ELISA、MEIA和WB检测TORCH—IgM和IgG抗体的效果

目的探讨三种方法对TORCH—IgM、IgG抗体检测结果的相关性,评价免疫印迹法在临床上检测TORCH—IgM、IgG抗体的应用价值。方法应用酶联免疫法（ELISA）、微粒子酶免疫法（MEIA）和免疫印迹法（WB）对196份临床孕妇筛查样本进行TORCH—IgM、IgG抗体检测,分析各种方法的抗体检出率和总符合率。结果ELISA、MEIA和wB检测TORCH—IgG抗体符合率分别为抗HSVl／2IgG为90％,抗CMVIgG为91％,抗RvIgG为84％,抗ToxIgG为98％。检测TORCH—IgM抗体符合率分别为抗HSV1／2IgM为87％,抗CMVIgM为89％,抗RvIgM为85％,抗ToxIgM为94％。结论WB检测临床标本TORCH—IgM、IgG抗体结果与ELISA、MEIA法所获得的结果具有较高的符合率,其灵敏度高、特异强为临床检测TORCH—IgM、IgG抗体提供了新的检测手段。     

免疫印迹法在临床TORCH项目检测应用价值评价

要：目的比较酶联免疫法（ELISA）与免疫印迹法（Lineblot）对临床TORCH标本检测结果的相关性，为临床应用免疫印迹法检测TORCH标本提供实验数据和工作基础。方法收集来自于我院临床各科室的TORCH标本，同时应用ELISA和免疫印迹法对上述标本进行TORCH项目IgM和IgG抗体检测。比较和分析两种不同实验方法所获得的检测结果，探讨免疫印迹法在临床TORCH项目检测领域的应用价值。结果在临床TORCH标本检测时，两种实验方法显示：①IgG抗体检测结果符合率分别为：抗HSV1／2抗体，符合率90％；抗CMV抗体，符合率94％；抗Rv抗体，符合率84％；抗Tox抗体，符合率98％。②IgG抗体检测结果符合率分别为：抗HSV1／2抗体，符合率89％；抗CMV抗体，符合率90％；抗Rv抗体，符合率84％；抗Tox抗体，符合率87％。结论应用免疫印迹法进行TORCH临床标本检测的结果与通过酶联免疫法所获得的结果具有较高的符合率；而且由于免疫印迹法具备在一次温育反应后获得五种TORCH病原体可靠和完整的血清学数据，实验结果可实现数字化判读等优点，因此在TORCH项目临床检验实践中具有良好的应用前景。     

不明原因发热病人血清中2型登革病毒特异性抗体的检测

目的：了解贵州省夏秋季不明原因发热病人中2型登革病毒的感染情况。方法：收集贵州省不同地区2002和2003年夏秋季不明原因发热病人血清364份，用间接酶联免疫吸附测定（ELISA）检测抗2型登革病毒特异性IgM，IgG类抗体。结果：病人血清抗2型登革病毒特异性IgG类抗体平均阳性率为12．6％，特异性IgM类抗体平均阳性率为18．4％，特异性IgG，IgM类抗体均阳性为4．7％。42份病人双份血清中，抗2型登革病毒特异性IgG类抗体效价增高4倍或以上为13份（31％）；结论：贵州省夏秋季发热病人部分为2型登革病毒感染。     

斑点免疫金渗滤试验同步检测血清中抗登革病毒IgM和IgG抗体

建立用斑点免疫金渗滤试验同步检测血清中抗登革病毒ＩｇＭ和ＩｇＧ抗体的方法，与ＭａｃＥＬＩＳＡ比较抗登革病毒ＩｇＭ抗体检测符合率为９３．８％，与ＤＩＢＡ比较抗登革病毒ＩｇＧ抗体检测符合率为９４．７％。本法简便、快速，适于在各级实验室推广应用。     

建立甲型肝炎病毒IgM抗体的斑点免疫渗滤试验检测方法

目的：建立斑点免疫渗滤试验检测甲型肝炎病毒IgM抗体的实验方法．方法：用抗人IgMμ链包被硝酸纤维素膜，捕获血清中的IgM抗体，以甲肝抗原为桥，连接胶体金标记的抗HAV IgG，阳性反应有红色斑点出现．并通过比较不同试剂用量条件下的检测结果的符合率确定试剂最佳用量．结果：与国际公认的金标准相比，本检测方法的灵敏度为93．5％，特异度为98．0％，符合率为95．8％．结论：本检测方法较灵敏特异，成本低廉，较适合于筛检和流行病学调查．     

登革热疫点22年后的血清流行病学调查

目的了解曾发生登革热流行的旧疫区健康人群抗登革病毒的抗体水平及分布。方法在1986年曾爆发Ⅱ型登革热疫情的黄埔区鱼珠街一带,对2周内无临床症状的健康人群横断面采样,收集血清,ELISA法检测血清中抗登革病毒IgG抗体,并和非疫点健康人群抗登革病毒IgG抗体阳性率进行比较。RT—PCR法检测抗体阳性者血清中登革病毒。结果登革热疫点健康人群抗登革病毒IgG抗体阳性率为23.3％,非疫点健康人群抗登革病毒IgG抗体阳性率为3．8％,两者差异有统计学意义（P〈0．01）;登革热疫点人群抗体阳性率与年龄成正相关,0～20、21～30、31—40、41～50、51—60、61～70和70岁以上各年龄组的抗体阳性率分别为3．8％、5．8％、9．1％、26．5％、27．7％、32．5％和35．1％。30岁以下年龄组与31～40岁年龄组、31～d0岁年龄组与41～60岁年龄组、41-60岁年龄组与61岁年龄组间的抗登革病毒IgG抗体阳性率差异分别具有统计学意义（P〈0．05）。登革热疫点和非疫点15岁以下中小学生滤纸血样标本中均未检测到抗登革病毒IgG抗体。RT—PCR法未检测到抗体阳性者血清中有登革病毒。结论登革热疫点人群抗登革病毒IgG阳性率明显高于非疫点人群,疫点人群抗体阳性率随年龄增长而上升,提示登革热疫点在登革热疫情后,登革病毒可能在蚊媒体内存在低密度的循环。     

斑点金免疫渗滤试验同步检测抗斯氏狸殖吸虫IgM和IgG抗体的研究

目的:寻求简便、快速、可靠的方法,用于斯氏狸殖吸虫病早期诊断及疗效考核.方法:建立检测抗斯氏狸殖吸虫抗体的斑点金免疫渗滤试验(DIGFA),并对48例患者在治疗前和治疗后血清中特异抗体水平的动态变化进行研究.结果:斯氏狸殖吸虫病患者经有效药物治疗后3月、6月、1年、1.5年连续采血,经DIGFA检测连续观察的结果表明,IgM抗体出现较早,阴转较为明显和迅速,治疗后3月的阴转率就达47.9%(23/48),1年的阴转率可达89.6%(43/48);而IgG抗体则出现较晚,阴转缓慢,治疗后1.5年的阴转率仅为18.8%(9/48).结论:DIGFA为检测抗斯氏狸殖吸虫抗体的有效方法,检测IgM抗体可用于早期诊断及疗效考核,IgG抗体的检测主要用于回忆性诊断,却不能用来判断治愈或诊断再感染.     

ELISA和金标法在新型冠状病毒肺炎诊断中的临床价值

目的：探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）和金标法检测新型冠状病毒抗体的临床应用价值。方法：新型冠状病毒肺炎确诊患者17例在入院时分别采用ELISA和金标法检测新型冠状病毒IgG抗体和IgM抗体,同时选取30例健康体检者作为正常对照组。结果：ELISA法检测COVID-19患者单独IgG抗体阳性3例,单独IgM抗体阳性3例,二者同时阳性8例,同时阴性3例,健康对照组IgG和IgM抗体均有１例阳性,IgG抗体灵敏度和特异度分别为64.7%和90.2%;IgM抗体灵敏度和特异度分别为64.7%和96.7%。金标法检测IgG和IgM抗体同时阳性10例,同时阴性7例,其灵敏度、特异度分别为58.8%和100%,健康对照组均为阴性。两种方法检测IgG抗体的符合率为82.3%,Kappa系数为0.627,检测IgM抗体的符合率为58.8%,Kappa系数为0.131。结论：ELISA和金标法检测新型冠状病毒IgG抗体和IgM抗体的特异度高,可用于疑似人群快速筛查,但二者符合率一般,建议联合检测     

检测血抗阿拉伯糖甘露糖脂IgG抗体诊断泌尿系统结核的应用价值

目的：了解检测抗阿拉伯糖甘露糖脂IgG抗体（LAM－IgG)指标诊断泌尿系统结核的临床应用价值。方法：42例泌尿系统结核病患为实验组，32例非结核性泌尿系统疾病患为对照组，采集血液为检测标本，应用斑点免疫金渗滤试验（DIGFA）检测LAM－IgG。结果：实验组LAM－IgG阳性结果27例，对照组无LAM－IgG阳性结果，结论：检测LAM－IgG指标，对诊断与鉴别诊断泌尿系统结核有较高的特异性（100％）和敏感性（64．3％）。     

胃肠道腺癌患者血清抗癌胚抗原抗体的检测

目的：探讨胃肠道腺癌患者血清中IgG和IgM抗癌胚抗原(CEA)抗体的情况，评价CEA及IgG和IgM抗CEA抗体的联合检测在胃肠道腺癌诊断中的意义。方法：用放免法检测血清中CEA含量，酶联免疫吸附法(EuSA)检测血清中IgG和IgM抗CEA抗体，用竞争抑制法检测抗体的特异性。结果：胃肠道腺癌患者血清CEA含量升高者(≥15ng／ml)占30．9％(21／68)，IgG抗CEA抗体阳性者占35．3％(2，4／68)，IgM抗CEA抗体阳性者占26．5％(18／68)，CEA及抗CEA抗体的联合检测可使胃肠道腺癌的阳性率提高到60．3％(41／68)；健康对照组血清CEA升高者为0，IgG和IgM抗CEA抗体阳性者占3.3%，(1／30)。结论：胃肠道腺癌患者血清中IgG和IgM抗CEA抗体的检出率较高，这些抗体与血清CEA水平的联合检测可提高胃肠道腺癌的诊断率。     

应用滴金法检测孕妇TORCH感染

[目的 ]了解大连地区孕妇TORCH各病原体的感染情况及与不良孕史的关系 ,评价滴金法临床应用的可行性。 [方法 ]应用滴金法 ,对 2 4 0例孕妇和 4 6例咨询病人进行了弓形体、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒 4种病原体血清特异性IgM与IgG抗体的检测。IgG抗体的检测同时采用ELISA法对照。 [结果 ]2 4 0位孕妇血清中四种病原体特异性IgM抗体阳性率分别为1 .2 5 %、2 .0 8%、3.75 %、1 .2 5 % ;滴金法检测特异性IgG抗体阳性率分别为 6 .6 7%、87.92 %、79.5 8%、6 0 .4 1 % ;4 6例咨询病人IgM抗体阳性率分别为 6 .5 %、8.7%、1 9.6 %、6 .5 % ;ELISA法的阳性率分别为 6 .2 5 %、86 .2 5 %、77.0 8%、5 9.1 7%。两种方法检测TORCH -IgG阳性率无明显差异 (P >0 .0 5 )。 [结论 ]孕妇TORCH感染的筛选对优生优育是非常有用的指标 ;滴金法为一种灵敏、快速、简便检测孕妇TORCH感染的方法     

戊型肝炎病毒合成肽决定簇检测抗HEV的研究

利用３段分别代表ＨＥＶ３个基因区的合成多肽，研制成ＥＬＩＳＡ抗ＨＥＶ检测试剂。此试剂对ＩｇＧ及ＩｇＧ检测出阳性率在急性ＮＡＮＢＮＸ肝炎患者中分别为５４．１％（５３／９８）和３３．７％（３３／９８），在其他疾病患者正常献血员中则分别为２．７％－６．３％和０％－２．６％。与Ｇｅｎｅｌａｂｓ重组抗原生产的检测试剂比较，两者有很好的一致性，其阳性符合率为９０．０％，阴性符合率为９８．５％，总符合率为９７．     

血清戊型肝炎抗体检测的比较研究

目的评价戊型肝炎抗HEV E2 IgM、IgG酶联免疫试剂(捕获法)在戊型肝炎诊断中的意义。方法对226例肝病患者及50例健康体检者进行抗HEV E2 IgM、IgG检测,同时对226例患者进行上海科华抗HEV IgM、IgG试剂平行检测。结果抗HEV E2 IgM ELISA试剂在226例肝病患者中检出43例阳性,阳性率为19.0%。上海科华试剂在226例肝病患者中检出45例抗HEV-IgM阳性和/或抗HEV-IgG阳性,阳性率为19.9%,与抗HEV E2 IgM ELISA试剂检测结果相符,差异无统计学意义(P>0.05)。抗HEVE2IgM阴性、抗HEV IgG阳性的99例临床诊断考虑戊型肝炎既往感染病例中,上海科华试剂检出16例抗HEV IgG阳性,占16.2%。结论抗HEV E2 IgM ELISA试剂用于戊型肝炎急性感染的检测灵敏准确,是一个较好的HEV近期感染指标。万泰抗HEVIgG试剂在戊型肝炎既往感染的诊断上具有准确、敏感的优势。     

汉坦病毒核衣壳蛋白抗原多肽片段的合成与应用

目的 以合成肽为抗原建立新型特异性检测抗汉埋病毒IgG和IgM的ELISA。方法 用多肽合成仪合成汉坦病毒核衣原壳蛋白（aa17-66)50个氨基酸残基的核心序列,以此为抗原,通过实验发现这一序列具有较强的抗原性,首次建立了以合成肽为抗原的新型特异性检测抗汉坦病毒IgG和IgM的ELISA,测定肾综合征出血热（HFRS）患者血清23份,乙型肝炎患者血清9份,正常人血清11份。结果 乙型肝炎患者血清和正常人血清均为阴性,20份HFRS血清IgG阳性,21份HFRS血清IgM阳性,本方法的相对敏感性为86％和91％,相对特异性为100％,符合率为93％和95％。结论 本法特异性强,灵敏度高,简便易行,是适于基层医疗单位的诊断方法。     

血液样本灭活处理对三种SARS-CoV-2抗体检测方法结果的影响

目的 探讨56 ℃ 30 min灭活处理对不同方法测定2019新型冠状病毒（SARS-CoV-2）抗体检测结果的影响。方法 本文为回顾性研究。收集2020年2月12~18日在佛山市第一人民医院确诊为新型冠状病毒性肺炎患者血清样本、血浆样本及全血样本各11份,同时收集同期疑似病例及其他疾病患者血清、血浆及全血样本各10份,采用双盲法,在样本采用56 ℃ 30 min灭活处理前后,分别采用免疫层析法检测样本中的SARS-CoV-2总抗体、采用荧光免疫层析法检测样本中的SARS-CoV-2 IgM抗体、采用化学发光荧光免疫分析法检测血清及血浆样本SARS-CoV-2 IgM及SARS-CoV-2 IgG,比较灭活前与灭活处理后样本的抗体检测结果,并采用Pearson相关性分析灭活前后检测IgM及IgG半定量检测结果的相关性。结果 免疫层析法检测灭活前后血清与血浆样本中SARS-CoV-2总抗体的阳性样本符合率为90.9%,阴性符合率为100.0%,总符合率均为95.2%。免疫层析法检测灭活前后全血样本中SARS-CoV-2总抗体的总符合率为100.0%。荧光免疫层析法检测灭活前后血清、血浆及全血样本中SARS-CoV-2 IgM抗体的阳性符合率均为100.0%,阴性符合率均为0%,总符合率均为47.6%。化学发光免疫分析法检测灭活 前后血清样本中SARS-CoV-2 IgM及IgG抗体及血浆中的IgG抗体,阳性符合率、阴性符合率及总符合率均为100.0%,检测血浆IgM抗体的总符合率为95.2%。采用Pearson相关对灭活前后血清及血浆样本IgM和IgG半定量检测结果进行相关性分析,其中IgM灭活前后结果的相关系数为0.9999（95%CI：0.9998~1.000,P<0.001）,IgG灭活前后结果的相关系数为0.9999（95%CI： 0.9998~1.000,P<0.001）。结论 56 ℃ 30 min灭活处理血液样本对免疫层析法及化学发光免疫分析法检测SARS-CoV-2抗体结果几乎无影响,可在检测前先进行灭活以降低检验人员感染风险,荧光免疫层析法不可使用灭活后样本进行检测。     

重组核衣壳蛋白免疫滴金检测肾综合征出血热抗体差异的研究

目的比较重组核蛋白抗原制备的胶体金免疫试剂盒与病毒悬液抗原制备的胶体金免疫试剂盒在检测肾综合征出血热特异性抗体的差异。方法以汉坦76—118病毒M14626株s片段为模板，克隆334bp片段，重组表达核衣壳蛋白，以此蛋白作为抗原，制备胶体金试剂盒，与以病毒悬液为抗原的胶体金试剂盒进行平行检测300例肾综合征出血热血清IgM和IgG抗体。并与酶联免疫吸附试验（ELISA）和间接免疫荧光法（IFA）对比检测。结果成功构建了重组核蛋白原核表达载体pGEX-4T-1-S，获得高纯度的抗原，分子量约12kD，以此蛋白为抗原制备胶体金试剂盒。检测300例HFRS病人血清抗HFRSigM，rNPCGIDA阳性检出率为90．7％，后者高于前者，差异有显著性（X^2=32．9，P〈0．05）。用rNP与天然NP平行检测蛋白表达法HFRSIgM76.3％，HFRSIgG84．2％；细胞培养法HFRSIgM86．8％，HFRSIgG92．1％。HFRSIgM符合率达89．7％，HFRSIgG符合率达92．3％；CGIDA法检测HFRS IgM的敏感性为75.0％，特异性为100％；CGIDA法检测HFRSIgG的敏感性为83．1％，特异性为100％。结论该重组核蛋白的CGIDA对HFRS的早期诊断具有较好的应用价值。但是敏感性及特异性均低于细胞培养法的CGIDA。     

金标免疫渗滤法检测斯氏狸殖吸虫病患者血清IgM的评价

目的为寻求简便、可靠的方法,用于斯氏狸殖吸虫病早期诊断及疗效考核。方法建立检测斯氏狸殖吸虫病患者血清IgM抗体的金标免疫渗滤法(DIGFA),并对53例患者在治疗前和治疗后血清中特异抗体水平的动态变化进行研究。结果斯氏狸殖吸虫病患者经有效药物治疗后3个月、6个月、1年、1．5年连续采血,经DIGFA检测连续观察的结果表明,IgM抗体出现较早,阴转较为明显和迅速,治疗后3个月的阴转率就达47．2％(25／53),1年的阴转率可达86．8％(46／53);而IgG抗体则出现较晚,阴转缓慢,治疗后1．5年的阴转率仅为15．1％(8／53)。结论DIGFA检测斯氏狸殖吸虫病患者血清IgM抗体可作为早期诊断及疗效考核的有效方法。     

斑点金免疫渗滤试验快速检测抗甲型肝炎病毒IgM抗体

建立胶体金免疫渗滤试验用于快速检测抗甲型肝炎ＩｇＭ抗体。     

风疹病毒特异性IgM诊断试剂盒的研制和临床应用

目的 :建立风疹病毒特异性IgM诊断试剂的技术方法并应用于临床。方法 :对传统的间接ELISA方法进行了改良 ,定性检测人血清中风疹病毒IgM。结果及结论 :本法克服了类风湿因子 (RF)和特异性IgG对实验的干扰 ;与HSV 1、HSV 2和HCMV抗原无交叉反应 ;具有快速、敏感、特异性强、重复性好等优点。在 16 5例临床可疑风疹病例中检出阳性 142例 ,用进口风疹病毒捕获法试剂盒检出阳性 133例 ,阴阳符合率为 84.0 %。     

Evaluation by indirect immunofluorescent assay and enzyme linked immunosorbent assay of the dynamic changes of serum antibody responses against severe acute respiratory syndrome coronavirus

Background Severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS-CoV) is a newly emerging virus that gives rise to SARS patients with high rates of infectivity and fatality. To study the humoral immune responses to SARSCoV, the authors evaluated lgG and IgM specific antibodies in patients‘ sera.Methods Two methods, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and indirect immunofluorescent assay (IFA) , were used to detect specific serum IgG and IgM against SARS-CoV in 98 SARS patients and 250 controls consisting of patients with pneumonia, heahh-care professionals and healthy subjects. The serum antibody profiles were investigated at different times over one and a half years in 18 of the SARS patients.Results The sensitivity and specificity of ELISA for detecting IgG against SARS-CoV were 100.0% and 97.2% and for IgM 89. 8% and 97.6% respectively; the figures using IFA for IgG were 100.0% and 100.0% and for IgM 81.8% and 100.0% respectively. During the first seven days of the antibodies trace test, no IgG and IgM were detected, but on day 15, IgG response increased dramatically, reaching a peak on day 60,remaining high up to day 180 and decreasing gradually until day 540. On day 15,IgM was detected, rapidly reached a peak, then declined gradually until day 180 when IgM was undetectable.Conclusion The detection of antibodies against SARS virus is helpful in the clinical diagnosis of SARS.