二叶式主动脉瓣中miRNA-195调控瓣膜钙化的机制研究

目的：探究二叶式主动脉瓣中miRNA-195调控瓣膜钙化的可能机制。方法：收集35例接受主动脉瓣置换术患者狭窄的二叶式或三叶式主动脉瓣,通过PCR及Western blot分别检测miRNA-195的表达量、果蝇母源抗皮肤生长因子（drosophila mothers against decapentaplegic 7,SMAD7）的mRNA及蛋白表达量。双荧光素酶法预测miRNA-195的靶基因。在猪瓣膜间质细胞中分别沉默和过表达miRNA-195,检测SMAD7的mRNA表达水平并探究两者的相互关系。在人类瓣膜组织上通过免疫组化染色检测基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）-2、MMP-9蛋白水平,通过天狼星红染色检测胶原蛋白水平,通过Von Kossa染色比较钙化程度差异,进而研究钙化相关的功能改变。结果：与狭窄的三叶式主动脉瓣相比,狭窄的二叶式主动脉瓣中miRNA-195表达降低,SMAD7的mRNA和蛋白水平升高。双荧光素酶实验提示SMAD7是miRNA-195的直接靶标。在猪瓣膜间质细胞中沉默miRNA-195引起SMAD7 mRNA水平升高,过表达miRNA-195引起SMAD7 mRNA水平降低。狭窄钙化的二叶式主动脉瓣组织中MMP-2、MMP-9及胶原的表达较狭窄钙化的三叶式主动脉瓣升高。结论：在二叶式主动脉瓣中,下调的miRNA-195促进了SMAD7表达,进而促进细胞外基质的纤维化并最终促进其钙化。     

miRNA-374a在乳腺癌侵袭与转移中的作用及机制

目的 探讨miRNA-374a在乳腺癌侵袭转移过程中的作用及机制.方法 选取实验标本48例,其中高侵袭转移性乳腺癌前缘组织标本（A组）、低侵袭转移性乳腺癌前缘组织标本（B组）、正常乳腺组织标本（C组）各16例.每组随机选取6例标本混合后分别进行高通量基因组学分析.筛选出差异表达的miRNA-374a.通过生物信息学工具预测miRNA-374a的靶蛋白BMP-2.运用qRT-PCR及Western blot方法检测各组剩余10例标本的miRNA-374a mRNA、BMP-2 mRNA及BMP-2蛋白表达水平以进行验证.所得数据运用SPSS 18.0统计分析.结果 miRNA-374a mRNA的表达次序为：C组＞B组＞A组（P＜0.05）,BMP-2 mRNA表达次序为：C组＜B组≈A组（P＜0.05）,BMP-2蛋白表达次序为：C组＜B组＜A组（P＜0.05）.相关性分析显示miRNA-374a mRNA与BMP-2蛋白存在明显负相关（P=-0.412 8）.结论 miRNA-374a通过调节BMP-2的蛋白表达抑制乳腺癌侵袭转移.     

MicroRNA-486 和TGF-β1 对人主动脉瓣膜 钙化的影响及其机制研究

目的 研究microRNA-486（miRNA-486）对人主动脉瓣膜间质细胞（VICs）钙化的影响及作 用机制。方法 体外培养VICs,经成骨诱导后用双荧光素报告基因检测miRNA-486 靶基因。转染miR-486 mimic、miR-486 Inhibitors 后,将细胞分为miR-486 mimic 组、miR-486 mimic NC 组、miR-486 Inhibitors 组、miR-486 Inhibitors NC 组。采用茜红素染色、ALP 试验分析各组钙化程度,实时荧光定量聚合酶链反应 （qRT-PCR）、免疫荧光试验检测miR-486 靶基因及成骨相关因子mRNA 和蛋白的表达水平。结果 双荧 光素报告基因检测和Western blot 检测结果显示,转录生长因子-β1（TGF -β 1）为潜在靶基因。茜红素染 色、ALP 试验结果显示,miR-486 mimic 组钙化程度高于miR-486 Inhibitors 组。qRT-PCR、免疫荧光试验 结果表明,miR-486 mimic 组TGF-β1、SMAD3 mRNA 和蛋白表达水平较低（P <0.05）;miR-486 mimic 组RUNX2、骨钙素mRNA 表达水平较miR-486 Inhibitors 组高（P <0.05）。结论 miR-486 可通过下调 TGF-β1 的表达,促进RUNX2、骨钙素的表达和活性,诱导间质细胞向成骨细胞分化。     

血管钙化大鼠肾动脉BMP2/Smad1/Runx2信号通路的表达

目的 观察血管钙化大鼠模型肾动脉上骨形态蛋白2（BMP2）/Smad1/Runt相关转录因子2（Runx2）信号通路的表达及其变化规律,探讨BMP2/Smad1/Runx2信号通路激活在肾动脉钙化中的作用。方法 将24只雄性SD大鼠随机分为对照组和钙化组,钙化组建立维生素D3和尼古丁诱导的大鼠血管钙化模型,对照组给予生理盐水和花生油。6周后采用Von Kossa染色检测肾动脉钙化程度,钙离子试剂盒测定大鼠肾动脉钙含量,实时荧光定量PCR检测肾动脉组织中BMP2、Smad1、Runx2 mRNA水平,免疫组化法观察BMP2、Smad1、Runx2及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。结果 Von Kossa染色见钙化组大鼠肾动脉有大量黑色颗粒沉淀。钙化组血管钙含量高于对照组（ P<0.05)。与对照组相比,钙化组大鼠肾动脉组织BMP2、Smad1、Runx2 mRNA的水平升高（P<0.05),BMP2/Smad1/Runx2信号通路蛋白在肾动脉的表达亦同步上调,而α-SMA的表达较对照组下降（P<0.05)。相关分析表明,大鼠肾血管钙含量与肾动脉组织BMP2 mRNA（r =0.655, P<0.05)、Smad1 mRNA (r =0.735, P<0.05)、Runx2 mRNA ( r=0.734, P<0.05)均呈正相关。结论 BMP2/Smad1/Runx2通路的表达变化与肾动脉钙化的严重程度相关,提示BMP2/Smad1/Runx2信号通路参与了肾动脉钙化的发生发展。     

MiRNA-26a通过调控结缔组织生长因子缓解血管平滑肌细胞的钙化

目的 探究miRNA-26a调控结缔组织生长因子对血管平滑肌细胞钙化的作用。方法 将细胞分为对照组、模型组、模型+AR234960组、AR234960+miR-26a mimic组和miR-26a mimic组。对照组细胞正常培养基培养,模型组VSMC细胞诱导钙化,模型+AR234960组的VSMC细胞诱导钙化后加入AR234960激动剂干预,AR234960+miR-26a mimic组的VSMC细胞诱导钙化后用AR234960激动剂和miR-26a mimic处理,miR-26a mimic组的VSMC细胞诱导钙化后转染miR-26a mimic。茜素红染色测定各组细胞钙化沉积;试剂盒检测各组细胞碱性磷酸酶（ALP）活性;荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞miR-26a、OPG、OPN、BMP-2、Collagen II基因和蛋白表达情况。双荧光素酶基因验证miR-26a与CTGF的结合。结果 平滑肌A7r5细胞钙化后,miR-26a的表达随着钙化时间的增加而降低（P<0.05）,而CTGF的表达随钙化时间的增加而增加（P<0.05）。茜素红染色结果显示,AR234960能够增加细胞的钙化程度,而miR-26a mimic能够减轻细胞钙化。与对照组相比,模型组ALP活性、OPN、BMP-2、Collagen II mRNA和蛋白的表达显著升高（P<0.05）,OPG mRNA和蛋白的表达显著降低（P<0.05）;与模型组相比,模型+AR234960组上述指标均无显著差异（P>0.05）,而miR-26a mimic组ALP活性、OPN、BMP-2、Collagen II mRNA和蛋白的表达显著降低（P<0.05）,OPG mRNA和蛋白的表达显著升高（P<0.05）;与miR-26a mimic组相比,AR234960+miR-26amimic组ALP活性、OPN、BMP-2、Collagen II mRNA和蛋白的表达显著升高（P<0.05）,OPG mRNA和蛋白的表达显著降低（P<0.05）。双荧光素酶基因检测结果显示,miR-26a-inhibitor组CTGF 3'-UTR野生型中相对荧光素酶活性较miR-26a-mimic组显著升高（P<0.05）。结论 miRNA-26a能够有效降低细胞中ALP活性及OPN、BMP-2、Collagen II的表达,同时增加钙化细胞中OPG水平,为miRNA-26a通过调控CTGF水平进而对缓解血管平滑肌细胞钙化提供了理论依据。     

肾元颗粒对db/db糖尿病肾病小鼠血管钙化的改善作用及其机制

目的：通过高磷诱导db/db糖尿病肾病（DN）小鼠血管钙化,探讨肾元颗粒对db/db DN小鼠血管钙化的改善作用及其可能机制。方法：将20只SPF级db/db小鼠随机分为模型组和肾元颗粒组（n=10）,同系背景野生型（WT）小鼠作为空白组（n=10）。给药12周后,取各组小鼠血清、肾脏和胸主动脉组织。ELISA法检测各组小鼠血清FGF23水平,HE和von Kossa法检测各组小鼠胸主动脉病理形态表现以及钙盐沉积情况,实时荧光定量PCR （Real-time PCR）法检测各组小鼠肾脏组织中KlothomRNA和胸主动脉组织中Pit-1、Runx2及SM22α mRNA表达水平,Western blotting法检测各组小鼠肾脏组织中Klotho蛋白和胸主动脉组织中Pit-1、Runx2及SM22α蛋白表达水平,免疫组织化学法检测各组小鼠胸主动脉组织中Pit-1蛋白表达水平,免疫荧光法检测各组小鼠胸主动脉组织中SM22α和Runx2蛋白表达水平。结果：与空白组比较,模型组小鼠血清FGF23水平明显升高（P<0.05）,肾脏组织中Klotho mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,胸主动脉组织中Pit-1和Runx2 mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,SM22α mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,胸主动脉组织中Pit-1和Runx2蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,SM22α蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。与模型组比较,肾元颗粒组小鼠血清FGF23水平降低（P<0.05）,肾脏组织中Klotho mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,胸主动脉组织中Pit-1和Runx2 mRNA及蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,胸主动脉组织中SM22α mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。结论：肾元颗粒可通过上调小鼠肾脏组织中Klotho蛋白表达水平,减少Pit-1表达水平,抑制FGF23/Pit-1信号通路,调节血管平滑肌细胞（VSMC）的表型转化,达到血管保护作用。     

Bax抑制因子1通过促进视神经萎缩蛋白1表达抑制小鼠动脉血管钙化

目的 探讨Bax抑制因子1（BI-1）和视神经萎缩蛋白1（OPA1）蛋白对血管钙化的影响。方法 ApoE-/-糖尿病小鼠高脂喂养12周后予以腹腔注射Nε（- 1-羧甲基）-L-赖氨酸16周建立血管钙化模型,实验将小鼠分为4组,6只/组：对照组（ApoE-/-小鼠普通饲料喂养）、钙化组（ApoE-/-小鼠建立钙化模型）、钙化+BI-1TG组（血管特异性过表达BI-1的ApoE-/-小鼠建立钙化模型）和钙化＋BI-1TG＋OPA1-/-组（血管特异性过表达BI-1和基因敲除OPA1的ApoE-/-小鼠建立钙化模型）。另β磷酸甘油诱导血管平滑肌细胞建立细胞钙化模型。使用von Kossa染色检测血管钙化程度,使用ELISA检测主动脉钙含量,使用免疫组织化学方法检测Runt相关转录因子2和骨形态发生蛋白2表达、使用TUNEL检测细胞凋亡率,使用Western blot检测BI-1、OPA1、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3水平的表达。结果 血管钙化后,BI-1和OPA1蛋白表达均下降（P=0.0044）,钙沉积、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达增加（P=0.0041）。过表达BI-1促进OPA1蛋白表达,钙沉积、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达均减少（P=0.0006）。基因敲除OPA1蛋白后,钙沉积、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3又明显增多（P=0.0007）。结论 BI-1可能通过促进OPA1表达,减轻钙沉积、细胞骨型分化和细胞凋亡,继而抑制血管钙化。     

人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因敲除促进小鼠动脉血管钙化的机制研究

目的 研究人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10,PTEN)在小鼠动脉血管钙化形成过程中的作用.方法 ①构建血管特异性PTEN敲除小鼠(PTEN△/△),对照组小鼠为PTENf/f;②免疫组化检测ApoE全敲除小鼠钙化血管中PTEN的表达水平;③体外通过钙化培养基诱导血管钙化;④Alizarin Red染色和Von Kossa染色评估PTEN敲除后小鼠血管钙化程度;⑤实时荧光定量PCR检测血管钙化标志物Runx2、骨钙蛋白和BMP2的表达水平.结果 ①与普通饮食组相比,高脂饮食诱导的ApoE基因敲除小鼠血管钙化明显,而钙化后的血管中PTEN的表达水平显著下降(P＜0.01);②经体外诱导后,PTEN△/△小鼠血管明显钙化,而PTENf/f小鼠血管几乎无钙化;③与PTENf/f组相比,PTENⅣ△小鼠血管钙化标志物Runx2、骨钙蛋白和BMP2的表达均明显升高(P＜0.05).结论 血管特异性PTEN基因敲除促进小鼠血管钙化的形成.     

miRNA-3679抑制下游ZADH2-靶基因促进肝癌细胞增殖的机制研究

  目的   寻找miRNA-3679与肝癌细胞系之间的关系,并验证其下游靶基因。   方法   通过PCR检测miRNA-3679在肝癌细胞系中的表达,使用ENCORI、miRDB、TargetScan数据库预测miRNA-3679的下游靶基因;通过qPCR检测（空白对照组、转染组及转染阴性对照组）转染靶基因表达水平确定靶基因为含锌结合醇脱氢酶结构域-2（ZADH2）;Western blot检测转染miRNA-3679抑制剂后ZADH2蛋白表达;EdU染色检测转染miRNA-3679抑制剂及同时转染miRNA-3679、ZADH2抑制剂后对细胞增殖的影响;克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡。   结果   miRNA-3679在肝癌细胞系中的表达水平均高于正常人肝细胞株（P<0.05）,数据库中共筛选出6个在肝癌中下调的基因:GLUD1、B3GAT1、SLC46A3、MAP2K3、ATF5、ZADH2;qPCR检测转染miRNA-3679抑制剂后ZADH2表达升高（P<0.01）;转染miR-3679抑制剂后荧光素酶活性升高（P<0.01）;Western blot检测miR-3679 inhibitor组中的ZADH2蛋白表达高于NC组（P<0.01）;EdU分析检测miRNA-3679 inhibitor组阳性细胞数低于NC组及Inhibitor NC组（P<0.05）;miR-3679 inhibitor+si-ZADH2组克隆计数多于miR-3679 inhibitor组（P<0.01）;流式细胞术检测提示miR-3679 inhibitor+si-ZADH2组细胞凋亡数目低于miR-3679 inhibitor组（P<0.01）。   结论   miRNA-3679在肝癌细胞中显著高表达,可直接作用于ZADH2基因并影响其表达,且通过抑制ZADH2发挥促进HCC细胞的增殖及抑制其凋亡。      

Klotho在急性缺血再灌注性肾损伤中的变化及其与凋亡的关系

目的 观察Klotho蛋白在缺血再灌注急性肾损伤中的表达变化,探讨其在肾小管上皮细胞凋亡中的作用。方法 10只BALB/c小鼠随机分为肾脏缺血再灌注组（I/R组, n=5）和假手术组（Sham组, n=5）,采用双侧肾蒂夹闭术建立肾缺血再灌注模型,于造模后24 h留取小鼠的血清及肾组织。应用酶法分别测定血清尿素氮和肌酐,ELISA法检测血清Klotho蛋白水平,TUNEL染色法检测肾脏细胞凋亡水平,Real-Time PCR及Western blotting技术分别检测肾组织Klotho、Bax、Bcl-2和Caspase-3的基因及蛋白表达,应用Pearson直线相关法分析急性肾损伤时小鼠全身及局部的Klotho水平和肾脏凋亡的关系。结果 与Sham组相比,I/R组小鼠术后24 h肾小管上皮细胞明显变性、坏死,肾脏凋亡细胞明显增加,肾组织cleaved Caspase-3蛋白水平、Bax/Bcl-2 mRNA及蛋白表达比值均显著升高。I/R组小鼠血清Klotho蛋白水平较Sham组小鼠显著降低[（669.89±136.51） pg/mL vs. （2 107.92±549.22） pg/mL,P〈0.01],肾组织Klotho mRNA及蛋白表达分别较Sham组下调约9/10 （P〈0.001）及1/5 （P〈0.05）。相关性分析显示肾组织bax/bcl-2 mRNA比值与血清Klotho蛋白及肾组织klotho mRNA均呈显著负相关（r=-0.833,P〈0.01;r=-0.916,P〈0.001）,肾组织Bax/Bcl-2蛋白比值和肾组织Klotho蛋白也呈显著负相关（r=-0.637,P〈0.05）。结论 缺血再灌注急性肾损伤后小鼠全身及肾组织局部Klotho表达均显著下调,Klotho水平的下降可能与凋亡诱导的肾损害密切相关。     

Role of TGF-β1 Signaling in Heart Valve Calcification Induced by Abnormal Mechanical Stimulation in a Tissue Engineering Model

A tissue engineering model of heart valve calcification induced in a bioreactor was established to evaluate the calcification induced by abnormal mechanical stimulation and explore the underlying molecular mechanisms. Polyethylene glycol (PEG)-modified decellularized porcine aortic leaflets seeded with human valve interstitial cells (huVICs) were mounted on a Ti-Ni alloy frame to fabricate two-leaflet and threeleaflet tissue engineered valves. The two-leaflet model valves were exposed to abnormal pulsatile flow stimulation with null (group A), low (1000 mL/min, group B), medium (2000 mL/min, group C), and high velocity (3000 mL/min, group D) for 14 days. Morphology and calcification were assessed by von Kossa staining, alkaline phosphatase (ALP) content, and Runx2 immunostaining. Leaflet calcification and mRNA and protein expression of transforming growth factor (TGF)-β1, bone morphogenetic protein 2 (BMP2), Smad1, and MSX2 were measured at different time points. ALP content was examined in two-leaflet valves seeded with BMP2 shRNA plasmid-infected huVICs and exposed to the same stimulation conditions. The results showed that during 14 days of flow stimulation, huVICs on the leaflet surface proliferated to generate normal monolayer coverage in groups A, B, and C. Under mechanical stimulation, huVICs showed a parallel growth pattern in the direction of the fluid flow, but huVICs exhibited disordered growth in the high-velocity flow environment. von Kossa staining, ALP measurement, and immunohistochemical staining for Runx2 confirmed the lack of obvious calcification in group A and significant calcification in group D. Expression levels of TGF-β1, BMP2, and MSX2 mRNA and protein were increased under fluid stimulation. ALP production by BMP2 shRNA plasmid-infected huVICs on model leaflets was significantly reduced. In conclusion, abnormal mechanical stimulation in a bioreactor induced calcification in the tissue engineering valve model. The extent of calcification correlated positively with the flow velocity, as did the mRNA and protein levels of TGF-β1, BMP2, and MSX2. These findings indicate that TGF-β1/BMP2 signaling is involved in valve calcification induced by abnormal mechanical stimulation.     

老年人退行性心脏瓣膜病120例超声诊断分析

目的：探讨超声心动图对老年退行性心脏瓣膜病的诊断价值。方法：回顾性分析120例老年退行性心脏瓣膜病的超声心动图影像资料,分析瓣膜病变检出情况以及瓣膜退行性变伴反流发生率。结果：120例老年退行性心脏瓣膜病患者中,主动脉瓣钙化或硬化37例（30．8％）,二尖瓣硬化与钙化18例（15．0％）,主动脉瓣和二尖瓣同时有硬化或钙化者65例（54．2％）。主动脉瓣钙化反流78例,发生率为65％;二尖瓣反流42例,发生率为35％,反流程度差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：超声心动图检查是老年性退行性瓣膜病早期诊断的有效方法。反流是老年退行性心脏瓣膜病常见的表现,对于出现多瓣膜轻度反流的老年人,应给予足够的重视,定期行超声心动图检查,及早发现心脏瓣膜的结构改变。     

超声心动图对老年退行性心瓣膜病的检测评价

目的探讨老年退行性心瓣膜病（SDHVD）的超声检测价值。方法应用彩色多普勒超声诊断仪,对5032例中老年人实施超声心动图检查,观察心脏瓣膜及辩环的形态改变、回声、活动状态与辩口血流情况。结果检出SDHVD 776例（15．42％）,其中主动脉辨环、瓣叶钙化521例（67．14％）,主动脉辫及二尖瓣钙化185例（23．84％）,二尖瓣环钙化70例（9．02％）。结论心脏瓣膜钙化的发生率随年龄增长而增加,以主动脉辨膜钙化较为多见,二尖辩次之;超声心动图对老年退行性心瓣膜病的检出率高,较为准确、可靠,具有重要的临床应用价值。     

老年人退行性心脏瓣膜病临床观察

对186例病人常规进行心脏超声检查,确诊老年退行性心脏瓣膜病(DCVD)病人46例,检出率为24.7%,50岁以上、60岁以上和70岁以上检出率分别为28.6%,43.0%和60.5%,随着年龄增加,检出率亦增加,统计学处理,P<0.005,瓣膜钙化主动脉瓣多于二尖瓣(P<0.005),亦有联合瓣膜病变。受累瓣膜近半数发生启闭异常,多为主动脉瓣关闭不全。超声检查可显示瓣膜钙化的特征性改变。并对DCVD的发病情况、病理特点、临床表现及诊断进行初步探讨。     

利用基因芯片筛选动脉钙化大鼠差异表达基因

目的：利用基因芯片技术筛选正常大鼠和动脉钙化大鼠腹主动脉组织中差异表达基因及检测转化生长因子－β（TGF－β）、基质金属蛋白酶－2（MMP－2）和基质金属蛋白酶－9（MMP－9）的表达量,以探讨动脉钙化发病的可能机制。方法通过皮下注射大剂量维生素D3建立大鼠动脉钙化模型,采用Von Kossa染色观察动脉钙化程度,基因芯片技术筛选两组大鼠差异表达基因及检测TGF－β、MMP－2和MMP－9的表达量。结果与对照组相比,模型组差异表达的基因有710条,其中上调基因344条,下调基因366条。模型组TGF －β1、TGF－β3和MMP－2的表达均明显上调,差异具有统计学意义（P＜0.05）,而TGF－β2和MMP－9的表达则无明显差异（P＞0.05）。结论动脉钙化的形成是多基因共同作用的结果,其中TGF－β、MMP－2和MMP－9对动脉钙化的发生发展起着至关重要的作用,其机制还有待进一步研究。     

脂肪因子脂联素、瘦素在退行性瓣膜中的表达特点

目的 探讨脂肪因子脂联素、瘦素在退行性主动脉瓣的组织表达特点。方法 收集2012年10月至2013年10月在海南省人民医院心外科因退行性主动脉瓣疾病行手术切除的主动脉瓣标本30例[男17例,女13例,年龄（55±6）岁],因夹层动脉瘤行Bentall手术切除正常主动脉瓣标本7例[男性4例,女性3例,年龄（41±8）岁]。经HE和免疫组织化学染色,观察退行性主动脉瓣的组织病理学改变,了解脂肪因子脂联素、瘦素在退行性主动脉瓣的表达特点。结果 HE染色显示,与正常瓣膜比较,损伤的主动脉层内皮下可见大量炎症细胞聚集、纤维组织增生和结节性钙化灶形成,退行性主动脉瓣的厚度不同程度增加[重度（2.80±1.18）mm、中度（2.10±0.09）mm、轻度（0.92±0.13）mm、正常（0.75±0.07）mm],进一步的分析显示胶原层增厚明显,松质层厚度降低,而心室层无明显改变,免疫组织化学染色显示脂联素在正常瓣膜和退行性主动脉瓣中无表达;瘦素在正常瓣膜无表达,而在退行性主动脉瓣见新生血管以及血管周围有表达。结论 退行性主动脉瓣病变中瘦素表达增加。