全层铺片技术显示胃肠道不同部位Cajal间质细胞

正Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC),是西班牙神经解剖学家Santiago Ramony Cajal于1893年首次在胃肠道中发现的一类特殊间质细胞,与胃肠道平滑肌和神经纤维末梢在解剖学上有紧密联系,具有独立功能,既是胃肠起搏细胞,又具有传导神经递质的作用~[1]。ICC广泛存在于哺乳动物的整个消化道管壁内,按分布区域可大致分为:分布于胃、小肠和结肠内的环肌与纵行肌之间的肌间神经丛ICC;位于黏膜下环肌层表面的ICC;位于小肠深肌丛区域的ICC;广泛散布于环肌和纵肌肌束内的ICC~[2]。目前消化道全层铺片技术由于能够直观、全面地显示ICC的分布、形态以及形成的细胞网络,而成为研究胃肠神经系统的重要方法之一,但文献中却鲜少提及此方法的详细操作过程。已知ICC特异性表达由原癌基因c-kit编码的受体酪氨酸激酶     

成体干细胞的可塑性研究

近年越来越多的研究表明不同组织中存在的成体干细胞不仅具有自我更新和不断增值的能力,还具有跨胚层分化的能力,这为临床移植医学提供了新的思路。未来医学中,应用成体干细胞及其衍生的组织或器官替代受损的组织细胞治疗急慢性疾病将成为可能。     

豚鼠壶腹Cajal样细胞的分布及Oddi括约肌肌电活动观察

目的 研究成年豚鼠壶腹处Cajal样细胞(ICLC)的分布及Oddi括约肌(SO)的肌电活动.方法 取成年豚鼠壶腹全层铺片,c-Kit免疫细胞化学染色观察ICLC的分布情况;采用黏膜接触电极记录豚鼠SO的肌电活动.结果 壶腹的外侧壁和内侧壁均可观察到c-Kit阳性ICLC,位于环形和纵行平滑肌层内以及两层平滑肌之间.肌内的ICLC细胞呈梭形.肌间的ICLC胞体呈椭圆形或三角形,发出3个以上的有分支的突起,这些细胞相互连接排列成网络状,与十二指肠的肌间丛Cajal间质细胞(IOCs)十分相似.在壶腹外侧壁的内面ICLC与十二指肠的深肌丛ICCs相似.壶腹的内侧壁肌层有大量的ICLC,与平滑肌细胞平行走行.在壶腹开口处,ICLC围绕开口形成一个ICLC环.在SO记录到自发节律性的肌电活动波.结论 壶腹内的ICLC可能参与SO自主节律性运动的调控并与SO运动障碍的发生有关.     

胆碱酯酶及乙酰胆碱的组化显示法

<正> 胆碱酯酶(Cholinesterase ChE)大致分成两类:一类为假胆碱酯酶(或丁酰胆碱酯酶BuChE);另一类为乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase AChE)。二者存在部位不完全相同,BuChE在哺乳动物含量甚微,主要分布於非神经组织、血浆等处,AChE主要位于胆碱能神经的胞体、轴突、神经末梢、骨骼肌、红细胞等处,通常可用AChE染色显示胆碱能神经。AChE染色分光镜和电镜两种,现分述如下:     

植物性神经在猫胆囊及肝外胆道系统的分布

本实验应用乙酰胆碱酯酶染色(AChE)、乙醛酸诱发荧光组织化学法、PAP 免疫组织化学法及生化测定组织中去甲肾上腺素(NA),从铺片和切片角度,对猫胆道系统植物性神经分布进行了观察。结果表明:胆囊壁内胆碱能神经形成两个神经节丛,分布在浆膜下靠近肌层和粘膜固有层。两个     

小肠铺片PAP染色的体会

70年代末,Bloom及同事们提出了“肽能神经”的概念,继后10余年的研究资料表明,胃肠道肽能神经分布广泛,神经肽的种类达数10种,其生物效应与胃肠道许多生理功能有关。近年来,本室在研究胃肠道肽能神经的形态结构和分布等工作中,将全层铺片技术与免疫细胞化学技术相结合,取得了较满意的结果。本文以血管活性肠肽(VIP)为例,将铺片技术与PAP法介绍如下:     

酪氨酸激酶受体KIT在小鼠结肠黏膜上皮的表达及其功能

目的 探讨酪氨酸激酶受体KIT在小鼠结肠黏膜上皮的表达及作用。 方法 应用Western blotting和RT-PCR技术检测c-kit基因及KIT
蛋白在野生型C57BL/6小鼠结肠黏膜上皮的表达;用免疫荧光染色显示野生型C57BL/6小鼠以及乙基亚硝酸钠（ENU）诱变的c-kit基因点突变纯
合子小鼠（Wads ^m/m）结肠黏膜上皮KIT阳性细胞的部位;腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）（30 mg/kg）观察对比野生型以及Wads m/m
小鼠结肠黏膜上皮BrdU掺入情况及动态变化,分析KIT在结肠黏膜上皮更新过程的作用。 结果 RT-PCR检测结果表明,在野生型小鼠结肠黏膜组
织表达 c-kit基因, Western blotting证明在肠黏膜组织存在KIT蛋白;免疫荧光染色显示,KIT阳性细胞位于结肠黏膜上皮,主要位于肠腺隐
窝基底部,但是Wads ^m/m小鼠KIT阳性细胞数以及KIT蛋白表达量较野生型小鼠明显减少;BrdU掺入实验发现,Wads ^m/m小鼠远端结肠黏膜上皮
BrdU摄入和更新速度较野生型小鼠明显减慢。结论 结肠黏膜上皮表达KIT蛋白与结肠黏膜上皮的更新密切相关。     

医学发育生物学课程的构建与实践

发育生物学已成为一门迅猛发展的重要学科。其作为21世纪的前沿学科之一已得到广泛认同，医学发育生物学则是发育生物学在医学领域的一个分支，然而，在我国大多数医学院校既没有开设医学发育生物学专业课程，也缺乏合适的教材。最近，我校尝试开设了医学发育生物学课程，通过对发育生物学的发展简史、一些基本概念和理论知识的了解和认识，特别是结合人体早期胚胎发育的过程和机制、畸形的发生及其机制等，使学员对医学发育生物学有了一些基本的了解。为培养医学领域中跨学科跨层次、适应新世纪需求的高素质医学人才打下良好的基础。     

BDNF基因修饰神经干细胞移植后大鼠脊髓损伤移植处的基因表达变化

目的：了解脑源性神经营养因子（Brain-derived neurotrophic factor,BDNF）基因修饰神经干细胞移植到大鼠脊髓损伤处后的基因表达变化，为脊髓损伤修复提供基础研究资料。方法：大鼠随机分为4组：正常对照组，手术对照组，神经干细胞（Neural stem cells,NSCs）移植组，BDNF－NSCs移植组，各组分4个时相点（7d、1个月、2个月、3个月），利用细胞移植、X-gal组化、免疫组化、原位杂交等方法，观察了移植处细胞的标记基因（LacZ）表达和BDNF、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、神经丝－200（NF－200）的表达。结果：大鼠脊髓损伤移植处细胞中，有标记基因阳性细胞，BDNF强烈表达，尤其是BDNF－NSCs移植组的移植后1周和1个月时。各组各时相点均有GFAP和NF－200免疫反应阳性细胞和纤维。结论：BDNF基因修饰神经干细胞能在脊髓损伤移植处存活，强烈表达BDNF，BDNF基因修饰神经干细胞可以作为脊髓损伤修复的移植材料。     

血管周肾上腺素能神经密度与管壁组成成分的关系

本文应用组织化学技术和电镜方法对家兔、豚鼠和大鼠血管周的肾上腺素能神经密度与管壁组成成分的关系进行了观察。实验结果证明,血管周神经分布于外膜层,中膜内未见有神经分布,肌性动脉(以肠系膜动脉为代表)较弹性动脉(以颈总动脉为代表)的血管周神经密度和含膨体数都较高。神经肌肉间隔近(0.05—3微米),最近者神经与肌肉间除基板外无其它组织成分。弹性动脉神经肌肉间隔较远(1—12微米),神经肌肉间隔以外弹力膜、成纤维细胞和板层状的结缔组织。股动脉和肾动脉周的神经分布特点介于上二者之间。静脉较相应动脉神经分布稀疏。但也存在部位的特殊性和种属差异性。如脐动脉虽属肌性动脉,但动脉周并无神经分布,豚鼠肾动脉周的神经密度远较兔及大鼠稀疏。作者认为血管周的神经密度与血管壁中平滑肌的含量有关。本文并对肌性动脉周神经分布致密的原因,不同类型动脉的神经分布特点与生理功能的关系进行了讨论。