深低温停循环全身逆行灌注对重要器官保护作用的研究进展

深低温停循环 (ＤＨＣＡ)全身逆行灌注有ＴＢＲＰ(ｔｏｔａｌｂｏｄｙｒｅｔｒｏｇｒａｄｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ) 〔1〕、ＷＢＲＰ(ｗｈｏｌｅｂｏｄｙｒｅｔｒｏｇｒａｄｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ) 〔2〕、重要器官逆行灌注 (ＶＯＲＰ ,ｖｉｔａｌｏｒｇａｎｒｅｔｒｏｇｒａｄｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ) 〔3〕等多种定义。Ｍａｔａｌａｎｉｓ等〔3〕认为 ,ＶＯＲＰ代表重要器官逆行灌注更为恰当。ＶＯＲＰ由 3部分组成 :(1)经上腔静脉 (ＳＶＣ)逆行脑灌注 (ＲＣＰ)保护脑 ;(2 )经冠状静脉窦逆行灌注 (ＲＣＳＰ)保护心脏 ;(3)经下腔静脉 (ＩＶＣ)逆…     

冠状窦堵塞对心脏停搏液灌注压力的影响

目的 探讨主动脉根部顺行灌注加冠状窦堵塞心肌保护时心脏停搏液灌注速度、主动脉根部压、冠状型压间的相互关系。方法 采用改良的Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ离体兔心灌注模型的,将１８只兔按太窦堵塞程度不同分为不堵塞组,并堵塞组和次全堵塞组,每组６只兔,在行主动脉根部灌注心脏停搏有堵塞冠状窦。温血心脏停搏液以２ｍｌ／ｋｇ．ｍｉｎ,４ｍｌ／ｋｇ．ｍｉｎ,６ｍｌ／ｋｇ．ｍｉｎ、８ｍｌ／ｋｇ．ｍｉｎ４种速度主,观察三     

冷晶体停搏液间断灌注和温血停搏液连续灌注法对心脏直视手术患者心肌的保护作用

本研究通过观察心脏直视手术患者心肌肌钙蛋白I(cTnI)及心肌超微结构的变化,评价冷晶体停搏液间断灌注和温血停搏液连续灌注法对心肌的保护效果。资料和方法选择心脏瓣膜置换术患者20例,随机分为温血组和冷晶组,每组10例;灌注方法:胸骨正中劈开建立体外循环后,冷晶组:肛温降至28℃～30℃时用改良St.Thomas冷晶体停     

极化心脏停搏液对离体大鼠心脏的保护作用

目的探讨Na+通道阻滞剂河豚毒素(tetraodontoxin,TTX)在极化状态下对离体大鼠心脏的保护作用. 方法将20只Wistar大鼠按体重均衡原则随机分成两组,每组10只.取出心脏建立Langendorff灌注模型和左心工作灌注模型,分别用去极化心脏停搏液(St.Thomas 2号液,STH-2组)和极化心脏停搏液(22 μmol/L TTX + K-H缓冲液,TTX组)停搏,低温保存5小时后再灌注心脏.观察两组心脏缺血前、后在心功能、心肌酶漏出量、三磷酸腺苷酶(ATPase)活性、再灌注后心肌胞浆游离Ca2+浓度和心肌超微结构等方面的改变. 结果恢复灌注后,TTX组心功能恢复明显优于STH-2组(P＜0.01),心肌酶漏出量较少(P＜0.05),各种ATPase维持较高的活性(P＜0.01),胞浆游离Ca2+浓度明显低于STH-2组(P＜0.01),心肌超微结构得到很好的保护. 结论以TTX阻断Na+通道为特点的极化心脏停搏液对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用优于去极化心脏停搏液,有希望成为新型、有效的心脏停搏液和供者心脏保存液.     

Cariporide对离体鼠心缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨特异性Na^＋／H^＋交换抑制剂卡立泊来德（Cariporide）加入停搏液中对缺血再灌注心肌的保护作用。方法20只SD雄性大鼠随机分成2组（每组10只），即对照组（停搏液为改良St．ThomasⅡ停搏液）和实验组（停搏液为加入Cariporide的改良St．ThomasⅡ停搏液）。离体鼠心在改良Langendorff灌注模型上30min预灌注，60min停搏，30rain再灌注，监测心脏缺血前及复灌后血流动力学变化，心肌酶CK—MB、LDH变化，电镜观察心肌超微结构改变，评价心肌保护效果。结果再灌注后，实验组心功能、心肌超微结构的改善明显优于对照组；心肌酶CK—MB、LDH的漏出明显低于对照组（P〈0．05）。结论特异性Na^＋／H^＋交换抑制剂Cariporide作为停搏液的辅剂可显著减轻心肌缺血再灌注损伤，改善低温缺血心肌的功能恢复。     

偏酸性含血停搏液终末控制性再灌注对未成熟心肌的保护作用

目的 研究终末控制性再灌注含血停搏液pH值与时间的关系，探讨对未成熟心肌保护的I临床意义。方法 3～4周龄健康长耳白兔，按含血停搏液终末控制性再灌pH值(6．6、7．0、7．4和7．8)和再灌时程(1、3、5和7min)组合随机分为16组，每组10只，建立Langendorff离体心脏灌注模型。运用温血停搏液诱导停搏，低温保护，终末温血停搏液控制性再灌注技术。观察指标：血流动力学指标；心肌肌酸激酶(CK)漏出率；心肌细胞内Na 、Ca2 含量；心肌组织ATP含量；心肌超微结构。结果 轻度偏酸(pH7．0)含血停搏液终末再灌注3min各指标优于其余各组。结论 对于未成熟心肌，采用偏酸性含血停搏液终末控制性再灌的适宜pH值为7．0。时程为终末再灌开始3min以内。过度偏酸或偏酸性再灌注时间过长均对未成熟心肌保护产生不利影响。     

吡那地尔超极化停搏对大鼠离体心脏缺血再灌注时心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨吡那地尔超极化停搏对大鼠离体心脏缺血再灌注时心肌细胞凋亡的影响.方法 健康SD大鼠108只,随机分为6组(n=18),建立Langendorff离体心脏灌注模型,对照组(C组)持续灌注37.C含氧K-H缓冲液120 min不停搏;37℃含氧的K-H缓冲液平衡灌注15 min后,去极化停搏组(D组)灌注37℃St.Thomas停搏液(含K+16 mmol/L)20 ml/kg,超极化停搏组(H组)灌注37℃吡那地尔(50 μmol/L,K+5 mmol/L)超极化停搏液20 ml/kg,线粒体ATP敏感性钾通道阻滞剂5-羟葵酸+超极化停搏组(5-HD+H组)和膜ATP敏感性钾通道阻滞剂 HMR-1098+超极化停搏组(HMR-1098+H组)灌注100 μmol/L 5-HD或HMR-1098,5 min后灌注吡那地尔超极化停搏液20 ml/kg;5-HD+HMR-1098+H组先灌注100 μmol/L5-HD和100 μmol/L HMR-1098混合液,5 min后灌注吡那地尔超极化停搏液20ml/kg.各停搏组心脏常温停搏(缺血)40 min,再用37℃含氧K.H缓冲液再灌注60 min.于缺血前、缺血40 min和再灌注60 min时取心肌组织,测定caspase-3、caspase-9活性,观察细胞凋亡情况.结果 缺血前各组间各指标差异无统计学意义(P＞0.05).与C组比较,其余各组细胞凋亡指数(AI)、caspase-3、caspase-9活性增加;与D组比较,H组AI、caspase-3、caspase-9活性降低;与H组比较,加阻滞剂的3组AI、caspase-3、caspase-9活性增加;与5-HD+H组、HMR-1098+H组比较,5-HD+HMR-1098+H组 AI、caspase-3、caspase-9 活性增加(P＜0.05).与缺血前比较,在缺血40 min、再灌注60 min时,各组AI、caspase-3、caspase-9 活性增加(P＜0.05).结论 吡那地尔超极化停搏可明显抑制大鼠离体心脏缺血再灌注时心肌细胞凋亡,产生心肌保护效应,其机制可能与降低caspase-3、caspase-9活性有关.     

1，6-二磷酸果糖停搏液心肌保护的对比研究

目的　观察外源性１ ,６二磷酸果糖（ Ｆ Ｄ Ｐ） 用于心脏停搏液,对心脏直视术期间心肌缺血的保护作用。方法　将１６ 例心脏瓣膜置换术患者随机分成 Ｓｔ ． ＴｈｏｍｓⅡ号停搏液组（ 对照组） 及 Ｆ Ｄ Ｐ停搏液组（ 实验组） 。观察两组不同停搏液灌注后病人心肌酶 Ｃ Ｐ Ｋ、心肌肌钙蛋白 Ｔ（ Ｃ Ｔｎ Ｔ） 的动态变化、术中心脏停搏情况、术后心脏复苏及血流动力学状况。结果　 Ｆ Ｄ Ｐ 停搏液组血清 Ｃ Ｐ Ｋ、 Ｃ Ｔｎ Ｔ 水平明显低于对照组。 Ｆ Ｄ Ｐ 加入停搏液能显著降低冠状静脉窦流出液 Ｍ Ｄ Ａ 的含量,心脏超微结构保存较好,术中心脏诱导停搏时间短,术后心脏复苏好,血流动力学稳定。结论　外源性 Ｆ Ｄ Ｐ 用于心脏停搏液,有明显的心肌保护效果。     

吡那地尔预处理和超极化停搏的心肌保护效果研究

ＡＴＰ敏感性钾通道的开放与缺血心肌保护有密切的关系 ,为了解其开放程度及给药方式对心肌保护效果的影响 ,我们拟用不同浓度的吡那地尔 (ｐｉｎａｃｉｄｉｌ) ,分别模拟缺血预处理和心脏超极化停搏 ,观察体外循环中对犬缺血心肌的保护效果。实验方法　 18条犬随机分成 3组 ,每组 6条 :对照组间断灌注 4℃标准Ｓｔ.Ｔｈｏｍａｓ停搏液 (Ｋ 16ｍｍｏｌ/Ｌ) ;预处理组 ,阻断升主动脉后 ,灌注含吡那地尔 10 μｍｏｌ/Ｌ的 4℃充氧Ｓｔ.Ｔｈｏｍａｓ液 (Ｋ 5ｍｍｏｌ/Ｌ) 10ｍｉｎ ,开放循环 5ｍｉｎ ,再阻断升主动脉后实施对照组实验步骤 ;…     

含氧血心脏停搏持续灌注后血清钾的变化

目的 观察含氧血心脏停搏液持续灌注后血清钾的变化，对造成高钾血症的原因及预防措施进行了探讨。方法 根据灌注不同的心脏停搏液，将６８例心瓣膜直视术患者随机分为两组，组Ⅰ：用冷晶体心脏停搏液（Ｓｔ．Ｔｈｏｍａｓ液）灌注；组Ⅱ：用含氧血心脏停搏液灌注。对两组血清钾水平进行了连续监测及比较分析。结果 含氧血心脏停搏液持续灌注者术后能使血清钾维持在较好的水平，但有可能造成术中高钾血症。结论 使用含氧血心脏停     

含氧血心脏停搏液持续灌注后血清钾的变化

目的　观察含氧血心脏停搏液持续灌注后血清钾的变化 ,对造成高钾血症的原因及预防措施进行了探讨。　方法　根据灌注不同的心脏停搏液 ,将 6 8例心瓣膜直视术患者随机分为两组 ,组 :用冷晶体心脏停搏液 (St.Thomas液 )灌注 ;组 :用含氧血心脏停搏液灌注。对两组血清钾水平进行了连续监测及比较分析。　结果　含氧血心脏停搏液持续灌注者术后能使血清钾维持在较好的水平 ,但有可能造成术中高钾血症。　结论　使用含氧血心脏停搏液持续灌注技术适当 ,可避免高钾血症。     

冷浸泡法保存心脏的实验研究（保存心脏2—6小时）

冷浸泡法保存成年猪心２．５０～６．０８ｈ，利用体外循环装置使１１个心脏离体复苏并测试心功能。在心脏复苏前用温血心停搏液灌注以减轻再灌注损伤。结果表明在灌注温血心停搏液时，心脏无电机械活动，ＭＶＯ２为１．５０±０．９３％。１１个离体心脏经灌注氧合血后７个自动复跳，４个需电击除颤。测试心输出量为１５００～４２５０ｍｌ／ｍｉｎ，平均２７２５±８７５ｍｌ／ｍｉｎ；其中１个心脏保存６．０８ｈ，心输出量为４２００ｍｌ／ｍｉｎ。２个保存心脏的组织学表明除心肌纤维及其间隙轻度水肿外，无不可逆病损。单纯冷浸泡法保存心脏其安全时限一般为４ｈ。本实验采用温血心停搏液灌注法，延长保存期至６ｈ，心肌组织学损害轻。复苏后心功能满意。     

吡那地尔超极化停搏对大鼠离体心脏缺血再灌注时p38MAPK表达的影响

目的 评价吡那地尔超极化停搏对大鼠离体心脏缺血再灌注时p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)表达的影响.方法 成年雄性SD大鼠48只,体重250～300 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为6组(n=8):自然停搏组(A组)、St.Thomas组(B组)、吡那地尔超极化停搏组(C组)、5-羟葵酸(5-HD)组(D组)、HMR-1098组(E组)和5-HD+HMR-1098组(F组).采用Langendorff离体心脏灌注模型,K-H液平衡灌注15 min后,A组阻断主动脉,不予停搏液灌注,使其自然停搏;B组灌注St.Thomas停搏液;C组灌注吡那地尔超极化停搏液;D组、E组和F组K-H液平衡灌注10 min后,分别灌注含5-HD、HMR-1098、5-HD+ HMR-1098的K-H液5min,再灌注吡那地尔超级化停搏液.心脏停跳缺血60 min后,K-H液再灌注30 min.于平衡灌注15 min和再灌注20 min时记录冠脉流量(CF)、心率(HR)、左室发展压(LVDP)、左室收缩压(LVSP)和左室压力瞬时最大变化率(dp/dtmax);于再灌注30 min时取心肌组织,采用Western blot法测定心肌磷酸化p38MAPK和非磷酸化p38MAPK的表达.结果 与C组相比,A组、B组、D组、E组和F组再灌注20min时CF、HR、LVSP、LVDP及dp/dt/dymax降低,再灌注30 min时磷酸化p38MAPK表达下调,非磷酸化p38MAPK表达上调(P＜0.05);与E组相比,D组和F组再灌注20 min时CF、HR、LVSP、LVDP及dp/dtmax降低,再灌注30 min时磷酸化p38MAPK表达下调,非磷酸化p38MAPK表达上调(P＜0.05).结论 吡那地尔超极化停搏可改善大鼠离体缺血再灌注心脏功能,其机制与上调磷酸化p38MAPK表达,下调非磷酸化p38MAPK表达有关,而这种调控作用与线粒体ATP敏感性钾通道关系更密切.     

甲状腺激素T3增补于心脏停搏液中对心肌的保护作用

目的　探讨Ｔ３ 增补于停搏液中的心肌保护作用。方法　离体鼠心（ ｎ ＝ １６） 在改良的ＬａｎｇｅｎｄｏｒｆｆＮｅｅｌｙ 灌注模型上、３７ ℃下经历２０ 分钟预灌注、２０ 分钟停搏、３０ 分钟再灌注。结果　再灌注３０ 分钟时,左室功能指标（ＬＶＤＰｄｐ／ｄｔ）百分恢复率治疗组显著高于对照组（ Ｐ ＜０ ．０１）,心肌超氧化物歧化酶（ＳＯＤ） 治疗组显著高于对照组（ Ｐ＜ ０．０１）,过氧化脂质（ＬＰＯ） 治疗组显著低于对照组（ Ｐ ＜０．０５）;心肌酶（ＨＢＤＨ．ＬＤＨ）释放量再灌注期对应时点组间比较,治疗组显著低于对照组（ Ｐ＜ ０ ．０１） ;电镜观察心肌超微结构,治疗组显著优于对照组。结论　Ｔ３ 增补于心脏停搏液中可以显著地促进缺血后左室功能的恢复,显著减轻心肌缺血再灌注损伤,具有良好的心肌保护作用。     

心肌保护液添加剂的研究进展

心肌缺血-再灌注时存在心肌细胞凋亡[1].围术期心肌保护的问题引起研究者广泛关注.心脏停搏液可以防止和逆转心肌缺血性和再灌注性损伤,明显延长心脏停搏的安全时限,降低术后低心排综合征的发生率,减少手术并发症和死亡率.新的心肌保护液的配方不断革新,心停搏液的成份日趋完善.就心肌保护液添加剂的研究进展作一简要综述.     

超极化停搏对体外循环中心肌细胞膜微粘度变化的影响

目的比较超极化停搏和去极化停搏对体外循环(CPB)中心肌细胞膜流动性变化的影响,评价超极化停搏液的心肌保护作用. 方法根据随机数字表法将72只家猫均分为3组,每组24只.对照组:不阻断上、下腔静脉和主动脉,仅行并行循环180分钟;去极化停搏组:阻断主动脉60分钟,再灌注90分钟,心脏停搏液使用St.Thomas液(K 16mmol/L);超极化停搏组:心脏停搏液使用含吡那地尔的St.Thomas液(K 5mmol/L),其余处理与去极化停搏组相同.应用荧光偏振法测定心肌细胞膜的微粘度(η),以η的倒数表示心肌细胞膜流动性. 结果去极化停搏组主动脉阻断期间心肌细胞膜η值明显上升,且于再灌注期间进一步升高;超极化停搏组主动脉阻断期间亦呈升高趋势,但各时间点η值均明显低于去极化停搏组(P＜0.01). 结论超极化停搏比去极化停搏能更有效地维持CPB中缺血-再灌注心肌细胞膜的流动性,从而起到更好的心肌保护作用.     

腺苷停搏液对未成熟心肌的保护作用

目的　探讨腺苷加入停搏液对未成熟心肌的保护作用。方法　 0～ 2d的豚鼠 3 0只 ,随机分为 3组 ,每组 10只。低温组 :局部单纯低温 (15～ 17℃ ) ;Thomas组 :ThomasⅡ号停搏液灌注加低温 ;腺苷组 :腺苷高钾停搏液灌注加低温。平均全心停循环 90min ,再灌注 3 0min。观察诱导心脏停搏时间、冠脉流量恢复率 (CFR)、心肌含水量、超微结构、丙二醛 (MDA )和黄嘌呤氧化酶(XO)的变化。结果　腺苷组诱导心脏停搏时间 (4 .0± 1.1)s较Thomas组 (15 .6± 3 .7)s明显缩短 ;心肌MDA含量 (5 5 .2 6± 3 .3 4)低于Thomas组 (61.49± 3 .70 )和低温组 (64 .92± 3 .2 0 ) ;再灌注末心肌含水量 (77.17± 1.44 ) %少于Thomas组 (79.5 4± 2 .49) %和低温组 (79.48± 1.78) % ;CFR(73 .72± 6.74)高于Thomas组 (67.85± 4.83 )和低温组 (63 .5 5± 4.70 ) ;心肌超微结构改变较轻。 3组间心肌XO差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　腺苷加入停搏液中对未成熟心肌有保护作用。     

11,12-环氧二十碳三烯酸对幼兔心脏再灌注性心律失常的影响

目的 为提高未成熟心肌的保护作用,观察11,12-环氧二十碳三烯酸(11,12-EET)对幼兔冷停搏长时间保存的心脏再灌注性心律失常的影响. 方法 16只幼兔按单纯随机原则分成2组,每组8只.对照组:采用St.Thomas Ⅱ心脏停搏液保护心肌;实验组:采用St.Thomas Ⅱ 11,12-EET心脏停搏液保护心肌.采用Langendorff灌注装置,测定灌注心脏停搏液后的电机械活动停止时间以及保存16小时(4°C)后复灌30分钟(37°C)的心率(HR)、冠状动脉流量(CF)、心肌含水量(MWC)、冠状动脉漏出液中肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)、心肌钙离子含量,观察心律失常发生情况. 结果实验组灌注心脏停搏液后的电机械活动停止时间明显缩短;HR恢复、CF、MWC、CK、LDH、心肌钙离子含量和心律失常情况均优于对照组. 结论 St.Thomas Ⅱ液中加入11,12-EET可减轻幼兔离体心脏长时间保存后再灌注性心律失常的发生.     

三甲氧苄嗪对大鼠离体心脏再灌注损伤的保护作用

目的　探讨三甲氧苄嗪增补于心脏停搏液中对离体鼠心再灌注损伤的保护作用。　方法　将 2 4只Wistar大鼠随机分为实验组和对照组。离体鼠心在改良的 L angendorff- Neely灌注模型上 30分钟预灌注 ,12 0分钟停搏 ,30分钟再灌注。缺血前和再灌注期间测定血流动力学指标、心肌酶中血清肌酸激酶 (CK)、血清乳酸脱氢酶(L DH)、心肌超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化脂质 (L PO)含量、心肌三磷酸腺苷 (ATP)水平。电子显微镜观察心肌超微结构。　结果　再灌注后 ,实验组心功能、心肌超微结构的改善明显优于对照组 ,CK、L DH和 L PO含量显著低于对照组 (P<0 .0 1) ,SOD含量和心肌 ATP水平显著高于对照组 (P<0 .0 1)。　结论　三甲氧苄嗪增补于心脏停搏液中可显著减轻心肌缺血 -再灌注损伤 ,具有良好的心肌保护作用。     

二氮嗪对鼠缺血-再灌注心肌细胞凋亡的作用

目的观察心肌线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道开放剂二氮嗪(diazoxide,DZ)对缺血-再灌注(I/R)大鼠心肌细胞凋亡的作用。方法50只大鼠随机分为5组,每组10只,取离体心脏制备Langendorff模型。对照组:切开胸腔取正常心肌,不进行灌注;A组:建立Langendorff离体灌注模型,停灌30min,复灌生理盐水60min;B组:心脏稳定搏动后给予常规含钾心脏停搏液灌注,其余实验步骤同A组;C组:心脏稳定搏动后给予常规含钾心脏停搏液 DZ(20mg/kg)灌注,其余实验步骤同A组;D组:心脏稳定搏动后给予格列苯脲(3mg/kg),10min后给予心脏停搏液 DZ灌注,其余实验步骤同A组。再灌注30min、60min或相应的时间点测定[Ca2 ]m含量、丙二醛(MDA)含量、细胞色素C(CytC)蛋白、线粒体、胞浆中Caspase-3活性、Caspase-3 mRNA的表达和心肌细胞凋亡情况。结果I/R后A组、B组、C组和D组心肌线粒体内[Ca2 ]m、MDA、CytC蛋白含量、Caspase-3 mRNA表达水平、Caspase-3活性和心肌细胞凋亡指数均较对照组增高;而C组上述指标均明显低于A组、B组和D组(P<0.05)。结论含DZ的心脏停搏液能抑制心肌细胞凋亡,减轻心肌I/R损伤。