用石蜡包埋制作眼球标本切片

眼球外形近似圆球形，外层巩膜是致密结缔组织，内层视网膜柔软、易剥离脱落，球内有较硬的晶状体和透明胶状物构成的玻璃体。鉴于这种解剖学和组织学上的结构特点，又因用石蜡包埋切片，常使眼球结构变硬变脆，因此制作眼球标本组织切片，传统多用火棉胶包埋，即火棉胶切...     

眼球的HE整体染色石蜡包埋切片法

眼球切片标本的制作 ,传统方法是用火棉胶包埋切片染色法 ,石蜡包埋切片染色法也有许多报道 ,把ＨＥ块染色法[1 ] 应用于全眼球染色 ,用石蜡包埋切片 ,并进行了改进。结果 ;眼球各部结构染色层次清楚。经反复试验 ,效果良好 ,适合大量制作切片标本 ,方法如下。1　材料与方法1 .1　取材与固定处死动物 ,速取其眼球立即投入ＡＧＦＤ眼球固定液 (丙酮 1 0 0ｍＬ、冰醋酸 4ｍＬ、福尔马林 8ｍＬ、蒸馏水 6ｍＬ) ,1Ｗ后 ,将原液倒出一半 ,再加等量丙酮固定 5ｄ。1 .2　固定后处理将眼球从固定液中取出快速按视神经乳头的平行方向从上、下两侧对称…     

石蜡包埋制作猫眼球切片方法的改良

目的 探讨和改良石蜡包埋制作猫眼球切片方法.方法 取健康猫眼球10只,AFA(甲醛-乙醇-冰醋酸)固定液固定,乙醇梯度脱水,氯仿透明,石蜡包埋制作眼球切片,厚度7 μm,HE染色,观察并记录.结果 ①石蜡包埋的猫眼球不变形,外观无明显收缩,结构完整,可获得整个眼球;②HE染色切片观察,眼球壁各层结构清晰,角膜、角膜缘、巩膜静脉窦、睫状肌等组织结构完整,视网膜无明显剥离,层次清楚,各层细胞排列整齐、容易辨认.结论 采用此方法对猫眼球进行石蜡包埋,可获得较满意的眼球组织切片.     

石蜡包埋全眼球切片在免疫组化中的应用

传统全眼球切片，通常采用火棉腔包埋。由于该方法有切片较厚，不宜观察精细的细胞结构，旦制作程序复杂、费时较长等诸多缺点，限制了该法在临床活检及科研工作中的应用。石蜡包埋则由于全眼球标本富有大空腔，易于萎陷，眼球各部组织结构精细、脆弱，相互同依附性较差，因而在制作过程由易引起变形及移位，较难得到完整满意的切片。     

石蜡包埋标本用于制作树脂半薄大切片的方法

目的介绍利用石蜡包埋标本制作树脂半薄大切片用于光镜研究的方法：方法将石蜡包埋标本方法与树脂包埋方法结合并进行改良，利用超薄切片机和玻璃刀制作树脂半薄大切片结果光镜观察见切片平整．结构显示清晰。结论该方法制作的切片与电镜树脂包埋方法制作的连续半薄大切片结果相似，具有推广应用的价值.     

两种骨髓活检组织制片方法的比较

1971年Burkhardt·R报告了用塑料包埋剂代替石蜡包埋制备组织切片技术,使组织制片方法更加完善。塑料包埋切片与石蜡包埋切片相比,具有细胞收缩小、切片薄、结构清晰等优点,其制片质量明显优于石蜡切片,特别在骨髓活检组织制片中起到了一定地促进作用,有利于对细胞细微结构的观察。塑料包埋切片技术在骨髓活检组织中的应用弥补了石蜡包埋组织切片的不足,对血液病的诊断和研究提供了更好的手段。但这一技术操作繁琐,质量要求高,制作时间长,国内从1980年开展到目前除少数科研院所外还不能广泛用于基层医院病理诊断的需要。石蜡包埋切片仍是制作骨髓切片最常用方法,具有方法恒定,操作简便,又能自动化。本文就两种骨髓包埋制片方法进行了探讨和比较,现介绍如下。1骨髓石蜡包埋切片制作石蜡包埋制作骨髓切片经不断的改进,切片质量明显提高,其制作切片的关键在骨髓活检组织脱钙和切片染色。1.1石蜡包埋制片将送检的骨髓活检标本经4%中性缓冲甲醛固定10h后移至95%乙醇内脱脂12h;用0.2M磷酸缓冲液调至pH7.0的10%乙二胺四乙酸二钠(EDTA)液中进行初步脱钙5h,后经Plank ang Rychlo脱钙剂充分脱钙10h;不经流水冲洗,直接...     

改良的眼球火棉胶——石蜡双重包埋法

眼球切片是组织学实习课中不可缺少的标本,但它的制作过程却相当复杂繁琐。传统的制作方法,大多采用火棉胶包埋,滑动式切片机切片。但存在着周期长、切片厚、造价高、步骤繁琐等一系列问题,加上我室又短缺火棉胶切片机,因此眼球标本的制作,一直是困扰我们的一个难题。经过我室技术人员不断的摸索和实践,探讨出一种在现有设备条件下,能够生产出完全符合教学要求的眼球标本制作技术。方法简单可靠,现报告如下。1　材料与方法1.1　取材固定　取人或动物新鲜眼球,保留视神经1cm左右,以便于固定。将眼球固定于AGFD固定液中,1周后将原液倒去一半…     

石蜡包埋制作全喉大切片的体会

大切片的制作通常用火棉胶包埋，但其过程复杂，且切片太厚（400μm），不便于组织形态观察。我们用石蜡包埋法制作全喉标本切片，效果满意。1 材 料 尸检切取的全喉和手术切除的喉癌标本，按需要从水平、冠状、矢状面三个方向把喉切开，取材的厚度在3cm左右。用15%的甲醛固定。2 方 法2.1 脱钙 对已有钙化的甲状软骨用5%的硝酸水液脱钙，时间限为72h以内，脱钙后用流水充分水洗。2.2 脱水透明 将全喉放在有盖的容器内依次进行脱水与透明。70%、80%、90%酒精各脱水12h。两次100%洒精各脱水6h；两次二甲苯透明各6h。3.3 浸蜡、包埋 经透明后,…     

眼球标本的石蜡切片制作

眼球标本的石蜡切片制作申姜颖１黄庆玉１姜桃英２柳雅玲１（１病理解剖学教研室，２莱州师范学校）鉴于眼球独特的解剖组织学结构特点，眼球标本组织切片的制作，传统上多用火棉胶或硝化纤维素做为包埋剂。其优点为切片完整，组织收缩小。但整个制片过程费时较长，大约需...     

火棉胶包埋法在海绵窦断层解剖研究中的应用

目的：建立一套以火棉胶包埋技术制备大体断层切片的方法并制作出海绵窦断层切片,为海绵窦的影像诊断学提供解剖学依据。方法：采用火棉胶包埋技术将标本制成连续切片,观察海绵窦在各个数面上的位置、形态、大小和内部结构。结果：火棉胶包埋法制备大体断层切片具有切片薄、无锯耗、无结构变形移位、切片标本易于观察和保存等优点。不同层面海绵窦的大小形态内部结构及毗邻关系明显不同,但同一层面海绵窦内部结构的位置关系基本恒定。冠状位切片观察海绵窦的结构优于横轴位。结论：火棉胶包埋技术是一种较好的大体断层标本制作技术。海绵窦断层解剖研究有助于影像诊断学对海绵窦病变的评价。     

用RT-PCR技术检测石蜡包埋组织中的肠道病毒RNA

目的:应用逆转录PCR技术(RT-PCR)在石蜡包埋的心肌组织切片中检测肠道病毒(柯萨奇病毒B3,CVB3)RNA.方法:用Trizol法从石蜡包埋的心肌组织切片中提取CVB3RNA,用适当的引物合成cDNA第一链,从中取出适量进行聚合酶链反应(PCR).PCR结果用琼脂糖凝胶电泳检测并将PCR产物做核苷酸序列分析.阳性对照采用CVB3感染的人羊膜细胞.结果:用RT-PCR技术可扩增出一条约500 bp(540 bp)的核苷酸片段,测序结果表明是CVB3的一个片段.结论:RT-PCR技术应用于长期保存的石蜡包埋的组织切片进行肠道病毒的检测可获得较满意结果,可将RT-PCR技术用于回顾性研究.     

组织芯片在乳腺癌病理研究中的应用价值

目的探讨组织芯片在乳腺癌病理研究中的应用价值。方法选取105例乳腺癌标本,使用改造的骨髓穿刺针采集组织芯,运用胶水黏贴、石蜡包埋制成组织芯片蜡块,并进行HE切片、染色。结果芯片蜡块所有点阵排列整齐,显微镜下观察HE切片的组织微阵列排列整齐,组织芯彼此分界清楚,基本无掉片、折叠和严重移位。结论手工石蜡包埋制作组织芯片所需工具简单,操作简便而仍有较高质量,适于科研和临床的应用。     

碎小组织石蜡包埋的改进

在制作组织切片中,技术人员对于碎小组织的包埋普遍感到棘手,原因之一是多个碎小组织往往不能包埋在同一平面;其二是在包埋过程中组织容易丢失,且在染色过程中碎小组织容易脱落,从而导致病理诊断的不全面或误诊,继而延长诊断时间,延误病人的治疗。笔经过半年的临床实践,取得     

临床眼球标本切片制作方法改良

目的:改进常规的眼球标本制作方法,并且制作、诊断了15例眼球摘除的病例.方法:眼球的固定,手术摘除后的眼球标本放置于体积大于眼球数倍的容器中,眼球的取材,眼球的脱水、包埋及制片.结果:所有切片效果良好.眼球不变形,外观收缩变形不明显,剖切眼球时肉眼观察未见有固定液性视网膜剥离.结论:本方法省时、操作简单、易于掌握;切片完整,各层结构清楚,细胞排列整齐,染色鲜艳,制作眼球切片选择本方法为佳.     

石蜡制片术中切片过程的常见问题及解决方法

石蜡包埋制片术是组织切片制作最常用的一种技术.其基本步骤包括取材、固定、脱水、浸蜡、包埋、切片、染色和封片等,其中切片是最重要的环节.我们在工作实践中发现,切片制作过程中常常由于多方面的原因在切片这一环节中遇到困难,甚至导致制片失败.针对切片过程中出现的问题,我们积极寻找原因,探究解决问题的方法.现以问题-原因-解决方法的模式,报道如下.     

富含脂肪组织标本制片方法的改进

在病理制片过程中 ,发现富含脂肪组织的标本按常规的脱水程序处理所制取的包埋块 ,切片不顺利 ,经常出现破碎、挤压或切片不完整等现象 ,甚至经脱脂处理的标本切片仍出现上述问题。因此 ,笔者对这类标本的制片方法进行摸索与改进 ,使这类组织切片的质量得以提高 ,介绍如下。1　材料与方法1.1　材料　 10 %福尔马林液固定的脂肪瘤组织标本 8例 ,每例取材 6块 ,大小为 2 .5 cm× 2 cm× 0 .3cm ,并分为 6组。德国莱卡 TP10 2 0型全自动脱水机。1.2　方法1.2 .1　组织按常规方法脱水透明。1.2 .2　石蜡 (熔点为 5 6～ 5 8℃ ) 6 0℃ 1h× 3。1…     

颈部大块组织火棉胶包埋连续切片法

火棉胶包埋技术用于颈廓清大块标本制作,该方面尚未见详细报道。我科自１９８８年以来,采用火棉胶包埋连续切片技术,成功地进行了３００多例颈部大块组织上万张大切片的制作,取得了满意的效果,现介绍如下。１材料与方法１．１标本处理和切片准备１．１．１按解剖位置...     

FISH检测石蜡包埋组织切片的理想消化时间

目的 探讨石蜡包埋组织切片进行荧光原位杂交（FISH）检测前合适的酶消化时间。方法 62例乳腺癌石蜡包埋组织切片,将其中的21张石蜡包埋的组织切片进行间隔5min的梯度时间酶消化,然后光镜下及加入DAPI后荧光显微镜观察。随后继续杂交过程,对杂交信号进行观察。结果 15～20min是一个比较理想的消化时间,背景干净,杂交信号理想,能够很好地进行判读。对剩余的41张石蜡包埋切片进行同样时间的消化后均获得了满意的杂交信号。结论 15～20min是石蜡包埋切片理想的消化时间。本实验仅给出了时间段,并没有给出一个固定值,这同组织标本的个体差异及实验室间制片的差异有关。故建议不同实验室甚至不同批次的标本在进行FISH技术杂交检测之前,应首先对酶消化时间进行调整。     

简易提取石蜡包埋组织DNA

DNA的提取是 PCR成功与否的关键 ,而 DNA提取最好是用新鲜标本 ,但对回顾性研究只能从石蜡包埋组织中提取。传统的石蜡包埋组织 DNA提取是用二甲苯脱蜡 ,酚 -氯仿反复多次的抽提 ,这样使得 DNA不断破坏 ,大量丢失 ,操作非常繁琐 ,费时费试剂 ,不适宜处理大量标本 ,且试剂对人体有毒害作用 ,而得到的 PCR反应的结果阳性率低 ,污染严重。为此 ,本室将传统的石蜡包埋组织 DNA提取法进行改良 ,介绍如下。1　材料与方法1.1　材料　本室 1996～ 2 0 0 0年存档的手术切除的甲状腺癌标本 41例。水浴恒温振摇器 (SHA- C型 ,深圳天南海北实…     

一种快速冷冻切片方法制作小鼠眼球切片

目的快速制作小鼠眼球切片。方法 OCT包埋,用液氮快速冷冻,切片后HE染色。结果制片时间较快,眼球壁结构完整,视网膜各层次清晰,无冰晶形成。结论快速冷冻切片方法能快速制作高质量的切片。