支气管哮喘小鼠细胞免疫因子及Th17细胞水平的变化及发病机制研究

目的探讨支气管哮喘小鼠细胞免疫因子及辅助性T细胞（Th）17细胞水平的变化及发病机制,旨在为支气管哮喘的临床治疗提供参考。方法选择SPF级昆明种小鼠24只,采用随机数字表法分为正常对照组和哮喘模型组各12只。哮喘模型组小鼠分别于实验开始当天和第8天腹腔内注入卵清蛋白（OVA）混悬液[含OVA/Al（OH）310mg/g]50滋g/次致敏,并于第16天给予雾化吸入含1%OVA的0.9%氯化钠溶液30~40ml进行激发,持续30~40min,1次/d,连续7d。正常对照组小鼠则给予等量的0.9%氯化钠溶液。比较两组小鼠行为变化情况、肺组织病理切片HE染色结果、肺泡灌洗液（BALF）中炎性细胞分类计数、BALF和血清中细胞免疫因子和Th17细胞水平。结果哮喘模型组小鼠肺组织内可见大量中性粒细胞和嗜酸性粒细胞,且相对阳性着色面积增大。与正常对照组小鼠相比,哮喘模型组小鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞等炎性细胞分类计数均明显升高,BALF和血清中IL-4、IL-5、IFN-γ和IL-17水平均明显升高,而IL-10水平明显降低,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论支气管哮喘小鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞等炎性细胞分类计数均明显升高,可能与BALF和血清中IL-4、IL-5、IFN-γ和IL-17水平明显升高,而IL-10水平明显降低密切相关。     

辅助性T细胞17及IL-17在支气管哮喘小鼠中的变化

目的:探讨辅助性T细胞17(Th17)及IL-17在支气管哮喘小鼠中的变化及意义.方法:将24只BABL/c小鼠随机分为哮喘组(12只)和正常对照组(12只).用卵清白蛋白(OVA)致敏和激发建立小鼠哮喘模型;行苏木精书红(HE)染色,观察肺组织炎症改变;流式细胞术检测脾脏单个核细胞中Th17细胞比例;酶联免疫吸附法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中卟17细胞相关细胞因子I[-17水平;并计数BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞及中性粒细胞数.结果:哮喘组肺组织及气道周围的炎症改变较正常对照组显著增强.哮喘组脾脏中Th17细胞及BALF中IL-17水平均显著高于正常对照组(P均<0.01).哮喘组BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞计数显著高于正常对照组(P均<0.01),结论:哮喘小鼠存在Th17细胞数量增多及其分泌的IL-17水平增高,IL-17可能通过促进嗜酸粒细胞在气道的聚集而参与炎症反应,Th17细胞可能在哮喘的发病中具有重要作用.     

阿奇霉素通过抑制Th17细胞功能活性改善小鼠哮喘炎症

目的 研究阿奇霉素对Th17应答增强致气道以中性粒细胞浸润为主的小鼠哮喘炎症的作用.方法 采用卵蛋白(OVA)+内毒素(LPS)联合致敏,OVA激发的方法建立Th17应答增强致气道中性粒细胞浸润为主的哮喘小鼠模型,48只BALB/c雌性小鼠随机分为对照组、哮喘组、阿奇霉素组、地塞米松组(n=12).采用HE染色观察肺组织病理改变;小鼠肺功能仪检测气道高反应性(airway hyperreactivity,AHR);肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)行细胞分类计数;ELISA检测外周血OVA特异性IgE及BALF中IL-17、TNF-α、IL-8、IL-5和IFN-γ浓度;Q-PCR检测肺组织Th1、Th2和Th17细胞分化.结果 用OVA联合LPS的方法可以复制既有Th2活化和肺内嗜酸性细胞增多,又有Th17表达增强和明显中性粒细胞炎症的哮喘小鼠模型.与哮喘组比较,阿奇霉素组气道炎症细胞浸润明显改善,特别是中性粒细胞比例显著降低(P＜0.05).同时还有BALF中IL-17、TNF-α、IL-8、IL-5水平显著降低(P＜0.05);肺组织Th17细胞分化减少(P＜0.05)以及AHR改善(P＜0.05).而地塞米松组与哮喘组比较,虽然BALF嗜酸性细胞比例显著降低,但BALF中细胞总数、IL-17、TNF-α、IL-8水平及肺组织Th17细胞分化均无明显差别(P＞0.05).结论 阿奇霉素可抑制Th17细胞分化、减少炎症介质分泌从而抑制炎症细胞浸润,由此减弱Th17应答增强致气道中性粒细胞增高的小鼠哮喘炎症.     

抗IL-9抗体对哮喘小鼠肺部炎症的影响

目的通过比较不同干预措施对气道局部炎症反应和主要免疫系统中CD4+ Th2细胞活性的影响,旨在了解外源性抗IL-9抗体对哮喘潜在的治疗价值.方法 40只BALB/c小鼠随机分为阳性对照组、阴性对照组、抗IL-9抗体组和地塞米松(Dex)组,建立小鼠哮喘模型,采取不同干预措施,比较各组支气管肺泡灌洗液(BALF) 细胞计数、肺组织学检查.结果抗IL-9抗体和Dex均可抑制淋巴细胞、嗜酸性细胞和中性粒细胞等炎症细胞在肺内的过度聚集,降低BALF中Th2细胞因子;Dex降低支气管肺泡灌洗液(BALF)中Th1细胞因子水平,而抗IL-9抗体对其无影响.结论抗IL-9抗体和Dex均能明显减轻哮喘小鼠的肺部炎症,在气道建立起新的Th1/Th2平衡.与Dex相比,应用抗IL-9抗体建立的新平衡不会造成因细胞免疫功能受抑引起的一系列不良反应.     

CpGODN对尘螨哮喘小鼠Foxp3表达的影响

目的研究CpG寡脱氧核苷酸(CpGODN)对尘螨哮喘小鼠Th1/Th2型细胞因子及肺组织中Foxp3蛋白表达的影响。方法用雌性C57BL/6J小鼠建立尘螨哮喘小鼠模型,在抗原致敏阶段加入CpGODN进行干预,并设立GpCODN治疗对照组及布地奈德治疗对照组,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比(EOS%)的变化;用酶联免疫吸附(ELISA)法检测BALF中IL-4、IL-5、IFN-γ的含量变化;用免疫印迹(Western-blot)法检测肺组织Foxp3蛋白的表达水平。结果与哮喘模型组及GpCODN治疗对照组比较,CpGODN治疗组的BALF中IL-4、IL-5的浓度降低,IFN-γ浓度升高,肺组织中Foxp3蛋白表达增高;相关性分析显示肺组织Foxp3表达与BALF中IFN-γ水平呈正相关,与BALF中IL-4、IL-5水平、EOS绝对值均呈负相关。结论 CpGODN能够改善尘螨哮喘小鼠气道炎症,调节Th1/Th2型细胞因子的平衡,可能是通过诱导Foxp3的表达来起到免疫调节的作用。     

重组白细胞介素-35对支气管哮喘模型小鼠T淋巴细胞亚群及细胞因子的影响*

目的 探究重组白细胞介素-35（rIL-35）对支气管哮喘模型小鼠T淋巴细胞亚群和细胞因子的影 响及其作用机制。方法 100只SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、rIL-35低剂量组、rIL-35中 剂量组和rIL-35高剂量组,每组20只。哮喘组和rIL-35各剂量组小鼠采用卵白蛋白（OVA）复制支气管哮喘模 型,对照组小鼠则以生理盐水代替OVA进行处理。rIL-35各剂量组小鼠在OVA激发结束后腹腔注射不同剂量 rIL-35,连续3 d,对照组和哮喘组小鼠注射等剂量的生理盐水。比较各组小鼠的气道反应性、肺泡灌洗液 （BALF）中总细胞、淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的数量;采用流式细胞仪检测各组小鼠BALF中T淋 巴细胞亚群的水平;采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测小鼠BALF中IgE、白细胞介素-2（IL-2）、干扰素-γ （IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-5（IL-5）、白细胞介素-17（IL-17）、白细胞介素-22（IL-22）、 白细胞介素-10（IL-10）和转化生长因子-β（TGF-β）水平。结果 对照组小鼠未见明显异常状态。哮喘组小 鼠致敏后活动减少,雾化激发时出现不同程度的咳嗽、呼吸急促、烦躁不安等症状。rIL-35低、中和高剂量组小 鼠雾化激发时上述反应症状减轻。不同组激发时肺阻力（RL） 和肺顺应性（Cdyn） 比较,差异有统计学意义 （P <0.05）,不同剂量乙酰甲胆碱激发时RL和Cdyn比较,差异有统计学意义（P <0.05）。乙酰甲胆碱与rIL-35存 在交互作用,随着乙酰甲胆碱剂量增大,rIL-35剂量减小,激发时RL越大（F =202.320,P =0.000）,Cdyn越小（F = 5.623,P =0.000）。与对照组比较,哮喘组小鼠BALF中的细胞总数、淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞等炎 症细胞的数量均增加（P <0.05）,Th2、Th17、Th17/Treg、IgE、IL-4、IL-5、IL-17、IL-22 水平升高（P < 0.05）,而Th1、Treg、Th1/Th2、IL-2、IFN-γ、IL-10 和TGF-β水平降低（P <0.05）。与哮喘组小鼠比较, rIL-35低、中和高剂量组小鼠BALF中的细胞总数、淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞等炎症细胞的数量降 低（P <0.05）,均呈随rIL-35剂量增加而减少的趋势,Th2、Th17、Th17/Treg、IgE、IL-4、IL-5、IL-17、IL- 22水平降低（P <0.05）,均呈随rIL-35剂量增加而降低的趋势,而Th1、Treg、Th1/Th2、IL-2、IFN-γ、IL-10 和TGF-β水平升高（P <0.05）,且呈随rIL-35蛋白剂量增加而升高的趋势。结论 rIL-35可通过调控Th1/Th2 和Th17/Treg细胞的失衡及炎症细胞因子的分泌,抑制支气管哮喘小鼠体内的炎症反应。     

抗IL-9抗体对哮喘小鼠肺部炎症的影响

目的通过比较不同干预措施对气道局部炎症反应和主要免疫系统中CD4^ Th2细胞活性的影响，旨在了解外源性抗IL-9抗体对哮喘潜在的治疗价值。方法40只BALB／c小鼠随机分为阳性对照组、阴性对照组、抗IL-9抗体组和地塞米松(Dex)组．建立小鼠哮喘模型，采取不同干预措施，比较各组支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数、肺组织学检查。结果抗IL-9抗体和Dex均可抑制淋巴细胞、嗜酸性细胞和中性粒细胞等炎症细胞在肺内的过度聚集，降低BALF中Th2细胞因子；Dex降低支气管肺泡灌洗液(BALF)中Th1细胞因子水平，而抗IL-9抗体对其无影响。结论抗IL-9抗体和Dex均能明显减轻哮喘小鼠的肺部炎症，在气道建立起新的Th1／Th2平衡。与Dex相比，应用抗IL-9抗体建立的新平衡不会造成因细胞免疫功能受抑引起的一系列不良反应。     

CpGODN对尘螨哮喘小鼠T-bet/GATA-3表达的影响

目的探讨CpG寡脱氧核苷酸(CpGODN)对尘螨哮喘小鼠Th1/Th2型细胞因子的影响及其机制。方法用雌性C57BL/6J小鼠建立尘螨哮喘小鼠模型,在抗原致敏阶段加入CpGODN进行干预,并设立GpCODN治疗对照组及布地奈德治疗对照组,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞(EOS)数量的变化;用酶联免疫吸附(ELISA)法检测BALF中IL-4、IL-5、IFN-γ的含量变化;用免疫印迹(Western blotting)法检测肺组织T-bet和GATA-3蛋白的表达水平。结果与哮喘模型组及GpCODN治疗对照组比较,CpGODN治疗组的BALF中炎症细胞明显减少,IL-4、IL-5的浓度降低,IFN-γ浓度升高,肺组织中GATA-3蛋白表达降低,T-bet表达增高;与布地奈德治疗组比较,CpGODN治疗组的BALF中IFN-γ浓度升高。相关分析显示肺组织中T-bet/GATA-3比值与BALF中IFN-γ/IL-4比值呈正相关。结论 CpGODN可通过诱导T-bet表达、抑制GATA-3表达以恢复Th1/Th2平衡,从而减轻尘螨过敏性哮喘小鼠的气道炎症。     

桑白皮水提取物对哮喘模型小鼠支气管肺泡灌洗液中炎性细胞的影响

[目的]探讨桑白皮水提取物对哮喘模型小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎性细胞计数的影响,并观察在活体内桑白皮水提取物的抗过敏作用.[方法]将BALB/C小鼠随机分成5个组,即正常对照组（A组）、模型对照组（B组）、致敏前桑白皮水提取物处理组（C组）、激发前桑白皮水提取物处理组（D组）和致敏及激发前桑白皮水提取物处理组（E组）.B组用OVA诱导制作哮喘模型,C,D,E组分别在致敏前、激发前、致敏及激发前1h经呼吸道行雾化吸入给予桑白皮水提取物（1g/L）.第24天处死各组小鼠后取BALF,利用Diff-quik染色液检测嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和巨噬细胞的数量.[结果]桑白皮水提取物对OVA诱导的小鼠哮喘模型BALF中嗜酸性粒细胞、淋巴细胞及中性粒细胞计数的增多均有明显的抑制作用.[结论]桑白皮水提取物可抑制OVA诱导的小鼠哮喘模型BALF中的炎性细胞增多.     

P2Y12敲除在LPS诱导的急性肺炎肺损伤中的保护作用

目的研究G蛋白偶联P2Y受体12（P2Y12）敲除对脂多糖（LPS）诱导的急性肺炎肺损伤的保护作用。方法选取野生型（WT）小鼠（WT组）和P2Y12敲除（P2Y12 KO）小鼠（P2Y12 KO组）,通过LPS注射建立小鼠急性肺炎模型,比较2组小鼠经LPS处理0～7 d后的生存率。收集2组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）和肺组织,采用生化分析仪和BCA法检测BALF中性粒细胞数量和蛋白含量,采用HE染色和ELISA法检测2组小鼠肺损伤情况和肺组织炎症因子[肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-6、IL-10、巨噬细胞炎性蛋白1Β（MIP1B）]的表达。结果与WT组相比,P2Y12 KO组小鼠经LPS处理0～7 d后存活率明显增加。LPS处理后6～48 h,与WT组比较,P2Y12 KO组BALF中性粒细胞数量和蛋白含量均明显降低（P<0.05或P<0.01）;HE染色结果显示,LPS处理24 h后,与WT组比较,P2Y12 KO组肺组织中性粒细胞募集明显减少（P<0.01）,并且肺部聚合纤维蛋白染色较浅,肺水肿程度明显降低（P<0.01）;ELISA实验结果显示,LPS处理24 h后,与WT组比较,P2Y12 KO组肺组织炎症因子TNF-α、IL-6、IL-10和MIP1b含量明显下降（P<0.01或P<0.001）。结论 P2Y12敲除可显著降低LPS诱导的小鼠肺部炎症反应并减少肺损伤。     

白细胞介素-6、10、17A在哮喘大鼠中的变化

目的建立大鼠哮喘模型,观察血清及支气管肺泡灌洗液IL-6、10、17A的水平变化,探讨其可能的作用机制。方法选用50只SD大鼠,随机分为正常对照组、哮喘模型组。模型组应用卵白蛋白（OVA）注射,雾化吸入致敏激发法复制哮喘模型。正常对照组取上清液备用。行支气管肺泡灌洗,回收支气管肺泡灌洗液（BALF）,吸取上清液备用。采用酶联免疫分析法测定血清及BALF上清液中IL-6、10、17A水平变化。结果两组大鼠血清细胞因子水平与肺泡灌洗液细胞因子水平,呈现出相同的统计学结果 ：哮喘模型组白细胞介素6、17A明显高于正常对照组（P〈0.05）,IL-10明显低于正常对照组（P〈0.01）。结论支气管哮喘的慢性气道炎症涉及多种细胞的相互作用,Th17细胞和其产生的IL-17促进了哮喘的发病,抑制过多的Th17细胞的生成,可能成为哮喘治疗的重要手段。     

布地奈德对哮喘小鼠IL-17 表达的影响

目的 探讨白细胞介素17（IL-17）在哮喘小鼠发病机制中的作用,布地奈德控制哮喘的作用机 制与IL-17 表达的关系。方法 24 只4 周龄清洁级雌性BALB/c 小鼠,随机分为正常组、哮喘组及布地奈德组, 每组8 只。以卵清蛋白（OVA）致敏、激发复制哮喘小鼠模型。采用雾化吸入的方法给予哮喘小鼠布地奈德 混悬液治疗。模型复制成功后,取其肺组织行病理切片观察肺组织病理变化,并行实时荧光定量聚合酶链反 应（qRT-PCR）,测定肺组织中IL-17 mRNA 的表达。取支气管肺泡灌洗液（BALF）行酶联免疫吸附试验 （ELISA）检测IL-17 细胞因子的水平。结果 哮喘组气道中炎症细胞浸润、BALF 中IL-17 表达、肺组织中 IL-17 mRNA 表达与正常组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,哮喘组均增高。经布地奈德雾化吸入干预后, 布地奈德组气道中炎症细胞、BALF 中IL-17 的表达、肺组织中IL-17 mRNA 表达与哮喘组比较,差异有统 计学意义（P <0.05）,布地奈德组低于哮喘组。结论 IL-17 在哮喘小鼠中的表达升高,抑制小鼠中IL-17 的表达, 是布地奈德控制哮喘的作用机制之一。     

哮喘小鼠肺泡灌洗液中白细胞介素-17含量变化

目的 探讨哮喘小鼠肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中白细胞介素-17（IL-17）含量的变化.方法 将64只BALB/c小鼠分为正常组32只,哮喘组32只,两组分别于造模后第3、7、14、21天取小鼠肺泡灌洗液,每次8只.应用HE染色法观察哮喘组及正常组各时间点小鼠肺组织情况.应用ELISA法检测小鼠BALF中IL-17的含量.结果 哮喘组的肺组织炎症反应较同期正常小鼠明显,哮喘组较正常组BALF中IL-17含量有显著升高,差异有统计学意义（P＜0.05）.哮喘组第7天小鼠BALF中IL-17含量达到高峰,同期小鼠肺组织HE染色炎症亦最明显.结论 哮喘组小鼠BALF中IL-17含量升高,且在造模后第7天达到高峰.IL-17可能是参与支气管哮喘急性发作的主要细胞因子之一.     

屋尘螨诱导气道上皮TLR4表达和影响T淋巴细胞分化在哮喘气道炎症中的作用

目的研究屋尘螨（HDM）对于气道上皮Toll样受体4（TLR4）表达及T淋巴细胞分化的影响,以进一步探讨其在哮喘小鼠气道炎症中作用。方法雌性BALB/c小鼠30只随机分为OVA哮喘模型组（OVA组）、HDM组和生理盐水对照组（对照组）。OVA组用卵白蛋白（OVA）致敏与激发建立小鼠哮喘模型,HDM组给予HDM提取液替代OVA致敏与激发,对照组用生理盐水替代OVA。观察小鼠气道及肺组织病理炎症浸润情况,支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数及细胞分类计数。ELISA检测小鼠BALF上清中IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ和IL-17的含量。实时荧光定量PCR法测定气道上皮TLR4 mRNA的表达,免疫印迹法测定气道上皮TLR4蛋白的表达。流式细胞技术检测小鼠外周血Th1、Th2及Th17淋巴细胞占CD4＋T淋巴细胞百分率情况。结果 OVA组支气管黏膜下水肿,黏液腺增生,以嗜酸粒细胞为主的炎症细胞浸润;HDM组出现肺泡腔及间质充血,中性粒细胞等炎症细胞浸润;对照组小鼠气道上皮无增厚,无炎症细胞浸润,肺泡壁完整。与OVA组比较,HDM组BALF细胞总数及分类计数除嗜酸粒细胞无显著差异外（P〉0.05）,其余均显著升高（P〈0.05）;HDM组BALF上清中IL-4、IL-5、IL-13及IL-17水平较OVA组明显增高（P〈0.05）,IFN-γ的表达无显著差异（P〉0.05）;HDM组气道上皮TLR4 mRNA及TLR4蛋白的表达明显增高（P〈0.05）,OVA组与对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。与OVA组比较,HDM组外周血Th2、Th17细胞显著增高（P〈0.05）,而Th1细胞无明显变化（P〉0.05）。结论 HDM诱导气道上皮TLR4表达增高,使Th2与Th17淋巴细胞活化,气道内炎症细胞浸润,可能在哮喘气道炎症中起重要作用。     

IL-17在哮喘小鼠模型中表达及其对肥大细胞IL-6分泌的影响

目的 :研究白细胞介素(interleukin,IL)-17在哮喘小鼠模型中的表达,观察其对肥大细胞IL-6分泌的影响。方法:BALB/c小鼠随机分为对照组和哮喘组,分别用等量磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution,PBS)和卵清蛋白(ovalbumin,OVA)干预,检测肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中细胞总数及嗜酸性粒细胞(eosnophils,EOS)数验证模型的成功建立。应用逆转录-聚合酶链反应法、酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测两组小鼠肺组织中IL-17m RNA、BALF及血清中IL-17的表达差异。细胞实验分为对照组和IL-17组,分别予等量培养基和IL-17干预小鼠肥大细胞株(P815)后收集上清,用ELISA检测IL-6的水平。结果 :哮喘组BALF中细胞总数及EOS计数较对照组显著升高(P<0.05),模型建立成功。哮喘组肺组织中IL-17 m RNA、BALF及血清中IL-17表达较正常组显著升高(P<0.05)。细胞水平的研究发现IL-17组P815上清中IL-6表达较正常组显著升高(P<0.05)。结论 :IL-17在OVA诱导哮喘小鼠模型中表达升高。IL-17刺激肥大细胞分泌IL-6,可能在哮喘的发病中起促进作用。     

Linker for activation of T cells contributes to airway inflammation in an asthmatic mouse model

Background Allergic asthma is associated with airway inflammation and hyperresponsiveness caused by dysregulated production of cytokines secreted by allergen-specific helper T-type 2 （Th2） cells. The linker for activation of T cells （LAT） is a membrane-associated adaptor protein, which has been shown to take part in regulating T cell receptor （TCR） signaling and T cell homeostasis. In this study, we established an asthmatic mouse model to examine the changes in LAT levels during allergic airway disease and the effects of LAT transgenic expression on airway inflammation. Methods T cells from mouse lung tissues were isolated from allergen challenged （ovalbumin （OVA）） and control mice, and the purity of these isolated T cells was examined by fluorescence-activated cell sorter （FACS）. Semi-quantitative RT-PCR and Western blotting were used to detect the expression of the LAT gene and LAT protein, respectively. After an intranasally administered mixture of pCMV-HA-LAT plasmid and Lipofectamine 2000, 24 hours before and 72 hours after allergen challenge, the BALF cell count and the differential cytologies were studied. In addition, IL-4 and IFN-γ levels in the BALF were determined by ELISA, and pathological changes in lung tissues were observed. Results LAT protein and mRNA expression were decreased in lung T cells in a mouse model of allergen-induced airway disease. After intranasal administration of pCMV-HA-LAT, histopathological examination of the lungs showed that intervention with LAT overexpression prevented mice from developing airway inflammation, and the number of total cells, eosinophils, neutrophils, and lymphocytes in the BALF was reduced significantly compared with the OVA sensitized and challenged group. In addition, the Th2 cytokine IL-4 decreased, while the Thl cytokine IFN-γ increased compared to the OVA sensitized and challenged group or the OVA sensitized group plus pCMV-HA treatment. Conclusion This study demonstrates that LAT might effectively diminish Th2 cytokine responses, lung histopathological changes and lung inflammation to allergen challenge in a model of expedmentally induced asthma.     

三氧化二砷对支气管哮喘小鼠Th17细胞的影响

目的 观察三氧化二砷（ATO）对支气管哮喘小鼠Th 17细胞和IL-17的影响.方法 30只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组和ATO组.末次激发24小时后,测定气道肺阻力,收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,细胞分类计数,流式细胞仪检测脾脏Th17细胞阳性率.ATO干预20小时后,检测培养上清液及BALF中IL-17及IL-4水平.结果 ①哮喘组BALF中各类炎症细胞均明显高于对照组（P＜0.05）,而ATO组明显低于哮喘组（P＜0.01）.②哮喘组肺阻力、脾脏CD4＋T细胞总数、Th17细胞阳性率、BALF中IL-17及IL-4均明显高于对照组,而ATO组上述指标均明显低于哮喘组（P＜0.05）.③ATO干预组培养上清液中IL-17、IL-4含量显著低于原液组（P＜0.01）.④Th17细胞阳性率、IL-17含量均与中性粒细胞数量呈显著正相关（P＜0.05）.结论 ATO能够抑制Th17细胞、IL-17的表达,减轻哮喘小鼠气道炎症及高反应性.     

姜黄素衍生物WZ01对哮喘气道炎症介质IL-13和组胺及糖皮质激素受体的影响

目的：研究姜黄素衍生物WZ01对哮喘气道炎症反应、白细胞介素（IL）-13、组胺及糖皮质激素受体（GR）的影响,探讨WZ01抑制哮喘气道炎症的机制。方法：30只小鼠,随机分为：正常对照组、哮喘组、低剂量WZ01组、中剂量WZ01组、高剂量WZ01组,每组6只。在第21～第27天1%卵清白蛋白（OVA）雾化激发,每次雾化前30 min予腹腔注射相应剂量0.9%氯化钠溶液或WZ01。末次激发24 h内,麻醉并处死小鼠,留取肺组织标本HE染色检测炎症病理改变,留取支气管肺泡灌洗液（BALF）进行细胞分类计数,ELISA法检测IL-13和组胺浓度,Western blot和免疫组织化学染色检测肺组织GR蛋白的表达。结果：与正常对照组比较,哮喘组小鼠气道周围可见明显炎症细胞浸润及黏液分泌,BALF中炎症细胞数量、IL-13及组胺水平均显著升高（P＜0.01）。与哮喘组相比,各剂量WZ01组气道周围炎症细胞浸润及黏液分泌显著减少,BALF中淋巴细胞和嗜酸性粒细胞数量明显减少,BALF中IL-13和组胺浓度显著下降,差异均有统计学意义（P＜0.01）;BALF中淋巴细胞数量与IL-13和组胺浓度均呈显著正相关（r值分别为0.886、0.886,P均＜0.01）,嗜酸性粒细胞数量与IL-13和组胺浓度均呈显著正相关（r值分别为0.897、0.898,P均＜0.01）。Western blot和免疫组织化学染色结果显示,哮喘小鼠肺组织GR表达明显降低,与哮喘组相比,不同剂量WZ01均能显著上调哮喘小鼠肺组织GR表达水平。结论：姜黄素衍生物WZ01可显著抑制哮喘气道炎症细胞浸润和黏液分泌,可能与其降低炎症介质IL-13和组胺浓度及上调哮喘小鼠肺组织GR表达水平有关,WZ01可能有望成为防治哮喘气道炎症的新药。     

姬松茸多糖对哮喘模型小鼠气道炎症和Th2类细胞因子水平的影响

[目的]探讨姬松茸多糖对哮喘模型小鼠气道炎症和Th2类细胞因子水平的影响.[方法]取雌性Balb/c小鼠40只,随机分为正常对照组、哮喘模型组和姬松茸多糖小、大剂量组,姬松茸多糖小、大剂量组分别灌胃给予姬松茸多糖200,400mg/kg.采用酶联免疫吸附法和蛋白质印迹法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-4,IL-5,IL-13含量,并观察BALF中炎症细胞计数和肺组织病理学改变.[结果]与正常对照组比较,哮喘模型组小鼠BALF中炎症细胞计数及IL-4,IL-5,IL-13水平均明显升高(P<0.05).与哮喘模型组比较,姬松茸多糖小、大剂量组BALF中炎症细胞计数及IL-4,IL-5,IL-13水平均明显降低(P<0.05).姬松茸多糖可明显减轻哮喘模型小鼠肺组织病理学改变.[结论]姬松茸多糖具有抗哮喘作用,其机制可能与下调Th2炎症细胞因子、减少炎症细胞浸润有关.     

哮喘小鼠肺组织中IL-17及IL-17受体的变化

目的：探讨哮喘小鼠肺泡灌洗液（Bronchoalveolarlavagefluid,BALF）中自细胞介素-17（IL-17）及肺组织匀浆中IL-17受体含量的变化。方法：将64只BALB/c小鼠分为正常组32只,哮喘组32只,两组分别于造模后第3、7、14、21天取小鼠肺泡灌洗液及肺组织,每次8只。应用ELISA法检测小鼠BALF中IL-17及肺组织匀浆中IL-17受体的含量。结果：哮喘组较正常组IL-17及IL-17受体含量有显著升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。哮喘组第7天IL-17及IL-17受体含量达到高峰。结论：哮喘组小鼠肺组织中IL-17及IL-17受体含量升高,且在造模后第7天达到高峰。IL-17及IL-17受体可能是参与支气管哮喘急性发作的主要细胞因子。