中药对方对雌激素负荷去势大鼠E2、ER、ERα、ERβ表达的影响

目的:研究中药方对去势雌激素负荷大鼠子宫内膜增生症模型雌激素、雌激素受体及雌激素受体亚型的影响.方法:放射免疫法测定大鼠血清雌激素(E2)水平,免疫组化法观察大鼠子宫内膜腺上皮雌激素受体(ER)及雌激素受体亚型(ERα、ERβ)的表达.结果:与模型组相比,给予药物干预的小组血清雌激素(E2)水平降低,本方可降低大鼠子宫内膜腺上皮细胞ERα、ERβ的表达.结论:实验表明造模大鼠体内存在高雌激素,高雌激素受体及其亚型的病理状态,而本实验对方能有效拮抗其体内雌激素、雌激素受体,雌激素受体亚型水平的提高.本实验成功的利用靶向给药方法祛除增生的子宫内膜,为临床治疗功血提供了新的思路和方法.     

痛经宁颗粒对痛经大鼠子宫雌、孕激素受体的影响

目的:探讨中药痛经宁颗粒治疗原发性痛经(PD)的作用机制。方法:建立大鼠痛经模型,以西药阿司匹林作对照药,采用放免法、免疫组化法、彩色病理图像分析系统对照观察了痛经大鼠血浆雌激素(E2)、孕激素(P)及子宫雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达与外周血、子宫前列腺素含量的相关性变化。结果:E2、ER与PGF2α、TXB2含量密切相关;中药组E2、ER、PGF2α、TXB2较之模型组显著下降(P<0.01);P、PR、PGE2、6-keto-PGF1α含量较模型组显著上升(P<0.01)。结论:卵巢激素及其受体结合活动参与了PD的发生,痛经宁通过调节ER、PR表达,调节卵巢激素,调节前列腺素而达到治疗PD的作用。     

马鬃蛇醇提物对下丘脑抑制大鼠雌激素水平及卵巢ER的影响

目的:研究马鬃蛇醇提物(CVAE)对下丘脑抑制大鼠雌激素水平及卵巢雌激素受体(ER)的影响。方法:sc吗啡建立未成年雌性大鼠下丘脑抑制模型,灌胃给药21d,用放射免疫法测定血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)水平,用免疫组化法测定卵巢ER。结果:CVAE可提高雌激素受体阳性细胞表达,明显升高血清中E2、FSH水平,大鼠出现动情期提前,并可升高子宫、卵巢的脏器系数。显微镜观察显示,大鼠子宫内膜增厚,腺体数量增多,间质致密。结论:CVAE可提高未成年雌性大鼠下丘脑抑制的E2、FSH水平,增加卵巢ER阳性细胞表达,提示其作用机制可能是通过下丘脑-垂体-卵巢轴的调节。     

宁心红杞胶囊对去势雌性大鼠的雌激素样作用

目的:研究宁心红杞胶囊对去势雌性大鼠的雌激素样作用机制。方法:采用去势雌性大鼠模型(OVX),以雌二醇(17β-estradiol,E2)作为阳性对照,给予宁心红杞胶囊2周后,测定其子宫系数、血清E2含量;以免疫组化法观察子宫上血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、水通道蛋白(aquaporin,AQP)、雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)和原癌基因c-jun,c-fos的表达;以酵母双杂交法检测宁心红杞胶囊中是否含有与ERα或ERβ结合的成分。结果:宁心红杞胶囊与E2均能显著增加OVX大鼠子宫系数,提高血清E2水平,上调子宫上VEGF,AQP2和AQP5的表达;但与E2不同,未见宁心红杞胶囊有促进OVX大鼠子宫上ERα,PR,c-jun,c-fos表达的作用。酵母双杂交实验未检测到宁心红杞胶囊中含有与ERα或ERβ结合的成分。结论:宁心红杞胶囊具有雌激素样作用,能治疗围绝经期综合征,但作用机制不同于雌激素类物质,较少发生雌激素介导的子宫内膜癌的风险。     

补肾活血复方直肠给药促卵泡发育作用研究

目的:探讨补肾活血复方资冲颗粒直肠给药的促卵泡发育作用及其机制。方法:幼龄大鼠(160～170g)和去势小鼠经直肠给予资冲颗粒,并与己烯雌酚、女金丹进行对照。对大鼠卵巢各级卵泡及黄体进行计数;对大鼠与小鼠子宫指数、子宫组织形态学进行观察;采用酶免疫分析法测定小鼠血清E2水平。结果:资冲颗粒、己烯雌酚、女金丹作用相似,均可增加大鼠卵巢窦前卵泡数和卵泡总数(P0.05或P0.01)并能增加子宫指数及子宫内膜厚度(P0.05);增加去势小鼠子宫指数(P0.01)、子宫内膜厚度(P0.05),提高血清E2水平(P0.05)。结论:资冲颗粒直肠给药能促进幼龄大鼠卵泡发育,提高去势小鼠血清雌激素水平,并产生雌激素样效应。提示补肾活血复方促卵泡发育的作用可能与提高雌激素水平有关。直肠给药可能是促卵泡发育的有效给药途经之一。     

二仙汤及其组方中药对幼年大鼠子宫作用的研究

目的:通过对二仙汤及其组方中药对幼年大鼠子宫作用的定量分析,探讨其对子宫功能的影响机制。方法:幼年SD大鼠54只,分为正常对照、己烯雌酚、二仙汤、淫羊藿、仙茅、巴戟天、当归、黄柏和知母9组,各组给药6 d后麻醉大鼠,取血清测量雌二醇(E2)的含量,分离摘取双侧子宫,称重后常规石蜡包埋切片,行HE染色和免疫组织化学染色。结果:己烯雌酚组、二仙汤组、淫羊藿组和仙茅组子宫系数与正常组对比增加明显,有统计学意义(P0.05)。仅己烯雌酚组E2增高。HE染色发现己烯雌酚组子宫内膜厚度和上皮细胞高度明显增加(P0.01)。免疫组织化学染色发现己烯雌酚可明显下调雌激素受体α(ERα)和雌激素受体β(ERβ)在大鼠子宫中的表达,而二仙汤及方中君药淫羊藿和仙茅则上调ERα和ERβ的表达(P0.01)。结论:二仙汤及其方中温肾药(淫羊藿、仙茅)通过调节雌激素受体ERα和ERβ在子宫中的表达而发挥植物雌激素的功能。     

急性胰腺炎的CT诊断研究

目的：研究中药方对去势雌激素负荷大鼠子宫内膜增生症模型雌激素、雌激素受体及雌激素受体亚型的影响。方法：放射免疫法测定大鼠血清雌激素（E2）水平,免疫组化法观察大鼠子宫内膜腺上皮雌激素受体（ER）及雌激素受体亚型（ERα、ERβ）的表达。结果：与模型组相比,给予药物干预的小组血清雌激素（E2）水平降低,本方可降低大鼠子宫内膜腺上皮细胞ERα、ERβ的表达。结论：实验表明造模大鼠体内存在高雌激素,高雌激素受体及其亚型的病理状态,而本实验对方能有效拮抗其体内雌激素、雌激素受体,雌激素受体亚型水平的提高。本实验成功的利用靶向给药方法祛除增生的子宫内膜,为临床治疗功血提供了新的思路和方法。     

补肾调冲方对去卵巢大鼠性激素水平及下丘脑雌激素受体α、雌激素受体β mRNA表达的影响

[目的]探讨补肾调冲方对去卵巢大鼠血清性激素水平及下丘脑雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)mRNA表达的影响。[方法]以假手术组为对照,将去卵巢大鼠随机分为去卵巢空白组,补肾调冲方高、中、低剂量组,已烯雌酚组。采用放射免疫分析法测定血清雌二醇(E2)、促卵泡生成激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)水平,采用逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)检测下丘脑ERα、ERβmRNA表达。[结果]去卵巢大鼠血清FSH、LH水平升高,E2及下丘脑ERα、ERβmRNA水平降低,补肾调冲方大鼠血清E2有升高趋势,FSH有降低趋势,补肾调冲方能降低去卵巢大鼠血清LH水平,升高下丘脑ERα、βmRNA的表达。[结论]补肾调冲方在改善去卵巢大鼠性激素水平同时,可能通过影响ERα、ERβmRNA的表达,提高ER的生物效应,从而降低更年期综合征的发生。     

更年乐颗粒剂对12月龄大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的调节作用

目的:通过检测内分泌激素的水平,下丘脑雌激素受体(ER)表达,考察更年乐对下丘脑-垂体-卵巢轴(HPO)的调节作用。方法:采用12-15月龄SD大鼠,同时设青年鼠作对照,灌胃给药30 d后,放免法检测血清E2、P、Te、FSH、LH水平,免疫组化法检测下丘脑GnRH,垂体和下丘脑ER表达。结果:与更年组比,12月龄组可以升高12月龄大鼠血清中E2,P(P<0.05或P<0,01)水平,有降低LH水平的趋势(P>0.05),明显降低下丘脑GnRH的表达(P<0.05),上调下丘脑ER表达。结论:更年乐能改善因体内雌激素水平降低导致的下丘脑、垂体功能的相对亢进状态,上调下丘脑ER表达,增强雌激素效应,调节HPO轴的失调。     

“逆针灸”对去卵巢大鼠生殖内分泌影响的研究

目的:探讨逆针、逆灸关元穴对去卵巢大鼠生殖内分泌包括血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)、促卵泡素(FSH)、黄体生成激素(LH)、FSH/LH及子宫E2、雌激素受体-α(ER-α)的影响及其机制.方法:将80只3.5月龄SD雌性大鼠随机分为5组,采用放射免疫、免疫组化等方法,观察在3.5月龄逆针、逆灸关元穴(每周2次,连续4周)对随后去卵巢大鼠的血清E2、P、T、FSH、LH、FSH/LH及子宫E2、ER-α的影响.结果:与假手术组相比,去卵巢大鼠的血清E2、P及T降低(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01),FSH、LH及FSH/LH升高,子宫E2和ER-α表达下降(P＜0.05,P＜0.01);而预先介入逆针、逆灸疗法后,血清E2回升,FSH、LH及FSH/LH下降,其中以逆灸去卵巢组FSH及逆针、逆灸去卵巢组FSH/LH下降最为明显(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01),子宫E2和ER-α表达提高,其中逆针去卵巢组E2及逆针、逆灸去卵巢组ER-α表达均显著增强(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01).对血清P影响不明显,而对于血清T则有下调之势.结论:逆针、逆灸关元穴可以减缓去卵巢大鼠的生殖内分泌紊乱,可能与该疗法直接或间接促进E2的合成,提高性器官的ER-α表达,调节下丘脑-垂体-卵巢轴的功能异常有关.     

忍冬木层孔菌醇提物雌激素样作用研究

目的:研究忍冬木层孔菌醇提物的雌激素样作用,为寻找安全有效的雌激素替代药物提供依据。方法:采用细胞增殖实验评价忍冬木层孔菌醇提物的体外雌激素样作用和抗雌激素作用;检测忍冬木层孔菌提取物对雌性幼鼠、去势雌性大鼠血清中雌二醇(E2)、孕酮(P)含量及成年雌性大鼠子宫雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)表达,并考察其对成年雌性大鼠子宫、卵巢及乳腺组织病理学的影响。结果:细胞增殖实验显示,忍冬木层孔菌醇提物在5~50μg/m L时能刺激MCF-7细胞增殖,具有雌激素样作用;在10~100μg/m L时能降低E2诱导的MCF-7细胞增殖,具有抗雌激素作用。体内实验表明300 mg/kg忍冬木层孔菌醇提物能增加雌性幼鼠血清E2含量,促进初生雌性幼鼠子宫发育;忍冬木层孔菌醇提物240 mg/kg可增加去势雌鼠血清E2、P含量,改善因雌激素缺乏而导致的子宫萎缩。120 mg/kg忍冬木层孔菌醇提物可增加正常成年雌性大鼠血清P含量,120、240 mg/kg忍冬木层孔菌醇提物可以增加正常雌性成年大鼠血清E2含量并能调节成年雌性大鼠子宫ERα、ERβ表达。病理检查显示,忍冬木层孔菌醇提物对大鼠子宫、卵巢、乳腺等组织病理学无明显影响。结论:忍冬木层孔菌具有雌激素样作用,无明显不良反应,具有替代雌激素应用的前景。     

逍遥丸对排卵障碍模型大鼠子宫内膜雌孕激素受体表达的影响

目的:以"女子以肝为先天"的中医理论为基础,选用逍遥丸作为疏肝法的代表方,比较逍遥丸对排卵障碍模型大鼠子宫内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达的影响。方法:雌性Wistar大鼠给予雷公藤多甙片,雌性SD大鼠注射丙酸睾丸酮,将2种排卵障碍成功模型大鼠随机分为模型组和治疗组(灌服逍遥丸),给药5周,择动情前期,断头取血,检测血清雌二醇(E2)、孕酮(P);取子宫,进行免疫组织化学染色,观察子宫内膜ER、PR的表达。结果:2种模型组均表现为血清E2、P值异常,子宫内膜ER、PR表达降低,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05);经逍遥丸治疗后,均有不同程度的改善,差异均有统计学意义(P<0.05);两治疗组血清E2及子宫内膜ER表达与正常组比较,差异无统计学意义。结论:逍遥丸可通过改善卵巢激素和子宫内膜ER、PR的表达治疗排卵障碍性疾病。     

二仙汤及其组方中药对幼年大鼠卵巢形态学影响

目的:通过二仙汤及其组方中药对幼年大鼠卵巢的形态学观察,探讨其对卵巢功能的影响机制。方法:幼年SD大鼠54只,分为正常对照组、阳性对照组、二仙汤组、淫羊藿组、仙茅组、巴戟天组、当归组、黄柏组和知母组9组。各组给药6d后麻醉大鼠,取血清测量卵泡刺激素(FSH)和雌二醇(E2)的含量,分离摘取双侧卵巢,称重后常规石蜡包埋切片,行HE染色和免疫组织化学染色。结果:阳性对照组、仙茅组和黄柏组卵巢系数与正常组对比增加明显,差异有统计学意义(P<0.05)。仅阳性对照组E2含量升高。HE染色发现阳性对照组、二仙汤组、淫羊藿组、仙茅组、当归组和黄柏组卵泡数量明显增多,其中阳性对照组、仙茅组和黄柏组可见黄体形成。免疫组织化学染色发现雌激素受体α(ERα)在各组大鼠的卵巢颗粒细胞中未见表达,雌激素受体β(ERβ)主要表达于各组大鼠的卵巢颗粒细胞的细胞核中;二仙汤组、淫羊藿组、仙茅组、当归组和黄柏组ERβ表达显著增强(P<0.05)。结论:二仙汤及其方中温肾药(淫羊藿、仙茅),滋阴药(黄柏)和调理冲任药(当归)通过上调卵泡颗粒细胞ERβ表达,促进卵泡发育成熟和排卵。     

胶艾汤及参芪胶艾汤的雌激素样作用及可能机制

目的:观察胶艾汤及其加味方参芪胶艾汤的植物雌激素样作用,并利用雌激素受体(ER)(+)MCF7细胞探讨其发挥雌激素样作用的可能靶点和机制.方法:正常昆明种性未成熟雌性小鼠60只,体重9～12 g,按体重均衡和随机的原则分为6组:正常组给予等体积蒸馏水,阳性药己烯雌酚组按0.35 mg·kg~(-1)·d~(-1)给予己烯雌酚,胶艾汤和参芪胶艾汤低,高剂量组分别按2.5,5.0 g·kg~(-1)·d~(-1)给予中药方剂,给药持续4 d.第5天眼眶取血,分离血清,称取子宫并计算子宫系数.通过MTT细胞增殖实验观察2个方剂含药血清对MCF7细胞增殖的影响;运用实时荧光定量RT-PCR技术检测含药血清对雌激素效应基因pS_2及ERα，ERβ泶锏牡骺刈饔茫徊⒁源萍に厥芴遛卓辜罥CI182,780干预,探讨其发挥雌激素样作用的可能机制.结果:高剂量胶艾汤及参芪胶艾汤能够明显提高性未成熟小鼠的子宫系数(P<0.05);其含药血清能够显著促进MCF7细胞增殖(P<0.05或0.01),加入ER拮抗剂ICI182,780可抑制其促增殖作用(P<0.05或0.01).与已烯雌酚组一致,2个方剂含药血清也可提高靶细胞pS_2表达水平(P<0.01),加入ICI182,780可抑制ps_2表达水平的提高(P<0.01);2个方剂含药血清还可明显提高ERα(P<0.05)和ERβ(P<0.01)的表达水平.结论:胶艾汤及参芪胶艾汤均具有一定的通过ER介导的雌激素样作用,并可提高靶细胞ER亚型(特别是ERβ）mRNA的表达水平.     

逆针三阴交穴对去卵巢大鼠子宫雌激素受体(ER)的影响

目的:探讨逆针三阴交穴(SP6)改善女性围绝经期综合征的作用机制。方法:3月龄SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、逆针组,测定随后去势大鼠子宫雌激素受体(ER)的含量。结果:与正常组相比,模型组子宫ER水平显著降低(P<0.01);与模型组相比,逆针组子宫E2水平显著升高(P<0.01)。结论:逆针三阴交穴能提高随后去卵巢大鼠子宫ER水平,从而提高子宫雌激素的利用率,以发挥更大的生物学效应。     

淫羊藿苷对去势大鼠ERβ基因表达及血清E_2水平的影响

目的:观察淫羊藿苷对去势大鼠血清E_2水平及骨组织ERB基因表达的影响。方法:将72只雌性SD大鼠建立去卵巢骨质疏松症病理模型,随机分为淫羊藿苷高剂量组(A)、淫羊藿苷低剂量组(B)、壮骨止痛方中剂量组(C)、模型组(D)、戌酸雌乙醇对照组(E),另选取12只雌性SD大鼠为假手术组(F)。各组分别灌胃给药13周。每组随机选取8只实验大鼠经腹主动脉采血,凝固后离心采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定检测各组血清E_2浓度,并提取股骨组织mRNA样本进行PCR反应,检测ERβ基因的表达。结果:各给药组血清E_2水平上升明显,ERβ基因表达回调明显,A、C、E、F组较D组血清E_2水平上升、ERB基因表达上调差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);B组上述指标与F组比较,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:淫羊藿苷可能通过改善去势大鼠血清E_2水平,同时上调去势大鼠骨组织ERβmRNA的表达,使ERβ合成增加,从而提高ER的生物效应,达到抗绝经后骨质疏松的作用。     

电针命门穴对去势骨质疏松模型大鼠肾上腺雌激素受体ERαmRNA表达的影响

目的研究电针命门穴对去卵巢骨质疏松模型(OVX)大鼠肾上腺功能的影响。方法造模成功的雌性SD大鼠18只,随机分为假手术组、模型组、电针组,每组6只。大鼠处死后,用放免法测各组大鼠血清中雌二醇(estradiol,E2)水平,荧光定量PCR(探针法)检测各组大鼠肾上腺ERαmRNA表达。结果模型组与假手术组比较,血清E2水平明显下降,有显著性差异(P0.05),电针组血清E2水平有一定升高,与模型组比较,无统计学意义(P0.05);模型组肾上腺ERαmRNA表达强于假手术组,有统计学意义(P0.05),电针组肾上腺ERαmRNA表达降低,与模型组相比,有显著性差异(P0.05)。结论去卵巢后,大鼠肾上腺可起代偿作用,电针能提高去卵巢骨质疏松大鼠血清雌激素水平,并影响大鼠ERα在肾上腺的表达。     

益妇宁软胶囊对去势大鼠免疫功能的影响

目的观察益妇宁软胶囊(YFN)对去势大鼠免疫功能的影响.方法 50只SD雌性大鼠随机分为5组:正常对照组、模型对照组、己烯雌酚片组、YFN大、小剂量组.给药4周后用放射免疫法测定大鼠血清雌二醇(E2)、白细胞介素2(IL-2)水平,放射配基受体结合分析法测定脾细胞雌激素受体(ER),光镜下观察胸腺病理组织学变化,测定大鼠体重及脏器指数.结果 YFN能明显升高大鼠去势后降低的血清E2、IL-2水平(P＜0.05或P＜0.01);提高脾脏指数及脾细胞ER含量(P＜0.05或P＜0.01);改善胸腺组织病理变化.结论 YFN可以改善去势大鼠的免疫功能.     

更年益胶囊对去势大鼠内分泌功能影响的实验研究

目的 观察更年益胶囊对去卵巢大鼠的血清性激素水平和子宫、肾上腺脏器系数的影响,探讨其治疗更年期综合征的作用机理.方法 取70只SD大鼠随机分为7组:假手术组、去卵巢对照组、乙烯雌酚组、更年安胶囊组、更年益胶囊高、中、低剂量组.假手术组和模型组给等体积蒸馏水,其余各组给药30 d,末次给药24 h后,取血清,放免法测定血清性激素水平,处死后,测定肾上腺、子宫重量计算脏器系数,并对子宫和肾上腺进行组织学观察.结果 胶囊各剂量组对血清E2水平有一定的提高作用,同时能显著增加去势大鼠子宫系数,并可改善去势大鼠子宫和肾上腺的一些病理改变.结论 胶囊缓解更年期综合征的作用与从多环节调节生殖内分泌功能有关.     

葛根素对去卵巢大鼠下丘脑正中隆起nNOS阳性神经元表达的影响

目的:观察葛根素对去卵巢大鼠下丘脑正中隆起一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元表达是否具有雌激素样保护作用。方法:通过用不同剂量葛根素液、倍美力溶液灌胃去卵巢大鼠2个月,观察血清雌二醇(E2)水平变化,并用ABC免疫组化法观察下丘脑正中隆起nNOS阳性神经元表达的光密度值(AOD)及表达面积的变化。结果:模型组血清E2水平较假手术组明显下降(60天),各用药组较模型组明显升高,与假手术组比较无明显差异。nNOS阳性神经元表达明显减少,各用药组较去势组明显增多,与假手术组比较无明显差异。结论:葛根素能上调血E2水平和下丘脑正中隆起nNOS阳性神经元表达,以此调节GnRH分泌,从而改善围绝经期综合征症状。