奥沙利铂通过调控miRNA-7-5p/RAF-1促进胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究

目的探讨奥沙利铂如何调控MAPK通路,抑制胃癌细胞的增殖。方法NCBI检索文献,利用TargetScan、StarBase和miRBase数据库,进行GO分析与KEGG通路富集,找到相关miRNAs,预测靶基因。应用Real-time PCR、MTT、Hoechst33258、流式细胞术、细胞划痕实验、Western blot等方法分析人胃癌SGC-7901细胞的增殖、细胞周期、侵袭及蛋白表达情况。结果胃癌细胞中miR-7-5p显著低表达,RAF1与miR-7-5p存在互靶关系。miR-7-5p mimics与奥沙利铂均可促进SGC-7901细胞的凋亡,提高G1期细胞百分率(P<0.05),降低侵袭、迁移速度。caspase3、caspase9蛋白表达升高,Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05)。结论过表达miR-7-5p与奥沙利铂均可促进胃癌SGC-7901细胞的凋亡,提示奥沙利铂可能通过上调miRNA-7-5p促进SGC-7901细胞的凋亡,降低侵袭、迁移速度。     

同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶1及金属蛋白酶组织抑制剂1的影响

背景:同型半胱氨酸已被证实是动脉粥样硬化发生的一个独立危险因素。目的:观察同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶1及金属蛋白酶组织抑制剂1的分泌量和活性的影响。设计:自身对照观察。单位:吉林大学再生医学科学研究所病理室。材料:体外培养的鼠龄4～6周,体质量150g左右雄性Wistar大鼠的血管平滑肌细胞。大鼠由吉林大学白求恩医学部实验动物室提供。方法:实验于2001-05/2003-05在吉林大学再生医学科学研究所病理室完成。采用体外培养大鼠血管平滑肌细胞,分成5组,分别加入浓度为0(对照组),0.10,0.25,0.50和1.00mmol/L同型半胱氨酸作用48h,通过酶谱分析同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞细胞基质金属蛋白酶1活性的影响,Western blot技术和半定量RT-PCR方法观察细胞基质金属蛋白酶1和金属蛋白酶组织抑制剂1分泌量及其mRNA的表达。主要观察指标:细胞基质金属蛋白酶1的活性,金属蛋白酶1和金属蛋白酶组织抑制剂1分泌量及其mRNA的表达。结果:①金属蛋白酶1和金属蛋白酶组织抑制剂1分泌量:半胱氨酸0.25,0.50和1.00mmol/L组金属蛋白酶1显著低于对照组(P<0.05～0.01);半胱氨酸0.10,0.25,0.50和1.00mmol/L组金属蛋白酶组织抑制剂1均高于对照组(P<0.05～0.01);②基质金属蛋白酶1活性随着半胱氨酸剂量增加而降低,0.50和1.00mmol/L组降低显著(P<0.01);③加入同型半胱氨酸4组金属蛋白酶1mRNA表达显著低于对照组(P<0.01)],半胱氨酸0.25mmol/L组金属蛋白酶组织抑制剂1mRNA高于对照组(P<0.05),0.50和1.00mmol/L组显著高于对照组(P<0.01))。结论:同型半胱氨酸通过抑制细胞基质金属蛋白酶1的分泌,抑制其酶活性,减少胶原降解而使胶原蓄积。提示同型半胱氨酸减少胶原降解可能是动脉粥样硬化的发病机制之一。     

rhKD/APPvar对实验性急性肝损伤小鼠肝细胞增殖能力的影响

目的探讨重组人淀粉样蛋白前体Kunitz型蛋白酶抑制剂结构域变异体(Reorganization human Kunitz protease inhibitor domain of amyloid protein precursor variant,rh KD/APPvar)对实验性急性肝损伤小鼠肝细胞增殖能力的影响。方法利用实验鼠的四氯化碳(CCl4)慢性肝损伤模型,采用免疫组化方法,检测各组增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)阳性细胞数。结果正常对照组的PCNA阳性细胞数为(2±2)个/视野,模型组的PCNA阳性细胞数为(6±3)个/视野,rh KD/APPvar小、中、大剂量组的PCNA阳性细胞个数分别为(29±110)个/视野、(38±10)个/视野、(55±12)个/视野,抑肽酶组的PCNA阳性细胞个数为(24±9)个/视野,rh KD/APP组的PCNA阳性细胞个数为(19±5)个/视野。与模型组相比,rh KD/APPvar各剂量组PCNA阳性细胞数目均显著增加(P<0.05),并且存在剂量依赖关系。rh KD/APPvar各剂量组阳性细胞数多于抑肽酶组。结论 rh KD/APPvar能够促进急性肝损伤小鼠肝细胞增殖,其作用随着剂量的增加而增强。     

血管生成素2经PI3K/Akt途径对HCT-8细胞增殖的促进作用

目的:研究外源性血管生成素2(Ang-2)蛋白对结肠癌细胞株(HCT-8)中Tie-2、1-磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、Akt基因及蛋白表达的影响,探讨其与PI3K/Akt通路的关系.方法:用不同浓度的Ang-2蛋白(0、0.2、0.4、0.8、1.2、2.0、3.0 mg·L-1)作用于HCT-8细胞,用MTT法...     

老年人胃癌中PTEN和hTERT表达及两者的相关性

近年来研究表明，端粒酶的激活及其活性上调是恶性肿瘤发病机制中极其重要和关键的一步，其活性高低主要取决于端粒酶逆转录酶（hTERT）的表达水平，hTERT为端粒酶活性的限速因子。第10号染色体缺失的与张力蛋白同源的磷酸脂酶基因（PTEN）是继p53之后近年发现的另一种肿瘤抑癌基因。目前关于胃癌的研究多单纯观察hTERT与胃癌或PTEN与胃癌的关系，但PTEN和hTERT在胃癌中相关性研究的报道很少，为进一步探讨二者在胃癌发生发展中的分子机制，本文观察了二者在胃癌中的表达规律及相互关系，旨为胃癌的早期诊断和治疗提供理论根据。     

硒对心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原合成代谢的影响

目的 研究硒（Se）和去甲肾上腺素（norepinephrine NE）对体外培养的心肌成纤维细胞（cardiacfibroblast CFbs）合成Ⅰ型胶原合成和mRNA表达的影响。方法 采用酶消化法获得Wistar大乳鼠EFbs并进行培养，与NE和Se（Selenium）作用48h后，测定细胞培养液中Ⅰ型胶原和羟脯氨酸含量，利用RT—PCR技术半定量分析细胞中mRNA表达情况。结果 NE组上清液中的Ⅰ型胶原含量（A值）与对照组比较有显著性增加（P〈0．01）；补Se组A值较NE组显著性降低（P〈0．01）；补Se可降低NE引起的羟脯氨酸含量增加，且有显著性差异（P〈0．01）。结论 NE可以促进Ⅰ型胶原含量和CFbsα1Ⅰ型胶原mRNA表达增加，而Se对于Ⅰ型胶原的合成具有抑制作用。     

营养因素对地方性氟中毒的影响

在影响地方性氟中毒发生发展的诸因素中，营养因素提出很早，而要弄清营养因素对地方性氟中毒发病的影响，应把人群调查与实验研究结合起来分析。１蛋白质要区分蛋白质与其他营养素各自的作用有赖于动物实验，但这方面的研究资料并不太多。Boyde等[１]用大鼠研究膳食中蛋白质对氟的生物利用的影响，用半合成纯化饲料，以酪蛋白或乳清蛋白调节蛋白质含量，控制了其他营养因素的影响。其结果表明在同一投氟剂量下，高蛋白饲料组（３６０g／kg饲料）大鼠比低蛋白饲料组（１２０g／kg饲料）大鼠氟的吸收虽然增加，但同时伴有尿中排氟明显增多，…     

caveolin-1在大肠癌中的表达及临床生物学意义

目的：探讨caveolin-1（窖蛋白-1）在大肠癌中的表达及临床意义。方法：采用免疫组化方法分别检测10例大肠正常粘膜、27例腺瘤和78例大肠癌组织中caveolin-1的表达。结果：caveolin-1在正常大肠粘膜、腺瘤及大肠癌中的阳性表达率分别为100％、59．3％和134．6％,两两比较差异具有显著性（P〈0．05,0．01）。caveolin-1与大肠癌的分化程度、淋巴结转移、浸润深度及分期均密切相关（P〈0．05,0．01）,而与年龄、性别无关（P〉0．05）。结论：caveolin-1参与了大肠正常粘膜-腺瘤-大肠癌的发生发展过程,有可能成为判断大肠癌进展和预后的生物学指标。     

应用组织芯片研究CD44v9 mRNA在乳腺癌中的表达及意义

目的：探讨CD44v9 mRNA在乳腺癌发生发展中的作用。方法：应用组织芯片结合原位杂交方法检测60例乳腺癌、20例乳腺良性病变和20例正常乳腺组织中CD44v9 mRNA的表达情况。结果：乳腺癌CD44v9 mRNA的表达明显高于乳腺良性病变和正常组织（P〈0．05）。乳腺癌组织中CD44v9 mRNA的表达与淋巴结转移、远处转移具有显著相关性,但与组织病理分级、肿瘤大小、年龄等无关（P〉0．05）。结论：CD44v9 mRNA在乳腺癌发生发展中起一定作用,与侵袭转移密切相关。     

人激肽释放酶10在卵巢癌组织中的表达及其意义

目的：研究人激肽释放酶10（hK10）在卵巢癌组织中的表达,探讨hK10基因在卵巢癌早期诊断研究中的意义。方法：①应用4 097靶基因点基因芯片对5例卵巢浆液性囊腺癌及5例正常卵巢组织进行基因表达谱分析,筛查差异表达基因。②应用RT-PCR检测32例卵巢浆液性囊腺癌组织、20例卵巢浆液性囊腺瘤组织及16例正常卵巢组织中hK10表达并对比分析。结果：①基因芯片筛查出差异表达基因58个,其中表达增高（上调趋势）基因30个,表达降低（下调趋势）基因28个,hK10基因为表达上调基因（Cy5/Cy3＝3.031）。②hK10基因在正常卵巢及卵巢瘤组织中有弱表达(0.023±0015和0.023±0.045),在卵巢癌组织中表达明显增强(0.106±0.045),hK10基因在卵巢癌组的表达明显高于正常卵巢组及卵巢瘤组（P<0.01）。结论：基因芯片能够用于筛查卵巢癌差异表达基因;hK10基因在卵巢癌组织表达明显增强,有望成为卵巢癌的肿瘤标志物。 