氟康唑与两性霉素B抗白假丝酵母菌临床分离株的实验研究

目的评价白假丝酵母菌临床分离株对氟康唑(FCZ)与两性霉素B(AmB)的敏感性及两药相互作用的方式. 方法采用美国国家临床实验室标准化委员会M27-A推荐的棋盘微量稀释法,检测了22株白假丝酵母菌临床分离株对FCZ、AmB及两药联合的体外药物敏感性,同时对两药的作用方式进行了判定. 结果联合用药时,FCZ MIC值的几何均数从0.369 mg/L显著降低到0.227 mg/L,AmB MIC值的几何均数从0.223 mg/L显著降低到0.118 mg/L,22.73%受试菌表现为协同作用方式,63.14%的受试菌株表现为相加作用方式,13.64%受试菌株表现为无关作用方式,未观察到拮抗作用的出现.测定不同浓度下药物单独和联合作用的1株菌的菌落形成单位(cfu/ml),联合用药组都较单独用药组有明显减少,且对HF细胞和Hep-2细胞无毒性.结论 FCZ与AmB联合较任一药物单独使用体外抗白假丝酵母菌的活性高,且具有差异毒力.     

两性霉素B与人参茎叶皂苷联合抗念珠菌生物膜作用的研究

目的 探讨人参茎叶皂苷（Ginseng stem-leaf saponins, GSLS）联合两性霉素B(amphotericin B, AMB)对念珠菌生物膜的体外抑制活性。方法 采用ITS及β-tubulin基因部分测序对临床分离的31株经形态学鉴定为念珠菌菌株进行分子鉴定;按照美国标准化实验室与研究所（CLSI）推荐的M27-A3微量液基稀释法对收集的临床菌株及标准菌株进行体外抗念珠菌生物膜联合药敏试验;使用甲基四氮盐（XTT）减低法和结晶紫分光光度法分别对生物膜的活性和生物膜总量测定。结果 31株临床念珠菌中,其中白念珠菌16株、近平滑念珠菌6株、热带念珠菌8株、季也蒙念珠菌1株。两性霉素B联合人参茎叶皂苷对所有试验菌株的FICI值均小于等于0.5（FICI≤0.5）。相对于单独用药,二者联合能更有效地抑制菌株生物膜的形成和活力,单药与两药联合的生物膜形成量的差异有统计学意义（P<0.05）。结论 两性霉素B与人参茎叶皂苷在体外联用对几种念珠菌生物膜以协同作用为主。     

两性霉素B和两性霉素B脂质体体外抗真菌的实验研究

本实验室于 1999年 1月至 2月用美国国家临床试验标准化委员会 (NCCL S)方案对上海 4家医院提供的 91株致病真菌进行了两性霉素 B(c Am B)和两性霉素 B脂质体 (Am Bi-some)的体外药敏试验 ,现将结果报告如下。1　材料和方法1.1　实验菌株　长海医院提供 :新生隐球菌 3株 ;长征医院提供 :新生隐球菌 15株 ,白念珠菌 19株 ,黄曲霉 2株 ,烟曲霉 2株 ,青霉菌 2株 ,总状毛霉 1株 ;瑞金医院提供 :新生隐球菌 4株 ,白念珠菌 17株 ,热带念珠菌 8株 ,类星型念珠菌 2株 ,黑曲霉 1株 ,克柔念珠菌 2株 ,链互隔菌 2株 ,总状毛霉 1株 ,土生念珠菌 1株…     

两性霉素B脂质体对于白色念珠菌感染小鼠模型的治疗观察

【目的】尾静脉注射脂质体包囊两性霉素B(两性霉素B脂质体)和两性霉素B脱氧胆酸盐(两性霉素B)来评价对于暂时缺失免疫活性的小鼠白色念珠菌感染模型的疗效。【方法】给小鼠皮下注射环磷酰胺,制作小鼠暂时缺失免疫的模型。2 d后通过尾静脉给小鼠注射白色念珠菌。注射白色念珠菌4 h后,尾静脉注射抗真菌药。1 d后再次皮下注射环磷酰胺1次。记录27 d后小鼠的生存情况。【结果】高浓度两性霉素B脂质体(5mg/kg)与对照组相比明显延长白色念珠菌所感染小鼠的存活时间,在本试验中两性霉素B脂质体的耐受剂量明显高于两性霉素B(1 mg/kg)。【结论】在治疗白色念珠菌的机会感染中,高浓度两性霉素B脂质体的效果明显优于两性霉素B。     

大蒜素与两性霉素B体外联合应用抑制白色念珠菌菌丝形成的研究

目的  研究大蒜素与两性霉素B体外联合应用对白色念珠菌菌丝形成的抑制作用,并检测联合应用时细胞毒性的变化。方法  采用微量稀释法测定两类药物联合抗白色念珠菌的作用,采用FICI法对联用结果进行评价。用10％小牛血清RPMI 1640培养基诱导菌丝形成,检测大蒜素与两性霉素B联合应用对白色念珠菌芽管率和菌丝形成的影响。通过对细胞形态的观察及MTT法检测联合用药后对人宫颈上皮细胞H8毒性的变化。结果  两种药物联用对白色念珠菌表现为协同作用,大蒜素能够加强两性霉素B抑制菌丝形成的能力,联合用药后能够显著降低对H8细胞的毒性。结论  大蒜素能够提高两性霉素B抗白色念珠菌的作用,是临床上减少两性霉素B用量,减轻其副作用的最佳选择。     

携载两性霉素B的聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的制备及特性评价

目的:制备携载两性霉素B(AmB)的聚氰基丙烯酸正丁酯(PBCA)纳米粒,测定表征,并筛选制备工艺.方法:将抗真菌药物AmB以孵化法吸附在PBCA空白纳米粒上,制备两性霉素B-聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒(AmB-PBCA-NP),并以聚山梨酯-80进行表面修饰.检测所制备AmB-PBCA-NP溶液的D405值,利用AmB的标准方程计算AmB药物浓度并评价药物溶液的稳定性;Nano-S粒径测定仪测定粒径分布;将AmB-PBCA-NP胶体溶液离心后,取上清液测定浓度,按公式计算纳米粒的包封率及载药量等指标;进行体外释放实验;以不同处方条件下纳米粒的粒径、载药量和包封率为评价指标筛选优化的处方工艺.结果:制备的AmB-PBCA-NP外观呈圆或类圆形,平均粒径(69.01±28.56) nm,分散均匀;AmB标准品在1.12～5.60 μg/ml范围内的线性回归方程为:D405=0.163 4c 0.006 6,r=0.999 3,AmB-PBCA-NP的平均回收率为99.93%,其溶液在12 h内稳定性较好;体外释放实验表明24 h体外释放具有一定的缓释性;实验发现最优化的处方为稳定剂采用DextranT-70,且不加助溶剂脱氧胆酸钠,其包封率及载药量均比较高,分别为56.10%、82%.结论:该方法工艺简单易行,载药纳米粒性状符合药剂学要求.     

兔曲霉菌性角膜溃疡局部应用两性霉素B脂质体的研究

目的 探讨兔曲霉菌性角膜溃疡局部应用两性霉素B脂质体(Liposomal amphotericin B,LAmB)和两性霉素B(AmB)滴眼液后,角膜及房水中的药物代谢状况。方法 用105只新西兰白兔,随机分为5组,采用角膜“#”形划痕法制作兔实验性曲霉菌性角膜溃疡模型,分别应用0.5% LAmB、0.25% LAmB、0.5% AmB点眼,分别在用药后5 min、15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、8 h,共7个时点,抽取兔眼房水并取下角膜,用高效液相色谱检测(high performance liquid chromatography,HPLC)测定角膜及房水中两性霉素B的药物浓度。结果 三组滴眼液在7个时间点角膜中的药物浓度均能超过MIC₉₀;在房水检测中,0.5%AmB滴眼液组房水中的药物浓度超过MIC₉₀时段在用药30 min后至2 h之间,而0.5% LAmB,0.25% LAmB滴眼液组在用药15 min后房水中的药物浓度分别达到(10.57±0.042)μg/mL和(7.55±0.170)μg/mL,8 h后仍能维持在MIC₉₀以上,药物浓度分别为(5.344±0.3673)μg/mL和(4.382±0.3591)μg/mL。结论 LAmB滴眼液具有较好的缓释作用和生物利用度,药物浓度稳定,作用时间长,0.25%LAmB滴眼液是局部治疗曲霉菌性角膜溃疡的合适浓度。     

两性霉素B/聚乙二醇-聚谷氨酸苄酯纳米球溶血毒性的研究

目的:考察两性霉素B/聚乙二醇-聚谷氨酸(AmB/PEG-PBLG)纳米球是否能降低AmB的溶血毒性.方法:超微透析法制备AmB/PEG-PBLG纳米药球,用紫外分光光度法测定样品的溶血率.结果:AmB/PEG-PBLG纳米药球平均粒径142.1 nm,载药量27.55%;溶血率从低到高依次为:PEG-PBLG空白纳米球、脱氧胆酸钠、AmB/PEG-PBLG纳米药球、AmB注射液.结论:AmB/PEG-PBLG纳米药球能有效降低AmB的溶血毒性.     

两性霉素B与两性霉素B脂质体治疗真菌感染的疗效比较

目的观察两性霉素B与两性霉素B脂质体对恶性血液病患者侵袭性真菌感染的临床疗效及不良反应。方法回顾用两性霉素B与两性霉素B脂质体治疗恶性血液病合并侵袭性真菌感染病例。A组：（两性霉素B组20例）,B组（：两性霉素B脂质体组19例）。结果临床总有效率A组为75.0%,B组84.2%,;A组不良反应畏寒、寒战、发热,低血钾血症,消化道反应,肾功能损害,肝功损害及静脉炎的发生率分别为55.0%、45.0%、20.0%、15.0%、10.0%、10.0%;B组分别为5.2%、26.3%、10.5%、5.2%、5.2%、5.2%。结论两性霉素B脂质体较两性霉素B疗效略高,两性霉素B副作用较两性霉素B脂质体大,但两性霉素B价格便宜,是治疗侵袭性真菌感染比较安全有效、经济的选择。     

两性霉素B治疗侵袭性真菌感染的临床观察

目的观察两性霉素B治疗侵袭性真菌感染(invasive fungal infection,IFI)的临床疗效。方法应用两性霉素B冻干制剂治疗恶性血液病化疗或造血干细胞移植后患者5例,脑外科术后患者1例,急性坏死性胰腺炎术后患者1例,慢性乙型肝炎伴原发性腹膜炎患者1例,重型再障(SAA)患者1例。感染种类:毛霉菌2例,热带白色念珠菌1例。两性霉素B静脉滴注从0.25 mg/kg.d增至0.5 mg/kg.d。最大剂量不超过3 000 mg。结果5例治愈,1例死亡,1例复发,1例因经济困难放弃。结论两性霉素B治疗IFI疗效肯定,毒副作用不明显。     

In vitro activities of five antifungal agents against pathogenic Exophiala species

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅｓＴｏｅｘａｍｉｎｅｔｈｅｉｎｖｉｔｒｏａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｆｉｖｅａｎｔｉｆｕｎｇａｌａｇｅｎｔｓａｇａｉｎｓｔｃｏｍｍｏｎｐａｔｈｏｇｅｎｉｃＥｘｏｐｈｉａｌａｓｐｅｃｉｅｓ;ｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｍｉｎｉｍｕｍｉｎｈｉｂｉ...     

异源型药物对补体活性影响的评价及临床意义探讨

目的 补体活性测量被评价为药物一致性和药物免疫毒性的检测指标之一,因此,建立一个敏感、可靠、标准、快捷的药物理化性质与免疫补体激活CARPA的评价标准,用于界定药物对补体活化作用的影响。 方法 收集宜昌市中心人民医院中医免疫科和肾病综合科送检的健康者血清140例,加入免疫球蛋白Ig G和zymosan A刺激剂作为标准阳性对照,把经典途径的特异性因子C4d、C5a、SC5b-9和替代途径特异性因子Bb作为检测指标,建立药物对补体活性影响的体外评价标准,并确定为评价模型。应用该评价标准,以异源型的两性霉素B及注射用的伏立康唑为研究对象,对本药物免疫毒性、仿制与市售制剂药物一致性建立一个初步评价。 结果 Ambisome、ABCD组和d-AmB组处方中,Ambisome和d-AmB激活补体的能力较强,其中Ambisome能够同时激活CP和AP两种途径,而d-AmB仅能激活AP途径。测量到市售的RLD1、RLD2和RLD3两性霉素B脂质体制剂血清中SC5b-9的含量基本一致,均值为(22.16±0.63)μg/ml、而C5a的含量波动幅度较大,平均值为(571.32±106.12)ng/ml,自制的Test1和Test2两性霉素B脂质体制剂在血清中SC5b-9和C5a的含量与市售制剂的均值存在差异性。 结论 初步建立了异源型药物对免疫补体活性调控的体外评价标准。      

新型三氮唑类化合物的抗念珠菌属真菌的活性

目的：研究一类新型的三氮唑化合物对念珠菌属真菌的抗真菌活性。方法：采用体外抗真菌活性试验, 测定化合物的最低抑菌浓度(MIC),从而评价化合物的生物活性作用。结果：所有24个新的化合物对念珠菌属真菌均有不同的抑制作用,其中对白念珠菌的活性最好。化合物12对白念珠菌的活性最强,是标准对照品氟康唑的256倍。化合物17对耐氟康唑的白念珠菌的活性最强,是标准对照品氟康唑的16倍。结论：化合物12和17可以作为两个潜在的药物进一步进行研究。     

In vitro susceptibility testing of Aspergillus spp. against voriconazole, itraconazole, posaconazole, amphotericin B and caspofungin

Background During recent years, the incidence of serious infections caused by opportunistic fungi has increased dramatically due to alterations of the immune status of patients with hematological diseases, malignant tumors, transplantations and so forth. Unfortunately, the wide use of triazole antifungal agents to treat these infections has lead to the emergence of Aspergillus spp. resistant to triazoles. The present study was to assess the in vitro activities of five antifungal agents （voriconazole, itraconazole, posaconazole, amphotericin B and caspofungin） against different kinds of Aspergillus spp. that are commonly encountered in the clinical setting. Methods The agar-based Etest MIC method was employed. One hundred and seven strains of Aspergillus spp. （5 species） were collected and prepared according to Etest Technique Manuel. Etest MICs were determined with RPMI agar containing 2% glucose and were read after incubation for 48 hours at 35℃. MIC50, MIC90 and MIC range were acquired by Whonet 5.4 software. Results The MIC90 of caspofungin against A. fumigatus, A. flavus and A. nidulans was 0.094 μg/ml whereas the MIC90 against A. niger was 0.19μg/ml. For these four species, the MIC90 of caspofungin was the lowest among the five antifungal agents. For A. terrus, the MIC90 of posaconazole was the lowest. For A. fumigatus and A. flavus, the MIC90 in order of increasing was caspofungin, posaconazole, voriconazole, itraconazole, and amphotericin B. The MIC of amphotericin B against A. terrus was higher than 32 μg/ml in all 7 strains tested. Conclusions The in vitro antifungal susceptibility test shows the new drug caspofungin, which is a kind of echinocandins, has good activity against the five species of Aspergillus spp. and all the triazoles tested have better in vitro activity than traditional amphotericin B.     

二性霉素B及其脂质体在治疗侵袭性真菌感染中的地位和意义

目的:观察静脉用二性霉素B(AmB)及其脂质体(L-AmB)对侵袭性真菌感染(IF I)的临床疗效及安全性。方法:46例IF I的原发基础病包括血液病32例及非血液系统疾病14例。普通AmB用量为0.5~1.0 m g/(kg.d),L-AmB用量为0.5~2.0 m g/(kg.d),总剂量为215~2950m g,中位数455m g,疗程10~119d,中位数17d。并对进口AmB、L-AmB及国产AmB的抗真菌疗效和副作用进行了比较分析。结果:二性霉素B临床总有效率为73.9%,真菌清除率为71.0%。进口AmB、L-AmB及国产AmB的治疗有效率分别为76.5%、71.5%及73.3%。不良反应发生率中寒颤、发热19.6%,低血钾21.7%,肝、肾功能损害各为10.9%和15.2%。结论:早期诊断、早期治疗及经验性治疗是提高IF I患者生存率、降低死亡风险的关键。只要预防得当,合理用药,定期监测肝肾功能,二性霉素B仍是一相对较为安全有效的药物。     

雾化吸入两性霉素B对侵袭性肺曲霉病预防效果的Meta分析

目的采用Meta分析方法对现已发表的关于雾化吸入两性霉素B（AmB）预防侵袭性肺曲霉病（IPA）的文献进行综合分析,从动物实验和临床研究两个方面分别评价雾化吸入AmB对IPA的预防作用。方法检索MEDLINE生物医学数据库、科学引文索引（ISI）、医学文摘资料库（EMBASE）及万方数据库,检索发表于2011年3月以前关于雾化吸入AmB预防IPA的文献,由2名评价员分别筛选符合标准的文献,进行质量评价和数据提取。采用RevMan 4.22软件进行异质性分析,合并效应量的检验采用优势比（OR）及95%可信区间（95%CI）。结果共纳入符合标准的动物实验文献5篇,包括实验动物626只;临床研究文献6篇,包括1354例真菌感染高危病人。Meta分析结果显示感染前雾化吸入AmB的实验动物存活率高于安慰剂对照组（38.3%比9.7%,OR=13.93,95%CI 7.46～26.01,P〈0.000 01）。真菌感染高危人群中,预防性雾化吸入AmB的患者IPA发生率较安慰剂或空白对照组为低（2.6%比9.2%,OR=0.27,95%CI 0.16～0.46,P〈0.000 01）;雾化预防组与对照组患者IPA相关病死率及总死亡率差异无统计学意义（RR=0.65,95%CI 0.33～1.30,P=0.23;OR=1.17,95%CI 0.73～1.89,P=0.51）;雾化吸入AmB绝大部分不良反应程度轻微。结论预防性雾化吸入AmB能有效降低实验动物肺曲霉感染死亡率,对粒细胞缺乏等高危人群预防性雾化吸入AmB能有效降低IPA发生率,不良反应轻微,但未降低曲霉感染相关病死率及总死亡率。需要更多高质量大型临床研究进一步提供循证医学证据。     

外阴阴道假丝酵母菌病致病菌株调查及药敏分析

目的 探讨外阴阴道假丝酵母菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)致病菌株的分布和药敏.方法 采用法国CHROMagar显色培养基及梅里埃YBC酵母菌鉴定卡分离鉴定菌株,Rocso纸片扩散法进行药敏试验.结果 VVC致病菌株以白假丝酵母菌为主,占95.02%(191/201).致病菌株对酮康唑、制霉菌素、克霉唑、两性霉素B、氟康唑的敏感率较高,对咪康唑、益康唑、伊曲康唑的耐药率较高.结论 不同致病菌株对不同药物敏感性存在较大差异,临床上应重视假丝酵母菌的培养、鉴定和药敏试验,合理选用抗真菌药物.     

In vitro synergy and antagonism of antifungal agents against yeast-like fungi

Some antifungal agents have been tested qualitatively in various associations against species of Candida, Cryptococcus and Torulopsis. The method used was the channel test and the results are confirmed by comparison with the serial dilution test in agar. The antagonism in vitro with the combination of amphotericin B imidazole suggests that caution must be exercised before prescribing the antifungal drugs in combination for man. The frequent synergy of flucytosine with econazole is, however, encouraging because of the low toxicity of the 2 drugs. Under the limited conditions described, the combination of flucytosine and amphotericin B was not found synergistic but additive on the strains of C. albicans used in this study. This combination was found synergistic for a strain of C. parapsilosis and is useful for avoiding resistance to flucytosine.