宁心红杞胶囊对围绝经大鼠卵巢局部自分泌及旁分泌因子的调节作用

目的　探讨宁心红杞胶囊对围绝经大鼠卵巢局部自分泌及旁分泌因子的调节作用。方法　选用4月龄雌性大鼠（正常组）,14月龄阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠（作为老年大鼠模型）。模型大鼠随机分为宁心红杞大、中、小剂量组、阳性药（雌二醇）组和模型组,分别给予相应药物。HE染色观察卵巢生长卵泡、黄体等情况;免疫组化检测卵巢雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、促卵泡激素(FSH)、促黄体激素(LH)、抑制素α（INHα）、激活素（ACT）α β、卵泡抑制素（FS）、胰岛素样生长因子（IGF） 1的表达。结果　与模型组比较,宁心红杞大、中剂量组卵巢指数、生长卵泡数增加（P＜0．05）, FSH、LH水平表达降低（P＜0．05）;宁心红杞大剂量组和阳性药物组ER表达水平上升（P＜0．05）,宁心红杞大、中剂量组IGF 1和INHα表达水平升高（P＜0．05）,而ACTα-β和FS表达水平下降（P＜0.05）。结论 宁心红杞胶囊可使卵巢局部自分泌、旁分泌系统调节因子相互协调平衡,进而改善卵巢功能。     

忍冬木层孔菌醇提物雌激素样作用研究

目的:研究忍冬木层孔菌醇提物的雌激素样作用,为寻找安全有效的雌激素替代药物提供依据。方法:采用细胞增殖实验评价忍冬木层孔菌醇提物的体外雌激素样作用和抗雌激素作用;检测忍冬木层孔菌提取物对雌性幼鼠、去势雌性大鼠血清中雌二醇(E2)、孕酮(P)含量及成年雌性大鼠子宫雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)表达,并考察其对成年雌性大鼠子宫、卵巢及乳腺组织病理学的影响。结果:细胞增殖实验显示,忍冬木层孔菌醇提物在5~50μg/m L时能刺激MCF-7细胞增殖,具有雌激素样作用;在10~100μg/m L时能降低E2诱导的MCF-7细胞增殖,具有抗雌激素作用。体内实验表明300 mg/kg忍冬木层孔菌醇提物能增加雌性幼鼠血清E2含量,促进初生雌性幼鼠子宫发育;忍冬木层孔菌醇提物240 mg/kg可增加去势雌鼠血清E2、P含量,改善因雌激素缺乏而导致的子宫萎缩。120 mg/kg忍冬木层孔菌醇提物可增加正常成年雌性大鼠血清P含量,120、240 mg/kg忍冬木层孔菌醇提物可以增加正常雌性成年大鼠血清E2含量并能调节成年雌性大鼠子宫ERα、ERβ表达。病理检查显示,忍冬木层孔菌醇提物对大鼠子宫、卵巢、乳腺等组织病理学无明显影响。结论:忍冬木层孔菌具有雌激素样作用,无明显不良反应,具有替代雌激素应用的前景。     

中药对方对雌激素负荷去势大鼠E2、ER、ERα、ERβ表达的影响

目的:研究中药方对去势雌激素负荷大鼠子宫内膜增生症模型雌激素、雌激素受体及雌激素受体亚型的影响.方法:放射免疫法测定大鼠血清雌激素(E2)水平,免疫组化法观察大鼠子宫内膜腺上皮雌激素受体(ER)及雌激素受体亚型(ERα、ERβ)的表达.结果:与模型组相比,给予药物干预的小组血清雌激素(E2)水平降低,本方可降低大鼠子宫内膜腺上皮细胞ERα、ERβ的表达.结论:实验表明造模大鼠体内存在高雌激素,高雌激素受体及其亚型的病理状态,而本实验对方能有效拮抗其体内雌激素、雌激素受体,雌激素受体亚型水平的提高.本实验成功的利用靶向给药方法祛除增生的子宫内膜,为临床治疗功血提供了新的思路和方法.     

葛根素对去卵巢大鼠子宫雌激素受体α表达的影响

目的:探讨葛根素对去卵巢大鼠子宫雌激素受体(ER)α表达的影响。方法:大鼠去势后灌服不同剂量葛根素、倍美力溶液30d后,用酶联免疫吸附试验(ELISA)观察血清雌二醇(E2)水平,免疫组织化学法观察子宫ERα的表达。结果:大鼠去势后血清E2下降(P<0.01),给药30d后,给药各组血清E2水平及子宫ERα阳性表达明显上升,与模型组比较,有显著性差异(P<0.01)。结论:葛根素具有雌激素样作用,通过影响ERα的表达调节去卵巢大鼠生殖内分泌的功能。     

急性胰腺炎的CT诊断研究

目的：研究中药方对去势雌激素负荷大鼠子宫内膜增生症模型雌激素、雌激素受体及雌激素受体亚型的影响。方法：放射免疫法测定大鼠血清雌激素（E2）水平,免疫组化法观察大鼠子宫内膜腺上皮雌激素受体（ER）及雌激素受体亚型（ERα、ERβ）的表达。结果：与模型组相比,给予药物干预的小组血清雌激素（E2）水平降低,本方可降低大鼠子宫内膜腺上皮细胞ERα、ERβ的表达。结论：实验表明造模大鼠体内存在高雌激素,高雌激素受体及其亚型的病理状态,而本实验对方能有效拮抗其体内雌激素、雌激素受体,雌激素受体亚型水平的提高。本实验成功的利用靶向给药方法祛除增生的子宫内膜,为临床治疗功血提供了新的思路和方法。     

左、右归丸对去势大鼠阴道ER的影响研究

目的:探讨左、右归丸增加去势大鼠阴道固有层血管数量的机制。方法:将雌性育龄期大鼠随机分为正常组、假手术组、去势模型组、去势倍美力组、去势左、右归丸组。正常组、假手术组、去势模型组:每日生理盐水灌胃;去势倍美力组:以62.5μg/100 g倍美力灌胃;去势左、右归丸组:按成人用量的15倍灌胃。连续给药12周。采用免疫组化法阴道组织进行病理切片制作,通过Mias-2000图像分析系统检测阴道黏膜雌激素受体α(ERα)及雌激素受体β(ERβ)蛋白表达水平,并测量阴道黏膜厚度、上皮层数、皱襞数和阴道固有层血管数;采用荧光定量PCR技术检测阴道组织ERαmRNA表达水平。结果:与假手术组、正常组比较,去势模型组大鼠阴道黏膜厚度、阴道皱襞数、阴道固有层血管数明显降低(P<0.05);与去势模型组比较,去势倍美力组大鼠阴道黏膜厚度、阴道皱襞数、阴道固有层血管数明显增加(P<0.05),去势左、右归丸组大鼠阴道皱襞数、阴道固有层血管数均明显升高(P<0.05);与假手术组、正常组比较,去势模型组大鼠阴道ERα与ERβ明显减少(P<0.05);与去势模型组比较,去势倍美力组、去势左丸组大鼠阴道ERα明显增加(P<0.05),去势倍美力组、去势左、右归丸组大鼠阴道ERβ明显增加(P<0.05);假手术组、正常组、倍美力组、左、右归丸组大鼠阴道组织ERαmRNA的表达量分别为模型组的1.83、1.54、1.53、1.88、1.36倍。结论:左归丸通过促进去势雌性大鼠阴道ERα、ERβ蛋白及mRNA表达、右归丸通过促进去势雌性大鼠阴道ERβ蛋白及mRNA表达而促进去势雌性大鼠阴道固有层血管数量。     

乳康胶囊对乳腺增生大鼠乳腺组织及相关受体表达的影响

目的:观察乳康胶囊对大鼠乳腺增生组织及雌孕激素受体表达的影响。方法:48只雌性健康未孕大鼠,随机抽取8只作为正常对照组,其余40只大鼠采用注射苯甲酸雌二醇及黄体酮建立大鼠乳腺增生模型,将造模成功的大鼠随机分为5组,即模型组,阳性对照组,乳康胶囊小、中、大剂量组。各组大鼠给予相应药物干预后HE染色观察各组大鼠乳腺组织变化,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定大鼠乳腺组织血管内皮生长因子(VEGF)含量,采用免疫组化法测定各组大鼠乳腺组织血管内皮生长因子(VEGF)、乳腺雌激素受体α(ERα)和孕激素受体(PR)表达。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠乳腺组织中腺泡数目增多,腺泡和导管增生、扩张,细胞排列紊乱,表现出典型的乳腺增生症状,其乳腺组织VEGF、ERα和PR表达水平升高(P0.05);与模型组相比,乳康胶囊各剂量组大鼠乳腺增生小叶和腺泡数量减少,同时乳腺组织VEGF、ERα和PR表达降低。结论:乳康胶囊对大鼠乳腺增生具有抑制作用,其治疗机制可能与下调VEGF、ERα和PR的表达有关。     

桂附胶囊治疗子宫内膜异位症实验研究

目的探讨桂附胶囊对实验性子宫内膜异位症大鼠激素及相关因素的影响.方法以子宫内膜自体移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型.随机分为桂附胶囊组及丹那唑组.放射免疫法测定血清雌二醇(E2)、孕酮(P);免疫组化法测定雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、血管内皮生长因子(VEGF)、NK细胞.结果桂附胶囊能够降低子宫内膜异位症大鼠外周血中E2、P水平(P＜0.01);降低异位内膜ER、PR的含量(P＜0.05);提高NK细胞活性(P＜0.05);并可抑制血管内皮生长因子(VEGF)的生成.桂附胶囊的实验效果与对照药丹那唑相近.结论桂附胶囊能够通过调节内异症大鼠的内分泌而抑制异位内膜的血管形成,从而抑制异位内膜的生长;同时增加NK细胞的活性,以加强对异位内膜组织的清除作用.     

宁心红杞含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞超微结构及雌激素分泌的影响

目的:探讨宁心红杞含药血清对离体大鼠卵巢颗粒细胞超微结构及雌激素分泌的影响.方法:体外培养的卵巢颗粒细胞用氯化镉造模,加入宁心红杞舍药血清作用24h后,在电镜下观察颗粒细胞超微结构的变化,放射免疫法测定培养液中雌激素的浓度.结果:宁心红杞舍药血清可明显增加雌二醇(B)的分泌,能明显改善离体大鼠卵巢颗粒细胞超微结构,电镜下表现为分泌颗粒增多,滑面内质网增多等.结论:宁心红杞胶囊可通过增加雌二醇的分泌及超微结构的改变来改善卵巢功能,延缓卵巢衰老.     

大黄、虫对药对雌孕激素负荷大鼠子宫肌瘤模型ERα、ERβ的影响

目的:探讨大黄、虫对药对雌、孕激素负荷大鼠子宫肌瘤模型雌激素受体亚型ERα、ERβ的影响及作用机理。方法:70只SD雌性大鼠随机分成正常对照组、模型组、大黄虫小剂量组、大黄虫中剂量组、大黄虫大剂量组、大黄虫丸组、桂枝茯苓胶囊组。采用雌、孕激素负荷法建立大鼠子宫肌瘤模型,用SABC免疫组化法测定大鼠子宫平滑肌细胞ERα、ERβ的表达水平。结果:模型大鼠子宫平滑肌细胞ERα、ERβ的表达显著增高(P<0.01),各治疗组的ERα、ERβ较模型组均下降(P<0.01)。结论:大黄、虫对药可抑制子宫肌瘤平滑肌细胞ERα、ERβ的表达,这可能是该药治疗子宫肌瘤的主要机理之一。     

Radix Paeoniae Alba increases serum estrogen level and up‐regulates estrogen receptor expression in uterus and vagina of immature/ovariectomized mice

Radix Paeoniae Alba (RPA) is widely used in clinical treatment for gynecological diseases, particularly abnormal menstruation, menstrual pain, and breast tenderness; however, no scientific evidence base links RPA to estrogen replacement therapy. In this study, we characterize estrogenic activity of RPA using immature and ovariectomized (OVX) mice together with in vitro studies focus on estrogen receptor (ER) pathway for molecular mechanism. RPA treatments demonstrated significant estrogenic activity, as indicated by promoting the development of uterus and vagina in immature mice, reversing the atrophy of uterus and vagina in OVX mice, up‐regulating the expressions of ERα and ERβ at protein and mRNA level in reproductive tissues. Meanwhile, RPA significantly increased serum estradiol and clearly decreased serum luteinizing hormone and follicle‐stimulating hormone of immature/OVX mice. Moreover, RPA could induce ER positive MCF‐7 cell from S‐phase to G2 stage and induce proliferation and no influence on ER negative MDA‐MB‐231 cell. RPA could bind with ERα and ERβ and significantly stimulate ERα/β‐estrogen response element (ERE) luciferase reporter gene expression. All activities were inhibited by the ER antagonist ICI 182,780. This study illustrates RPA exerts estrogenic effects by stimulating biosynthesis of estrogen in circulation, up‐regulating ERs in target tissues, and mimicking the estrogen through ER‐ERE‐dependent pathway.     

金雀异黄酮与芹菜素的雌激素样作用体外研究

目的:用雌激素受体(estrogen receptor,ER)表达阳性细胞株人乳腺癌细胞MCF-7,检测金雀异黄酮(genistein)与芹菜素(apigenin)的雌激素样活性大小。方法:用MTT法研究金雀异黄酮与芹菜素对体外培养MCF-7细胞增殖的影响;Real-time RT-PCR法检测其对ERα,ERβ,PR,PS2 mRNA表达水平的影响。结果:金雀异黄酮与芹菜素促进MCF-7增殖;金雀异黄酮的1×10-10mol.L-1组显著增加ERαmRNA的表达水平,是对照组的17.76倍,是阳性对照E2组的1.75倍。芹菜素显著促进了PR mRNA表达水平,是对照组4.57倍,并达到E2组1.11倍。两者在不同浓度对ERα,ERβ,PR,PS2 mRNA中的一个或几个均有不同的促进作用。结论:金雀异黄酮与芹菜素均有明显的雌激素样作用,虽对于不同的雌激素应答基因(ERα,ERβ,PR,PS2 mRNA)表现出不同的促进表达作用,但金雀异黄酮更加强烈。提示植物雌激素发挥雌激素样作用的信号途径与雌激素信号途径并不完全相同;黄酮类药物的B环位置是雌激素样活性的关键位点之一,异黄酮(B环处于3位时)的雌激素样活性大于黄酮(B环处于2号位)。     

补肾育宫冲剂治疗子宫发育不良的机理研究

目的：探讨补肾育宫冲剂治疗子宫发育不良性不孕症的作用机理。方法：（１）以子宫发育不良和发育正常的育龄妇女为观察组和对照组，于卵泡期测血清性激素和子宫内膜雌、孕激素受体（ＥＲ、ＰＲ）含量，并作观察组治疗前后比较。（２）用大鼠作动物实验，设对照组及补肾育宫冲剂３个剂量组，于服药前后测血清雌二醇（Ｅ２），对服药后大鼠的垂体、卵巢、子宫作病理检验并测ＥＲ、ＰＲ含量。对切除卵巢的幼龄大鼠作本冲剂的雌激素活怀     

桃红消癥散对子宫肌瘤模型大鼠雌、孕激素受体表达的影响

目的:研究桃红消癓散对子宫肌瘤模型大鼠雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法:采用雌孕激素负荷法建立大鼠子宫肌瘤动物模型,通过放免法检测血清雌孕激素水平,观察子宫组织病理改变,免疫组化法观察大鼠子宫平滑肌细胞ER,PR及PCNA的表达。结果:模型大鼠较正常大鼠子宫明显增大,血清性激素水平升高,子宫平滑肌细胞ER,PR及PCNA的表达明显高于正常大鼠。与模型对照组比较,桃红消癓散可降低血清性激素水平,改善子宫组织结构,抑制平滑肌细胞ER,PR及PCNA的表达。结论:桃红消癓散有治疗子宫肌瘤的作用,其机制可能与调节血中雌孕激素水平,抑制子宫平滑肌细胞ER,PR及PCNA的表达有关。     

乌鸡白凤丸对肾虚血亏大鼠子宫内膜ER、PR、VEGF蛋白表达影响

目的：探讨乌鸡白凤丸对肾虚血亏大鼠子宫内膜血管生成的影响及作用机制。方法：采用放血、饥饿加灌服羟基脲制备肾虚血亏大鼠模型,用乌鸡白凤丸进行干预,采用HE染色观察子宫内膜厚度及腺体情况;免疫组化方法检测子宫内膜ER、PR、VEGF蛋白的表达。结果：乌鸡白凤丸能有效增加肾虚血亏大鼠子宫内膜的厚度,提高ER、VEGF蛋白表达（P〈0．01）,差异有统计学意义。结论：乌鸡白凤丸具有促肾虚血亏大鼠子宫内膜血管生成及内膜修复作用,其作用机制可能与提高ER、VEGF蛋白表达有关。     

助孕3号方防治大鼠自然流产的机理研究

目的：研究助孕3号方防治肾虚、脾虚型大鼠自然流产的机理。方法：(1)以羟基脲与米非司酮(RU486)建立肾虚加黄体抑制模型,利血平与RU486建立脾虚加黄体抑制模型。(2)观察助孕3号方对病证结合模型大鼠孕酮(P)分泌、蜕膜孕激素受体(PR)和雌激素受体(ER)的影响;酶联免疫法检测血清卵泡刺激素、雌二醇和P,免疫组化法检测蜕膜PR,光镜观察子宫、卵巢的形态学改变。(3)助孕3号方对大鼠离体与在体子宫兴奋性的影响,采用水提液与含药血清进行离体子宫兴奋试验。结果：(1)助孕3号方能提高肾虚加黄体抑制与脾虚加黄体抑制模型大鼠蜕膜PR阳性率,与单纯黄体抑制模型组比较差异均有显著性(P<0．05)。(2)助孕3号方水提液和含药血清均能降低离体子宫肌条收缩的强度(P<0．05),在体子宫兴奋试验提示助孕3号组子宫收缩强度显著下降(P<0．05)。结论：补肾和补肾健脾中药保胎的主要作用环节是提高靶细胞PR以及对子宫平滑肌的舒缓作用。     

妇科止血消痛颗粒对药物流产大鼠模型雌孕激素及其受体的影响

目的观察妇科止血消痛颗粒对药物流产后大鼠血清雌激素、孕激素含量及子宫组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达的影响,探讨其治疗药物流产后子宫复旧不全的机制。方法选用SD雌性大鼠72只,随机分为空白组、模型组、产妇康组及妇科止血消痛颗粒高、中、低剂量组。建立大鼠药物流产后子宫复旧不全病理模型。采用放射免疫法检测大鼠血清中雌二醇(E2)、孕酮(P)含量,免疫组化法检测各组大鼠子宫组织中ER、PR的表达水平。结果模型组大鼠血清中E2、P含量及子宫组织中ER、PR表达均低于空白组。妇科止血消痛颗粒高、中、低剂量组用药后,血清中E2含量升高,P含量降低,差异有统计学意义(P0.05,P0.01),与产妇康组比较,差异无统计学意义(P0.05)。妇科止血消痛颗粒中、低剂量组可升高ER的表达,妇科止血消痛中剂量组可升高PR的表达(P0.05,P0.01)。结论大鼠药物流产后子宫复旧不全模型E2、P、ER、PR均降低,可能影响了产后子宫内膜的修复,妇科止血消痛颗粒通过升高E2、ER、PR水平,降低P水平,发挥治疗药物流产后子宫复旧不全的作用。     

更血停治疗子宫肌瘤及其对雌孕激素受体的影响

目的 探讨更血停治疗子宫肌瘤的疗效及其对雌孕激素受体的影响。方法 选择临床诊断为子宫肌瘤并有手术指征的64例患者,按配对随机分为两组（各32例）,治疗组从月经第1天起每天给予更血停胶囊1粒,连续口服90天后行手术治疗;对照组只行手术治疗。两组均于卵泡期和手术前1天采用放射免疫法测定血清生殖激素〔包括雌二醇（E2）、孕酮（P）、促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素（LH）〕水平;彩色多普勒超声测定治疗组服药前后子宫及子宫肌瘤体积的变化,免疫组化链霉素抗生物素蛋白,即过氧化物酶连接法（SP法）检测子宫肌瘤及肌层组织的雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）的表达。结果 服药后治疗组血清E2为〔（167.0±85.9）pmol/L〕、P为（1.9±1.0）nmol/L、FSH为（10.4±2.1）IU/L、LH为（12.0±9.8）IU/L,均维持在早卵泡期水平;最大子宫肌瘤体积由（380.4±21.0）cm³缩小至（162.3±14.8）cm³（P＜0.01）;治疗组子宫肌瘤组织中ER、PR的表达均明显低于对照组（P＜0.01）。结论 更血停可明显减少子宫肌瘤组织中的ER、PR的表达,使子宫肌瘤明显缩小。     

肺气虚模型大鼠肺、肾组织水液代谢相关性的机制研究

目的:观察肺气虚模型大鼠肺、肾组织AQP1表达及血中ET、IL-1β、TNF-α水平的变化,为机体水液代谢过程中肺肾相关理论提供依据。方法:用气管内注入脂多糖及熏香烟方法复制肺气虚大鼠模型,应用免疫组化、Westernblot方法、RT-PCR方法测定肺、肾组织AQP1蛋白及mRNA表达的变化,应用放免法测定血中、肺组织匀浆中ET、IL-1β及TNF-α含量。结果:与对照组比较,模型组肺组织AQP1mRNA及蛋白表达明显下降;肾组织AQP1mRNA及蛋白表达明显增加(P<0.01)。模型组血中ET、IL-1β及TNF-α含量明显升高(P<0.01)。结论:肺气虚模型大鼠肺组织AQP1表达下调;肾组织AQP1表达上调;血中及肺组织中ET、IL-1β、TNF-α含量明显升高,结果提示肺主"通调水道"功能之一可能与影响肺肾组织AQP1表达有关。     

助阳通络方治疗大鼠乳腺增生病的实验研究

目的:利用动物模型,观察助阳通络方不同剂量组对乳腺增生病模型大鼠性激素水平的影响以及雌、孕激素受体表达情况,探讨其作用机制。方法:采用放射免疫法测定血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、催乳素(PRL)的激素水平;采用免疫组化法测定乳腺增生病模型大鼠雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)阳性表达。结果:在助阳通络方对乳腺增生病大鼠性激素水平的影响实验中,助阳通络方高剂量组(E组)与正常对照组(A组)比较,E2、P、PRL均有显著性差异(P0.01);与疾病模型组(B组)比较,E2、P、PRL均有显著性差异(P0.01)。助阳通络方中剂量组(F组)与A组比较,无显著性差异(P0.05);与B组比较E2、P、PRL均有显著性差异(P0.01)。助阳通络方低剂量组(G组)与A组比较,E2、P、PRL均有显著性差异(P0.01);与B组比较E2、P、PRL均有显著性差异(P0.01)。在助阳通络方对乳腺增生病大鼠ER、PR的影响实验中,E组与A组比较,无显著性差异(P0.05);与B组比较,无显著性差异(P0.05)。F组与A组比较,无显著性差异(P0.05);与B组比较ER、PR阳性表达显著降低(P0.01)。G组与A组比较,ER阳性表达显著升高(P0.01);PR阳性表达升高(P0.05);与B组比较,无显著性差异(P0.05)。结论:助阳通络方可降低造模大鼠乳腺组织中升高的E2、PRL的含量,升高造模大鼠乳腺组织中降低的P含量,与三苯氧胺作用类似。可使造模大鼠乳腺组织中ER、PR阳性表达受抑制,且作用与三苯氧胺类似。