苦杏仁苷对Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠关节滑膜ASIC3表达的影响

目的 类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)病程中由于炎症导致关节局部组织酸化,酸敏感离子通道(acid-sensitive ion channels,ASICs)表达与大鼠关节软骨的破坏密切相关。本研究从多途径观察苦杏仁苷对胶原诱导性关节炎(type Ⅱ collagen induced arthritis,CIA)大鼠关节滑膜的免疫应答调节,探讨苦杏仁苷抗RA的作用机制。 方法 选取45只Wistar雌性大鼠,随机抽取8只为空白对照组。35只造模成功的CIA大鼠又随机分为模型组5只,雷公藤多甙组(即阳性对照药组)、苦杏仁苷高剂量组、苦杏仁苷低剂量组各10只。空白对照组和CIA模型组予以0.9%生理盐水,雷公藤多甙组予以雷公藤多甙1 mg/(kg·d),苦杏仁苷高剂量组予以120 mg/(kg·d),苦杏仁苷低剂量组予以60 mg/(kg·d),1次/d连续灌胃给药28 d。经腹腔麻醉,股动脉采血,常规分离血清用于IL-1β、sICAM-1检测;分离左膝关节滑膜组织用40 g/L多聚甲醛固定作为HE染色标本;分离右膝关节滑膜组织-80℃中保存用于Western blot ASIC3蛋白检测。同时提取脑组织于-80℃中保存作为阳性对照。 结果 HE染色显示CIA模型组滑膜细胞排列疏散、紊乱、增生,大量的炎细胞浸润;苦杏仁苷高剂量组、低剂量组和雷公藤多甙组滑膜轻度增生,炎性细胞浸润明显减少,外周血中IL-1β、sICAM-1水平均有明显下降,滑膜中ASIC3蛋白表达也明显下降,与CIA模型组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);与空白组比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05)。 结论 苦杏仁苷能有效通过抑制CIA大鼠外周血中炎性细胞因子IL-1β、sICAM-1的表达水平,以及下调滑膜ASIC3蛋白的表达,干扰对关节滑膜的损伤,起到抗炎和免疫抑制作用,可能是苦杏仁苷的抗炎镇痛和保护软骨作用的机制之一。      

山茱萸总苷对关节炎大鼠原代滑膜细胞培养上清趋化能力的影响

探讨山茱萸总苷抗类风湿关节炎的作用机理.采用改良的Boyden小室前导法检测CⅡ诱导的关节炎大鼠山茱萸总苷治疗组和模型组的原代滑膜细胞培养上清对关节浸润炎性细胞如中性粒细胞、骨髓巨噬细胞和淋巴细胞趋化能力,结果以实验组穿膜细胞数减去对照组穿膜细胞数表示.结果发现:山茱萸总苷治疗组的原代滑膜细胞培养上清对上述三种炎性细胞的趋化能力(穿膜细胞数)均显著低于模型组(P＜0.01).说明山茱萸总苷抑制关节滑膜细胞对炎性细胞的趋化,减少炎性细胞向关节滑膜的浸润是其抗关节炎作用的机理之一.     

雷公藤多苷对胶原诱导性关节炎大鼠组织中血管内皮生长因子及血管内皮生长因子受体2mRNA表达水平的影响

目的雷公藤多苷联合其他药物治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的临床疗效已得到肯定,但其作用机制尚待进一步研究。文章探讨雷公藤多苷对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠关节肿胀和滑膜组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growthfactor receptor-2,VEGFR2)mRNA表达水平的影响。方法使用造模成功大鼠30只,并随机分为模型组、雷公藤多苷组,另设正常组。每隔1周计算其关节炎指数和关节肿胀度,并采用实时荧光定量PCR法检测大鼠滑膜组织中VEGF、VEGFR2mRNA的表达水平。结果经雷公藤多苷治疗后的模型大鼠的关节炎指数和关节肿胀度均显著下降(P<0.05),VEGFmRNA的表达低于模型组(P<0.05),VEGFR2 mRNA与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论雷公藤多苷能够改善CIA大鼠的关节肿胀情况,降低VEGF及VEGFR2的表达,为类风湿关节炎患者的临床治疗提供实验依据。     

ISL-β-CD对实验性类风湿性关节炎大鼠血清细胞因子及关节滑膜组织病理改变的影响

目的研究异甘草素-β-环糊精包合物(isoliquiritigenin-β-cyclodextrin,ISL-β-CD Complex)对Ⅱ型胶原蛋白诱导的类风湿性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型大鼠细胞因子水平及关节滑膜组织病理改变的影响。方法将四周龄雄性SD大鼠分为六组,空白对照组、模型对照组,雷公藤多苷片组(100mg·kg-1)和3个不同剂量的ISL-β-CD组(100、400、800mg·kg-1),除空白对照组,其余五组建立CIA模型,自加强免疫第2天灌胃给药4周,末次给药后取血,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子TNF-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-6、IL-10;取关节滑膜,观察关节滑膜病理改变情况。结果与模型对照组相比,ISL-β-CD各个剂量组均能降低大鼠关节肿胀(P<0.05),降低大鼠血清中促炎性细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6的含量(P<0.05),升高抑炎性细胞因子IL-4、IL-10的含量(P<0.05);ISL-β-CD高剂量组对IL-1β、IL-4水平的影响与阳性药物雷公藤多苷片相比差异无统计学意义(P>0.05)。形态学观察ISL-β-CD各个剂量组和雷公藤多苷片组对滑膜细胞增生有显著的抑制作用。结论 ISL-β-CD可通过上调IL-4、IL-10抑炎性细胞因子和下调IL-1β、TNF-α、IL-6促炎性细胞因子而发挥治疗类风湿性关节炎的作用。     

白芍总苷对兔佐剂性关节炎滑膜细胞增殖的影响

目的观察不同浓度的甲氨蝶呤(MTX)和白芍总苷(TGP)在体外实验中对类风湿关节炎滑膜细胞增殖的影响。方法利用弗氏完全佐剂制备兔佐剂性关节炎模型。利用MTT比色法测定不同浓度的甲氨蝶呤和白芍总苷单独或联合作用于滑膜细胞,对滑膜细胞增殖的影响。结果白芍总苷在0.8-25.6 mg/L浓度范围内抑制兔佐剂性关节炎滑膜细胞的增殖。随白芍总苷浓度的增高,抑制作用增强。各用药组与对照组相比,对滑膜细胞的增殖均具有显著的抑制作用。TGP组与MTX小剂量组或MTX大剂量组相比,抑制率均相近。结论白芍总苷在0.8-25.6 mg/L浓度范围内对兔佐剂性关节炎滑膜细胞的增殖具有抑制作用,并且呈浓度依赖性。在体外实验中,甲氨蝶呤和白芍总苷单独或联合作用均可显著抑制兔佐剂性关节炎滑膜细胞的增殖,这可能是甲氨蝶呤和白芍总苷发挥对类风湿关节炎治疗作用的重要机制之一。     

雷公藤多苷对Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎模型IL-1β和TNF-α的影响

目的探讨雷公藤多苷治疗类风湿关节炎的部分作用机制。方法采用Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎模型，对大鼠的关节肿胀指数、外周血IL-1β及TNF-α和关节滑膜的病理变化进行观察。结果雷公藤多苷能显著减轻大鼠关节肿胀指数、显著降低外周血IL-1β和TNF-α、减轻关节滑膜病理改变。结论雷公藤抑制IL-1β和TNF-α，是其治疗类风湿关节炎的作用机制之一。     

雷公藤多苷对小鼠减毒机制的探讨

目的初步探究有故无殒理论是否可以指导雷公藤多苷的临床治疗,从而为临床治疗提供实验依据。方法动物随机分为4组,即正常组、类风湿性关节炎组、雷公藤多苷组、类风湿性关节炎服用雷公藤多苷组,采用生物化学方法研究雷公藤多苷对正常小鼠和类风湿性关节炎小鼠ALT、AST、TP、T-Bi L、D-Bi L、ALB、GLB的影响,对比生化指标及肝组织HE切片。结果类风湿关节炎组小鼠具有肝损伤,雷公藤多苷组小鼠有轻微肝损伤,类风湿关节炎服用雷公藤多苷组小鼠有肝损伤,较未给药组小鼠情况良好。结论雷公藤多苷对正常小鼠有肝损伤,但对类风湿关节炎伴肝损伤小鼠用药时表现出保护和治疗作用,并不是进一步损伤,即雷公藤多苷对肝脏存在"有故无殒"现象。     

复方芪芎颗粒对关节炎大鼠的抗炎镇痛作用及机制研究

目的探究复方芪芎颗粒对佐剂型关节炎(AA)大鼠滑膜组织中TRAF-6、MyD88及SIGIRR蛋白表达及信号传导机制的影响。方法将雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、复方芪芎颗粒小剂量组、复方芪芎颗粒中剂量组、复方芪芎颗粒大剂量组、雷公藤组。除正常组外,其余大鼠给予弗氏完全佐剂标准注射建立AA模型。各给药组分别给予小、中、大剂量复方芪芎颗粒水溶液和雷公藤多苷片水溶液灌胃,正常组和模型组给以蒸馏水,给药(4周)前后观测各组大鼠一般情况及致炎侧后足直径变化、关节炎症指数评分(AI),检测大鼠滑膜组织中TRAF-6、MyD88、SIGIRR蛋白水平。结果与正常组比较,模型组致炎侧后足直径及其肿胀度均增加(P0.05),TRAF-6、MyD88蛋白表达均高于正常组(P0.05),SIGIRR蛋白表达低于正常组(P0.05);与模型组比较,复方芪芎颗粒中、大剂量组、雷公藤组各检测指标均有明显改善(P0.05,P0.01);与雷公藤组比较,复方芪芎颗粒大剂量组改善明显(P0.01)。结论复方芪芎颗粒抑制受累关节炎症浸润及减轻疼痛,其抑制异常激活TRAF-6、MyD88蛋白的表达与治疗类风湿性关节炎作用机制密切相关。     

痹痛灵颗粒对AIA大鼠滑膜细胞增殖和分泌功能的影响

目的 研究痹痛灵颗粒对佐剂性关节炎(AIA)大鼠滑膜细胞的作用及机制.方法 建立AIA大鼠模型,分离培养大鼠滑膜细胞,MTT法检测滑膜细胞的增殖能力,滑膜细胞培养上清液中IL-1活性的测定采用小鼠胸腺细胞增殖法.结果 痹痛灵能有效抑制AIA大鼠滑膜细胞过度的增殖反应和降低其IL-1,NO和NOS的水平.结论 痹痛灵对AIA大鼠功能亢进的滑膜细胞具有明显的抑制作用,其作用机制可能与其抑制滑膜细胞的过度增殖和分泌能力有关.     

纳米级炭黑颗粒通过激活NLRP3炎性小体诱导小鼠急性肺炎反应

目的：探讨NLRP3炎性小体在纳米级炭黑颗粒致急性肺炎中的作用。方法：采用动物全身动态暴露系统建立C57BL/6小鼠低剂量分别连续动态吸入纳米级炭黑颗粒3 d及7 d模型,利用ELISA法检测血清及肺泡灌洗液中白细胞介素?1β（interleukin?1β,IL?1β）含量,并收集小鼠全血,行血常规检查。小鼠处死后解剖,通过HE法检测小鼠肺组织病理损伤情况,通过免疫组织化学染色法检测小鼠肺组织NLRP3蛋白表达,之后利用NLRP3基因敲除小鼠做进一步验证。结果：HE染色结果表明,短期暴露于纳米级炭黑颗粒,小鼠出现急性肺部炎症,主要表现为肺泡间隔增宽、炎性细胞浸润,且暴露组与对照组相比病理评分差异具有统计学意义,免疫组化结果表明,暴露组NLRP3阳性细胞数明显多于对照组,暴露组肺泡灌洗液中IL?1β水平明显高于对照组。结论：NLRP3炎性小体的激活参与了纳米级炭黑颗粒短期暴露引起的小鼠急性肺炎。     

洛伐他汀对胶原诱导性关节炎大鼠的抗炎机制探讨

目的：观察洛伐他汀对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠的抗炎作用,并探讨可能的作用机制。方法：利用牛II型胶原建立Wistar大鼠CIA模型。结果：洛伐他汀组大鼠踝关节肿胀程度与CIA模型组相比有显著差异,关节炎评分与CIA模型组相比显著降低。洛伐他汀组血清中炎性细胞因子TNF-α的含量、踝关节滑膜组织中RANTES阳性细胞均显著低于CIA模型组。结论：洛伐他汀对CIA大鼠具有抗炎作用,其作用机制可能与抑制踝关节滑膜组织中RANTES的表达有关。     

苗药追风伞对CIA模型大鼠血清IL-1、IL-1β、TNF-α表达水平的影响

目的:探讨苗药追风伞对CIA模型大鼠炎症及血清IL-1、IL-1β、TNF-α表达水平的影响。方法:60只6周龄雌雄各半的Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、雷公藤多苷片组、追风伞高、中、低剂量组。除空白组外,其余各组建立CIA模型,造模第8天给予药物治疗,空白组和模型组灌服等量0.9%氯化钠注射液,治疗4周后处死大鼠取血清,采用ELISA检测血清IL-1、IL-1β、TNF-α。结果:给药4周后,追风伞各治疗组及雷公藤多苷片组CIA大鼠血清中IL-1、IL-1β、TNF-α均低于模型组(P0.01)。追风伞各治疗组对大鼠血清IL-1、IL-1β、TNF-α的抑制作用随药物剂量的递增而增强,差异有统计学意义(P0.01或P0.05)。从滑膜和关节软骨病理损伤程度可见,雷公藤组及追风伞用药各组与模型组对比损伤程度更轻,其中以雷公藤组和追风伞高剂量组较为明显。结论:苗药追风伞能降低CIA模型大鼠血清IL-1、IL-1β、TNF-α的表达水平,这可能是苗药追风伞治疗类风湿的机制之一。     

制马钱子对佐剂性关节炎大鼠抗炎作用的实验研究

目的：观察制马钱子对大鼠佐剂性关节炎的影响,并探讨其作用机制。方法：48只SD大鼠随机平均分为正常组、模型组、雷公藤多苷片对照组、制马钱子低剂量组、制马钱子中剂量组、制马钱子高剂量组,分别于第1天、第4天、第8天、第15天、第21天、第29天测量大鼠双后足体积,计算肿胀度,观察大鼠一般情况,实验结束测血清NO、NOS含量。结果：制马钱子能有效抑制大鼠后足肿胀度（ P<0.05）。雷公藤多苷片组、制马钱子中剂量组、制马钱子高剂量组大鼠血清NO含量均低于模型组,差异具有统计学意义（ P<0.05）。雷公藤多苷片组、制马钱子中剂量组、制马钱子高剂量组大鼠血清NO含量均低于马钱子低剂量组,差异具有统计学意义（ P<0.05）。雷公藤多苷片组、制马钱子各剂量组大鼠血清NOS含量均低于模型组,差异具有统计学意义（ P<0.05）。结论：制马钱子可抑制类风湿关节炎炎症发展,可能与调节NO、NOS有关。     

雷公藤甲素对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞系MH7A中VEGF?MMP-9水平变化的影响

目的:研究雷公藤甲素对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞系MH7A培养上清液中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平变化的影响.方法:肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激RA滑膜成纤维细胞系MH7A后,以不同剂量TP干预,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液上清中VEGF、MMP-9水平的变化.结果:TNF-α刺激后,细胞培养上清液中VEGF及MMP-9分泌不同程度增加.TP各剂量组(1、5、25、75 μg/ml)在不同时间点(24、48、72 h)均可以明显下调培养上清液中MMP-9和VEGF的水平,与地塞米松对照组比有显著差异.结论:雷公藤甲素能抑制血管新生有关细胞因子VEGF、MMP-9的表达.     

雷公藤甲素脂质体透皮制剂对II型胶原诱发的关节炎的影响

目的 观察雷公藤甲素脂质体透皮制剂对II型胶原诱发的关节炎（CIA）的影响及不良反应。方法 制备CIA小鼠模型。造模后小鼠随机分为模型组、雷公藤片剂对照组、雷公藤甲素脂质体透皮制剂（简称透皮制剂）高、中、低剂量（200、100、50 mg/kg）组。免疫组化法计数滑膜血管翳数目;检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）和尿素氮（BUN）水平;观察小鼠心、肝、肾、胃病理组织学改变。结果 与模型组比较,透皮制剂高剂量组和雷公藤片剂组滑膜增生血管翳数量显著减少（P＜0.01）。与模型组比较,雷公藤片剂组小鼠血清ALT和BUN水平显著升高（P＜0.01）;透皮制剂高、中、低剂量组小鼠血清ALT和BUN水平较雷公藤片剂组显著降低（P＜0.01）。雷公藤片剂组小鼠显示明显的心、肝、肾、胃细胞及组织损伤;透皮制剂高剂量组小鼠心、肝、肾、胃均未发现明显的病理改变。结论 雷公藤甲素脂质体透皮制剂高剂量和雷公藤片剂均具有抗CIA的作用;雷公藤甲素脂质体透皮制剂具有较高的生物活性,与口服给药的作用相当,且明显减少大剂量口服给药所产生的不良反应。     

雷公藤多甙对滑膜细胞趋化因子RANTES、MCP-1影响的研究

目的 研究雷公藤多甙对类风湿关节炎滑膜产生趋化因子RANTES、MCP-1的影响.方法 取经雷公藤多甙、MTX治疗后的CIA大鼠关节滑膜组织,提取总RNA,用RT-PCR法测定其中RANTESmRNA、MCP-1mRNA水平.结果 雷公藤多甙能抑制滑膜组织中趋化因子MCP-1mRNA、RANTESmRNA的表达,MTX对MCP-1mRNA、RANTESmRNA的影响作用不明显.结论 雷公藤多甙可抑制类风关滑膜趋化因子RANTES、MCP-1产生.     

穿山龙总皂苷对胶原诱导性关节炎大鼠关节滑膜组织NF-κB p65活性及STAT3表达的影响

目的 通过观察穿山龙总皂苷对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠滑膜组织核转录因子κB (NF-κB)及信号转导子和转录激活因子3(STAT3)表达的影响,探讨穿山龙总皂苷抑制类风湿性关节炎血管新生可能的信号转导通路作用机制.方法 将造模成功的60只CIA大鼠随机分为CIA模型组、雷公藤组(阳性对照组)、穿山龙总皂苷组、薯蓣皂苷元组、穿山龙水溶性皂苷片组,另设正常对照组,每组12只.造模成功后分别给予相应的药物灌胃,连续治疗35 d.应用TransAMTM NF-κB p65活性检测试剂盒检测滑膜组织中NF-κB p65的DNA结合活性.应用免疫组织化学染色的方法观察滑膜组织中STAT3蛋白的表达.结果 与正常对照组相比,CIA模型组大鼠滑膜细胞核蛋白提取物中NF-κB p65的DNA结合活性和滑膜组织中STAT3蛋白的表达显著增高,有统计学意义(P＜0.01);与CIA模型组相比,穿山龙总皂苷组、雷公藤组、薯蓣皂苷元组、穿山龙水溶性皂苷片组的NF-κB p65的DNA结合活性和STAT3蛋白的表达均显著降低,有统计学意义(P＜0.01);各治疗组之间两两比较均无统计学意义(P＞0.05).结论 穿山龙总皂苷可能通过抑制NF-κB信号转导通路中NF-κB p65的活性和JAK-STAT信号转导通路中重要底物STAT3蛋白的表达,起到抑制类风湿性关节炎血管新生的作用.     

雷公藤多甙对滑膜细胞趋化因子RANTES、MCP-1影响的研究

目的研究雷公藤多甙对类风湿关节炎滑膜产生趋化因子RANTES、MCP-1的影响。方法取经雷公藤多甙、MTX治疗后的CIA大鼠关节滑膜组织,提取总RNA,用RT-PCR法测定其中RANTESmRNA、MCP-1mRNA水平。结果雷公藤多甙能抑制滑膜组织中趋化因子MCP-1mRNA、RANTESmRNA的表达,MTX对MCP-1mRNA、RANTESmRNA的影响作用不明显。结论雷公藤多甙可抑制类风关滑膜趋化因子RANTES、MCP-1产生。     

复方竹节参片对佐剂性关节炎小鼠的抗炎作用

目的：探讨复方竹节参片治疗实验性关节炎的效果与作用机制。方法：建立弗氏完全佐剂诱导小鼠关节炎病理模型,以复方竹节参片为实验组,雷公藤多苷片为对照组,通过测定右后足肿胀、耳肿胀、血清细胞因子进行效果对比。结果：复方竹节参片能明显抑制弗氏完全佐剂性关节炎小鼠关节肿胀及病理学改变,降低关节炎指数,降低关节炎病理模型小鼠血清中异常增高的白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）和肿瘤坏死因子（TNF）水平优于雷公藤多苷片组（P〈0.05）。结论：复方竹节参片能显著抑制促炎细胞因子的病理性升高,有效抑制小鼠关节炎病情进展。     

清热化瘀凝胶对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠炎症细胞因子表达的影响

目的通过观察清热化瘀凝胶对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠滑膜及血清细胞因子表达的影响,探讨清热化瘀凝胶外敷治疗类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)的相关作用机制。方法 50只SD雌性大鼠随机分为清热化瘀凝胶外敷组、雷公藤多苷片口服组、扶他林外敷组、模型组和正常组,每组10只。观察大鼠关节肿胀度,关节病理切片,肝脏、肾脏组织病理切片,采用ELISA法检测血清及滑膜组织中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素1(Ang-1)和白介素1β(IL-1β)表达差异。结果清热化瘀凝胶外敷组CIA大鼠关节肿胀程度明显减轻;与模型组比较,清热化瘀凝胶组显著降低CIA大鼠血清中IL-1β(P 0. 01)、TNF-α(P 0. 001)和Ang-1(P 0. 01)的水平;滑膜组织中IL-1β(P 0. 001)、TNF-α(P 0. 01)、VEGF(P 0. 01)及Ang-1(P 0. 001)较模型组显著下降;关节病理切片显示清热化瘀凝胶可减少炎症细胞浸润、抑制滑膜组织增殖、延缓骨质破坏;肝脏、肾脏病理切片与正常组比较无异常变化。结论清热化瘀凝胶通过降低RA炎症细胞因子水平,抑制滑膜组织增殖,减少滑膜中血管新生和血管翳形成,进而控制RA病情,且安全性良好。