MicroRNA-486 和TGF-β1 对人主动脉瓣膜 钙化的影响及其机制研究

目的 研究microRNA-486（miRNA-486）对人主动脉瓣膜间质细胞（VICs）钙化的影响及作 用机制。方法 体外培养VICs，经成骨诱导后用双荧光素报告基因检测miRNA-486 靶基因。转染miR-486 mimic、miR-486 Inhibitors 后，将细胞分为miR-486 mimic 组、miR-486 mimic NC 组、miR-486 Inhibitors 组、miR-486 Inhibitors NC 组。采用茜红素染色、ALP 试验分析各组钙化程度，实时荧光定量聚合酶链反应 （qRT-PCR）、免疫荧光试验检测miR-486 靶基因及成骨相关因子mRNA 和蛋白的表达水平。结果 双荧 光素报告基因检测和Western blot 检测结果显示，转录生长因子-β1（TGF -β 1）为潜在靶基因。茜红素染 色、ALP 试验结果显示，miR-486 mimic 组钙化程度高于miR-486 Inhibitors 组。qRT-PCR、免疫荧光试验 结果表明，miR-486 mimic 组TGF-β1、SMAD3 mRNA 和蛋白表达水平较低（P <0.05）；miR-486 mimic 组RUNX2、骨钙素mRNA 表达水平较miR-486 Inhibitors 组高（P <0.05）。结论 miR-486 可通过下调 TGF-β1 的表达，促进RUNX2、骨钙素的表达和活性，诱导间质细胞向成骨细胞分化。