益气化瘀解毒方及拆方对人肝癌HepG2裸鼠移植瘤和HIF1α、E-cad表达的影响

目的:观察益气化瘀解毒方对人肝癌移植瘤及HIF1a、E-cad表达的影响。方法:建立人肝癌移植瘤模型,分为7组,分别以益气化瘀解毒方、黄芪、莪术、重楼、壁虎、顺铂药物干预21 d后,取瘤组织,行免疫组化检测。结果:(1)成瘤体积比较:给药后瘤体积及差值比较,各组与空白组均有显著性差异(P<0.05);全方组分别与黄芪组、重楼组、壁虎组、空白对照组等比较有显著性差异(P<0.05)。(2)对HIF1a的影响:全方组与黄芪组比较无显著性差异(P>0.05),与其它组比较有显著性差异(P<0.05);各组与空白组比较有显著性差异(P<0.05);莪术组、壁虎组、顺铂组间比较无显著性差异(P>0.05)。(3)对E-cad影响:全方组与黄芪组比较无显著性差异(P>0.05),莪术、重楼、壁虎组与空白组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:(1)益气化瘀解毒方全方较单味中药具有较强的抑瘤作用,其组方中药如莪术、重楼、壁虎均有一定程度抑瘤作用,莪术抑瘤作用较强;组方内主要单味中药发挥了协同抑瘤效应,使整方呈现出最强的抑瘤效应。(2)益气化瘀解毒方能抑制HIF1a表达,促进E-cad表达,可能通过阻断上皮间质转化而发挥抗肝癌转移侵袭作用,组方中药对其作用各有侧重,但作为整方的有机组成从不同环节发挥了协同作用。     

益气化瘀解毒方及其单味药对人肝癌HepG2裸鼠移植瘤血管拟态相关因子的影响

目的探讨益气化瘀解毒方及其单味药对人肝癌移植瘤血管拟态相关因子表达的影响。方法瘤细胞接种建立人肝癌移植瘤模型,随机分为益气化瘀解毒方组(全方组)、黄芪组、莪术组、重楼组、壁虎组、顺铂组及模型组,除模型组外,各给药组予相应药物干预。21d后,采用免疫组化法检测瘤组织低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2、E-钙黏附蛋白(E-cad)表达,免疫荧光法观察血管生成拟态结构,实时荧光定量PCR检测瘤组织Twist1、Bcl-2表达。结果与模型组比较,给药后各给药组瘤体积减小(P0.05),全方组优于黄芪组、重楼组、壁虎组(P0.05);各组血管生成拟态结构荧光表达稀少,模型组、顺铂组最为明显;除黄芪组外,各给药组HIF-1α及MMP-9、MMP-2表达与模型组比较差异有统计学意义(P0.05),全方组最为明显;全方组、黄芪组E-cad表达与模型组比较差异有统计学意义(P0.05);全方组、重楼组、壁虎组与模型组比较Bcl-2表达明显降低(P0.05),其中全方组Bcl-2表达明显优于其他给药组(P0.05);全方组、莪术组、重楼组、顺铂组Twist1表达与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论益气化瘀解毒方及其单味药通过下调HIF-1α、Twist1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9及上调E-cad表达,从而抑制血管生成拟态形成。     

健脾消癌方及其拆方对肠癌模型裸鼠体质量、瘤体、转移率及Caspase-3,Bcl-xL,Bax蛋白表达的影响

目的:观察健脾消癌方及其拆方对肠癌模型裸鼠体质量、瘤体、转移率及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-x L(B-cell lymphoma/leukemia-x L,Bcl-x L)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)表达的影响。方法:建立裸鼠肠癌原位瘤模型,分为模型组,健脾益气组(15 g·kg-1),化瘀解毒组(15 g·kg-1),健脾消癌方组(全方组,15 g·kg-1),5-氟尿嘧啶组(5-Fu,20 mg·kg-1),共5组。分别予以相应药物干预4周,观察裸鼠体重、瘤体抑制率、转移率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Caspase-3,Bcl-x L,Bax蛋白表达。结果:健脾益气组、全方组体重下降低于模型组(P0.05),化瘀解毒组体重下降高于模型组(P0.05);健脾益气组对瘤体的抑制与模型组比较无统计学差异,与空白组比较,化瘀解毒组、全方组对瘤体均有较好抑制作用(P0.05);各组均出现不同程度地转移,其中模型组、健脾益气组总体转移率达90%,化瘀解毒组、全方组转移率分别为70%,60%,低于模型组(P0.05);与模型组比较,化瘀解毒组及全方组能够上调Bax蛋白表达,下调Caspase-3,Bcl-x L蛋白表达(P0.01)。结论:健脾消癌方中健脾益气组优势在于稳定体重,化瘀解毒组优势在于抑制肿瘤,抑制转移;全方组能够稳定体质量,抑制肿瘤,抑制转移,全方配伍疗效最优,其抗肿瘤机制可能是上调凋亡相关蛋白Bax及下调Caspase-3,Bcl-x L,诱导肿瘤细胞凋亡。     

黄芪、莪术单药及配伍通过影响上皮间质转化抑制Lewis荷瘤小鼠肺转移的研究

目的通过观察黄芪、莪术及其配伍应用对Lewis荷瘤小鼠肺转移灶数目及肿瘤上皮间质转化的影响,研究其基于上皮间质转化机制抑制肿瘤转移的作用,并分析黄芪、莪术配伍应用的意义。方法将50只C57 Lewis荷瘤小鼠模型随机分为模型组、顺铂组、黄芪单药组、莪术单药组及黄芪-莪术配伍组,接种后次日开始连续15 d,分别给予相应药物干预,处死后解剖取出肺脏,解剖显微镜下观察双肺表面超过2 mm结节数目;剥离腋下种植瘤体,EnVision法检测肿瘤组织中E-cad、MMP-2、MMP-9表达。结果顺铂组和配伍组肺转移结节数量少于模型组(均P0.05),单药组肺转移灶数量虽均少于模型组但差异无统计学意义(P0.05);各中药组均不及顺铂组(P0.05),配伍组少于黄芪、莪术单药组,但差异无统计学意义(P0.05)。E-cad表达,与模型组相比,顺铂组、配伍组升高(均P0.05),单药组与模型组比差异均无统计学意义(P0.05);各中药组低于顺铂组(均P0.05),配伍组高于莪术组(P0.05),与黄芪组差异无统计学意义(P0.05)。MMP-2表达,各组差异无统计学意义(P0.05)。MMP-9表达,顺铂组、配伍组、莪术单药组低于模型组(均P0.05),黄芪组与模型组比较差异无统计学意义(P0.05);各中药组高于顺铂组(均P0.05),配伍组低于黄芪组(P0.05),与莪术单药组接近,差异无统计学意义(P0.05)。结论黄芪-莪术配伍抑制肿瘤转移的效果优于单用黄芪、莪术,其作用机制为提高E-cad蛋白表达、降低MMP-9表达;黄芪、莪术配伍使用在提高E-cad表达上优于单用黄芪、莪术,在降低MMP-9表达上与莪术相近、优于单用黄芪。     

黄芪、莪术联合顺铂对人肝癌裸鼠原位移植瘤内微血管的影响

目的:探讨黄芪、莪术配伍联合顺铂(DDP)抗肝癌新生血管生成的作用机制。方法:构建人肝癌裸鼠原位移植瘤模型。成瘤后,将其随机分为8组:模型对照组、阳性对照组(DDP)、黄芪莪术配伍高剂量组(H)、黄芪莪术配伍中剂量组(M)、黄芪莪术配伍低剂量组(L)、黄芪莪术配伍高剂量+顺铂组(H+DDP)、黄芪莪术配伍中剂量+顺铂组(M+DDP)、黄芪莪术配伍低剂量+顺铂组(L+DDP),每组8只,给药15 d,检测肿瘤新生微血管密度计数(CD34)、MMP-2、bFGF。结果:与模型对照组相比,H、M、H+DDP、M+DDP组移植瘤组织微血管数目均减少(P0.05或P0.01),血清中bFGF、MMP-2含量均明显降低(P0.01)。与DDP组相比,H、M、H+DDP、M+DDP组移植瘤组织微血管数目均减少(P0.05或P0.01),H、H+DDP组血清中bFGF、MMP-2含量均明显降低(P0.01)。结论:黄芪、莪术配伍可能是通过下调MMP-2、bFGF的表达对新生血管生成产生抑制作用。     

扶正散结汤拆方配伍中药对Lewis肺癌转移及血管生成影响的研究

目的:研究扶正散结汤拆方配伍中药对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤转移及血管生成机制影响的差异及其协同作用。方法:80只C57小鼠,随机均分为空白组、模型组、顺铂组、扶正组、化痰组、活血组、解毒组、联合组,除空白组外其余小鼠右腋皮下接种Lewis瘤细胞建立肺癌模型,从接种后的第2天开始分别给予相应药物灌胃或腹腔注射,连续14 d后处死,将瘤体剥离常规固定、脱水、包埋切片,免疫组化SP法检测肿瘤组织中VEGF、ES、MMP-2。结果:各给药组肺转移结节数量均低于模型组(P<0.05),以顺铂组和联用组为最少、也最接近,其次依次为扶正组、解毒组和活血组,各组与顺铂组相比,除化痰组外,无显著性差异。顺铂及各配伍组分组均较模型组VEGF、MMP-2表达量降低、ES表达量升高,其中解毒组VEGF表达最低(P<0.05)、联用组ES表达量最高(P<0.05 or P<0.01)、MMP-2表达量最低(P<0.05),而顺铂组不具任何优势。结论:扶正散结汤拆方配伍四法联用具有更好抗肿瘤转移效果,与顺铂相当;在抗肿瘤微血管生成机制方面,各配伍组分作用各有特点,但四法联用具有更优的效果。     

黄芪、莪术联合顺铂对人肝癌裸鼠CD147、iNOS表达的影响

目的探讨黄芪、莪术配伍联合顺铂(DDP)对人肝癌裸鼠CD147、iNOS表达的影响。方法构建人肝癌裸鼠原位移植瘤模型。成瘤后,将其随机分为8组:模型对照组、阳性对照组(DDP)、黄芪莪术配伍高剂量组(H)、黄芪莪术配伍中剂量组(M)、黄芪莪术配伍低剂量组(L)、黄芪莪术配伍高剂量+顺铂组(H+DDP)、黄芪莪术配伍中剂量+顺铂组(M+DDP)、黄芪莪术配伍低剂量+顺铂组(L+DDP),每组8只,给药15d,免疫组织化学染色及Real-time RT-PCR检测肿瘤组织中CD147、iNOS蛋白及mRNA的表达。结果与模型对照组相比,H、M、H+DDP、M+DDP、L+DDP组CD147、iNOS蛋白及mRNA表达均显著下降(P0.05或P0.01),并与剂量呈一定的正相关性。与DDP组相比,H+DDP组CD147、iNOS蛋白表达降低(P0.05或P0.01)。结论黄芪、莪术配伍可能是通过下调CD147、iNOS蛋白及mRNA表达对肿瘤新生血管生成产生影响。     

益气解毒方对ACHN人肾癌干细胞移植瘤VEGF、MVD影响的实验研究

目的:探讨益气解毒方抗肾癌作用机制,为中药抗肾癌提供理论基础。方法:选取20只SPF级BALB/c裸鼠随机分为空白对照组(生理盐水)和益气解毒方组,每组10只。建立ACHN人肾癌干细胞裸鼠皮下移植瘤模型,2组分别给予生理盐水和益气解毒方煎剂灌胃,每日2次,连续25 d。于接种30 d处死裸鼠,剥取瘤体后,比较2组裸鼠肿瘤的体积和质量;通过免疫组织化学(SP法)测定移植瘤组织血管内皮因子(VEGF)的表达和微血管密度(MVD)计数值。结果:益气解毒方组和空白对照组的肿瘤体积(mm~3)分别为(304.68±13.53)、(419.60±22.69);质量(g)为(1.74±0.42)、(2.69±0.49);计算益气解毒方的抑瘤率为(35.3±14)%。免疫组化测定2组裸鼠移植瘤VEGF的OD值分别为(0.10±0.02)、(0.17±0.02);MVD计数值分别为(10.5±2.4)、(22.8±2.5)。益气解毒方组的移植瘤体积、质量、VEGF的OD值和MVD计数值较空白对照组均明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:益气解毒方对ACHN人肾癌干细胞移植瘤的生长和血管微环境的VEGF、MVD具有明显的抑制作用。     

益气化瘀解毒方加减联合索拉非尼治疗原发性肝癌疗效研究

目的:比较索拉非尼与益气化瘀解毒方联合索拉非尼治疗原发性肝癌的临床疗效。方法:将56例原发性肝癌患者随机分为对照组和联合组,对照组予以索拉非尼口服,联合组在口服索拉非尼的基础上予以益气化瘀解毒方治疗。结果:两组患者基线资料比较无统计学意义(P>0.05)。两组患者半年、1年、两年生存率分别是:对照组与联合组,78.6%与96.4%,60.7%与85.7%,14.3%与39.3%,差异具有统计学意义(P<0.05)。患者两组PFS比较,对照组(4.55±0.41)个月,联合组(6.99±0.60)个月,差异具有统计学意义(P<0.05);两组患者生活质量评分,治疗前对照组与联合组无统计学意义,治疗后对照组高于联合组,且差异具有统计学意义。两组患者不良反应率比较,对照组与联合组无统计学意义。结论:尽管益气化瘀解毒方加减未能减轻索拉非尼毒副作用,但益气化瘀解毒方联合索拉非尼能延长患者半年、一年及两年生存率,同时能延长患者疾病无进展生存时间,改善患者生活质量。     

黄芪莪术配伍对人肝癌裸鼠原位移植瘤新生血管生成的影响

目的探讨补气活血药黄芪、莪术配伍对人肝癌裸鼠原位移植瘤新生血管生成的影响。方法构建人肝癌裸鼠原位移植瘤模型。成瘤后,将其随机分为5组:模型对照组、顺铂组(DDP)(2mg/kg DDP腹腔注射)、黄芪莪术配伍高剂量组(H)[12g/(kg·d)灌胃]、黄芪莪术配伍中剂量组(M)[6g/(kg·d)灌胃]、黄芪莪术配伍低剂量组(L)[3g/(kg·d)灌胃],每组8只。观察黄芪、莪术配伍对原位移植瘤的作用,免疫组化SP法检测肿瘤组织HIF-1α、VEGF的表达。结果H、M、L组的瘤重抑制率为41.55%、26.48%、24.66%,瘤体积抑制率为42.91%、25.05%、23.95%,能抑制原位移植瘤的生长,H组与模型对照组比较有极显著差异(P0.01)。免疫组化结果提示,H、M、L组HIF-1α、VEGF阳性表达IOD值均下降,与模型对照组比较有显著性差异(P0.05,P0.01)。结论黄芪、莪术配伍对人肝癌裸鼠原位移植瘤的生长有抑制作用,并能抑制肿瘤新生血管生成,其机制可能与对HIF-1α、VEGF表达的抑制有关。     

阴阳升降理论探析与启迪

通过梳理《内经》及相关医家关于阴阳升降的论述,探讨阴阳升降的内容及阴阳升降的不同内涵。从阐述人体生理变化和脏腑特点、阐述疾病的病机、解释治则治法和方药配伍应用等方面分析阴阳升降对临床的启迪作用。     

谈人参在《伤寒论》中的应用

人参为五加科植物人参的根。最早见于《神农本草经》,列为上品,书云:“人参味甘微寒,主补五脏,安精神,定魂魄,止惊悸,除邪,明目,开心,益智。”其味甘、微苦,性微温。归脾(胃)、肺、心经。具有大补元气,补脾益肺,益气生津,宁心安神之功效。在《伤寒论》中,仲景应用人参共40次,入     

非酒精性脂肪肝诊治的问题及对策

目的探讨非酒精性脂肪肝临床治疗中有效对策。方法结合近代非酒精性脂肪肝治疗研究现状部分问题,运用中医辨证和辨病论治结合现代药理学研究进展方法,防治非酒精性脂肪肝。结果中西医结合防治此病有效。结论中西医结合辨证和辨病结合论治防治此病为有效对策。     

《金匮要略·血痹虚劳病脉证并治》虚劳病精气神调治原则与方法

从中医精气神辨识角度认识虚劳病,总结虚劳病病因病机。通过观察面容、形态、神色、五官、舌象、脉象等辨识精气神状态,确立虚劳病精气神调治原则。在精气神辨识理论指导下,对《金匮要略·血痹虚劳病脉证并治》相关条文、方药进行解析,总结虚劳病相关治则治法。根据精气神调养原则,为虚劳病临床应用提供指导。     

从“方药离合”看中医学的方药共荣

通过对历代方剂与本草的应用演变和发展过程的论述,揭示了中医方药共荣关系,并以黄柏、升麻等药为例,强调方药配伍运用是方药共荣的核心环节.随后,结合中医发展的现实环境,分析了坚持方药共荣的正确方向,对于防止重药轻方的错误倾向,提高中医临床疗效,启迪现代研究思路,均具有重要的学术价值和现实意义.     

五脏补血法理论及临床应用探讨

血液的生成与五脏关系密切,据此确立五脏补血法:养心补血法、健脾补血法、润肺补血法、滋肝补血法、益肾补血法。     

全蝎配伍蜂房之祛风攻毒作用探析

通过梳理古本草文献中全蝎、蜂房的有关记载和现代临床对该药对的配伍应用,探讨并阐释该药对祛风攻毒增效的作用机制,认为全蝎配蜂房,药力迅捷,内走脏腑,外达肢节,透骨搜风,既可祛风通络止痛,又可攻毒散结消痈.尤其适宜于治疗风湿顽痹、痈疽恶疮、癌肿等.     

丹栀逍遥散及其提取物镇静催眠作用研究

目的探讨丹栀逍遥散原方及提取物镇静催眠作用。方法将小鼠分为14组,正常对照组、原方组及各组分低中高剂量组,通过测定小鼠自主活动次数,采用戊巴比妥钠延长睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量镇静催眠协同作用实验观察丹栀逍遥散原方及各提取物镇静催眠作用。结果丹栀逍遥散原方及提取物均无改变小鼠自主活动的功能,表明均无中枢兴奋性作用;丹栀逍遥散石油醚提取液高、中剂量具有显著延长戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间的作用(P<0.01或P<0.05),石油醚提取液高剂量能明显增加阈下剂量戊巴比妥钠睡眠小鼠个数(P<0.01)。结论丹栀逍遥散石油醚提取部位可能为丹栀逍遥散的中枢抑制作用的有效部位。     

高脂血症诊治研究中问题及策略

目的:探讨高脂血症诊临床治疗中有效对策。方法:结合近代高脂血症诊治疗研究现状部分问题,运用中医辨证和辨病论治结合现代药理学研究进展方法,防治高脂血症。结果:中西医结合防治此病有效。结论:中西医结合辨证和辨病结合论治防治此病为有效对策。     

小青龙汤因机证治浅析

小青龙汤为温阳宣肺、蠲痰涤饮之剂,凡见哮喘、咳嗽、痰、饱胀、喘息和四肢水肿等因"外感风寒,内有寒饮"所致者,均可辨证应用小青龙汤。临证应用时注意:①寒邪不必拘泥外感;②"三水"的变化要审清;③但见寒饮,有无表证均可用此方;④注意痰饮在临床上的变化;⑤临床见喘未必治喘,要临证辨别。用此方,要抓住以下临床指征:①面色:"三水"之面色--黧黑之色;②脉象:弦脉或浮紧;③舌象:舌苔多水滑;④痰涎:咳痰较爽,痰涎清稀,泡沫状。以上"但见一证便是,不必悉俱",有效之后,应中病即止。