去甲斑蝥素-泊洛沙姆407缓释制剂局部注射治疗肿瘤的实验研究

目的:探讨增强去甲斑蝥素的抗癌效果,减轻其毒副反应。方法:选择泊洛沙姆407作为去甲斑蝥素局部用药的载体,将去甲斑蝥素制成缓释剂型,比较不同剂型去甲斑蝥素的毒性及对荷 W(256)肿瘤大鼠的抗肿瘤效果。结果:(1)去甲斑蝥素缓释剂型的毒性明显低于单纯去甲斑蝥素;(2)去甲斑蝥素缓释剂型治疗组大鼠肿瘤生长受到显著抑制,肿瘤组织坏死广泛,治疗后平均生存期延长(与单纯去甲斑蝥素比较,P<0.05);综合疗效优于单纯去甲斑蝥素组。结论:去甲斑蝥素-泊洛沙姆407缓释制剂瘤内注射,通过延缓药物释放,保持肿瘤内有效药物浓度,并避免峰值血药浓度出现而起到增效减毒作用。     

人参皂苷Rb1对斑蝥素致SD大鼠肝毒性保护作用

目的:用斑蝥素诱导SD大鼠肝脏损伤并建立肝脏毒性模型,研究人参皂苷Rb1对SD大鼠肝脏毒性的保护作用.方法:取SD大鼠40只随机分为正常组、斑蝥素组、人参皂苷Rb1低、高剂量组,每组10只.用斑蝥素连续15 d腹腔注射给药,建立SD大鼠肝毒性模型;用人参皂苷Rb1低、高剂量提前4d腹腔注射干预给药,第5天至第19天每天...     

斑蝥素及去甲斑蝥素对小鼠毒性靶器官的影响

目的:比较斑蝥素及去甲斑蝥素对小鼠的毒性作用及两者靶器官损伤程度的差异。方法:取Balb/c小鼠,采用概率单位法计算获得斑蝥素与去甲斑蝥素的半数致死量(median lethal dose,LD_(50))。以1/2 LD_(50)作为毒性研究给药剂量,连续灌胃给药2周。2周后取血检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST),尿素氮(BUN)水平,取肝、肾、小肠和膀胱进行病理组织学观察比较。结果:斑蝥素和去甲斑蝥素LD_(50)分别为2.045,20.966 mg·kg~(-1)。分别以1/2 LD_(50)给药剂量给小鼠灌胃2周后,血清学检测结果表明,与正常组比较,斑蝥素组无显著差异;去甲斑蝥素可导致ALT,BUN水平显著性升高。肝、肾病理结果表明,与正常组比较,斑蝥素组肝肾轻微病变,去甲斑蝥素组可见肝脏炎性细胞浸润,肝细胞空泡变样,肾小球和小管弥漫性损伤。小肠病理结果表明,斑蝥素组导致肠道淋巴结肿大并分叶,去甲斑蝥素组症状较轻。膀胱病理表明,斑蝥素组发现血管炎症、膀胱移行上皮或黏膜层炎症反应,去甲斑蝥素组轻微移行上皮炎症反应。结论:临床前动物模型结果表明,去甲斑蝥素的毒性主要表现在肝脏和肾脏,斑蝥素的毒性作用主要表现为小肠和膀胱。     

斑蝥素羟丙基β-环糊精原位凝胶剂的制备

目的：制备符合要求的斑蝥素羟丙基β-环糊精原位凝胶剂。方法：本实验以斑蝥素为模型药物,选用冷冻干燥法制备包合物,然后以泊洛沙姆407（P-407）为基质制备斑蝥素羟丙基β-环糊精包合物温敏原位凝胶。结果：成功的制备了斑蝥素羟丙基β-环糊精包合物,并将其进一步制成了温敏型原位凝胶,同时考察了处方因素对制剂性质的影响。结论：以泊洛沙姆407为基质可以制备斑蝥素羟丙基β-环糊精包合物温敏原位凝胶,工艺简便,制剂稳定。     

丹皮酚温度敏感型凝胶的制备及体外性能探索

目的：制备丹皮酚温敏凝胶并进行体外初步性能的研究。方法：采用试管倒转法考察泊洛沙姆407、泊洛沙姆188浓度对胶凝温度的影响;采用旋转式粘度计,考察凝胶的粘度;用无膜溶出法考察其体外溶蚀及释药特性。结果：泊洛沙姆407 的胶凝温度随着浓度的升高而降低,泊洛沙姆407的胶凝温度随着体系中加入的泊洛沙姆188的浓度的增加而升高;丹皮酚温敏凝胶体外320min累积释药70%,凝胶溶蚀与药物释放同时进行,没有突释现象。结论：丹皮酚温敏凝胶制备工艺简单,使用方便,具有明显的缓释效应。     

去甲斑蝥素联合环磷酰胺对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的：探讨去甲斑蝥素联合环磷酰胺对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：采用小鼠体内培养H22腹水肝癌细胞,接种健康小鼠,建立荷瘤小鼠模型,并给予去甲斑蝥素联合环磷酰胺治疗,观察计算脾脏指数、胸腺指数,CCK-8检测荷瘤小鼠经去甲斑蝥素联合环磷酰胺治疗后的脾脏淋巴细胞转化实验,流式检测经去甲斑蝥素联合环磷酰胺治疗后荷瘤小鼠T细胞亚群CD3＋、CD4＋、CD8＋百分率,骨髓有核细胞凋亡率及细胞周期。结果：与环磷酰胺组比较,去甲斑蝥索联合环磷酰胺处理组的脾脏指数有升高趋势;在淋巴细胞转化实验中,不同剂量的去甲斑蝥素联合环磷酰胺均可提高淋巴细胞转化率,且与去甲斑蝥素的剂量呈正相关。低剂量的去甲斑蝥素联合环磷酰胺可有效提高T细胞亚群的百分比,CD3＋（％）为11．4±3．13,CD4＋（%）为7．3±2．94,CD8＋（％）为2．88±0．51,与环磷酰胺组比较P〈0．05,与去甲斑蝥素的浓度呈负相关。随着去甲斑蝥素剂量的增加,骨髓有核细胞凋亡率也逐渐升高。结论：低剂量去甲斑蝥素（1mg/kg）联合环磷酰胺可以降低单纯环磷酰胺化疗药对免疫系统的抑制作用,为临床用药剂量提供参考依据。     

蟾酥缓释注射液的制备及其局部麻醉作用研究

目的以泊洛沙姆407作为载体材料制备蟾酥缓释注射液,并评价其在体内局部麻醉作用效果。方法采用冷溶法制备蟾酥缓释注射液,以胶凝温度为指标筛选蟾酥缓释注射液最佳处方,采用豚鼠皮丘模型比较蟾酥缓释注射液和蟾酥溶液局部麻醉作用时间。结果蟾酥缓释注射液的最佳处方是泊洛沙姆407 15.5%、乙醇10%、蟾酥提取物0.5%,胶凝温度在33℃,体内局部麻醉作用时间可达6～7 h,而蟾酥溶液麻醉作用时间仅为2～3 h。结论蟾酥缓释注射液是一种长效制剂。     

去甲斑蝥素对小鼠免疫系统的影响

目的:观察去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)对小鼠免疫器官及免疫细胞功能的影响。方法:小鼠注射 NCTD 5天,测量脾重;跟踪骨髓有核细胞数量变化;MTT 法测定脾 T 淋巴细胞转化率;脾 Tc 淋巴细胞毒性试验。结果:NCTD 1mg/kg 每日注射1次,对小鼠免疫器官及淋巴细胞功能无显著影响。每日注射2次,骨髓细胞数有一过性降低,但在停药后能较快恢复。结论:去甲斑蝥素对机体免疫系统及功能无明显损害。     

环孢素A生物黏附性纳米脂质载体的制备及在家兔眼部组织分布研究

 目的 制备适于眼部给药的环孢素A生物黏附性纳米脂质载体,考察其在家兔眼组织的分布情况,并进行眼局部刺激性研究。方法 采用熔融-乳化法制备纳米脂质载体,与生物黏附性材料泊洛沙姆407（P407）溶液混合后,得到泊洛沙姆407纳米脂质载体。运用激光粒度仪测定粒径,透射电镜观察形态,流变仪测定黏度,动态透析法研究其在人工泪液中的释药行为,HPLC测定泊洛沙姆407纳米脂质载体在家兔眼部各组织中不同时间点药物浓度,以未加入泊洛沙姆407的纳米脂质载体(CsA-NLC)及药物油滴眼液作对照,采用线性梯形法计算参数。利用家兔研究其眼局部刺激性。结果 泊洛沙姆407纳米脂质载体多为类球形粒子,泊洛沙姆407包覆于纳米脂质载体的外表,其平均粒径（41.2±0.2）nm,Zeta电位(-15.2±0.21) mV,属于非牛顿流体。体外释放表明,泊洛沙姆407纳米脂质载体具有明显的缓释特征,且体外释药行为符合单指数分布模型。含6.0%泊洛沙姆407的泊洛沙姆407纳米脂质载体在角膜、房水、虹膜的AUC_{0-24 h}分别是油滴眼液的10.75、4.45和4.62倍,是环孢素A纳米脂质载体的2.77、1.22和1.54倍,MRT分别是油滴眼液的3.28、2.26和3.46倍,是环孢素A纳米脂质载体的1.69、1.50和1.62倍。泊洛沙姆407纳米脂质载体对家兔眼部无刺激性。结论 泊洛沙姆407纳米脂质载体可延长药物在眼部的作用时间,显著提高药物在眼部各组织中的浓度,减少刺激性,作为眼部给药载体具有良好的应用前景。     

去甲斑蝥素控释微球的肝动脉栓塞作用和急性毒性实验

目的评价去甲斑蝥素-海藻酸/聚酸酐微球（NA/PMs）的肝动脉栓塞作用及其安全性。方法在DSA下对新西兰大白兔行肝动脉造影注入NA/PMs,观察NA/PMs对兔肝动脉栓塞作用;进行NA/PMs小鼠急性毒性试验和大鼠肝动脉介入实验,评价NA/PMs对两种动物的毒性作用。结果兔肝动脉栓塞前,肝脏血管造影清晰,栓塞后10 min造影,远端微血管消逝,肝动脉增粗、迂曲,3 d时可见肝脏轻微肿胀,7 d后肿胀明显减轻,14 d出现小片状梗死灶。急性毒性实验显示,NA/PMs组小鼠的死亡率和肾毒性明显低于去甲斑蝥素组（P〈0.05）,且无其它明显的脏器损害。大鼠肝动脉介入给药后,病理切片显示NA/PMs栓塞于肝窦前小动脉,且栓塞后出现一过性肝功能损害,AST,ALT均在栓塞后1 d达峰值,以后逐渐下降,7 d左右恢复正常水平（P〉0.05）。栓塞后白细胞出现一过性升高,第3天达峰值,第7天接近正常水平（P〉0.05）。结论去甲斑蝥素-海藻酸/聚酸酐微球具有良好的肝动脉末梢栓塞作用,且微球制剂能明显降低去甲斑蝥素的体内毒副作用。     

土贝母抗癌有效成分肝靶向给药系统的研究

目的:研制中药土贝母抗癌有效成分TBMS的肝靶向给药系统,并考察该给药系统的减毒作用。方法:以α-氰基丙烯酸正丁酯为载体材料,用系统全面反馈动态技术优化纳米粒制备工艺,并进行其制剂学性质及毒理学研究,用透射电镜观察纳米粒的小鼠体内靶向性、XXTX-2000组织病理图象数据自动定量分析管理系统观察其减毒作用。结果:制得D₅₀为0.68μm、大小较均匀的纳米粒,载药量、包封率分别为(37.33±0.19)%,(88.63±0.13)%。体外释放符合Weibull方程,释放达平衡时间与t_1/2分别较注射剂延长26倍和19倍。纳米粒结构主要分布在肝脏组织中,且纳米粒对肺和肝脏的毒性明显较注射剂低。纳米粒的LD₅₀高于注射剂13.5%,同时血管刺激性较TBMS注射剂大大降低。结论:采用肝靶向给药系统的手段,可使土贝母抗癌有效成分TBMS达到肝靶向的目的,同时有望解决阻碍应用于临床的毒性问题,为土贝母抗癌有效成分的进一步研究开发奠定了基础。     

复方消经痛胶囊的毒理学研究

目的观察动物口服复方消经痛胶囊的急性毒性和长期毒性反应。方法采用最大给药量法测定小鼠口服复方消经痛胶囊的急性毒性;以8.0,4.0,2.0 g/kg 3个剂量的复方消经痛胶囊(相当临床用量80、40、20倍)iq SD大鼠,连续90 d,观察服药90 d及停药第14天时,大鼠的生长发育、血液学、血液生化学、组织病理指标的变化。结果小鼠1 d内iq复方消经痛胶囊最大给药量为40 g/kg,相当于临床拟给药量的400倍。长期毒性实验中,给药90 d,高剂量组肝脏、脾脏、肾脏、睾丸的重量系数高于对照组(P<0.05或P<0.01);中剂量组肝脏重量系数增高(P<0.05)。病理学检查显示,高剂量组2只大鼠肝细胞可见点状坏死,4只大鼠脾脏白髓细胞疏松分布,各只雄性大鼠睾丸生精小管管腔直径增大,各层生精上皮细胞数目增多。中剂量组雄性大鼠睾丸内可见局灶性睾丸间质细胞增生。停药14 d后,高剂量组大鼠除睾丸重量系数与对照组比较仍高(P<0.01)外,其余均正常。病理学检查,高剂量组大鼠睾丸组织仍有上述改变,其它脏器正常。结论复方消经痛胶囊在规定剂量下服用是安全可靠的。     

逍遥散对急性肝损伤小鼠的肝脏保护作用

目的：观察逍遥散对四氯化碳（CCl4）致小鼠急性肝损伤的肝脏保护作用。方法将30只小鼠按照随机数字表法分为空白对照组、模型组、逍遥散组,逍遥散组灌胃逍遥散,其余2组灌胃等量蒸馏水。给药后7 d,腹腔注射CCl4花生油溶液诱导小鼠急性肝损伤,16 h后取材,检测小鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、肝组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）浓度,并取肝组织做病理学观察。结果模型组小鼠 ALT、AST、MDA 水平明显升高,SOD 水平明显降低[分别为（136.46±15.75）U/L、（145.37±16.39）U/L、（17.48±3.45）nmol/mg、（261.60±20.29）U/mg],与空白对照组比较[分别为（22.96±6.23）U/L、（31.89±7.26）U/L、（4.22±1.08） nmol /mg、（336.73±25.34）U/mg],差异有统计学意义（P＜0.01）。逍遥散组ALT、AST、MDA水平明显降低,SOD水平升高[分别为（89.38±6.96）U/L、（119.04±20.44）U/L、（10.30±2.22）nmol/mg、（304.77±31.71）U/mg],与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.01或0.05）。结论逍遥散对CCl4致小鼠急性肝损伤有保护作用。     

Hypolipemic effect of water extracts of Picrorrhiza rhizoma in PX-407 induced hyperlipemic ICR mouse model with hepatoprotective effects: a prevention study

The preventive hypolipemic effect of water extract of Picrorrhiza rhizoma (PR) was observed in Poloxamer (PX)-407 induced hyperlipemic mice with their hepatoprotective effects. Doses of 50, 100 and 200 mg/kg of PR extracts were given orally once a day for 12 weeks initiated with intraperitoneal injection of PX-407 (0.5 g/kg), and changes in body weight and gains, liver weight, serum aspartate transferase (AST) and alanine transferase (ALT) levels were monitored with serum low density lipoprotein (LDL), high density lipoprotein (HDL), triglyceride and total cholesterol levels. The efficacy of PX-407 was compared to that of 10mg/kg of simvastatin (SIMVA). No meaningful changes in the body weight were detected in all dosing groups compared to that of vehicle control group. Dramatic decrease of both absolute and relative liver weight was dose-dependently observed in all PR extracts dosing groups compared to that of vehicle control group. The serum AST and ALT levels were significantly and dose-dependently decreased in PR extracts dosing groups. However, slight increase of liver weight, serum AST and ALT levels were detected in SIMVA-dosing groups. The serum LDL, triglyceride and total cholesterol levels were dose-dependently decreased in PR extracts dosing groups and SIMVA-dosing group compared to that of vehicle control group, respectively. The serum HDL levels were slightly but dose-dependently increased in PR extracts dosing groups compared to that in vehicle control group, respectively. However, the efficacy on the serum lipid levels of PR extracts was lower than that of SIMVA-about 200 mg/kg of PR extracts which showed similar effect compared to that of SIMVA 10mg/kg. On the basis of these results, it is concluded that water extract of PR has a relatively good favorable preventive effect on the PX-407 inducing hyperlipemia with favorable hepatoprotective effect.     

女贞子墨旱莲对多发性肌炎模型大鼠肌组织中核转录因子-κB的影响

目的研究中药女贞子墨旱莲配伍对多发性肌炎模型大鼠的治疗作用与疗效,阐明养阴滋补肝肾法对多发性肌炎模型大鼠肌组织中核转录因子-κB(NF-κB)的影响。方法将40只SPF级SD雄性大鼠随机抽取10只作为空白组,其余大鼠皮下注射完全弗氏佐剂与抗原1∶1混合乳化液,成功制备多发性肌炎大鼠模型,成模大鼠随机分为中药组、激素组、模型组,各10只。空白组、模型组给予0.9%氯化钠注射液,激素组给予甲泼尼龙溶液,中药组给予女贞子墨旱莲药物溶液,均给药4周,观察大鼠的一般状态,根据Lennon LA的评分标准进行评分,检测血清中血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)含量。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肌肉组织中NF-κB的含量水平。结果在各组大鼠进行干预治疗后,中药组的症状评分低于模型组(P0.01),中药组AST水平明显低于模型组(P0.01),中药组与激素组比较差异无统计学意义(P0.05)。中药组LDH水平明显低于模型组(P0.01),中药组与激素组比较,血清中LDH含量较高(P0.05)。中药组CK水平明显低于模型组(P0.01),中药组与激素组,血清中CK含量高(P0.05)。中药组的NF-κB表达水平明显低于模型组(P0.05),中药组与激素组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论中药女贞子墨旱莲阻止炎症细胞凋亡,进而起到抗炎、阻止肌肉组织破坏,是通过抑制NF-κB信号通路,促进抗凋亡蛋白的表达,从而达到对多发性肌炎的治疗作用,表明养阴滋补肝肾法对多发性肌炎模型大鼠肌组织中NF-κB有一定的影响。     

云南白药对大鼠生育力与早期胚胎发育毒性的影响

目的：评价云南白药对大鼠生育力及早期胚胎发育的毒性影响。方法：SD大鼠每天分别灌胃给予云南白药4.0、1.4、0.5g.kg-1剂量和超纯水（以下简称＂阴性对照＂）1.5mL.kg-1。每天1次,连续给药4周和2周后将雄鼠和雌鼠按1∶1合笼,交配14d,记录交配情况。雄鼠给药至交配结束,雌鼠给药至妊娠第6天。在整个试验过程中每天观察大鼠的一般反应,定期称量大鼠体重和摄食量。雌雄大鼠分别于妊娠第15天和交配结束后进行解剖检查,计算孕鼠黄体数、着床数、活胎数、死胎数吸收胎数等检查早期胚胎发育情况,睾丸、附睾、前列腺或卵巢、子宫称重并计算脏器系数。结果：云南白药3个剂量组分别与阴性对照组比较,各剂量组雄鼠体重增长缓慢,有剂量和时间关系,雌鼠体重增长无异常;仅高剂量组大鼠的摄食量略少于阴性对照组;高剂量组给药后出现流涎、活动减少、闭眼等症状,少数大鼠出现打喷嚏、挠嘴等反应;各组大鼠解剖脏器均未发现肉眼可见的异常;各剂量组交配率、妊娠率、合笼天数与阴性对照组均无显著性差异P〉0.05;子宫连胎重、黄体数、着床数、着床前丢失数、活胎数、死胎数、吸收胎数等胚胎形成指标与及阴性对照组比较均无显著性差异;高剂量组睾丸系数、附睾系数、前列腺系数,中、低剂量组附睾系数高于阴性对照组（P〈0.05或P〈0.01）。结论：在本试验剂量条件下,SD大鼠从交配前到交配期直至胚胎着床期间灌胃给予云南白药,对雌雄大鼠有一定的亲代毒性作用,但并不影响大鼠的生育力及早期胚胎发育,大鼠的生育力及早期胚胎发育毒性的无毒性反应剂量（NOAEL）为4.0g.kg-1。     

中心复合设计-效应面法优化黄芩苷磷脂复合物鼻用原位凝胶的制备工艺

目的优化黄芩苷磷脂复合物鼻用原位凝胶的制备工艺。方法采用中心复合设计-效应面优化法,以胶凝温度为评价指标,对黄芩苷磷脂复合物鼻用原位凝胶的制备工艺关键影响因素Poloxamer407(P407)、Poloxamer188(P188)、聚乙二醇6000(PEG 6000)进行研究,利用多元数学统计矩模型,对制备工艺参数和胶凝温度的相关性进行研究,建立工艺参数与胶凝温度的相关方程,确立最佳工艺参数。结果先将黄芩苷磷脂复合物1.0 g溶于0.1%三乙醇胺溶液中,再加入18 gP407、6 g P188、1 g PEG 6000、葡萄糖5 g、苯扎氯胺0.02 g,加去离子水至100 g,于冰浴(4℃)磁力搅拌下使其分散均匀,置4℃冰箱中保存24 h以上,直至聚合物完全溶解得到澄明溶液。结论采用中心复合设计-效应面法优化的黄芩苷磷脂复合物鼻用原位凝胶的制备工艺稳定可行。     

斑蝥素非离子表面活性剂囊泡的制备及其体外特性表征

目的:以非离子表面活性剂为载体材料进行斑蝥素囊泡的制备考察,并评价其特性表征。方法:建立了注入法制备斑蝥素非离子表面活性剂泡囊的制备工艺;采用离心法和HPLC法测定斑蝥素囊泡的包封率;考察不同处方因素对囊泡体外表征的影响,在此基础上正交设计优化处方;对最佳处方囊泡的形态学、粒径、Zeta电位等性质进行了考察。结果:注入法获得的CTD-NS的包封率为(27.5±2.0)%,粒径(209.8±0.5)nm,Zeta电位(41.5±0.65)mV。结论:以非离子表面活性剂A和B联用为载体材料,注入法制备斑蝥素非离子表面活性剂囊泡,制备方法简单,性质稳定。     

橙皮苷对果糖饮食诱导的非酒精性脂肪肝小鼠的作用研究

目的:研究橙皮苷对高果糖加高脂饲料饮食诱导的非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)和固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)表达的影响。方法:昆明小鼠60只,雄性,随机分为正常组、模型组、阳性药物多烯磷脂酰胆碱组,以及橙皮苷低、中和高剂量组,每组10只,除正常组给予普通饲料和普通水喂养外,其余5组给予10%的果糖水+高脂饲料喂养8周构建NAFLD模型,治疗4周后处死,检测肝功能AST、AST,血脂和肝脂TG、TC,观察肝脏病理学,同时检测肝脏组织中PPARα和SREBP-1c蛋白及mRNA的表达。结果:肝脏病理学HE染色可见,正常组切片正常,模型组出现明显脂肪空泡,与模型组比较,各观察组均有明显好转;与正常组比较,模型组AST、ALT、血清TG、血清TC、肝脏TC和肝脏TG均明显升高(P<0.05),各观察组相较于模型组明显降低(P<0.05),此外橙皮苷高剂量组和多烯磷脂酰胆碱组差异无统计学意义;与正常组比较,模型组PPARα明显降低(P<0.05),SREBP-1c明显升高(P<0.05),橙皮苷治疗后PPARα明显升高(P<0.05),SREBP-1c则明显降低(P<0.05),此外橙皮苷高剂量组和多烯磷脂酰胆碱组没有差异。结论:橙皮苷可明显降低高果糖+高脂饮食诱导的NAFLD小鼠肝脏组织中SREBP-1c表达,同时升高PPARα表达,进而调节血脂,保护肝脏。