病理性瘢痕成纤维细胞Fas介导的死亡信号传导研究Ⅰ：Ca …

目的 研究和比较增生性瘢痕和瘢痕疙瘩成纤维细胞经Ｆａｓ单抗（ＦａｓＭｃａｂ）诱导产生凋亡的能力。同时探讨Ｃａ＾２＋在其相应死亡信号通道中的作用。方法 取手术切除的增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织各６例。通过细胞培养６－８代后，以ＦａｓＭｃａｂ为处理因素作用于增生性瘢痕及瘢痕疙瘩成纤维细胞２４ｈ。应用透射电镜证实凋亡现象的发生，流式细胞仪检测并比较两者凋亡率。同时，应用粘附式细胞仪检测ＦａｓＭｃａｂ作用下胞     

异常瘢痕成纤维细胞凋亡研究

目的：明确异常瘢痕成纤维细胞的凋亡特性及激素的机理。方法：以瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮肤（各６例）为材料,在体外对低血清和氟美松对不同成纤维细胞的细胞凋亡及怀凋亡有关的蛋白Ｂａｘ和Ｂｃｌ－２的表达的影响进行了研究;同时,对６例增生性瘢痕局部注射康宁克通后３ｄ和７ｄ的细胞凋亡和相关基因ｃ－ｍｙｃ的表达进行了在体研究。结果：在低血清中发生细胞凋亡正常皮肤成纤维细胞多于增生性瘢痕,增生性瘢痕多于瘢痕疙     

Fas介导下瘢痕成纤维细胞中死亡信号传导的研究

目的 研究和比较增生性瘢痕疙瘩成纤维细胞经Ｆａｓ单抗（ＦａｓＭｃａｂ）诱导产生调亡的能力，同时探讨Ｃａ＾２＋、氢过氧化物（ＬＰ０）在其相应开遍信号通道中的作用。方法 取手术切除的增生性瘢痕和瘢痕疙瘩患者的瘢痕及瘢痕疙者组织各６例，通过细胞６￣８代后，以ＦａｓＭｃａｂ为自理因素作用于增生性瘢痕及瘢痕疙瘩成纤维细胞２４ｈ，应用透射电镜证实凋亡现象的发生；应用流式仪检测及比较两者凋亡率。同时，应用粘附式     

病理性瘢痕成纤维细胞的增殖调控及Fas基因突变的筛选

目的 从细胞生物学及基因水平探讨正常皮肤、增生性瘢痕、瘢痕疙瘩周边部和中央部不同生长特性及瘢痕疙瘩发生的可能机制。方法 （１）取手术切除的正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织各６例为标本,通过细胞培养６～１０代后,应用流式细胞仪、粘附式细胞仪检测不同来源的成纤维细胞ｐ５３蛋白的表达和细胞周期的分布。（２）取瘢痕疙瘩、增生性瘢痕患者的组织及外周血标本,聚合酶链式反应（ＰＣＲ）特异性扩增Ｆａｓ分子外显子     

病理性瘢痕中c-myc原癌基因的表达

目的探讨原癌基因ｃ－ｍｙｃ的表达与病理性瘢痕形成的相关性。方法应用免疫组化ＳＰ法检测ｃ－ｍｙｃ蛋白在增生 性瘢痕、瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中的表达和分布,并用图像定量分析比较其差异。结果在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的 成纤维细胞中ｃ－ｍｙｃ蛋白呈强阳性表达,与正常皮肤对照组均有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论增生性瘢痕与瘢痕疙瘩中 ｃ－ｍｙｃ蛋白表达升高提示存在ｃ－ｍｙｃ原癌基因的激活,ｃ－ｍｙｃ原癌基因可能参与了成纤维细胞的分化增殖、胶原合成与 降解以及对细胞因子的调控,并导致瘢痕增生。     

肌成纤维细胞凋亡与肥厚性瘢痕消退的关系

目的：探讨肥厚性瘢痕消退与细胞凋亡的关系。方法：应用光镜,电镜,ＴＵＮＥＬ技术和免疫组织化学染色对６１例肥厚性瘢痕,２０例非肥厚性瘢痕和８例正常皮肤进行细胞凋亡,α－ＳＭ－ａｃｔｉｎ表达的分析。结果：肥厚性瘢痕中大多数肌成纤维细胞表达α－ＳＭ ａｃｔｉｎ;肥厚性瘢痕中存在细胞凋亡现象,肥厚性瘢痕消爱过程中成纤维细胞数的减少与肌成纤维细胞凋亡增加相一致。结论：细胞凋亡现象是了性瘢痕退化过程中肌成纤维     

病理性瘢痕成纤维细胞Fas 受体及Bcl-2 蛋白的表达

目的 研究病理性瘢痕成纤维细胞Fas受体及凋亡相关蛋白bcl-2的表达，探讨增生性瘢痕成纤维细胞对Fas介导凋亡的抑制作用。方法 取手术切除的增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织各6例，通过细胞培养6～10代后，应用流式细胞仪、粘附式细胞仪分别检测增生性瘢痕及瘢痕疙瘩成纤维细胞Fas及Bcl-2蛋白的表达。结果 增生性瘢痕成纤维细胞Fas受体呈低表达，而瘢痕疙瘩成纤维细胞Fas受体强表达。凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩成纤维细胞内均呈低表达，两者无显著差异。结论 正常情况下，Fas Mcab能诱导Fas受体表达阳性的细胞凋亡，瘢痕疙瘩成纤维细胞却表现为Fas受体高表达而不凋亡，Bcl-2低表达。实验结果表明，瘢痕疙瘩成纤维细胞不凋亡现象并非Fas受体缺陷或外源性抑制所致，提示瘢痕疙瘩成纤维细胞膜表面高表达的Fas受体可能处于无功能状态。     

微血管相关因素在瘢痕组织增生中作用的实验研究

瘢痕疙瘩和肥厚性瘢痕微血管有明显异常,是皮肤损伤后组织过度修复的结果。二者的发病机理尚不完全清楚。为进一步明确微血管及其相关因素在瘢痕增生中的作用,本课题采用免疫组化、原位分子杂交、脐静脉内皮细胞和皮肤成纤维细胞体外培养、同位素掺入、流式细胞仪分析等技术方法,对瘢痕疙瘩和肥厚性瘢痕组织中内皮素－１（ＥＴ－１）和一氧化氮（ＮＯ）的表达,细胞间粘附分子１的表达（ＩＣＡＭ－１）,血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）、碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）的表达,凋亡相关基因。ｃ－ｆｏｓ、ｂｃｌ－２的表达,内皮…     

柔红霉素体外对HL-60细胞的凋亡作用

目的：了解柔红霉素（ＤＮＲ）体外作用于ＨＬ－６０　细胞时产生凋亡的规律及一些相关蛋白表达的变化。方法：应用光镜、ＤＮＡ电泳及ＦＣＭ检测ＨＬ－６０细胞发生的凋亡模式；用ＩＣ、ＦＣＭ观察相关蛋白的变化。结果：当ＤＮＲ浓度为０．２μＭ～２μＭ时，ＨＬ－６０细胞发生的凋亡率随浓度的增加与作用时间的延长而升高，可见典型的凋亡细胞及明显的ＤＮＡ梯度条带。１μＭ　ＤＮＲ作用２ｈ时，ｂｃｌ－２与ｃ－ｍｙｃ的荧光强度指数（ＦＩ）降低，ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ－３　的　ＦＩ　升高；而作用５ｈ时，ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ－３的ＦＩ值反而降低。结论：一定浓度的ＤＮＲ在体外可诱导ＨＬ－６０细胞凋亡，它可抑制ｂｃｌ－２与ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达，而激活ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ－３蛋白的表达。     

细胞凋亡及凋亡相关基因在下肢静脉曲张中的表达及意义

目的：探讨细胞凋亡和凋亡相关基因在下肢静脉曲张中的表达及意义。方法：采用凋亡细胞原位检测、原位杂交、免疫组化研究８３例曲张静脉和１０例对照组内皮细胞和平滑肌细胞凋亡及相关基因表达。结果：①曲张静脉囊性扩张型Ｅｃｓ及ＳＭＣ凋亡指数显著增高（Ｐ＜０．０１）；②曲张静脉囊性扩张型Ｂｃｌ－２　ｍＲＮＡ阳性细胞表达率均显著低于非囊性扩张型（Ｐ＜０．０５）；③非囊性扩张型其Ｂｃｌ－２基因蛋白阳性细胞表达率均显著高于囊性扩张型和对照组（Ｐ均＜０．０５）；④囊性扩张型其Ｂａｘ　和Ｆａｓ基因蛋白阳性细胞表达率均显著高于非囊性扩张型和对照组（Ｐ均＜０．０５）；⑤Ｂｃｌ－２　ｍＲＮＡ表达阳性细胞数和表达率（０．２５±０．２３）与Ｂｃｌ－２基因蛋白（０．３０±０．２７）呈显著正相关，相关系数ｒ分别为０．７９５３８１（Ｐ＝０．００１９８１）和０．６８８２１６（Ｐ　＝０．０００８４４）。结论：①细胞过度凋亡导致静脉血管重塑，可能是静脉曲张发病机制之一；②曲张静脉囊性扩张型其ＥＣｓ和ＳＭＣ过度凋亡可能与Ｂｃｌ－２　ｍＲＮＡ、Ｂｃｌ－２蛋白低水平表达及Ｂａｘ、Ｆａｓ高水平表达相关。     

钙通道阻滞剂对增生性瘢痕成纤维细胞三维培养模型收缩的抑制作用

目的：观察钙通道阻滞剂对增生性瘢痕成纤维细胞三维培养模型收缩情况的影响,探讨进一步应用于临床治疗增生性瘢痕挛缩的可能性． 方法： 对人增生性瘢痕成纤维细胞进行体外培养,并构建含成纤维细胞的胶原网络支架（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｐｏｐｕｌａｔｅｄ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｌａｔｔｉｃｅ, Ｆ Ｐ Ｃ Ｌ）,即三维培养系统． Ｂｉｏｇｒａｐｈｙ： Ｗ Ａ Ｎ Ｇ Ｚｈｅｎｇ（ｍ ａｌｅ,ｗ ａｓ ｂｏｒｎ ｏｎ Ｊａｎ． １３, １９７４ ｉｎ Ｘｉ＇ａｎ Ｃｉｔｙ, Ｓｈａａｎｘｉ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ） ｉｓ ａ ｐｏｓｔｇｒａｄｕａｔ ｓｔｕｄｅｎｔ ｏｆ Ｆｏｕｒｔｈ Ｍ ｉｌｉｔａｒｙ Ｍ ｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．　 Ｔｕｔｏｒ： Ｐｒｏｆｅｓｓｏｒ Ｌ Ｕ Ｋａｉ Ｈｕａ, Ａｄｄｒｅｓｓ： Ｄｅｐａｒｔｍ ｅｎｔ ｏｆ Ｐｌａｓｔｉｃ Ｓｕｒｇｅｒｙ, Ｘｉｊｉｎｇ Ｈｏｓｐｉｔａｌ, Ｆｏｕｒｔｈ Ｍ ｉｌｉｔａｒｙ Ｍ ｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．　 Ｔｅｌ：（０２９）３３７５３０５ Ｒｅｃｅｉｖｅｄ ｄａｔｅ：１９９９┐０１┐１５;　 Ｒｅｖｉｓｅｄ ｄａｔｅ：１９９９┐０３┐２６ 结果：通过对６ 例手术切除的增生性瘢     

乐胃煎对大鼠胃粘膜上皮异型增生细胞凋亡及调控基因（Bcl—2,F …

目的 研究乐胃煎对胃粘膜上皮产生大鼠胃粘膜上皮细胞凋亡及调控基因（Ｂｃｌ－２、Ｆａｓ、ＩＣＥ）蛋白表达的影响,探讨乐胃煎治疗胃粘膜癌前病变的机制。方法 用Ｎ－甲基－Ｎ－亚硝基胍（ＭＮＮＧ）建立大鼠胃粘膜上皮异型增生模型,设立空白组、造模组、乐胃煎治疗组和维甲酸对照组,对大鼠胃粘膜用ＴＵＮＥＬ法检测细胞凋亡,用免疫组织化学法检测Ｂｃｌ－２、Ｆａｓ、ＩＣＥ蛋白表达水平。结果 空白组、对照组、治疗组和造     

蟾皮提取液对肾癌细胞凋亡及Fas,FasL和bcl—2表达的影响

目的：探讨蟾皮对肾癌细胞ＧＲＣ－１凋亡的诱导作用及Ｆａｓ、Ｆａｓ配体（Ｆａｓ Ｌｉｎａｎｄ,ＦａｓＬ）和ｂｃｌ－２表达的影响,了解其抑制肿瘤的分子生物学机制。方法：用末端脱氧核苷酰转移酶法（ＴｄＴ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｄＵＴＰｎｉｃｋ ｅｎｄ ｌａｂｅｌｉｎｇ,ＴＵＮＥＬ）流式细胞技术检测细胞凋亡,免疫细胞化学检测Ｆａｓ、ＦａｓＬ和ｂｃｌ－２的表达。结果：当蟾皮提取液浓度分别为０μｇ／ｍｌ,０．０１     

肝细胞癌患者癌和癌旁组织中Fas抗原和bcl-2表达的研究

目的：探讨人体肝细胞癌患者癌及癌旁组织中Ｆａｓ抗原的原位表达、分布，并与抗凋亡基因产物ｂｃｌ－２蛋白比较，探讨Ｆａｓ抗原在肝细胞癌形成过程中的生物学意义。方法：用免疫组织化学方法检测２０例患者的肝细胞癌及癌旁组织中Ｆａｓ抗原和ｂｃｌ－２蛋白的原位表达。结果：１８例癌组织中有Ｆａｓ表达，大多数表现为胞质阳性，所有癌旁组织均见Ｆａｓ表达，阳性可见于胞质及胞膜，炎细胞浸润明显之汇管区及纤维间隔附近的肝细胞阳性表达有所增强。ｂｃｌ－２在１９例ＨＣＣ和所有癌旁组织均有表达；胞质着色，癌组织较癌旁表达为弱。结论：人体肝癌组织有Ｆａｓ表达，以胞质阳性为主，癌旁组织胞质及胞膜均有表达，与淋巴细胞浸润关系密切，ｂｃｌ－２的表达并不减弱细胞Ｆａｓ的表达，二者在ＨＣＣ的发生过程中可能有着独立的作用机制并起了一定的作用。     

TGF—β1对瘢痕对纤维细胞α—SMA表达的诱导作用

目的 研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）对瘢痕成肌纤维细胞中α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ）表达的诱导作用。方法 以５例增生性瘢痕为标本,３例正常瘢痕为对照,２成纤维细胞二维培养和三维培养体系及ＬＳＡＢ免疫组织化学染色技术,观察了在不同ＴＧＦ－β１浓度条件作用下,来源的于增生性瘢痕和正常瘢痕在成纤维细胞表达α－ＳＭＡ的情况。结果 （１）不同浓度的ＴＧＦ－β１诱导瘢痕成纤维细胞表达α－ＳＭＡ的作用不     

凋亡相关蛋白在胆管癌中的表达及意义

目的：研究胆管癌组织中 Ｂｃｌ－２蛋白和 Ｆａｓ－Ｌ蛋白的表达及意义。方法：免疫组化 ＳＰ法。结果;５６例胆管癌中 Ｂｃｌ－２蛋白阳性 ３８例（６７． ８６％）和 Ｆａｓ－Ｌ蛋白阳性 ３１例（５５．３６％）,与８例正常胆管中二者的阳性表达２例（２５．００％）、７例（８７．５０％）有显著差异;Ｂｃｌ－２蛋白和Ｆａｓ－Ｌ蛋白在高分化癌（５２．６３％、７３．６８％）、中分化癌（６６．６７％、５７．７１％）、低分化癌（８７． ５０％、３７． ２５％）中的表达相关（Ｐ＜０． ０５）。结论：Ｂｃｌ－２蛋白和 Ｆａｓ－Ｌ蛋白在胆管癌的发生发展中起重要作用,测定Ｂｃｌ－２蛋白和Ｆａｓ－Ｌ蛋白有助于判断胆管癌的恶性程度和预后。     

增生性瘢痕不同时期TGF β1及其受体的表达

目的：研究ＴＧＦ－β１及其受体ＴＧＦ－βＲＩ在务后增生性瘢痕不同时期的表达。方法：免疫组化ＡＢＣ法。结果：在正常真皮成纤维细胞中ＴＧＦ－β１及ＴＧＦ－βＲＩ未检测到阳性表达,增生期的增生性瘢痕的真皮中ＴＧＦ－β１及ＴＧＦ－晨相同的丰纤维细胞亚群中高表达,而萎缩期的增生性瘢痕中两者表达均为阴性。结论：提示增生性瘢痕形成与成纤维细胞对ＴＧＦ－β１的反应性增高有关,同时也与伤口愈合高表达ＴＧＦ－βＲＩ的     

紫杉醇作用下的HeLa细胞基因表达研究

目的；研究ＨｅＬａ ｃｅｌｌｓ在紫杉醇作用下的基因表达。方法：通过生物素－抗生素蛋白ＤＣＳ体系间接免疫荧光染色法检测Ｂｃｌ－２及Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测Ｆａｓ基因的表达。结果；经生物素－抗生素蛋白ＤＣＳ体系间接免疫荧光染色法检测Ｂｃｌ－２基因表达加药组荧光强度较阳性对照组明显降低，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ法检测Ｆａｓ基因表达，未见明显条带。     

维拉帕米对兔耳增生性瘢痕作用的实验研究

目的 探讨钙通道阻滞剂维拉帕米对兔耳增生性瘢痕的作用。方法 建立兔耳外伤性皮肤早期瘢痕增生模型，将２４只兔随机平均分为３组，每组８只，各组瘢痕内分别注射维拉帕米２５μｌ／瘢痕、曲安缩松２５μｌ、生理不２５μｌ，１次／１０ｄ，共２次。观察瘢痕外形变化。治疗后２０ｄ在瘢痕处取材，切片行ＨＥ及Ｍａｓｓｏｎ染色。光镜下观察，计算瘢痕增生指数、切片内成纤维细胞数密度，计算机辅助图象分析测算切片内胶原纤维面密     

类风湿关节炎病人滑膜细胞增生与fas和bcl-2基因的表达

目的探讨类风湿关节炎（ＲＡ）病人滑膜细胞增生是否与细胞凋亡有关。方法通过体外转录合成,并标记ｆａｓ及其配体（ｆａｓＬ）和ｂｃｌ－２ＲＮＡ探针,应用原位杂交方法检测１９例滑膜组织的基因表达。用免疫组织化学方法检测蛋白表达。用ＤＮＡ电泳和流式细胞分析仪检测细胞凋亡。结果７例ＲＡ病人滑膜衬里层细胞明显增生,其中６例有ｆａｓｍＲＮＡ表达,５例表达ｂｃｌ－２,而ｆａｓＬｍＲ－ＮＡ在所有病例均不表达。在ＲＡ滑膜衬里层中,ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ总是伴随ｆａｓ而表达,且ｆａｓ和ｂｃｌ－２的表达率较骨性关节炎（ＯＡ）及正常对照者（ＮＣ）明显增高（Ｐ＜０．０５）。免疫组织化学结果表明,ｆａｓ和ｂｃｌ－２蛋白在滑膜衬里层有表达。从６例ＲＡ、４例ＯＡ病人及３例正常对照者滑膜组织中提取ＤＮＡ,仅１例ＯＡ病人可见典型的ＤＮＡ梯形图形。培养的ＲＡ和ＯＡ病人滑膜细胞经流式细胞分析仪检测,表明自发凋亡的细胞很少（＜５％）。结论ＲＡ病人滑膜细胞内不存在明显的细胞凋亡现象,ｂｃｌ－２过量表达可能抑制了ＲＡ滑膜细胞凋亡,是ＲＡ滑膜细胞增生的原因之一。