正交实验优化复合酶法提取山药多糖工艺研究

目的 确定山药多糖复合酶法提取的最佳酶配比和最佳提取工艺条件.方法 采用蛋白酶、纤维素酶、果胶酶复合处理提取山药多糖.以酶用量、酶作用温度、pH值、提取时间为因素水平,通过正交实验方法研究了3种酶量的最佳配比,及最佳提取工艺条件.结果 复合酶法提取山药多糖的最佳工艺条件:纤维素酶用量为1.5%、果胶酶用量为0.5%、酸性蛋白酶用量为2.0%配比,酶作用温度50 ℃,酶作用pH值为5.5,酶作用时间为60 min.在此条件下,多糖提取率最高,总糖得率5.38%.结论 该方法显著提高了山药多糖的提取率,可为山药多糖的大规模工业化生产提供了可借鉴的新方法.     

恒山黄芪粉碎度与黄芪多糖得率关联度研究

目的 研究恒山黄芪粉碎度与黄芪多糖得率之间的关系.方法 采用超微粉碎机对恒山黄芪进行超细化处理并按不同粒度分组,比较各组别恒山黄芪在不同温度、不同料液比条件下,水法提取与CaO法提取黄芪多糖的得率.结果 恒山黄芪粉体粒度≥600目(破壁前),黄芪多糖得率同等粉碎度CaO法提取优于水法提取,≤800目(破壁后)得率趋于一致.无论是采用水法还是CaO法提取,恒山黄芪在粉碎粒度为800目时,选择提取温度80℃,料液比1∶8,黄芪多糖得率达到最高,分别为8.36％和8.49％.结论 恒山黄芪多糖得率与粉碎度存在关联性.     

黄芪多糖微波提取工艺的研究

目的 探讨黄芪多糖的微波辅助提取.方法以黄芪多糖的得率及纯度为考察指标,以水为提取剂,采用正交设计实验的方法,研究了黄芪多糖的微波提取工艺.结果 确定的优化条件为:微波功率360W,提取时间10 min,液固比为5:1 (ml:g) ,测得样品中多糖得率和纯度分别为3.28%,46.56%.结论与直接加热提取法相比,微波提取能缩短提取时间,提高了提取效率.     

纤维素酶辅助提取藕节多糖工艺优化及其动力学、热力学研究

目的优化纤维素酶辅助提取藕节多糖工艺,并研究其动力学、热力学。方法在单因素试验基础上,以加酶量、介质p H、酶解温度、酶解时间为影响因素,多糖得率为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。对提取期间的动力学、热力学进行分析。结果最佳条件为加酶量0.9%,介质p H 5.0,酶解温度47℃,酶解时间2.5 h,多糖得率为5.86%。加入纤维素酶后,多糖得率、提取速率常数(k)、表面扩散系数(Ds)提高。提取过程符合一级动力学模型,吸热熵增加,放热熵减小,为自发过程。结论该方法稳定可靠,可用于纤维素酶辅助提取藕节多糖。     

恒山黄芪中黄芪多糖提取工艺研究

目的 探讨恒山黄芪不同提取溶剂、粉碎度、温度、料液比及乙醇提取倍率与黄芪多糖提取得率的关系,寻找恒山黄芪黄芪多糖最佳提取工艺.方法 采用微型植物粉碎机对恒山黄芪进行超细化处理并按粉体颗粒大小分组,测定各组不同温度、不同料液比、不同乙醇提取倍率水法提取与CaO法提取黄芪多糖的溶出率.结果 料液比1∶6,提取温度80℃,使用提取液3倍量95％乙醇沉淀,水法提取、粉碎粒度为800目,CaO法提取、粉碎粒度为400目时恒山黄芪黄芪多糖提取得率相对最高.结论 恒山黄芪黄芪多糖提取得率与使用何种提取溶剂及粉碎度、提取温度、料液比、乙醇使用量存在关联性,CaO法提取黄芪多糖得率常规下优于水法提取.     

酶法提取黄芪多糖的研究

采用纤维素酶提取黄芪多糖,通过正交实验确定了酶解的最佳条件为120min,酶用量0．8％,酶解温度为75℃,提取多糖含量为9．78％,总糖含量为50．2％。与传统水煮醇沉法相比,黄芪多糖的提取率有较大提高。     

酶法提取竹节参中多糖成分的工艺研究

目的：研究酶法提取竹节参中多糖成分的工艺。方法：以多糖得率为考察指标，采用正交试验法对竹节参中多糖成分酶法的提取工艺进行优选。结果：优化后的提取工艺为pH 5.0，50 ℃，料液比为1∶50，纤维素酶的质量分数1.2%，果胶酶的质量分数1.0%，酶解时间2 h，90 ℃灭酶和浸提2 h，多糖得率为14.3%。结论：酶法能有效提高竹节参多糖成分的得率。     

响应面优化酶法提取平菇多糖工艺研究

目的:建立平菇多糖的含量测定方法,确定纤维素酶法提取平菇多糖的最佳工艺条件。方法:采用苯酚-硫酸法测定平菇多糖的含量。以平菇多糖得率为指标,考察酶解时间、酶解温度、pH值等3个因素对平菇多糖纤维素酶提取工艺的影响,采用响应面分析法优化工艺条件。结果:平菇多糖的最佳提取工艺条件为酶解时间135min、酶解温度49℃、pH5.30,在此条件下得率可达6.82%。结论该法成本低、产品得率高,比传统水提法提高3.98%。     

复合酶法提取板党多糖的研究

目的 将现代酶解技术应用于板桥党参多糖的提取,筛选出最佳提取工艺.方法 以板党多糖得率为指标,先考察木瓜蛋白酶、纤维素酶和果胶酶各自最适当的酶用量、酶解时间、酶解pH及酶解温度,再通过正交实验和方差分析确定复合酶法提取板党多糖的最佳条件.结果 在木瓜蛋白酶、纤维素酶和果胶酶的酶用量分别为90,90,150 U/g干粉复合下,pH5.0、50℃酶解90 min,板党多糖得率最高,达26.47%.结论 采用酶解辅助提取板党多糖,可以明显提高多糖的提取率.     

黄芪多糖中脱蛋白方法的研究

目的为了筛选最佳的黄芪多糖的脱蛋白效果.方法比较sevage法,蛋白酶法,乙酸铅法和732树脂法脱除黄芪多糖中的蛋白质的效果.结果蛋白酶法和732树脂法都可以较好的除去黄芪多糖中的蛋白质.尤其以732树脂静态吸附效果为最佳.多糖得率达88.6%,蛋白质含量降低至0.91%.而且732树脂成本低,快速,吸附效果好,样品损失小,便于在黄芪多糖的制备中推广使用.结论732树脂静态吸附法是最佳的黄芪多糖脱蛋白方法.     

六种苦豆子生物碱对炎症介质白三烯的影响

目的：研究苦参碱(matrine MT)、氧化苦参碱(oxymatrine OMT)、槐果碱(sophocarpine SC)、氧化槐果碱(oxysophocarpine OSC)、槐定碱(sophoridine SRI)、氧化槐定碱(oxysophoridine OSRI)6种苦豆子类生物碱对炎症介质白三烯巴和白三烯134的影响，来研究其抗炎作用机制。方法：以大鼠腹腔白细胞为材料，采用高效液相色谱法(HPLC)测定白细胞内白三烯C4和白三烯B4水平。结果：SRI对LTC4的生物合成影响很小，但对LTB4的生物合成有明显的抑制作用。其余5种生物碱对LTC4和LTB4的生物合成均有明显的抑制作用，且有良好的剂量-效应关系。结论：6种苦豆子生物碱对白三烯(LTC4和LTB4)的生物合成均具有不同程度的抑制作用，这可能是它们抗炎作用的机制之一。     

5种生物碱胃癌多药耐药逆转剂的筛选及机制研究

目的研究骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、贝母素甲、贝母素乙和氧化苦参碱对肿瘤细胞多药耐药性(MDR)的逆转作用及机制。方法以胃癌亲本细胞系SGC-7901和MDR细胞系SGC-7901/VCR为细胞模型,采用MTT法检测上述5种生物碱的细胞毒活性及对MDR的逆转效果;用流式细胞仪检测MDR逆转效果最好的贝母素乙对肿瘤细胞内阿霉素(ADR)蓄积的影响;Western blotting法检测P-糖蛋白(P-gp)的表达;Hoechst荧光染色和细胞免疫荧光法检测贝母素乙诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡情况。结果骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、贝母素甲、贝母素乙和氧化苦参碱均能不同程度地抑制SGC-7901和SGC-7901/VCR细胞的增殖,在非毒剂量下贝母素乙能够显著提高SGC-7901/VCR细胞对ADR的敏感性及细胞内ADR的浓度,降低P-gp表达。贝母素乙联合5-氟尿嘧啶(5-FU)给药可诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡,凋亡细胞cleaved caspase-3呈高表达。结论贝母素乙具有作为胃癌MDR逆转剂的潜力,其逆转耐药的机制可能与下调P-gp表达和诱导细胞凋亡有关。     

黄疸病从脾论治探要

通过对有关黄疸病文献及古代医案的分析,探讨了脾与黄疸病的关系,指出了黄疸病的病位主要在太阴脾土,病因病机为脾虚湿困、湿热熏蒸所致,治疗的根本应从脾入手,以脾为本。脾强土旺则为肝正常的疏泄功能提供了丰厚的物质基础,使黄疸的形成成为无源之水;而脾运化功能正常则水湿无由内停,不会酿成湿热交结之痼疾,故健脾利湿应为治疗黄疸的根本之法。     

胆胰宁对慢性胰腺炎大鼠血清及胰腺组织中超氧化物 歧化酶活性和丙二醛含量的影响

目的:通过观察中药胆胰宁(DYN)对慢性胰腺炎(CP)大鼠中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响,进而探讨该方药治疗慢性胰腺炎的机制。方法:用腹腔注射L-精氨酸的方法制造慢性胰腺炎大鼠模型。将大鼠分为正常对照组,模型对照组,小柴胡汤丸组,胆胰宁低、高剂量组,观察胆胰宁治疗4周后大鼠血清及胰腺组织中SOD活性和MDA含量。结果:胆胰宁低剂量组和高剂量组对提高大鼠血清及胰腺组织中SOD活性有统计学意义(P<0.01)。胆胰宁低剂量组和高剂量组对降低大鼠血清及胰腺MDA含量有统计学意义(P<0.01)。结论:胆胰宁能够有效地提高慢性胰腺炎大鼠血清及胰腺组织中SOD活性,降低其血清及胰腺组织MDA的含量,能够有效地对抗慢性胰腺炎形成过程中的胰腺组织损伤,从而对慢性胰腺炎具有显著的防治作用。     

积雪草苷对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的影响

目的观察积雪草苷对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)小鼠的保护效应。方法56只Balb/c小鼠随机分为对照、假手术、模型、溶媒、积雪草苷(5、15、45 mg/kg)7组,每组8只。LPS(2.5 mg/kg)气管滴注造ALI模型,24 h后HE染色观察小鼠肺组织病理改变,计算肺湿质量/干质量值;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)后行白细胞计数和分类,BCA法检测其蛋白的量;化学法检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性。结果积雪草苷各剂量组呈剂量依赖性减轻LPS所致ALI模型肺组织病变情况,减轻肺水肿,减轻中性粒细胞的浸润,抑制蛋白渗出。抑制肺组织中MPO活性。结论积雪草苷对LPS诱导ALI有保护效应。     

肾衰冲剂缓解5/6肾切除大鼠肾小球硬化的实验研究

目的：研究扶正降浊的肾衰冲剂缓解慢性肾衰大鼠残余肾小球硬化的作用。方法：制作大鼠5／6肾切除肾衰模型，分别给予肾衰冲剂及主要单味药党参、丹参、制大黄灌胃，治疗1个月后检测大鼠血清Ⅳ型胶原（COL－Ⅳ）、层粘蛋白（LN）、纤维连接蛋白（FN）、Ⅲ前胶原（PC－Ⅲ）含量，图象分析残肾组织Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白的表达量。结果：肾衰冲剂可以降低血LN、COL－Ⅳ、PC-Ⅲ前胶原，提高血PN含量，减少残肾肾小球细胞外基质FN、Col-Ⅳ过量积聚。而党参、丹参、制大黄亦有各自一定的作用。结论：肾衰冲剂减轻肾小球硬化的机理在于减少残肾肾小球细胞外基质的增生。     

《金匮要略》不同方药对肺纤维化模型早期阶段(7天)肺、脑组织NE、DA、5-HT含量的影响

目的:观察《金匮要略》不同方药对肺纤维化模型早期阶段(7天)肺、脑组织去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)含量的影响,探讨中药作用机制即肺纤维化早期阶段中医方证本质。方法:Wistar大鼠随机分组,除正常组外,其余各组均采用平阳霉素复制肺纤维化模型,用药组造模后第2天开始用药,7d后处死动物,比较各组肺、脑组织NE、DA、5-HT含量。结果:模型组肺组织NE含量高于正常组、瓜蒌薤白汤组和泼尼松组,5-HT含量低于肾气丸组和泼尼松组,肾气丸组DA含量低于瓜蒌薤白汤组;模型组脑组织NE含量高于正常组,DA含量低于正常组、瓜蒌薤白汤组、麦门冬汤组,大黄虫丸组5-HT含量高于其他各组(P<0.05)。结论:肺纤维化早期阶段肺、脑组织NE含量增高,脑组织DA含量降低;瓜蒌薤白汤能阻止肺组织NE含量的增高与脑组织DA含量的降低,麦门冬汤能阻止脑组织DA含量的降低,大黄虫丸能提高脑组织5-HT含量,肾气丸能降低肺组织5-HT含量。上述方药可能通过影响肺、脑组织NE、DA、5-HT含量干预肺纤维化早期阶段病变,肺、脑组织NE、DA、5-HT含量变化可能与中医方证本质有关。     

浅议虫类药在咳喘病中的应用

虫类药是中草药的重要组成部分,其临床应用已有几千年的历史,功效逐渐被医家认知,应用范围不断拓展。近现代虫类药用于治疗咳喘病越来越受到医家的重视和广泛使用。临床实践表明常用虫类药具有疏风利咽、宣肺止咳,清肺化痰、解痉平喘,活血通络、息风止痛,温补肺肾、纳气定喘等功用。临床应在辨证论治基础上选药配伍,如蝉蜕、僵蚕适用于风热引起的咳喘;地龙、僵蚕适用于肺热、痰型咳喘;全蝎、蜈蚣适用于久病咳喘、血瘀痰阻明显,症状剧烈的咳喘或哮喘持续状态;蛤蚧、冬虫夏草则适用于久病体虚或年老体衰阴阳两虚的咳喘证。     

洋金花有效部位及其组分对二甲基亚砜损伤的中国仓鼠卵巢细胞的保护作用

目的观察洋金花不同提取物(有效部位、醉茄甾内酯组分和黄酮组分)对二甲基亚砜(DMSO)损伤的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的保护作用。方法常规传代培养CHO细胞,采用噻唑蓝(MTT)法和乳酸脱氢酶(LDH)法测定细胞活性。结果3%DMSO与CHO细胞共同孵育24h后,经MTT法检测细胞存活率明显下降。洋金花有效部位(10~80μg/mL)剂量依赖性增加细胞活性;洋金花醉茄甾内酯组分(30~120μg/mL)对DMSO的细胞损伤作用无明显影响,而洋金花黄酮组分(2.5~20μg/mL)呈剂量依赖性减轻DMSO对细胞的损伤作用。4.5%DMSO与CHO细胞共同孵育24h后,细胞LDH的漏出率明显增加。洋金花有效部位(10~80μg/mL)、洋金花醉茄甾内酯组分(30~120μg/mL)和洋金花黄酮组分(2.5~20μg/mL)均不能降低细胞LDH的漏出率。结论洋金花中的黄酮组分可以减轻DMSO的细胞毒性,此种药理作用可能与改善细胞线粒体的功能有关,而对细胞膜的损伤无明显保护作用。     

针药结合对VD大鼠脑内Ach及AchE活性的影响

目的:观察电针与中药复方脑康胶囊结合对VD大鼠脑内Ach含量及AchE活性的影响.方法:雄性大鼠60只,随机抽取10只,作为正常对照组;余下50只经4-血管阻断法造成VD动物模型后,随机抽取40只分成模型组、针药结合组、电针组、中药组.经4周分别治疗后处死取脑,检测其脑内Ach含量及AchE活性并进行比较.结果:针药结合组与模型组比较,Ach含量明显升高(P＜0.01),AchE活性明显降低(P＜0.01);与电针组和中药组相比,Ach含量升高(P＜0.05),AchE活性降低(P＜0.05).结论:针药结合能明显改善VD大鼠胆碱能系统的功能,调节脑内Ach生理代谢,从而达到治疗VD的目的,其作用较单纯电针和中药治疗明显.