黄芪-丹参”对于肾间质纤维化和肾小管上皮细胞转分化（EMT）的作用以及缺氧诱导因子（HIF）-1α表达的影响。[方法] 将大鼠分为假手术组、模型组、芪参低剂量组、芪参中剂量组、芪参高剂量组、氯沙坦组。采用UUO模型并灌胃、取材。Masson染色法观察大鼠肾脏组织病理改变;免疫组化法检测大鼠肾脏组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达;PCR法检测大鼠肾脏组织1型胶原蛋白（Col1）、纤连蛋白（FN）mRNA表达;蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测大鼠肾脏组织HIF-1α蛋白表达。[结果] Masson染色：模型组与假手术组比较,胶原容积升高,差异具有统计学意义（P＜0.001）;芪参中、高剂量与模型组比较出现下降,差异具有统计学意义（P＜0.01）;氯沙坦组与模型组比较下降,差异具有统计学意义（P＜0.001）。免疫组化：大鼠模型组与假手术组比较,α-SMA蛋白表达升高,差异具有统计学意义（P＜0.001）;芪参中、高剂量以及氯沙坦组与模型组比较,α-SMA均下降,差异具有统计学意义（P＜0.01）。实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）检测：模型组对比假手术组,Col1、FN表达水平升高（P＜0.001）,药物组与模型组比较Col1、FN表达降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）。Western Blot检测：模型组与假手术组比较,HIF-1α表达升高,差异具有统计学意义（P＜0.001）;芪参中剂量较模型组有下降,差异具有统计学意义（P＜0.01）。[结论] “黄芪-丹参”药对可以通过抑制细胞外基质的生成以及减轻肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化两个方面延缓肾间质纤维化,其机制可能与抑制HIF-1α表达有关。     

蔓性千斤拔素D通过TLR2/MyD88/NF-κB信号通路调控CIA大鼠炎症反应的相关机制

目的 观察蔓性千斤拔素D对大鼠胶原诱导型关节炎（CIA）的作用并探讨其作用机制。方法 将40只大鼠随机分为正常组、CIA组、甲氨蝶呤（MTX）组（1.35 mg·kg^-1）、蔓性千斤拔素D低剂量组（1.5 mg·kg^-1）及蔓性千斤拔素D高剂量组（3.0 mg·kg^-1）,每组8只,除正常组外,其余均采用Ⅱ型胶原诱导CIA模型。给药组通过灌胃给予相应药液,正常组给予相应体积生理盐水,MTX组每周1次,蔓性千斤拔素D各组每天1次,共给药28 d。实验中记录各组大鼠关节炎评分和关节肿胀度,苏木素-伊红（HE）染色观察各组大鼠踝关节病理学变化,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清炎症因子白细胞介素（IL）-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子（TNF）-α水平,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测Toll样受体2（TLR2）、髓样分化因子88（MyD88）、核转录因子-κB（NF-κB） p65 mRNA的表达量,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测TLR2、MyD88、NF-κB p65蛋白的表达量。结果 与正常组比较,CIA组大鼠踝关节明显肿胀,关节炎临床评分及关节肿胀度显著升高（P<0.01）,踝关节组织结构明显破坏,血清炎性因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α含量显著升高（P<0.01）,TLR2、MyD88、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达水平显著升高（P<0.01）。与CIA组比较,各给药组大鼠关节炎临床评分及关节肿胀度均明显降低（P<0.05,P<0.01）,踝关节组织结构病理变化明显改善,血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α含量均明显降低（P<0.05,P<0.01）,踝关节TLR2、MyD88、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达水平均明显下降（P<0.05,P<0.01）。结论 蔓性千斤拔素D在一定程度上可降低类风湿关节炎大鼠炎性因子的表达,能起到良好的治疗作用,其作用机制可能是通过抑制TLR2/MyD88/NF-κB信号通路的活化而发挥抗炎作用。     

化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏足细胞密度的干预作用

[目的] 分析化瘀通络中药对糖尿病肾病（DN）大肾脏整合素α3β1表达及足细胞密度的影响。[方法] 糖尿病大鼠模型采用高脂饲料联合腹腔注射链脲佐菌素建立,大鼠分为正常组、模型组、厄贝沙坦组和中药组,各组相应药物剂量灌胃。灌胃20周后检测各组大鼠空腹血糖（FBG）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、24h尿蛋白定量（24h UTP）,肾组织行光镜观察,分别采用实时聚合酶链反应（RT-PCR）及免疫组化（IHC）检测肾脏整合素α3（ITGA3）、整合素β1（ITGB1）、WT1 mRNA及蛋白的表达,计算足细胞密度。[结果] 与正常组比较,模型组各项指标差异均有统计学意义（P＜0.05）;与模型组比较,两治疗组BUN、24hUTP明显下降（P＜0.05）,ITGA3、ITGB1、WT1 mRNA表达水平及足细胞密度明显上升（P＜0.05）,干预组病理损伤明显减轻,主要表现为肾小球内细胞基质及系膜细胞明显减少;与厄贝沙坦组比较,中药组24h UTP明显降低（P＜0.05）,ITGB1 mRNA及足细胞密度明显上升。[结论] 化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏有保护作用,其机制可能与调节整合素α3β1表达从而减少足细胞脱落相关。     

加味四妙方抗高尿酸血症及痛风性关节炎药效学分析

目的： 考察加味四妙方抗高尿酸血症及痛风性关节炎的作用。 方法： SD大鼠60只随机分为空白组、模型组、别嘌醇组（60 mg·kg^-1）、加味四妙方高、中、低剂量组（24,12,6 g·kg^-1）6组（n=10）。除空白组外,其他组喂食次黄嘌呤饲料,喂饲后第1,3,5天sc氧嗪酸钾复制高尿酸血症模型,于喂饲后第1天ig给药,连续5 d。检测血尿酸（UA）,尿UA水平及血液、肝脏黄嘌呤氧化酶（XO）活性。新西兰兔40只随机分为模型组、秋水仙碱组（0.3 mg·kg^-1）、加味四妙方高、中、低剂量组（12,6,3 g·kg^-1）5组（n=8）。连续ig给药5 d后,各组家兔膝关节腔注射尿酸钠结晶（MSU）诱导痛风性关节炎模型。检测关节肿胀度,关节液白细胞计数（WBC）,白细胞介素-1β（IL-1β）,白细胞介素-6（IL-6）水平及关节囊、滑膜组织病变程度。 结果： 高尿酸血症模型大鼠与空白组比较,血UA,尿UA及血液XO,肝脏XO均明显上升（P<0.01）;加味四妙方高、中、低剂量组能降低高尿酸血症模型大鼠血UA,尿UA（P<0.01,P<0.05）,且能显著降低血液XO（P<0.01）。对由MSU引起的家兔膝关节肿胀,在致炎后1,3,5 h,痛风模型家兔与空白组比较,关节液WBC及IL-1β,IL-6含量均明显上升（P<0.01）;加味四妙方高、中剂量组能抑制其肿胀度（P<0.01,P<0.05）,显著降低关节液WBC及IL-1β,IL-6含量（P<0.01,P<0.05）,且高剂量组能减轻关节组织病变程度（P<0.05）。 结论： 加味四妙方对高尿酸血症模型大鼠有降UA作用,并对痛风模型家兔有良好的抗炎作用,其作用机制可能与降低XO活性,抑制关节IL-1β,IL-6合成与释放有关。     

大黄素对类风湿关节炎模型大鼠的治疗作用及抗炎机制研究

目的：观察大黄素对类风湿关节炎模型大鼠的治疗作用，并探索其抗炎机制。方法：选取60只3周龄SD大鼠，采用随机数字表法分为空白对照组、模型组、大黄素低剂量组和大黄素高剂量组。除空白对照组外其余各组采用不完全氟氏佐剂及牛Ⅱ胶原乳化剂制成类风湿关节炎大鼠模型。大黄素低剂量组和高剂量组分别予40 mg/kg和80 mg/kg大黄素灌胃，空白对照组和模型组予等量生理盐水灌胃，每日1次，持续14 d。造模与给药期间每周检测各组大鼠足肿胀度，计算足肿胀率；采用ELISA试剂盒检测治疗后各组大鼠血清炎症因子白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量；比较各组大鼠滑膜病理学评分；采用蛋白质印迹检测各组大鼠关节组织中高迁移族转移蛋白1（HMGB1）及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）及Bcl-2关联X蛋白（Bax）的表达。结果：造模后各造模组大鼠足肿胀率明显高于空白对照组（P<0.01）；经大黄素低剂量、中剂量干预后，足肿胀率明显低于同期模型组（P<0.01），高剂量治疗效果明显优于低剂量（P<0.01）。与空白对照组比较，模型组大鼠血清IL-1β、IL-6和TNF-α含量，滑膜细胞增生评分、炎症评分、血管新生评分及总病理评分，HMGB1、Caspase-3及Bax蛋白表达均显著升高（P<0.01），Bcl-2蛋白表达显著降低（P<0.01）；与模型组比较，大黄素低、高剂量组大鼠上述指标均有明显改善（P<0.01），高剂量组改善程度明显优于低剂量组（P<0.01）。结论：大黄素可以通过降低类风湿关节炎模型大鼠体内炎症反应同时抑制关节组织细胞的凋亡，从而缓解类风湿关节炎症状。     

肺肠合治法对LPS诱导急性肺损伤大鼠NF-κB炎症通路和巨噬细胞极化的影响

目的 探究肺肠合治法（麻黄汤+大承气汤）对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）大鼠的作用与保护机制。方法 将Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、肺肠合治低、中、高剂量组、地塞米松组。通过LPS（10 mg·kg^-1）腹腔注射成功复制ALI大鼠模型。观察与记录各组大鼠一般状态;采用肛温测量法记录各组大鼠造模后0~8 h体温数值;造模后24 h取材,收集血清与肺组织。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-10（IL-10）、精氨酸酶-1（Arg-1）含量;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组大鼠肺组织中核转录因子-κB p65（NF-κB p65）、磷酸化核转录因子-κB p65（p-NF-κB p65）、核转录因子抑制蛋白α（IκBα）、磷酸化核转录因子抑制蛋白α（p-IκBα）蛋白的表达量;免疫荧光双标检测大鼠肺组织经典激活型（M1）巨噬细胞标记物CD80、IL-1β、巨噬细胞标记物F4/80、IL-10表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠体温和热效应指数（TRI）显著升高,血清促炎因子TNF-α、IL-1β和抗炎因子IL-10水平显著升高（P<0.01）,肺组织p-NF-κB p65、p-IκBα蛋白表达显著升高（P<0.01）,肺组织巨噬细胞标志物F4/80、M1巨噬细胞标志物CD80和IL-1β的表达显著升高（P<0.01）;与模型组比较,肺肠合治各组和地塞米松组大鼠体温与TRI指数降低（P<0.01）,血清炎症因子TNF-α、IL-1β水平降低（P<0.05,P<0.01）,血清抗炎因子IL-10、Arg-1水平升高（P<0.05,P<0.01）,肺组织p-NF-κB p65、p-IκBα蛋白表达降低（P<0.05,P<0.01）,肺组织M1巨噬细胞标志物CD80、IL-1β表达显著降低和IL-10表达显著升高（P<0.01）,巨噬细胞标志物F4/80表达无明显变化。结论 肺肠合治方剂对ALI大鼠的发热与炎症状态有明显的改善,其机制可能与NF-κB炎症通路被抑制,肺组织巨噬细胞向抗炎表型极化有关。     

基于NLRP3炎性小体和TLR4/NF-κB信号通路探讨黄连解毒汤治疗急性痛风性关节炎的作用机制

目的 观察黄连解毒汤对急性痛风性关节炎（AGA）模型小鼠炎性损伤的影响，探讨黄连解毒汤治疗AGA的作用机制。方法 40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组和黄连解毒汤组。采用踝关节注射单钠尿酸盐（MSU）晶体混悬液建立小鼠AGA模型，给药组分别给予黄连解毒汤水煎液（5 g·kg^-1）和秋水仙碱（0.83 mg·kg^-1），每天测量小鼠右踝关节肿胀程度，7 d后苏木素-伊红（HE）染色检测踝关节组织病理改变。另外40只C57BL/6J小鼠同样分组处理，造模18 h后，取右踝关节，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测关节炎症因子白细胞介素（IL）-1β、肿瘤坏死因子（TNF）-α、IL-6和NOD样受体蛋白3（NLRP3）炎性小体NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、胱天蛋白酶-1（Caspase-1）mRNA的表达；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测炎症因子IL-1β、TNF-α和IL-6含量；蛋白免疫印迹法（Western bolt）检测NLRP3炎性小体和Toll样受体4/核转录因子-κB（TLR4/NF-κB）信号通路蛋白的表达。结果 与正常组比较，模型组小鼠右踝关节显著肿胀（P<0.01），HE染色观察到踝关节明显异物肉芽肿，其间有炎症细胞浸润，黄连解毒汤干预后可以缓解踝关节肿胀（P<0.05，P<0.01），异物肉芽肿减小。与正常组比较，模型组踝关节组织中炎症因子IL-1β含量和IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA表达显著升高（P<0.01），NLRP3炎性小体、Caspase-1 mRNA表达明显升高（P<0.05，P<0.01），NLRP3、Caspase-1、TLR4和NF-κB蛋白表达明显升高（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，黄连解毒汤干预明显降低炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6和NLRP3炎性小体、Caspase-1 mRNA表达（P<0.05，P<0.01），显著降低关节组织中炎症因子IL-1β、TNF-α和IL-6含量（P<0.01），下调NLRP3、Caspase-1、TLR4、NF-κB蛋白的表达（P<0.05，P<0.01）。结论 注射MSU晶体导致AGA小鼠关节局部炎性免疫损伤，黄连解毒汤干预减轻炎性免疫损伤，可能与其调控NLRP3炎性小体和TLR4/NF-κB信号通路相关。     

荞麦花叶总黄酮对阿霉素致心力衰竭大鼠的保护作用及机制

目的：观察荞麦花叶总黄酮（TFBFL）对阿霉素致心力衰竭大鼠的保护作用并分析其可能机制。方法：SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、荞麦花叶总黄酮低、中、高剂量组（100,200,400 mg·kg^-1）及卡托普利组（10 mg·kg^-1）。采用腹腔注射阿霉素建立大鼠心衰模型,于造模第4 周各组同时灌胃给予治疗药物,1次/d,连续3周。末次给药后测定各组大鼠心功能指标;放射免疫法测定血清心钠素（ANP）、脑钠素（BNP）水平;ELISA法检测血清中一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。结果：与正常对照组比较,模型对照组大鼠心功能各项指标如左室收缩压（LVSP）、左室舒张末压（LVEDP）、左室内压最大上升、下降速度（±dp/dtmax）及血清中ANP,BNP,NO,NOS,IL-1β,IL-6及TNF-α水平均出现显著升高（P<0.05,P<0.01）;与模型对照组比较,TFBFL各剂量组大鼠上述心功能各项指标及血清中各指标均出现不同程度的降低（P<0.05,P<0.01）。结论：TFBFL可改善阿霉素致心衰大鼠心功能,其机制可能与其降低血清中ANP,BNP,NO,NOS,IL-1β,IL-6及TNF-α水平相关。     

基于NLRP3炎性体轴土茯苓总黄酮对痛风性关节炎的作用和机制

目的：研究土茯苓总黄酮（TFSG）对急性痛风性关节炎小鼠的抗炎作用,并初步探讨其作用机制。方法：将90只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组,模型组,秋水仙碱组（0.65 mg·kg^-1）,土茯苓总黄酮低、中、高剂量组（100,300,500 mg·kg^-1）,每组15只。除正常组外,其余各组采用尿酸钠结晶复制小鼠痛风性关节炎模型,测定小鼠踝关节肿胀度;酶联免疫吸附法（ELISA）检测不同组别滑膜组织中白细胞介素-1β（IL-1β）,IL-6,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,蛋白免疫印迹法（Western blot）测定滑膜组织中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）,凋亡相关斑点样蛋白（ASC）,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）的蛋白表达,实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测NLRP3,ASC,Caspase-1 mRNA水平的表达。结果：与正常组比较,模型组小鼠踝关节肿胀度明显增加（P<0.01）,模型组小鼠滑膜组织中IL-1β,IL-6,TNF-α水平显著升高（P<0.01）,NLRP3,ASC,Caspase-1蛋白表达和mRNA水平显著升高（P<0.01）;与模型组比较,土茯苓总黄酮组能够显著降低小鼠踝关节肿胀度（P<0.01）,滑膜组织中IL-1β,IL-6,TNF-α水平以及NLRP3,ASC,Caspase-1蛋白水平和mRNA水平显著降低（P<0.01）。结论：土茯苓总黄酮具有一定的抗痛风性关节炎作用,其作用机制与NLRP3炎性体轴有关。     

抗痛风胶囊对急性痛风性关节炎大鼠的抗炎作用及机制探讨

目的:观察抗痛风胶囊对急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis,AGA)大鼠的抗炎作用及其作用机制。方法:大鼠足踝关节注射尿酸钠悬液诱导AGA,容积法检测足踝关节肿胀程度,ELISA法测定血清及关节液中白介素-1β(IL-1β)含量,免疫组织化学和图像分析观测踝关节软骨组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达水平。结果:尿酸钠混悬液注射后1～5 d,与正常组比较,AGA模型大鼠足踝关节肿胀度明显增高;与模型组比较,抗痛风胶囊低、高剂量(0.3,1.2 g.kg-1)与阳性药秋水仙碱(8×10-4g.kg-1)组大鼠足踝关节肿胀度显著降低(P<0.05和P<0.01);第5天,抗痛风胶囊高剂量与秋水仙碱组大鼠足踝关节肿胀度已降低至正常组水平。模型组大鼠足踝关节液IL-1β水平明显高于正常组,抗痛风胶囊和秋水仙碱组大鼠足踝关节液IL-1β水平均显著低于模型组。模型组大鼠踝关节软骨组织TNF-α蛋白表达水平增高(P<0.01);抗痛风胶囊组踝关节软骨组织TNF-α蛋白表达水平明显降低,与正常组无显著差异。结论:抗痛风胶囊治疗急性痛风性关节炎的作用机制可能与降低关节组织局部的炎症因子IL-1β和TNF-α水平有关。     

4种归肺经中药对肺热证小鼠TNF-α,IL-1β表达的影响

目的：探讨麻黄、干姜、黄芩、桑白皮4味归肺经中药对小鼠肺热证的影响,并初步揭示其作用机制。方法：将100只昆明种小鼠随机分为正常对照组,模型组,麻黄、干姜、黄芩、桑白皮组（20,10 g·kg^-1）,每组10只,灌胃给药7 d,每天1次,于实验第4,5,6天鼻腔滴入肺炎链球菌菌液建立小鼠肺热证模型,病理学观察肺组织形态变化,酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量,免疫组化法测定肺组织TNF-α,白介素-1β（IL-1β）蛋白表达。结果：与正常组比较,模型组肺组织实变（P<0.001）,血清TNF-α含量升高（P<0.01）,肺组织TNF-α,IL-1β蛋白表达升高（P<0.01）。与模型组比较,麻黄低剂量组,干姜高、低剂量组,黄芩高剂量组肺组织病理有明显改善（P<0.01,P<0.05）;血清TNF-α含量降低,除干姜高剂量组、黄芩低剂量组,其余各组差异均有统计学意义（P<0.01或P<0.05）;肺组织TNF-α,IL-1β蛋白表达降低,其中,TNF-α表达除干姜低剂量组、桑白皮高剂量组,其余各组差异均有统计学意义（P<0.01或P<0.05）,IL-1β表达除麻黄低剂量组、桑白皮低剂量组,其余各组差异均有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。结论：麻黄、干姜、黄芩、桑白皮可以干预肺热证,抑制TNF-α,IL-1β炎症因子表达可能是其减轻小鼠肺热证肺组织损伤的主要途径。     

注射用益气复脉（冻干）对慢性心力衰竭大鼠的药效和作用机制研究

目的 探究注射用益气复脉（冻干）在改善心梗后所致慢性心力衰竭（chronic heart failure,CHF）大鼠的作用及机制。方法 将冠状动脉左前降支手术结扎造模成功后的75只SD大鼠随机分为模型组,益气复脉低、高剂量（464.3、928.6 mg/kg）组,卡托普利（3.35 mg/kg）组和益气复脉（464.3 mg/kg）+卡托普利（3.35 mg/kg）组,另取15只仅切口缝合但不结扎的SD大鼠作为假手术组。给予药物干预2周后,用小动物超声诊断仪检测大鼠心功能;采用ELISA试剂盒检测各组大鼠血清中心钠肽（atrial natriuretic peptide,ANP）、脑钠肽（brain natriuretic peptide,BNP）、内皮素-1（endothelin-1,ET-1）、心肌肌钙蛋白（cardiac troponin,cTn）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）含量和肌酸激酶（creatine kinase,CK）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzyme-MB,CK-MB）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力;采用苏木素-伊红（HE）染色法观察各组大鼠心脏组织病理变化;采用Western blotting检测各组大鼠心脏中能量代谢相关蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠心功能指标左室射血分数（LVEF）、二尖瓣血流频谱E峰/A峰（E/A）和左室短轴缩短率（LVFS）均明显下降（P＜0.001）,血清中ANP、BNP、cTn、ET-1、IL-6、TNF-α水平和CK、CK-MB活力均显著升高（P＜0.001）,SOD活性和ATP水平显著下降（P＜0.001）,左心室组织出现心肌纤维断裂及心肌细胞变性、坏死等病理改变,心脏中磷酸腺苷激活的蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）、p-AMPK、葡萄糖转运蛋白-4（glucose transporter-4,GLUT-4）和肉碱棕榈酰转移酶-1（carnitine palmitoyltransferase-1,CPT-1）蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05、0.01、0.001）。与模型组比较,各给药组LVEF、E/A和LVFS均显著提高（P＜0.05、0.01、0.001）,血清中ANP、BNP、cTn、ET-1、IL-6、TNF-α水平和CK-MB、CK活力均显著降低（P＜0.05、0.01、0.001）,ATP水平和SOD活力显著升高（P＜0.01、0.001）,大鼠心肌损伤得到明显改善,心脏中p-AMPK、AMPK、GLUT-4和CPT-1蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05、0.01、0.001）。结论 益气复脉可以通过提高CHF大鼠的射血分数和舒缩功能改善心功能,通过降低大鼠血清心肌损伤、氧化应激水平并改善能量代谢,从而改善CHF大鼠心衰症状,改善能量代谢可能是其重要的作用机制之一。     

白虎加桂枝汤对急性痛风性关节炎大鼠关节肿胀度及炎症因子影响的研究

目的：观察白虎加桂枝汤对尿酸盐结晶诱导的急性痛风性关节炎（AGA）大鼠模型关节肿胀度及炎症细胞因子的影响并探讨其作用机制。方法：将 32 只 Wistar 大鼠随机分为对照组、模型组、秋水仙碱组、白虎加桂枝汤组，每组 8 只。除对照组外，其它 3 组采用踝关节注射尿酸钠晶体溶液的方法诱导 AGA 模型。模型制备成功后，秋水仙碱组、白虎加桂枝汤组分别灌胃秋水仙碱混悬液、白虎加桂枝汤治疗，对照组和模型组灌胃等量生理盐水。测量各时间点大鼠右踝关节直径，测定关节软组织白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、环氧化酶-2（COX-2）及一氧化氮（NO）的表达水平。结果：与对照组比较，模型组大鼠右踝关节直径及关节软组织 TNF-α、IL-1β、COX-2、NO 表达水平均明显升高 （P＜0.05）。与模型组比较，秋水仙碱组及白虎加桂枝汤组大鼠右足踝关节直径及关节软组织 TNF-α、IL-1β、COX-2、NO 表达水平明显下降 （P＜0.05）。白虎加桂枝汤组与秋水仙碱组以上各指标比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：白虎加桂枝汤可明显改善 AGA 大鼠关节肿胀，抑制炎症因子 IL-1β、TNF-α、COX-2、NO 的表达，减轻炎症反应。     

参味宁郁片对慢性束缚应激大鼠海马TLR4/MyD88信号通路介导免疫炎症的影响

目的 探究治疗抑郁症中药新药参味宁郁片对抑郁模型大鼠行为学及海马Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）信号通路介导免疫炎症的影响。方法 将44只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾司西酞普兰组和参味宁郁片组。除正常组外,其余各组大鼠均采用慢性束缚应激（CRS）结合孤养建立抑郁症模型、持续接受21 d CRS刺激;艾司西酞普兰组每日在CRS应激前1 h给予艾司西酞普兰（30 mg·kg^-1）灌胃给药;参味宁郁片组每日在CRS应激前1 h给予参味宁郁片（18 mg·kg^-1）灌胃干预。实验前、后通过体质量变化、糖水实验、旷场实验测试,观察各组大鼠体质量、糖水偏好指数、水平运动评分、垂直运动评分变化;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测海马TLR4,MyD88蛋白表达水平,应用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清炎性因子白细胞介素-1β（IL-1β）,白细胞介素-10（IL-10）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量变化。结果 行为学结果显示,实验前,各组大鼠行为学基线水平具有一致性、各组均值差异无统计学意义。随着时间推移应激负荷增加,与正常组比较,模型组大鼠在接受CRS应激21 d后体质量、糖水偏好指数、水平运动评分和垂直运动评分均显著降低（P?0.01）,与模型组比较,参味宁郁片组和艾司西酞普兰组大鼠体质量、糖水偏好指数、水平运动评分和垂直运动评分均显著升高（P?0.01）,参味宁郁片表现出明显的抗抑郁效应;Western blot和ELISA结果显示,与正常组比较,模型组大鼠海马TLR4,MyD88蛋白及血清炎性因子IL-1β,TNF-α含量显著升高（P?0.01）,血清IL-10含量降低（P?0.01）,而与模型组比较,参味宁郁片组和艾司西酞普兰组有效逆转了应激诱导的海马TLR4,MyD88蛋白及血清炎性因子IL-1β含量显著升高、血清IL-10含量降低情况,差异具有统计学意义（P?0.01）。结论 治疗抑郁症中药新药参味宁郁片对慢性应激诱导抑郁症的抗抑郁作用可能是通过抑制海马TLR4/MyD88信号通路介导的免疫炎性反应途径有关。