Northern印迹杂光检测胃癌组织中uPA和uPAP mRNA表达及其 …

目的：检测胃癌和相应癌旁组织中ｕＰＡ和ｕＰＡＲ ｍＲＮＡ表达水平,并探讨它们与胃癌的侵袭、转移之间的关系。方法：运用ｃＤＮＡ－ｍＲＮＡ Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂光方法定性和定量地检测了２０例胃癌和相应癌旁组织中ｕＰＡ和ｕＰＡＲ ｍＲＮＡ的表达水平。结果：在在检测的２０例胃癌组织中分别有１３例ｕＰＡ和１５例ｕＰＡＲ ｍＲＮＡ表达显著高于相应的癌旁组织（Ｐ〈０．０１）,其中１２例ｕＰＡ和ｕＰＡＲ ｍＲＮ     

正常胃粘膜、癌旁胃粘膜及胃癌组织Cx32mRNA表达及意义

目的：探讨正常胃粘膜、癌旁粘膜、癌组织中Ｃｘ３２ｍＲＮＡ的表达及意义。方法：应用免疫组化、原位杂交、斑点杂交检测相关指标。结果：在正常胃粘膜中,Ｃｘ３２及ＣｘｍＲＮＡ均以胃粘膜浅层上皮细胞表达最强,并沿胃小凹向下减少;ＰＣＮＡ阳性细胞中Ｃｘ３２及Ｃｘ３２ｍＲＮＡ未见表达;正常胃粘膜、癌旁胃粘膜、癌组织只Ｃｘ３２ｍＲＮＡ的表达依次下降（Ｐ〈０．０１）。结论：胃粘膜Ｃｘ３２与Ｃｘ３２ｍＲＮＡ表达规律相     

人胃癌组织WAF1基因的缺失与不表达

探讨ＷＡＦ１与胃癌的关系，为胃癌基因治疗提供有价值的依据。方法３２例胃癌和３０例正常胃粘膜标本提取细胞ＤＮＡ、总ＲＮＡ，ＭＴＳ１ｃＤＮＡ探针采用随机引物法进行３２Ｐ－ｄＡＴＰ掺入标记，ＷＡＦ１与所提ＤＮＡ、ＲＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析，检测标本中有无ＷＡＦ１的缺失和ｍＲＮＡ的不表达。ｐ５３抗体与提取的蛋白质进行Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析，检测标本中有无ｐ５３的表达。结果ＷＡＦ１Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析结果显示，３２例胃癌标本ＷＡＦ１基因缺失率及ｍＲＮＡ不表达率分别为３４．４％和４０．６％，明显高于正常胃粘膜组。ＷＡＦ１基因缺失率及ｍＲＮＡ不表达与胃癌浸润的深度及分化程度有关，胃癌侵及肌层组ＷＡＦ１基因缺失及ｍＲＮＡ不表达率分别为５２．６％和５７．９％，胃癌未侵及肌层组分别为７．７％和１５．４％，高、中分化胃癌组ＷＡＦ１基因缺失及ｍＲＮＡ不表达率分别为７．１％和１４．３％，而低分化及印戒细胞胃癌组分别为５５．８％和６１．１％。结论胃癌的发生与ｐ５３失活及ＷＡＦ１ｍＲＮＡ不表达有关，胃癌组织中ｐ５３失活与ＷＡＦ１ｍＲＮＡ不表达关系密切。     

胃癌组织中uPA和uPAR mRNA表达及临床意义

目的：探讨ｕＰＡ和ｕＰＡＲ ｍＲＮＡ表达水平与胃癌细胞恶性程度,浸润转移的关系及其临床意义。方法：运用ｃＤＮＡ－ｍＲＮＡ斑点杂交技术定量,平行地检测了２３例胃癌及相应癌旁组织中ｕＰＡ ｍＲＮＡ表达水平,并综合分析了ｕＰＡ和ｕＰＡＲ ｍＲＮＡ表达水平与胃癌临床生物学指征的相关意义。结果：ｕＰＡ和ｕＰＡＲ ｍＲＮＡ表达水平在２３例胃癌组织中,分别有１８例ｕＰＡ和１９例ｕＰＡＲ高于相应癌旁组织;１４例ｕ     

转移相关基因cd44v在胃癌中的表达及其临床意义

为探讨ｃｄ４４ｖｍＲＮＡ拼接和异常表达与胃癌临床病理之间的相关意义,用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测正常胃粘膜、癌旁组织及癌组织的转移相关基因ｃｄ４４ｖｍＲＮＡ表达。对４０份胃组织标本（２０份胃癌组织,１０份癌旁组织,１０份正常胃粘膜）中ｃｄ４４ｖ变异表达产物进行检测。结果显示：有ｃｄ４４ｖｍＲＮＡ阳性表达者：胃癌组织１６／２０,癌旁组织５／１０,正常粘膜０／１０;有淋巴转移者１５／１６,无淋巴结转移者１／４,表达有差异（Ｐ＜０．０５）;有远处转移者５／５。所有４０份胃癌组织、癌旁组织、正常粘膜都表达标准型ｃｄ４４（ｃｄ４４ｓ）,而且两型胃癌中ｃｄ４４ｖ表达有差异（Ｐ＜０．０５）,高分化腺癌（肠型）中２／５,低分化癌（弥漫型）中１４／１５。提示ｃｄ４４ｖｍＲＮＡ在胃癌中的异常表达有普遍性,既可能是早期癌变出现的生物学指标,也可能是判断胃癌转移的有用指标。     

组织蛋白酶B在胃癌组织中mRNA的变化

运用地高辛自由引物法标记１０２０ｂｐ ＣＢ ｃＤＮＡ探针行斑点印迹杂交，检测胃癌手术标本中ＣＢ ｍＲＮＡ含量。结果表明，胃癌组织中ＣＢ ｍＲＮＡ含量非常显著地高于非癌组织（Ｐ〈０．０１），提示ＣＢ在胃癌组织中的表达增高可能与胃癌的进展有关。     

胃癌组织中p16基因mRNA和蛋白的表达及其与p53、Cyclin D1蛋白表达的相关性和临床意义

目的排除正常组织细胞的影响，探讨ｐ１６基因在胃癌发生发展及预后判断上的作用和可能的基因调节机制。方法采用ＣＤＮＡ－ｍＲＮＡ原位核酸杂交和免疫组化技术观察６１例胃癌组织和４９例癌旁非癌组织中ｐ１６基因ｍＲＮＡ和蛋白的表达，并与ｐ５３、ＣｙｃｌｉｎＤ１蛋白表达情况及肿瘤的生物学行为进行相关性分析（Ｘ２检验，Ｗｉｌｃｏｘｏｎ等级秩和检验，配对资料Ｙａｔｅｓ校正Ｘ２检验）。以ＰＣＲ随机引物法制备生物素标记的ｐ１６ＣＤＮＡ探针。结果（１）胃癌组织ｐ１６ｍＲＮＡ的阳性率为５０．８％，ｐ１６蛋白的阳性率为７０．５％，与癌旁正常胃粘膜１００％的阳性率相比，差异具有显著性意义（Ｐ＜０．００１）。１０例早期胃癌ｐ１６ｍＲＮＡ和蛋白均阳性，而５１例进展期胃癌的阳性率分别为４１．２％（２１／５１），６４．７％（３３／５１）。早期与进展期胃癌相比，ｐ１６ｍＲＮＡ和ｐ１６蛋白的阳性率均有显著性差异（Ｐ＜０．００１，Ｐ＜０．０１）。而且在同一切片中也可以观察到分化较好或浸润浅层的癌细胞表达ｐ１６ｍＲＮＡ和蛋白，而分化较差、浸润深层的癌细胞则没有表达。（２）ｐ１６ｍＲＮＡ和ｐ１６蛋白的表达强度与胃癌的分化程度、浸润深度，有无淋巴结转移及病     

组织芯片分析PRSS2蛋白在胃癌组织中的表达与意义

目的 采用组织芯片分析PRSS2蛋白在胃癌组织中表达与意义,为获取胃癌诊断相关的蛋白分子提供实验资料。 方法 首先收集8例胃癌手术切除标本,包括正常胃粘膜、癌旁组织与胃癌组织,选用Western-blotting方法检测PRSS2蛋白在正常胃粘膜、癌旁组织与胃癌组织中的表达;其次运用免疫组织化学染色方法观察组织芯片（包括正常胃粘膜、癌旁和胃癌组织）中PRSS2蛋白在胃癌组织中的表达,分析其临床意义。 结果 胃癌组织中PRSS2蛋白表达较正常胃粘膜和癌旁组织明显升高,癌旁组织中的表达较正常胃粘膜组织升高;正常胃粘膜、癌旁和胃癌组织中PRSS2蛋白的阳性表达率分别为14.29%（5/34）、26.92%（7/26）和77.78%（63/81）,在胃癌组织中高分化、中分化和低分化腺癌的阳性表达率分别为60.00%（3/5）、70.59%（12/17）和81.36%（48/59）;PRSS2蛋白的阳性表达与胃癌组织的分化程度也呈现负相关。 结论 PRSS2蛋白在胃癌组织中表达较正常胃粘膜和癌旁组织高,癌旁组织中的表达较正常胃粘膜组织高,该蛋白表达与胃癌组织的发生和分化程度有关。     

人胃癌组织WAF1基因的缺失与不表达

目的 探讨ＷＡＦ１与胃癌的关系，为胃癌基因治疗提供有价值的依据。方法 ３２例胃癌和３０例正常胃粘膜标本提取细胞ＤＮＡ，总ＲＮＡ，ＭＴＳ１ｃＤＮＡ探针采用随机引物法进行＾３２Ｐ－ｄＡＴＰ掺入标记，ＷＡＦ１与所提ＤＮＡ，ＲＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析，检测标本于中无ＷＡＦ１的缺失和ｍＲＮＡ的不表达。ｐ５３抗体与提取的蛋白质进行Ｗｅｓｔｒｎ印迹分析，检测标本中有无ｐ５３的表达，结果     

胃窦部幽门螺杆菌感染与胃癌发生的相关关系

目的：观察胃窦部幽门螺杆菌感染与胃癌发生的相关关系。方法：应用ＰＣＲ技术对２８例胃癌患者的癌组织,癌旁组织,２８例慢性胃炎胃窦粘膜及２０名正常对照胃粘膜组织中的幽门螺杆菌（ＨＰ）进行了检测,同时应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）了上述患者及正常对照粘膜组织中的ＩＬ－１,ＩＬ－８及ＴＮＦα活性。结果：慢性胃炎粘膜与胃癌癌旁粘膜组织ＨＰ的阳性率明显高于对照组,而胃癌组织中的ＨＰ检出率明显低于胃癌癌旁粘     

胃癌患者CD44v6 mRNA的表达

目的探讨CD44v6在胃癌发展、转移中的作用.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测64例胃癌患者胃癌及其正常胃黏膜CD44v6 mRNA表达.结果胃癌患者胃的正常黏膜有少量CD44v6 mRNA表达;胃癌组织CD44v6 mRNA的表达阳性率高于其正常黏膜.胃癌组织CD44v6mRNA表达阳性率在淋巴结转移患者(75.56%)高于无淋巴结转移者(36.84%),有远处转移者(92.86%)高于无远处转移组(41.87%),患者性别、肿瘤长径＜5cm与≥5cm、肿瘤发生部位、大体类型、组织类型、组织学分化程度、浸润深度和TNM分期与CD44v6表达阳性率无关.结论胃的正常黏膜有少量CD44v6表达,胃癌组织CD44v6表达明显增多,CD44v6表达较多提示淋巴结转移和远处转移的可能.     

口腔鳞癌患者端粒酶催化亚基mRNA的定量检测及其意义

目的探讨端粒酶催化亚基基因(hTERT mRNA)在口腔鳞癌患者中的表达情况及其意义.方法采用实时定量PCR法(qRT-PCR)检测25例鳞癌患者口腔鳞癌组织及其切缘组织,10例正常人口腔黏膜中hTERT mRNA的表达情况并进行比较.结果口腔鳞癌组织中hTERT mRNA的表达量明显高于切缘组织和正常口腔黏膜(P＜0.05),而切缘组织与正常口腔黏膜中hTERT mRNA的表达量无区别(P＞0.05).结论口腔鳞癌中hTERT高表达,口腔切缘和正常口腔黏膜中低或无表达,提示hTERT mRNA活化是口腔癌变过程中的重要事件,hTERT mRNA可以作为检测口腔鳞癌及其切缘安全范围的一个客观量化指标.     

人胃癌组织中cAMP和cGMP浓度的变化

本文比较了人胃癌组织,癌旁组织和正常胃粘膜组织中cAMP和cGMP含量及其比值。结果:①cAMP含量:正常胃粘膜>癌旁组织>胃癌组织(P<0.01);②cGMP含量:正常胃粘膜<癌旁组织和胃癌组织(P<0.001);③cAMP/cGMP比值:正常胃粘膜>癌旁组织>胃癌组织(p<0.001)。结果表明胃癌发生与cAMP水平的降低和cGMP的水平升高有关,提示测定cAMP和cGMP水平及其比值可能有助于胃癌的早期诊断。     

胃癌组织中KiSS-1和基质金属蛋白酶-9蛋白及mRNA的表达

目的探讨肿瘤转移抑制基因KiSS-1及基质金属蛋白酶9（MMP-9）与胃癌侵袭、转移的关系。方法采用免疫组织化学SP法和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测40例胃癌及40例正常胃黏膜组织中KiSS-1及MMP-9蛋白和mRNA的表达情况,分析其与胃癌患者各临床病理特征的关系及二者的相关性。结果胃癌组织中KiSS-1蛋白的阳性表达率（52.5%）低于正常胃黏膜组织（95.0%）（P〈0.05）,并且其低表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。胃癌组织中MMP-9蛋白的阳性表达率（77.5%）高于正常胃黏膜组织（52.5%）（P〈0.05）,并且其高表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移相关（P〈0.05）。胃癌组织中KiSS-1 mRNA的阳性表达率及表达水平（57.5%,0.869±0.063）均低于正常胃黏膜组织（92.5%,1.103±0.152）（P〈0.05）,并且其低表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。胃癌组织中MMP-9 mRNA的阳性表达率及表达水平（75.0%,1.083±0.137）均高于正常胃黏膜组织（47.5%,0.902±0.035）（P〈0.05）,并且其高表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。KISS-1与MMP-9蛋白和mRNA的表达均呈负相关（P〈0.05）。结论 KiSS-1的低表达和MMP-9的过表达可能与胃癌的浸润、转移有关。二者有望成为判定胃癌侵袭和转移能力的指标。     

Expression of heat shock protein 90 beta in human gastric cancer tissue and SGC7901/VCR of MDR-type gastric cancer cell line.

OBJECTIVE To examine the expression of heat shock protein (HSP) 90 beta in human gastric cancer tissue and SGC7901/VCR of MDR-type gastric cancer cell line.

METHODS Immunohistochemical staining and in situ hybridization methods.

RESULTS Heat shock protein 90 beta was mainly located in the cell cytoplasma and weakly expressed in non-cancerous gastric mucosa. The expression rates of HSP90 beta in normal gastric mucosa, gastritis and paracancer tissues were 11.76%, 13.04% and 11.42% respectively, and there were no significant differences between them (P > 0.05). The expression of HSP90 beta was increased in gastric cancer. The positive rate of HSP90 beta in gastric cancer tissue was 30.00%, and was higher than non-cancerous gastric mucosa (P < 0.05). The expression rates of HSP90 beta in well differentiated, moderately differentiated, poorly differentiated gastric cancer and mucinous carcinoma were 15.38%, 31.25%, 33.33%, and 42.85% respectively. The expression of HSP90 beta in SGC7901/VCR of MDR-type gastric cell line was higher than in its parental cell line SGC7901. In situ hybridization showed that the positive signal of HSP90 beta was mainly located in the cell cytoplasma.

CONCLUSIONS The expression of HSP90 beta was higher in gastric cancer tissue than in non-cancerous gastric mucosa. In gastric cancer tissue, the expression of HSP90 beta was greater in poorly differentiated cancer tissue, and in SGC7901/VCR of MDR-type gastric cancer cell line the expression of HSP90 beta was higher than that in its parental cell line SGC7901.

     

胃癌组织及转移淋巴组织中胃泌素基因的表达

目的:分析胃癌患者癌组织及转移淋巴结组织中胃泌素基因的表达,进一步阐明胃泌素与胃癌发生、发展的相关机制,为胃癌的防治提供实验依据.方法:收集胃癌手术患者的癌组织、癌旁组织、淋巴结组织,提取及纯化总RNA,采用Taqman实时荧光定量PCR技术测定胃泌素mRNA的表达.结果:胃泌素mRNA表达在胃癌组织较癌旁组织降低,为...     

Runx3、Bcl-2在胃腺癌中的表达及其与预后的关系

目的研究抑癌基因Runx3与凋亡抑制因子Bcl-2在胃腺癌组织中的表达特征,探讨其与临床病理参数和预后之间的关系。方法用免疫组织化学SP法检测63例胃腺癌组织、19例低级别上皮内瘤变组织及10例因胃良性病变行部分切除的正常胃黏膜组织中Runx3、Bcl-2的表达特征,分析其与患者生存率的关系。结果Runx3在胃腺癌组织中的阳性表达率为39.7%,明显低于低级别上皮内瘤变组织（68.4%）及正常胃黏膜组织（90%）,差异有统计学意义（P〈0.05）。Runx3蛋白的表达与肿瘤的组织学类型、浸润深度及淋巴结转移之间有明显的相关性（P〈0.05）。Bcl-2在胃腺癌组织中的阳性表达率为65.1%,明显高于低级别上皮内瘤变组织（42.1%）及正常胃黏膜组织（20%）,差异有统计学意义（P〈0.05）。Bcl-2蛋白表达与肿瘤浸润深度、TNM分期、淋巴结转移无明显相关性（P〉0.05）。Kaplan-Meier生存分析显示：Runx3阳性表达组患者的总生存率显著高于阴性表达组（P〈0.01）。结论Runx3蛋白低表达及Bcl-2蛋白高表达对胃腺癌发生发展可能起着重要作用,检测其蛋白表达水平对评价患者的预后有重要意义。     

磷脂酶Cε1蛋白在不同部位胃癌细胞中的表达

目的:观察磷脂酶Cε1(PLCE1)在不同部位胃癌组织中的表达,探讨PLCE1在不同部位胃癌组织中的表达情况及PLCE1与胃癌生物学特征的关系。方法:采用免疫组化sp法测定60例贲门部胃癌组织(贲门癌)、60例胃窦部胃癌(胃窦癌)组织和30例正常胃粘膜组织中PLCE1的表达情况。结果:PLCE1在贲门癌组织中阳性表达率为73.3%,高于在胃窦癌组织中的表达率51.7%,高于在正常胃粘膜组织的表达率16.7%;PLCE1在胃窦癌组织中的表达率高于正常胃粘膜组织中的表达率。贲门癌与胃窦癌组织PLCE1的表达与淋巴结转移、原发肿瘤侵润深度及分化程度均有关(P<0.05),与性别、年龄均无关(P>0.05)。结论:PLCE1在贲门癌与胃窦癌的表达率不同,其表达率在不同病理分期中存在差异。     

肝肠钙粘蛋白在新疆哈萨克族胃癌中的表达及意义

目的：探讨肝肠钙粘蛋白（CDHl7）在新疆哈萨克族胃癌中的表达及意义。方法：收集哈萨克族胃癌组织30例、哈萨克族正常胃粘膜组织标本20例,采用RT-qPCR的方法检测两组组织中CDHl7mRNA的表达。结果：CDHl7mRNA在哈萨克族胃癌中的表达量为2．11±O．2．5,明显高于哈萨克族正常胃粘膜组织1．04±0．29（P〈0．01）;CDHl7mRNA的表达与性别、年龄无关而与肿瘤的分化程度相关。结论：CDHl7mRNA在哈萨克族胃癌中的表达显著高于哈萨克族正常胃粘膜组织,CDHl7可能在哈萨克族胃癌的发生及发展中起重要作用。     

健胃愈疡颗粒对消化性溃疡患者胃黏膜VEGF mRNA表达的影响

目的探讨健胃愈疡颗粒(JWYY)对消化性溃疡(PU)患者胃黏膜VEGF mRNA表达的影响,揭示其抗溃疡复发的分子机制.方法将60例胃镜下确诊的G U(中医辨证为肝郁脾虚证)患者,随机分为JWYY治疗组和西药对照组,每组30例;另设胃镜下无胃黏膜病变的患者10例为正常组.两组PU患者第1个疗程结束前后均于胃镜下取溃疡边缘组织活检标本用RT-PCR方法检测VEGF mRNA.结果 JWYY能提高人胃黏膜VEGFmRNA表达,两组经统计学处理无显著性差异.结论 JWYY能增强人胃黏膜VEGF mRNA的上增性表达,从而提高溃疡愈合质量,是JWYY抗消化性溃疡复发作用的部分机制.