小鼠利血平法脾虚证模型的建立

目的:建立小鼠脾虚证模型,研究小鼠脾虚证的机制。方法:采用利血平单因素造模法建立脾虚证小鼠动物模型,观察各组小鼠一般情况、体重和饮食量的改变,采用比色分析法及ELISA法分别测定各组小鼠血清D-木糖及胃泌素的含量。结果:模型组小鼠体重、饮食量、饮水量均明显低于正常对照组;与正常对照组比较,模型组小鼠血清D-木糖及胃泌素含量显著降低。结论:采用利血平单因素造模方法制作脾虚模型方法成熟可靠。     

石榴皮水煎液对脾虚泄泻模型小鼠免疫功能的影响

目的:通过检测脾虚泄泻证模型小鼠血清中T淋巴细胞计数等指标,探讨石榴皮水煎浓缩液对脾虚泄泻证模型小鼠免疫功能的影响。方法:采用苦寒药物灌胃致小鼠脾虚泄泻模型,以石榴皮水煎浓缩液治疗,同时设立对照组(思密达,即蒙脱石散剂灌胃),分别测定免疫脏器指数、腹腔吞噬细胞百分率及吞噬指数,木糖排泄率、淀粉酶活力单位、血红蛋白等指标。结果:造模小鼠体温、饮食量、饮水量、尿量、体重、二便、精神状态出现变化,符合脾虚泄泻证的特点,肠粘膜也出现相应病理变化,经石榴皮浓缩液治疗有效,客观指标变化明显。结论:石榴皮浓缩液具有明显健脾止泻、提高免疫力的药理作用,能有效治疗脾虚泄泻证所见相关表现。     

四种脾虚证造模方法的差异性研究

目的:探讨D-木糖吸收值及外周血T淋巴细胞百分率在四种脾虚模型中的变化规律.方法:采用耗气破气法、耗气破气加饥饱失常法、劳倦加饥饱失常法及劳倦加饮食失节法塑造脾虚证动物模型.用间苯三酚法检测不同模型大鼠D-木糖吸收值的变化;用ANAE法检测不同模型大鼠外周血T淋巴细胞百分率的变化.结果:四组模型在D-木糖吸收值及外周血T淋巴细胞百分率等项指标上存在着明显差异.结论:在脾虚证中,D-木糖吸收值存在升高的情况;外周血T淋巴细胞百分率在耗气破气法中降低最明显.     

补中益气丸对脾虚证小鼠免疫功能 的影响

用苦寒泻下药大黄复制小鼠“脾虚证”模型,研究补中益气丸对脾虚证小鼠免疫功能的影响。结果表明,补中益气丸能提高脾虚证小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数、外周血ANAE阳性淋巴细胞百分率及血清IgG抗体水平。     

强肌健力口服液对脾虚小鼠脾脏超微结构的保护作用

目的：观察强肌健力口服液对实验性脾虚证小鼠脾脏超微结构的影响．方法：将小鼠分为正常对照组、脾虚模型组、强肌健力口服液组和四君子汤组，比较各组脾脏的脾小体中淋巴细胞的变化。结果：正常对照组脾小体中淋巴细胞超微结构正常；脾虚模型组脾小体中淋巴细胞有明显的破坏现象；强肌健力口服液组及四君子汤组脾小体中淋巴细胞的超微结构接近正常组。结论：强肌健力口服液对脾虚小鼠受损的脾脏的超微结构具有保护作用。     

小建中汤有无饴糖对实验性小鼠脾虚模型的作用研究

目的:研究小建中汤有无饴糖对实验性小鼠脾虚证模型影响的差别.方法:以番泻叶脾虚证小鼠为实验对象,观察小建中汤有无饴糖对实验性脾虚小鼠的一般症状及粪便、体重变化、胃残留率、小肠推进率、脾及胸腺指数、肠组织形态变化.结果:小建中汤有无饴糖均能明显改善脾虚证小鼠的一般症状,增加小鼠的体重,促进胃排空及小肠推进运动,增加脾及胸腺指数,改善空肠组织形态.结论:小建中汤饴糖有无对实验性脾虚证模型未见显著差异.     

蛋白酪氨激酶与中医脾虚证研究

蛋白酪氨酸激酶(PTK)是一组能催化底物蛋白酪氨酸残基磷酸化的酶蛋白,依其基本特点分为受体型和非受体型两类。近年来国外研究发现它们在细胞信号传导中发挥作用。其中优先表达于淋巴细胞中的非受体型PTK通过介导分别经TCR和BCR的淋巴细胞激活途径,对于淋巴细胞的活化增殖及免疫应答均具有关键性作用。为探讨脾虚证免疫功能紊乱的分子免疫学基础,我们在建立了PTK活性的EL ISA检     

隐孔菌发酵物对脾虚证哮喘小鼠气道高反应性及炎症的影响

目的建立脾虚证哮喘小鼠模型,观察隐孔菌发酵物(CVFS)对脾虚证哮喘小鼠气道高反应性及炎症的影响。方法以卵白蛋白(OVA)致敏 饮食不节 劳倦过度伤脾法建立脾虚证哮喘小鼠模型;测定小鼠的肺阻力(RL)和支气管-肺泡灌洗液(BALF)中的炎症细胞,观察肺组织和免疫器官脾脏的病理变化。结果脾虚证哮喘小鼠的气道高反应性、BALF中的嗜酸性粒细胞数目,肺组织嗜酸性粒细胞炎性病理变化以及脾脏指数与单纯哮喘小鼠比较有明显差异(P<0.05)。CVFS能明显改善单纯哮喘小鼠和脾虚证哮喘小鼠由乙酰甲胆碱(MCH)诱导的气道高反应性,减少BALF中的嗜酸性粒细胞数目,以及改善肺组织嗜酸性粒细胞炎性病理变化,而对脾虚证哮喘小鼠作用更为明显。CVFS能明显增加脾虚证哮喘小鼠脾脏指数,而对单纯哮喘小鼠的脾脏指数无明显影响。结论OVA致敏 饮食不节 劳倦过度伤脾法可建立脾虚证哮喘小鼠模型;CVFS可明显改善脾虚症状,抑制脾虚证哮喘小鼠的气道高反应性和炎症反应,提示CVFS可用于临床脾虚证哮喘的治疗。     

健脾除湿汤对脾虚证小鼠变应性接触性皮炎作用的实验研究

目的:探讨脾虚证小鼠变应性接触性皮炎(ACD)反应及健脾除湿汤的作用。方法:脾虚证小鼠及正常小鼠分别服用健脾除湿汤煎剂、生理盐水和氢化可的松后诱发 ACD。结果:脾虚证小鼠 ACD 反应低于正常小鼠,健脾除湿汤煎剂对脾虚证小鼠 ACD 反应有抑制作用。结论:脾虚证小鼠 ACD 反应显著低于正常鼠。健脾除湿汤对脾虚证皮炎、湿疹有治疗作用。     

外湿对造模脾虚小鼠免疫学影响的实验研究

目的:探讨外湿对脾虚造模小鼠免疫学的影响,兼论脾虚生湿与外湿的关系。方法:劳倦过度加饮食失节法制造脾虚小鼠模型,增加环境湿度法制造外湿小鼠模型。造模成功后取小鼠脾脏和血液检测免疫学指标。结果:模型小鼠均出现了淋巴细胞转化率、CD_4、IgG、IgM的下降,CD_8的升高;并且改变程度D组>B组>C组。结论:脾虚湿盛、外湿和脾虚加外湿三组模型小鼠免疫功能均降低,外湿加脾虚湿盛对免疫功能的影响大于单纯外湿或单纯脾虚湿盛对免疫功能的影响。     

芪竹方对人脐静脉内皮细胞的PTK和P-STAT3异常表达的影响

目的:了解芪竹方对细胞的毒作用,了解芪竹方对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)刺激增殖后的细胞内蛋白酪氨酸激酶(PTK)活性和P-STAT3表达的影响。方法:建立对比模型组,用CCK-8法检测芪竹方对HUVEC增殖的影响,用ELISA法定量测定细胞中PTK含量,用Western Blot法测定细胞P-STAT3表达。结果:芪竹方对HUVEC正常增殖无影响;HUVEC被酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)刺激后,空白组PTK和P-STAT3表达异常,芪竹方组对PTK表达有抑制作用,抑制率达65%,同时对P-STAT3表达有抑制,高浓度的芪竹方组作用与阳性药相当。结论:芪竹方对细胞无毒作用,对细胞的PTK和P-STAT3的异常表达有抑制作用。     

白附子对人T细胞和单核细胞的调节活性

目的：研究中药白附子的免疫学调节活性。方法：用^3H介入法测定了中药白附子提取物（Rhizoma typhonii extract,RTE)对小鼠脾细胞和人淋巴细胞的增殖活性；用绵羊红细胞花结形成试验分离纯化淋巴细胞后，检测了RTE的效应细胞；用^51Cr游离实验测定了人杀伤细胞和自然杀伤细胞的杀伤活性，用ELISA法和生物法研究了单核细胞的细胞因子产生，并用^3H介入法分析了单核细胞对肿瘤细胞的吞噬功能；用层析法分析了白附子的化学成分，并用SDS－PAGE法测定了其有效成分的分子量。结果：RTE对小鼠脾细胞和人淋巴细胞的增殖活性有很强的促进作用，并有较好的量效关系；RTE的效应细胞是T细胞；RTE增强人杀伤细胞对肿瘤细胞的特异性杀伤活性和自然杀伤细胞的非特异性杀伤活性、增强单核细胞的细胞因子（肿瘤坏死因子和白细胞介素1）产生，并增强单核细胞对肿瘤细胞的吞噬功能。白附子的化学成分为66道尔顿的糖蛋白。结论：RTE对人的T细胞和单核细胞有免疫增强作用，并通过刺激机体的免疫系统杀伤或吞噬肿瘤细胞和外来抗原，这些活性可应用于临床调节免疫功能和治疗肿瘤等疾病。     

排毒增益汤对弓形虫感染雄鼠非特异免疫和体液免疫功能的变化的影响

目的:观察排毒增益汤对弓形虫感染雄鼠非特异免疫和体液免疫功能的影响,并探讨其作用机制。方法:采用AH株弓形虫包囊感染8W龄雄鼠造模,设立正常对照组、模型组、乙胺嘧啶阳性药物组、排毒增益汤大、中、小剂量组。分别用MTT法和间接ELISA法测定脾NK细胞杀伤率、B淋巴细胞转化率及IgG抗体和亚类含量。结果:排毒增益汤各剂量组脾NK细胞杀伤率、B淋巴细胞转化率及IgG抗体和亚类含量均高于模型组(P<0.05)。结论:排毒增益汤具有提高弓形虫感染雄鼠非特异免疫和体液免疫功能的作用。     

白花蛇舌草的免疫学调节活性和抗肿瘤活性

目的：研究白花蛇舌草的免疫学调节活性和抗肿瘤活性。方法：用^3H介入法分析了白花蛇舌草提取物（Oldenlandia diffusa extract,ODE）对小鼠脾细胞的增殖活性；用^51Cr游离实验测定了小鼠和人杀伤细胞对肿瘤细胞的特异性杀伤活性，用ELISA法和生物法研究了B细胞抗体的以及单核细胞的细胞因子产生，并用^3H介入法分析了单核细胞对肿瘤细胞的吞噬功能；用层析法、蛋白酶消化法和糖分解处理（即NaIO4处理）分析了白花舌草的化学成分。结果：ODE对小鼠脾细胞的增殖活性有很强的促进作用；ODE增强小鼠和人杀伤细胞对肿瘤细胞的特异性杀伤活性，增强B细胞抗体的产生以及单核细胞的细胞因子产生，并增强单核细胞对肿瘤细胞的吞噬功能，白花蛇舌草的化学成分为90道尔顿的糖蛋白。结论：ODE对小鼠的人有免疫调节作用，并通过刺激机体的免疫系统杀伤或蚕噬肿瘤细胞，这些活性可应用于临床调节免疫功能和治疗肿瘤等疾病。     

古尼拟青霉胞外多糖的免疫抑制活性

目的:研究古尼拟青霉胞外多糖的生物活性.方法:分别采用MTT法、中性红比色法测定古尼拟青霉胞外多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞(PMΦ)吞噬功能以及细胞毒T淋巴细胞(CTL)的杀伤活性的影响.结果:古尼拟青霉胞外多糖在10 μg/ml剂量时能明显抑制小鼠脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞吞噬功能以及细胞毒T淋巴细胞的活性.结论:古尼拟青霉胞外多糖具有免疫抑制的生物活性,在免疫抑制类药物开发方面展现了良好的应用前景.     

何首乌蒽醌苷对小鼠细胞免疫功能的影响

目的:研究何首乌蒽醌苷(AGPMT)体外对小鼠细胞免疫功能的影响。方法:将小鼠淋巴细胞或巨噬细胞与不同浓度的AGPMT共培养,用XTT法测T、B淋巴细胞的增殖能力、对MLR的影响及对MitC所致淋巴细胞增殖抑制的拮抗作用;用中性红染色法观察AGPMT对巨噬细胞吞噬功能、NK细胞活性、小鼠脾细胞分泌TNF活性的影响。结果:AGPMT在体外可明显促进小鼠T、B淋巴细胞的增殖,增强巨噬细胞吞噬中性红的能力,提高NK细胞活性及分泌TNF活性,并可促进MLR,拮抗MitC所致淋巴细胞增殖的抑制作用。结论:AGPMT具有免疫增强作用。     

补肾活血方对原发性免疫性血小板减少症小鼠肠道免疫及淋巴细胞周期的影响

目的:通过研究补肾活血方对原发性免疫性血小板减少症(ITP)模型小鼠免疫系统的影响,探讨补肾活血方治疗ITP的效果及作用机制。方法:建立ITP小鼠模型,ELISA法检测小鼠肠黏液中免疫球蛋白的含量及小鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞P53蛋白表达的变化;流式细胞仪检测小鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞周期及淋巴细胞凋亡率的变化。结果:补肾活血方能够显著下调小鼠肠黏液中免疫球蛋白含量(P<0.05);下调P53蛋白表达,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01);显著升高G0/G1期淋巴细胞比例(P<0.05),降低S期淋巴细胞比例(P<0.05),降低淋巴细胞凋亡率(P<0.05),对淋巴细胞周期异常分布及异常凋亡有一定的改善作用。结论:补肾活血方对ITP小鼠有明显的治疗作用,其作用机制主要表现为下调ITP小鼠IgG、SIgA含量及淋巴细胞P53蛋白表达、改善ITP小鼠淋巴细胞周期异常分布、降低淋巴细胞凋亡率等,其具体机制有待进一步的研究探索。     

益肺抗瘤饮对肺癌转移及免疫功能的影响

目的：探讨益肺抗瘤饮对肺癌转移的换制作用及其对免疫功能的影响。方法：（１）观察３组（９４例）肺癌患者远处转移灶，用放射免疫测定法测定患者的ＮＫ细胞、ＯＫＴ３、ＯＫＴ４、ＯＫＴ８值，并分比较分析；（２）运用Ｃ５７小鼠Ｂ１６黑素瘤模型观察益肺抗瘤饮对肺转移灶数的影响，并用免疫组织化学法观察转移灶周围Ｔ４、Ｔ８淋巴细胞的改变。结果：益肺抗瘤饮具有降低肺癌患者远处转移和减少Ｂ１６黑色素瘤肺转移的作用，而且     

含红芪与含黄芪玉屏风散含药血清对老龄小鼠脾淋巴细胞增殖和抗衰老作用的比较研究

目的:运用中药血清药理学方法,比较含红芪与含黄芪玉屏风散含药血清对老龄小鼠脾淋巴细胞增殖和抗衰老的影响。方法:用相同剂量的红芪替换玉屏风散中的黄芪后,观察两方高、中、低剂量对老龄小鼠脾脏、胸腺指数和脾淋巴细胞增殖能力的影响,确定最佳剂量;采用MTT法确定最佳剂量含药血清对老龄小鼠脾淋巴细胞刺激增殖作用的最佳稀释浓度和作用时间;用最佳稀释浓度的含药血清与老龄小鼠脾淋巴细胞作用最佳时间后观察衰老细胞的阳性率,检测细胞内总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)含量的变化。结果:与空白组比较,各剂量组均能提高脾脏、胸腺脏器指数和脾淋巴细胞增殖能力,以中剂量(0.4ml/20g)效果最佳。MTT结果表明不同稀释浓度的中等剂量含药血清均可促进体外培养的老龄小鼠脾淋巴细胞增殖,并表现出一定的时-效和量-效关系,以终浓度为20%的含药血清培养72h刺激增殖效果最佳,且红芪玉屏风散优于黄芪玉屏风散;β-半乳糖苷酶染色结果表明含药血清作用于老龄小鼠脾淋巴细胞后,衰老细胞减少,且红芪玉屏风散效果优于黄芪玉屏风散;红芪和黄芪玉屏风散含药血清均能调节老龄小鼠脾淋巴细胞超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)活性和细胞内活性氧(ROS)水平,且红芪玉屏风散提高T-SOD活性作用较黄芪玉屏风散好,其余二者无显著差异。结论:红芪玉屏风散与黄芪玉屏风散在抗衰老方面有相似作用,且在增强脾细胞增殖能力、提高T-SOD活性,降低衰老细胞数方面优于黄芪玉屏风散。     

超声波对古尼虫草菌丝体多糖免疫调节活性的影响

目的:研究古尼虫草菌丝体多糖经超声波解聚前后的免疫调节活性.疗法:用超声波解聚古尼虫草菌丝体多糖,并分别采用MTT法、中性红比色法测定古尼虫草菌丝体多糖及其解聚物对小鼠脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞(PMφ)吞噬功能以及细胞毒T淋巴细胞(CTL)杀伤活性的影响.结果:解聚后的古尼虫草菌丝体多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖、PMφ吞噬功能以及CTL活性的免疫抑制效果明显增强,尤其在10μg/ml和100μg/ml剂量时的抑制效果更好.古尼虫草菌丝体多糖并不随超声波解聚时间的延长而提高其免疫抑制活性,解聚1～2h和4～8 h的抑制效果没有显著的差异.结论:古尼虫草菌丝体多糖经超声波解聚后有更强的免疫调节活性,其解聚时间以1～2 h为宜.