缺氧缺血新生大鼠脑组织SOD、MDA和NO的变化及硫酸镁的保护作用

目的：建立新生鼠HIE模型，观察硫酸镁对缺氧缺血新生鼠脑组织中SOD、MDA和NO的影响，及病理影响。方法：将动物随机分为下列4组，每组10只；（1）正常对照组；（2）HIE组；（3）HIE＋硫酸镁小剂量组；（4）HIE＋硫酸镁大剂量组。上述正常对照组不作任何处理即处死，其余各组大鼠在HIE后2小时处死，分离左侧大脑皮质，称重，用生理盐水作均浆介质，按1g:10ml比例在冰水溶液中匀浆，然后离心取上清液分别测SOD、MDA、NO和匀浆蛋白量。各组随机取2只大鼠，在规定时间处死，取左侧大脑，置于10％甲醛溶液中固定，常规石蜡包埋，切片，HE染色。结果：HIE组MDA、NO值较正常组明显增高，SOD值降低，脑组织水肿显著；用硫酸镁后，HIE组MDA、NO降低，SOD增高，脑组织水肿减轻。大剂量组较小剂量组效果好。结论：（1）氧自由基、一氧化氮在HIE的发病过程中起重要作用；（2）硫酸镁对HIE具有保护作用。     

缺氧缺血新生大鼠脑组织中氧自由基脂类含量的变化

目的建立新生鼠HIE模型，探讨降钙素基因相关肽对缺氧缺血性新生鼠脑损伤可能的保护作用。方法将新生鼠分为正常对照组、生理盐水组和药物治疗组。正常对照组不作任何处理即处死，其余各组大鼠在规定时间处死，分离左侧大脑皮质，称重，用生理盐水作匀浆介质，按1g：10ml比例在冰水溶液中匀浆，然后离心取上清液分别检测新生鼠脑组织匀浆中丙二醛（MDA）、内皮素-1（ET-1）、超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）和匀浆蛋白量。另取大鼠左侧大脑，置于10％甲醛溶液中固定，常规石蜡包埋切片，HE染色。结果HIE组MDA、ET-1和NO的含量较正常组明显增高，SOD含量则明显降低，且脑组织水肿显著，差异有显著性（P〈0．001）；用降钙素基因相关肽（CGRP）治疗后，HIE组MDA、ET-1及NO的含量明显降低，SOD则增高，脑组织水肿减轻，与正常对照组相比差异无显著性（P〉0．05）。结论（1）氧自由基和ET-1在HIE的发病过程中起重要作用；（2）CGRP对HIE具有保护作用，它可能通过抑制氧自由基作用而减缓脑缺氧缺血程度。     

己酮可可碱对新生大鼠缺血缺氧性脑病的干预作用

目的观察己酮可可碱（PTX）对新生大鼠缺血缺氧性脑病（HIE）模型的干预作用。方法建立新生大鼠HIE模型，72只出生7d的Wistar大鼠随机分为假手术组，HIE模型组和PTX组，于缺血缺氧后72h取左脑，测定脑组织水含量、大脑皮层神经细胞内游离钙离子浓度、SOD、MDA、NOS及NO。结果与HIE模型组相比，PTX组脑组织含水量、游离钙离子浓度和MDA、NOS以及NO水平均显著降低（P〈0．05；P〈0．01；P〈0．05；P〈0．05；P〈0．05），SOD水平显著升高（P〈0．05）。结论PTX对新生大鼠缺血缺氧后脑组织有保护作用，其机制可能与PTX改善能量代谢及减少局部细胞毒性物质有关。     

人参川芎嗪注射液对局灶性脑缺血大鼠血清SOD活性、MDA含量及脑组织氨基酸含量的影响

目的：复制局灶性脑缺血大鼠模型,研究人参川芎嗪注射液对局灶性脑缺血大鼠血清超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）活性、丙二醛（Malondiadehyde,MDA）含量及脑组织兴奋性氨基酸（Excitatory amino acids,EAA）含量的影响。方法：通过电凝大脑中动脉复制大鼠脑缺血模型,设立假手术组、模型组、川芎嗪注射液组、人参川芎嗪注射液组,观察大鼠脑梗死后的血清SOD活性、MDA含量及脑组织兴奋性氨基酸含量的影响。结果：人参川芎嗪注射液能提高血清中SOD的活性,作用优于川芎嗪;降低血清中MDA的含量;降低脑组织中谷氨酸（Glutamic Acid,Glu）的含量。结论：人参川芎嗪注射液通过提高血清中SOD的活性,降低血清中MDA及脑组织中Glu的含量,对局灶性脑缺血损伤起到较好的干预作用。     

低O2高CO2致大鼠海马超微结构改变及川芎嗪的保护作用

目的：观察慢性低O2高CO2对大鼠海马超微结构的影响及川芎嗪注射液的保护作用。方法：雄性SD大鼠30只，随机分为正常对照组、低O2高CO2 4周组（模型组）、低O2高CO2 4周＋川芎嗪治疗组（川芎嗪组）。通过电镜观察海马超微结构并测定超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量。结果：慢性低O2高CO2使海马神经元和神经胶质细胞水肿、SOD活性降低、MDA含量升高，川芎嗪干预可使上述指标的异常变化明显减轻。结论：川芎嗪对慢性低O2高CO2大鼠海马神经细胞结构损害有保护作用，其机制可能与抗氧化作用有关。     

15例中重度新生儿缺氧缺血性脑病血清超氧化物歧化酶及丙二醛的变化

目的为了观察超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)中的变化,以探讨新生儿HIE与氧自由基(OFR)的关系.方法对收住的15例中重度HIE患儿检测治疗前后血清SOD活性及脂质过氧化反应产物MDA含量.结果新生儿HIE患儿极期SOD活性明显较恢复期降低(P＜0.01),MDA含量明显升高(P＜0.01),而恢复期SOD活性升高,MDA含量下降.结论新生儿HIE极期抗氧化功能下降,清除氧自由基的能力降低,脂质过氧化物增多,提示氧自由基参与HIE脑损伤的病理过程,为HIE治疗中应用氧自由基清除剂提供重要依据,同时测定SOD,MDA也可作为疾病转归的监测手段之一.     

新生儿缺氧缺血性脑病血清褪黑素测定的临床意义

目的研究新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）的血清褪黑素水平及其在不同病情和不同病期时的变化，阐明褪黑素在HIE发病与病情进展中的作用，并为褪黑素治疗HIE提供依据。方法用褪黑素放射免疫诊断试剂盒测定轻度和中重度HIE各20例急性期与恢复期的血清褪黑素值，并与20名正常足月新生儿作对照。分析HIE程度（轻度和中重度）、HIE病期（急性期和恢复期）对血清褪黑素水平的影响。结果（1）血清褪黑素水平在轻度HIE急性期时高于正常对照组，恢复期时与正常对照组无差异。（2）血清褪黑素水平在中重度HIE急性期时与正常对照组无差异，恢复期时高于正常对照组。（3）血清褪黑素水平在轻度HIE急性期高于恢复期，中重度HIE急性期低于恢复期。（4）血清褪黑素水平在HIE急性期轻度HIE高于中重度HIE，恢复期轻度HIE低于中重度HIE，差异均有显著性。结论褪黑素对HIE有一定的保护作用，病情较轻、急性期血清褪黑素水平升高的HIE预后较好，病情较重、急性期血清褪黑素水平降低的HIE预后较差。     

川芎嗪对兔膝关节骨性关节炎血清自由基影响的研究

目的：观察川芎嗪（2,3,5,6-四甲基吡嗪,Ligustrazine,tetramethylpyrazine,TMP）治疗兔膝关节骨性关节炎（Knee Osteoarthritis,KOA）血清自由基水平的动态变化,初步探讨TMP治疗膝关节骨性关节炎的作用机制.方法：大耳白兔随机分正常对照组、模型组、川芎嗪组.除正常对照组外,其余两组兔均采用伸膝制动OA动物模型法造模,制成免KOA模型.用生化法,检测3组兔造模后5周及9周血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平.结果：制备兔膝关节骨性关节炎5周时,与模型组相比,川芎嗪组SOD值升高（P＜0.01）,而MDA值降低（P＜0.01）,与正常对照组相比,川芎嗪组SOD值与MDA值较低差异均有显著差异（P＜0.01）;9周时SOD值和MDA值与正常对照组相比无显著差异.结论：川芎嗪能提高血清SOD含量和降低MDA含量,可通过提高机体自由基清除和抑制能力、改善自由基代谢,发挥对骨性关节炎的防治作用.     

硫酸镁联合多巴胺治疗新生儿缺氧缺血性脑病的临床研究

目的探讨硫酸镁联合多巴胺对新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）的脑保护作用。方法将60例患儿随机分为硫酸镁联合多巴胺组（D）、单用硫酸镁组（L）、生理盐水组（C）三组,同时设立正常对照组（N）,分别测定各组入院时及入院后48 h、72 h和7天各时间点血清S100β蛋白、肌酸激酶脑型同工酶（CK-BB）,并于治疗期间监测患儿呼吸、心率和血压的变化。结果D组和L组患儿入院后48 h、72 h与7天时血S100β蛋白、CK-BB浓度增加明显小于C组（P〈0.01,P〈0.05）,D组患儿呼吸抑制、心率和血压变化的发生率明显低于L组。结论硫酸镁联合多巴胺对HIE患儿有脑保护作用,同时减少了单用硫酸镁的不良反应。     

新生儿缺氧缺血性脑病早期血清脑型肌酸激酶的活性变化

①目的 探讨新生儿血清脑型肌酸激酶（CK-BB）水平对早期缺氧缺血性脑病（HIE）的诊断价值.②方法 采用比色法对49例HIE患儿和32例对照组新生儿血清CK-BB水平进行动态测定.③结果 轻、中、重度HIE患儿早期血清CK-BB水平明显高于同期对照组水平（P＜0.01）,并随脑损伤的程度升高,相互之间差异有显著性（P＜0.01）.④结论 CK-BB在新生儿缺氧缺血性脑病的发病中起重要作用.血清CK-BB水平测定可作为评价HIE患儿早期脑损伤程度及估计预后的重要参考指标.     

孕酮对缺氧缺血性脑病新生鼠脑组织中超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量的影响

目的探讨孕酮对缺氧缺血性脑病(HIE)新生鼠脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响。方法40只7日龄新生Wistar大鼠随机分成5组。假手术组、缺氧缺血组、4 mg孕酮组、8 mg孕酮组和16 m孕酮组。动物先行左侧颈总动脉结扎术,再吸入8%O2和92%N2的混合气体2.5 h建立HIE动物模型。药物组于建立模型前30 min给予不同剂量孕酮溶液,24h后动物全部处死,观察各组新生鼠脑组织中SOD活性和MDA含量的变化。结果缺氧缺血组新生鼠脑组织中SOD活性明显低于假手术组(P<0.01),丙二醛含量明显高于假手术组(P<0.01),药物组SOD活性明显高于缺氧缺血组(P<0.05),丙二醛含量低于缺氧缺血组(P<0.05)。结论孕酮通过升高新生鼠缺氧缺血时脑组织中SOD活性和降低丙二醛含量发挥对缺氧缺血性脑损伤的保护作用。     

蒲金口服液对缺氧缺血性脑损伤大鼠自由基的影响研究

目的 :通过蒲金口服液对缺氧缺血新生大鼠脑组织自由基的影响 ,探讨急性缺氧缺血性脑病的发病机制和化痰活瘀治疗的作用机理。方法 :采用 7日龄SD大鼠结扎右侧颈总动脉和置入低氧环境中诱发的缺氧缺血性脑损伤模型 ,于造模后即刻、2h、4h、6h、8h、1 0h ,将 1日药量共分为 6次灌胃 ,造模后 2 4h处死大鼠 ,取右侧顶枕区脑组织制成 1 0 %脑组织匀浆 ,用可见光分光光度计通过比色法测定超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)含量。结果 :蒲金口服液高剂量组与缺氧缺血性脑损伤模型组相比 ,有极显著差异 (P <0 .0 1 ) ;蒲金口服液高剂量组与达纳康组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :蒲金口服液高剂量组能显著升高缺氧缺血性脑损伤大鼠脑组织中SOD水平 ,降低MDA含量 ,具有明确的抗自由基作用     

高压氧对新生大鼠缺氧缺血性脑病脑组织匀浆中SOD、GSH-PX及MDA的影响

目的：探讨高压氧（ＨＢＯ）对新生大鼠缺氧缺血性脑病（ＨＩＥ）的影响。方法：将７日龄ＳＤ新生大鼠随机分为对照组、ＨＩＥ组和ＨＢＯ治疗组。在实验第７天后处死动物。测定病侧脑组织匀浆超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）和丙二醛（ＭＤＡ）含量。结果：（１）ＨＩＥ模型组ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ活力明显低于对照组（Ｐ＜０．０００３，Ｐ＜０．００６），而ＭＤＡ含量显著高于对照组（Ｐ＜０．００３）；（２）ＨＩＥ组ＨＢＯ治疗１周后，脑组织中ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ活力明显高于未治疗ＨＩＥ组（Ｐ＜０．０００３，Ｐ＜０．００６），而ＭＤＡ含量低于未治疗ＨＩＥ组（Ｐ＜０．００３）。结论：ＨＢＯ能增加ＨＩＥ脑组织内自由基清除酶类的活力，降低局部脂质过氧化物的含量     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后细胞凋亡与自由基损伤机制研究

目的:探讨新生大鼠缺氧缺血脑损伤(HIBD)后细胞凋亡与自由基损伤机制的研究。方法:7日龄SD大鼠72只,随机分成6组:①正常对照组;②HIBD后0h组;③HIBD后24h组;④HIBD后48h组;⑤HIBD后72h组;⑥HIBD后7d组。制备HIBD模型后0,24,48,72h,7d后处死大鼠,取脑并检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;并作HE和Tunel染色光镜下检测各组脑细胞凋亡数。结果:HIBD后各组脑组织SOD,MDA水平及脑细胞凋亡数与对照组比较均有显著性差异,48h及72h组与其他组比较有显著性差异;48h与72h组之间比较无显著性差异。结论:新生大鼠HIBD后48~72h为脑损伤高峰期,细胞凋亡与自由基损伤均参与了缺氧缺血后神经细胞的损害,阻止细胞凋亡或抗自由基损伤应争取在48h内进行。     

实验性颅脑伤大鼠脑组织SOD和MDA的变化

目的：观察实验性颅脑伤大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的动态变化，探讨SOD和MDA在颅脑伤病理损伤机制中的作用。方法：采用自由落体致伤方法制备大鼠颅脑伤模型(模型组)，并以正常大鼠作对照(对照组)，分别于造模后3、5和7d处死动物取脑，测定海马和皮质中SOD活力和MDA含量。结果：模型组大鼠海马SOD活力在3个时间点均显著低于对照组，而MDA含量均显著高于对照组；模型组大鼠皮质SOD活力在造模后3、5d时显著低于对照组，而MDA含量则显著高于对照组，到7d时二者与对照组均无明显差异。结论：大鼠颅脑伤时脑组织SOD活力显著降低，而MDA含量则显著增高，提示SOD和MDA可能参与颅脑伤病理损伤机制并在其中发挥重要作用。     

PKM2在新生鼠缺血缺氧性脑病中的表达变化*

目的：观察新生鼠缺血缺氧性损伤后,丙酮酸激酶M2(pyruvate kinase M2, PKM2)在大脑皮层中的表达变化。方法：选取9 d SD新生鼠40只,按随机数字表法分为假手术组(10只)和缺血缺氧性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy, HIE)模型组(30只)。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride, TTC)染色法检查两组的脑组织梗死面积;Western Blot法检测PKM2在大脑皮层的表达水平变化;组织免疫荧光染色检测PKM2在大脑皮层中的定位;将原代神经元经缺氧缺糖(oxygen glucose deprivation, OGD)处理后,通过细胞免疫荧光染色检测PKM2的入核情况。结果：TTC染色结果显示,HIE模型组新生鼠的大脑右侧半球发生梗死;PKM2在大脑皮层的神经元中表达;在OGD刺激之后PKM2的表达在神经元中出现入核现象。结论：新生鼠在缺血缺氧损伤后,PKM2可能通过O-乙酰氨基葡萄糖糖基化对大脑皮层神经元的应激性过程起到一定作用。     

脾气虚证自由基损伤、端粒长度变化探析

目的：探讨脾气虚状态下模型大鼠体内氧自由基损伤程度和端粒长度的变化情况。方法：采用＂饮食不节＋疲劳过度＂复合方法造模14 d后,取大鼠脑皮质和血清测定SOD、GSH-Px、T-AOC、MDA的含量,取脑皮质测端粒长度。结果：脾气虚模型组大鼠血清和脑皮质中SOD活性、GSH-Px活性、T-AOC和MDA含量与正常组相比均有显著差异（P〈0.05）。模型组脑皮质中端粒长度明显缩短（P〈0.05）。结论：脾气虚模型大鼠体内存在着明显的抗氧化酶活性降低和端粒长度缩短,但脾气虚状态处于脾病全程的何种阶段尚需深入研究了解。     

神经元型一氧化氮合酶在缺氧缺血新生大鼠脑组织的表达变化及其抑制剂7-NI的脑保护作用

目的　探讨神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)及其选择性抑制剂 7 硝基吲唑 (7 NI)在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)中的作用。方法　制备新生大鼠HIBD模型 ,用RT PCR的方法测定HIBD组缺氧开始后 0h、1h、2h、6hnNOSmRNA的表达 ,同对照组相应时点比较。测定HIBD组、7 NI组缺氧开始后 1h、2h、6h、8h以及对照组一氧化氮合酶 (NOS)、一氧化氮 (NO)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)的含量并作相应比较 ,另用TUNEL法比较 3组缺氧结束后 2 4h神经细胞凋亡的情况。结果　在缺氧开始后 2h和 6hHIBD组nNOSmRNA表达高于对照组 (P <0 0 5 ) ,且以 6h表达更高 (P <0 0 5 )。HIBD组各时点与对照组比较NOS、NO、MDA值升高 (P <0 0 1) ,SOD值下降 (P <0 0 1) ,而 7 NI组各时点MDA、NOS和NO值较HIBD组下降 (P <0 0 5 ) ,SOD值升高 (P <0 0 5 ) ,1h时点测定值接近对照组水平。对照组未见明显细胞凋亡情况 ,7 NI组比HIBD组凋亡减少 ,差异具有显著性 (P <0 0 0 1)。结论　nNOS参与了新生鼠HIBD的形成 ,其抑制剂 7 NI通过抗氧化和抑制凋亡发挥了神经保护作用。     

HIBD新生大鼠微管相关蛋白Tau表达变化的研究

目的:本研究采用经典的新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemicbraindamage,HIBD)动物模型,观察HIBD前后脑室周围白质Tau蛋白水平的改变,探讨新生大鼠HIBD早期Tau蛋白表达变化与脑损伤的关系。方法:清洁级7日龄Wistar大鼠82只,随机分成假手术组(对照组,n=40)和缺氧缺血性脑损伤模型组(HIBD组,n=42)。参照Rice法单侧结扎新生大鼠左颈总动脉复制HIBD动物模型;假手术组(对照组)只切开颈部正中皮肤,分离但不结扎左侧颈总动脉;HIBD～大鼠置入低氧环境缺氧2小时,而后按时间随机分为3小时、6小时、12小时、24小时、48小时组(n=8)。HE及嗜银染色后,光镜下观察HIBD前后及不同时间组新生大鼠脑神经细胞的病理变化;免疫组织化学法测各组大鼠脑室周围白质与皮层微管相关蛋白Tau水平的动态变化情况,400倍视野下利用计算机图象分析系统进行Tau蛋白平均光密度值(aver-age opticaldens卸,OD)测定,并统计学分析。结果:HIBD新生大鼠嗜银染色示脑室周围白质神经细胞中存在神经原纤维的增粗、缠绕。各实验组Tau蛋白随着缺氧缺血时间的延长参疫反应牲增强,其中H工后3小时与对照组比较差异无显著性,HIBD后6小时组、12小时组、24小时组以及48小时组的0D值较对照组明显增加(p<0.05),差异有显著性。结论:HIBD可造成新生鼠脑脑室周围白质中神经纤维变性,总Tau蛋白表达增加。     

孕酮对新生鼠缺氧缺血性脑损伤后脑组织糖原合成酶激酶-3β的影响

目的探讨孕酮对缺氧缺血性脑损伤新生鼠皮层和海马糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)水平的影响。方法40只7日龄新生Wistar大鼠随机分成假手术组、缺氧缺血组、孕酮4 mg组、孕酮8 mg组和孕酮16 mg组。假手术组腹腔注射溶剂芝麻油,缺氧缺血组于缺氧前30 min腹腔注射溶剂芝麻油,孕酮组于缺氧前30 min腹腔注射相应剂量的孕酮溶液,建立缺氧缺血脑损伤动物模型。24 h后动物全部处死,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测脑组织中GSK-3β的含量。结果缺氧缺血组新生鼠皮层和海马组织中GSK-3β水平明显高于假手术组(P<0.01),孕酮4 mg、8 mg、16 mg组皮层和海马组织中GSK-3β水平均明显低于缺氧缺血组(P<0.05)。结论缺氧缺血可升高新生鼠皮层和海马GSK-3β水平,孕酮通过降低新生鼠缺氧缺血时皮层和海马组织中GSK-3β水平发挥对缺氧缺血性脑损伤的保护作用。