痔疮病人术后激光机中药坐浴的疗效观察与护理

痔疮是最常见的肛肠疾病,包括内痔、外痔、混合痔,民间有"十人九痔"之说,其发生与久站、久坐、活动少、便秘、腹泻、排便时间过长、饮酒过多、嗜好辛辣饮食等因素有关,发病率女性高于男性,以成人居多。将我院痔疮病人术后分别采用激光坐浴机中药坐浴和传统中药坐浴进行比较研究,旨在探讨痔疮病人术后采用激光坐浴机中药坐浴的效果及护理措施。     

联合PCR技术克隆白纹伊蚊漆酶型酚氧化酶基因及其生物信息学分析

目的测定白纹伊蚊漆酶型酚氧化酶的基因的全长序列并用生物信息学方法分析其结构和功能。方法从白纹伊蚊卵、幼虫、蛹、雌蚊、雄蚊中提取总RNA,逆转录后以总cDNA为模板,设计简并引物进行巢式PCR,扩增部分序列后设计新的特异性引物补全5’端序列,使用3’-RACE法补全3’端序列,拼接全长后进一步进行生物信息学分析。结果通过巢式PCR扩增出1145bp的核苷酸序列,测序后设计5’端序列的下游引物,扩增出约900bp的核苷酸序列,设计3’端的上游引物,配合3’RACE试剂盒扩增出约600bp的核苷酸序列,寻找重复序列将三段序列进行拼接,得到国内外从未获得的长2244bp、编码747个氨基酸序列的白纹伊蚊漆酶型酚氧化酶基因的全长序列。生物信息学分析其与白纹伊蚊的相似性最高,为含信号肽的跨膜蛋白,含3个Cu氧化酶超家族位点,属于蓝色多铜氧化酶家族。结论联合PCR技术的应用使较长长度的基因序列的扩增更为方便、准确。为进一步对其进行功能的研究奠定了基础。     

粉尘螨第五组主要变应原（Der f5）的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定

目的克隆表达粉尘螨第五组变应原（Dermatophagoides farinae,Derf5）基因,并鉴定纯化蛋白免疫原性。方法提取活粉尘螨总RNA,扩增Derf5片段,PCR产物与克隆载体pMD18-T连接,转化入大肠埃希菌JM109,经酶切及测序鉴定获得pMD18-Der f5阳性菌株,再提取质粒进行双酶切,与表达载体pET-30a（＋）连接,转化入大肠埃希菌BL21,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白质印迹法（Western blotting）鉴定其表达效果,Ni-IDA亲和层析柱纯化蛋白,利用尘螨病人血清鉴定其免疫原性。结果构建了重组质粒pMD18-Derf5和pET30a-Der f5,SDS-PAGE结果表明Der f5基因在BL21中获得良好的可溶性表达,蛋白质分子量与理论值相符,纯化的蛋白与病人血清有良好的IgE结合活性。结论获得广州地区Der f5的原核表达载体,高效表达纯化重组蛋白,初步鉴定了该蛋白的免疫原性。     

阶段性目标教学法用于新护士培训的效果观察

目的 探讨阶段性目标教学法在新护士培训中的应用效果.方法 制定各阶段新护士带教目标和培训计划,对新护士进行规范培训及考核.结果 应用阶段性目标教学法培训后,新护士考核成绩均在良好以上,临床工作能力增强.结论 新护士培训应用阶段性目标教学法,可提高新护士的临床实际工作能力,提高护士业务素质.     

恙螨体内恙虫病立克次体经精胞传递的实验研究

本文报道地里纤恙螨雄虫人工接种恙虫病立克次体后与雌虫配对培养和传代，应用幼虫叮咬小鼠分离立克次体和PCR结合核酸杂交（核酸杂交检测PCR产物）检测子代体内立克次体的结果。幼虫叮咬小鼠分离立克农作检查第3子代幼虫体内立克次体阳性。PCR结合核酸杂交检测佛山市的病人恙虫病立克次休（未定株）接种雄虫和健康雌虫配对的第1、2、3子代成虫体内立克次体DNA阳性。Karp株接种雄虫的第1子代幼虫体内立克次体的幼虫叮咬小鼠法和PCR结合核酸杂交均呈阳性。     

刚地弓形虫LDH-Like MDH cDNA的克隆和序列分析

目的获取弓形虫RH株速殖子苹果酸脱氢酶(MDH)的cDNA全长序列，并对推导翻译出的氨基酸(aa)序列进行分析。方法将NCBI GenBank中登录的弓形虫MDH EST序列进行比对、拼接和电子延伸，发现近5’末端的部分核酸序列缺失。基于分析，设计的上游、下游引物分别包含起始密码子ATG和终止密码子TGA(TGA→UGA)，使经RT-PCR扩增出的片段对应完整的CDS或者ORF。之后对MDHCDS推导翻译出的aa序列进行了保守功能域和同源性分析。结果本研究克隆的MDH的cDNA全长951bp，推导翻译出的蛋白质有316个aa组成，约35kDa，与预期大小接近。保守功能域分析表明，弓形虫MDH最接近类-乳酸脱氢酶型(lactate dehydrogenase-like)MDH，其准确定名缩写为LDH-like MDH，同时弓形虫MDH还具有其它脱氢酶类的特征。弓形虫MDH除与隐孢子虫和恶性疟原虫高度同源外，还与很多细菌等物种同源，但与人的同源性最低(22％)。弓形虫MDH cDNA序列在NGBI GenBank中登录号为AY650028，对应aa序列的登录号为AAT67462。结论本研究首次获得了弓形虫MDH基因的全长cDNA序列和对应的aa序列。MDH是三羧酸循环中的重要酶类，该酶活性的改变。将直接影响弓形虫的存活。弓形虫MDHaa序列与人MDH蛋白间的同源性很低，提示基于MDH蛋白作为药靶，经高通量技术筛选抗弓形虫药具有可行性。     

广州地区白纹伊蚊体内登革病毒的检测

目的了解广州地区登革热传播媒介白纹伊蚊携带登革病毒的情况，为登革热预防控制提供预测预警信息。方法从广州11个行政区及其登革热旧疫点捕获白纹伊蚊成蚊和幼虫（经实验室培育羽化成成蚊），提取登革病毒RNA，One step SYBR Green I实时RT-PCR进行检测。结果2005—2007年从广州地区采集的493批白纹伊蚊（6255只）中，共检测出两份阳性结果，分别来自登革热疫点和旧疫点，经测序证实为登革I型．其余为阴性。最低感染率为0．32。结论本文白纹伊蚊携带登革病毒比率较低，可能与登革病毒在蚊体内传代的递减效应、采样时间滞后以及广州登革热非连续性爆发有关。     

超声在股浅静脉瓣膜戴戒术中的应用研究

目的 研究术中超声应用于股浅静脉瓣膜戴戒术治疗原发性下肢深静脉功能不全(PDVI)中的疗效和应用价值.方法 将经静脉顺行造影证实为原发性下肢深静脉瓣膜功能不全的88个病例分为A、B两组,两组均采用传统的股浅静脉瓣膜戴戒术加曲张静脉剥脱术,A 组术中加行超声辅助.以瓣膜反流持续时间评价即时效果,以临床病因-解剖-病理-生理(CEAP)临床分级与临床记分做随访评价疗效.结果 术中超声检测静脉反流持续时间戴戒后较戴戒前明显缩短;术后A、B两组临床分级与临床记分差值均有显著性差异( P < 0.01).结论 在股浅静脉瓣膜戴戒术中,超声检查进行辅助能够有效提高手术的针对性,增加手术效果.     

恙虫病的实验室诊断技术及新进展

恙虫病的实验室诊断对恙虫病的防治工作有着重要的实际意义。该文主要介绍了多种实验室常用的恙虫病诊断技术及研究进展。     

45年恙螨与媒介恙螨传播恙虫病的基础研究

报告作等45年来恙螨以及媒介恙螨传播恙虫病基础研究结果，主要包括：（1）恙螨调查研究：种类的发现，恙虫病东方体的分离和检测，媒介恙螨孳生地及其恙虫病流行；（2）恙螨生活史和实验生态研究；恙螨培育成功与生活史的实验，平民螨实验生态和恙虫病流行的预测预报；（3）恙螨传病机制及其控制恙虫病流行研究。恙虫病东方体阳性恙螨模型的建立及其东方体在恙螨体内的动态，恙螨体内东方体垂直传递和传病潜力。以及防灭恙螨与控制恙虫病的流行。