甲基汞对大鼠脑单胺类神经介质的影响

甲基汞与氯化镉联合给大鼠腹腔注射,使脑组织5-羟色胺(5—HT)的代谢产物5-羟吲哚乙酸(5—HIAA)含量降低,使去甲肾上腺素(NE)和多巴胺(DA)的含量增加。联合染毒的作用与甲基汞或氯化镉单独的作用不同。在联合染毒时,甲基汞与氯化镉表现为各自的独立作用。 尿中去甲肾上腺素的代谢产物3-甲氧基,4-羟基苯乙二醇硫酸结合物(MHPG-SO_4)可以反映脑中NE的合成和降解,本实验观察到注射甲基汞的大鼠尿MHPG-SO_4含量明显增高。 上述结果都是在染毒后未出现明显的神经症状情况下观察到的,提示大鼠脑功能的早期改变。尿MHPG-SO_4在反映甲基汞对中枢神经毒作用方面的实际意义如何,值得进一步研究。     

肝郁脾虚证患者尿MHPG-SO_4测定及其临床意义探讨

对肝郁脾虚证、脾虚证、肝郁证患者及健康人进行尿MHPG-SO_4测定,结果肝郁脾虚证组、肝郁证组低于健康人组;并就尿MHPG-SO_4测定意义进行了讨论。     

2＇-氟代核苷酸类衍生物的合成

目的合成2’-氟代核苷酸类衍生物,包括尿苷、胞苷与腺苷类衍生物。方法将1,3,5-三苯甲酰-β—D-2-脱氧-2-氟代阿拉伯糖溴化3,5-三苯甲酰-β—D-2-脱氧-2氟代-1溴代阿拉伯糖生成分别与硅醚化的尿嘧啶、胞嘧啶以及腺嘌呤发生氮烷基化反应生成对应的3,5-0-二苯甲酰-2-脱氧-2-氟代尿苷、胞苷、以及腺苷。再将3,5—0-二苯甲酰-2-脱氧-2-氟代尿苷经过水解生成2-脱氧-2-氟代-尿苷,再经醚化反应生成5-二对甲氧基三苯甲基-2-脱氧-2-氟代-尿苷。将3,5-0-二苯甲酰-2-脱氧-2-氟代胞苷经过N-乙酰化生成3,5-二苯甲酰-2-脱氧-2-氟代-N-乙酰化胞苷,再经水解生成2-脱氧-2-氟代-N-乙酰化胞苷。结果成功合成出5-二对甲氧基三苯甲基-2-脱氧-2-氟代-尿苷、2-脱氧-2-氟代-N-乙酰化胞苷和3,5-。-二苯甲酰-2-脱氧-2-氟代腺苷。结论通过1,3,5-三苯甲酰-β—D-2-脱氧-2-氟代阿拉伯糖的溴代以及其产物与硅醚化的尿嘧啶、胞嘧啶和乌嘌呤的氮烷基化反应,可生成3,5-0-二苯甲酰-2-脱氧-2-氟代尿苷、胞苷、以及腺苷,再各自通过水解、醚化;N-乙酰化,水解等步骤可得到目标化合物。     

双(4-氟苯基)—氯甲烷的合成

氟苯挂嗪(Ⅰ)为一种新的高效钙阻滞剂。合成(Ⅰ)的重要中间体为双(4—氟苯基)—氯甲烷(Ⅱ)。本文报道(Ⅱ)的合成及其化学结构的确证。文献的工艺易树脂化,产率低和流程长。我们改进反应条件,缩短了反应时间,获得较高收率。(Ⅱ)的合成是用氟苯与四氯化碳籍无水三氯化铝催化后再水解得双(4-氟苯基)甲酮(Ⅲ),为无色鳞片状结晶,m.p.107—8℃产率63.9%。(Ⅲ)用异丙醇铝/异丙醇还原成双(4-氟苯基)甲醇(Ⅳ),为无色针状结晶,m.p.91℃收率90%。(Ⅳ)用浓盐     

4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对肝癌细胞株HepG2增殖凋亡分化的影响

目的 研究新合成的全反式维甲酸(ATRA)衍生物(4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯)对人肝癌细胞株HepG2体外增殖、凋亡及分化情况的影响.方法 3种浓度(1、5、10 μmol/L)的ATRA衍生物分别处理HepG2细胞,1、2、3、7d后用MTT法检测4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对HepG2细胞增殖的影响;酶动力学法检测γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)比活性和甲胎蛋白(AFP)分泌量变化;流式细胞术分析细胞周期及凋亡情况;Western blot检测HepG2细胞中凋亡相关蛋白的表达量.结果 10 μmol/L的4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯可明显诱导HepG2细胞凋亡,凋亡率达到49%,并且使代表肝细胞恶变的γ-GT比活性、AFP分泌量明显下降,Western blot显示4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯显著抑制Bcl-2、Bcl-xS/L和p-Erk表达.结论 4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯是肝癌细胞HepG2有效的分化诱导剂,并明显促进肝癌细胞凋亡.     

地塞米松抑制试验与尿中3-甲氧基-4-羟基苯乙二醇硫酸酯

在情感性精神病的神经内分泌研究方面,Carroll等认为地塞米松抑制试验(DST)可作为内因性抑郁症实验室诊断的一种手段。约50％内因性抑郁症患者的DST呈非抑制现象(DST阳性)。以往文献中多讨论DST在精神科的临床应用以及影响DST结果的各种因素,未见有关DST与3-甲氧基-4-羟基苯乙二醇硫酸酯(MHPG-SO_4)相互关系的报道。作者最近对35例重性抑郁症患者(男24例,女     

4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯诱导的肺癌细胞的RARα、EGFR转录水平的变化

目的 探讨4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对肺癌细胞RA的Rα、表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响.方法 用4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯处理肺癌细胞24、48、72 h后,用RT-PCR方法分析细胞RARα、EGFR表达的变化.结果 4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯作用于肺癌细胞24、48、72后,A549和L78细胞的EGFR表达下降显著,并呈时间依赖(P＜0.01);A549和L78细胞的RARα表达增加并呈时间依赖(P＜0.05).结论 4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯可以显著降低肺癌细胞EGFR的表达,同时显著增加肺鳞癌细胞RARα表达.     

用4-硝基-1-萘基磷酸酯为底物测定碱性磷酸酶活性

目的：合成4-硝基-1-萘基磷酸酯 (4-nitro-1-naphthyl phosphate,NNPP)为显色底物测定牛小肠粘膜碱性磷酸酶 (alkaline phosphatase, ALP)。方法：4-硝基-1-萘酚(4-nitronaphthol, 4-NNP)与三氯氧磷反应,经硅胶柱纯化制得NNPP;检测产物吸收跟踪水解过程测定初速度,双倒数法测定米氏常数(Michaelis-Menten constant, Km)。结果：ALP水解NNPP产物最大差吸收峰接近460 nm,等吸收波长接近405 nm。与p-硝基苯酚相比,在pH 6.0~7.0间4-NNP消光系数为其3倍以上,在pH 7.0以上为其2倍以上。ALP对NNPP的Km约12?mol/L而p-硝基苯基磷酸酯的Km约35?mol/L,产物磷酸相对NNPP的竞争性抑制常数接近20?mol/L。ALP催化NNPP水解效率接近水解p-硝基苯基磷酸酯的40％。结论：NNPP可用于测定ALP活性, 且有望与作用于p-硝基苯酚类显色底物的其它酶联用实现单通道两种酶同步测定。     

尿胰蛋白酶原-2快速检测在急性胰腺炎诊断中的价值

目的　探讨胰蛋白酶原 -2快速检测在急性胰腺炎中的诊断价值。方法　对 45例急性腹痛患者分别用免疫层析法测定尿胰蛋白酶原 -2和用BECKMANCX9全自动生化分析仪测定尿淀粉酶。结果　 45例急性腹痛患者中有 15例为急性胰腺炎 ,其中 14例尿胰蛋白酶原 -2检测阳性 ,敏感性为 93.3% ( 14 /15 ) ;尿淀粉酶测定 9例阳性 ,敏感性为 6 0 %( 9/15 )。 30例急性腹痛非胰腺炎患者中 ,1例尿胰蛋白酶原 -2检测为阳性 ,其特异性为 96 .7% ( 2 9/30 )。而尿淀粉酶检测 6例阳性 ,特异性为 80 % ( 2 4/30 )。结论　尿胰蛋白酶原 -2检测可作为诊断急性胰腺炎的诊断指标。     

异喹胍及4-羟异喹胍的HPLC测定

本文报道用高效液相色谱法(HPLC)检测尿中异喹胍(Debrisoquine,D)及其在体内的代谢产物4-羟异喹胍(4-hydroxydebrisoquine,HD)排泄量的新方法。并依此计算人体对D的代谢比值,进行志愿者药物羟化代谢的初步研究。胍生(G)为内标,样本用乙酰丙酮衍生化后,经碱化-酸化-碱化溶剂提取。流动相为甲醇:水73:27(v/v),pH3.5,分析柱ODS C_(18),紫外检测波长248nm。尿中D和HD的浓度在0.1～20μg/ml范围内直线相关,r=0.9998,最低检测浓度为0.01μg/ml,四个浓度的方法回收率为97％～103％,天内精密度(CV)1.4％～3.3％,天间精密度(CV)3.0％～5.2％,10例健康志愿者一次口服10 mg D,测算服药后8h内尿中D和HD的含量,代谢比值在0.16—7.95间,均属快代谢型者。     

3-(4-羟基苯基)-6-甲氧基-7-羟基-4H-色烯-4-酮的合成及其抑制新生血管的作用

 目的 合成目标化合物3-(4-羟基苯基)-6-甲氧基-7-羟基-4H-色烯-4-酮(化合物1)，考查该化合物抑制新生血管生长活性。 方法 以异香兰素为起始原料，经过插氧、水解、酰化和环合四步反应合成目标化合物；以新生血管抑制剂2-甲氧基雌二醇为阳性对照，采用人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial Cells, HUVECs)筛药模型和子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells, ESCs)模型分别测定该化合物的新生血管抑制活性和细胞毒性。结果 在合成路线上改进了文献方法，用常规反应替代了文献方法中较难控制的微波反应，同时提高了合成收率；生物活性测定结果显示目标化合物的EC50和TI值分别为47.37 μmol/L和7.39。 结论 首次报道了目标化合物抑制新生血管的作用，该化合物具有与2-甲氧基雌二醇相近的体外活性。     

肝阳上亢证病人尿儿茶酚胺,MHPG-SO_4含量

健康人对照组,肝阳上亢、阴虚阳亢、肝肾阴虚三证型组,分别测定尿儿茶酚胺(CA)、肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)及3—甲氧—4—羟基苯乙二醇硫酸酯盐(MHPG—SO_4)含量并进行组间比较;结果发现肝阳上亢组病人尿CA、NE 含量显著高于健康人组及阴虚阳亢、肝肾阴虚组。三证散组的尿 MHPG—SO_4 含量均显著低于健康人组,各证型组间含量均数差别无显著性。提示尿 CA,NE可考虑为肝阳上亢证的一个临床生化指标。     

氟伏沙明的合成工艺改进

目的：改进氟伏沙明的合成方法。方法：以对三氟甲基苯甲腈为原料，经格氏反应和水解制成5-甲氧基-4’-三氟甲基苯基戊酮，再经肟化制成5-甲氧基-4'-三氟甲基-O-(2-胺乙基)戊酮肟，最后与马来酸成盐制得氟伏沙明。结果：合成产物总收率达36．1%，其结构经核磁共振谱确证。结论：此改进的合成路线是可行的。     

1-［二-(4-氟苯)甲基］-4-取代哌嗪类化合物的合成及抗肿瘤活性

目的:寻找活性强、毒性低的新抗肿瘤化合物。方法:以哌嗪为起始原料,通过与［二-(4-氟苯)］甲基氯反应得到 1-［二-(4-氟苯)甲基］哌嗪Ⅰ,Ⅰ分别通过烷基化、烷基二硫代甲酰化、酰基化和Mannich反应在哌嗪的4-位引入具有抗肿瘤活性的基团,得到 9 个未见文献报道的 1-［二-(4-氟苯)甲基］-4-取代哌嗪衍生物Ⅱa-i。通过SRB法和MTT法测试了它们对 8 种瘤株生长的抑制率。结果:改进了关键中间体Ⅰ的制备方法,使收率由文献的54%提高到74%。初步生物活性实验结果表明, 该类化合物对瘤株 Skov3（人体卵巢癌）较对其它瘤株有较强的抑制率;比较化合物Ⅱc和Ⅱg的结构和活性,可以发现二硫代酯基的存在与否对不同瘤株生长的抑制率有明显影响;4-位引入苄基可使活性有所提高。结论：1-［二-(4-氟苯)甲基］-4-取代苄基哌嗪类化合物值得进一步深入研究。     

尿儿茶酚胺浓度评价β-阻滞剂对血管迷走性晕厥的疗效

目的:评价血管迷走性晕厥患者尿儿茶酚胺在β-阻滞剂疗效预测中的价值.方法:临床诊断为血管迷走性晕厥的患者经直立倾斜试验证实为血管抑制型纳入研究组,同期无晕厥的健康者为对照组.留置试验前24小时尿和试验前后4小时尿测定儿茶酚胺.研究组患者启用治疗β-阻滞剂康可,2.5mg qd,目标值为晨起时自测心率55～65次/分.达目标值后重复上述尿液收集和倾斜试验,继续康可治疗3个月.记录随访过程中的晕厥次数.正常对照不再重复该试验和尿儿茶酚胺测定.结果:共有32例受试者纳入本研究.其中试验组12例(女9,男3),对照组20例(女12例,男8例).试验组治疗2周后重复倾斜试验仅1例结果阴性,然而治疗后3个月内的晕厥次数显著少于治疗前3个月(2.91次与1.43次).试验组治疗前24小时尿NE、E、DA与对照组的比较,差异均无显著性.试验组用β-阻滞剂治疗前直立倾斜试验前后4小时尿儿茶酚胺与对照组比较,前者的NE含量显著少于后者(2.52±0.85)mg与(4.85±1.99)mg,P＜0.01].经β-阻滞剂治疗后NE升高[(4.04±1.67)mg,P＜0.01).结论:直立倾斜试验未能预测β-阻滞剂预防血管迷走性晕厥疗效;倾斜试验前后尿NE含量测定有助于判定β-阻滞剂疗效.     

4-氨基-2-三氟甲基维甲酸酯对乳腺癌细胞株MDA-MB-231迁移的影响及其可能机制

目的研究维甲酸衍生物4-氨基-2-三氟甲基维甲酸酯(ATFMPE)对乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞迁移的影响及可能机制。方法不同浓度维甲酸(ATRA)和ATFMPE处理乳腺癌细胞株MDA-MB-231 48 h后,用MTT法检测ATFMPE对细胞增殖的影响,划痕法检测对细胞迁移的影响,Western blot法检测相关迁移蛋白的表达。结果 AT-FMPE对乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖具有明显的抑制作用,ATFMPE和肌球蛋白轻链激酶(MLCK)抑制剂ML-7对细胞的迁移具有明显的抑制作用,Western blot结果显示ATFMPE显著降低MLCK的表达和肌球蛋白轻链(MLC)的磷酸化。结论 ATFMPE对乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞的迁移具有抑制作用,可能与MLCK表达和MLC磷酸化水平下调相关。     

3-三氟甲基-4-氰基苯胺的合成

以2-溴-三氟甲基苯为起始原料经过硝化、还原、氰化反应三步反应合成3-三氟甲基-4-氰基苯胺。总收率为31．76％。该方法简单易行,适合工业化生产。     

酪氨酸羟化酶在肾上腺髓质增生大鼠肾上腺组织中的表达与意义

目的 :探讨酪氨酸羟化酶 (TH)蛋白在肾上腺髓质增生 (AMH)大鼠肾上腺组织中的表达与肾上腺髓质增生的关系。方法 :雄性Wistar大鼠随机分为 2组 :A组 (正常对照组 ) ,B组 (肾上腺髓质增生组 ) ,每组 2 0只。用利血平诱导肾上腺髓质增生大鼠模型。于 6周末用免疫组化的方法检测两组大鼠肾上腺组织中TH的表达 ,同时检测血清中的NE、E和 2 4h尿 3 甲氧 4 羟基苦杏仁酸 (VMA)的含量。结果 :6周末肾上腺组织中TH的表达肾上腺髓质增生组明显高于正常对照组 (P <0 .0 1 ) ,且与血清中的NE、E和 2 4h尿VMA的含量呈正相关 (r =0 .895 ,0 .6 4 6 ,0 .6 6 7,P <0 .0 1 )。结论 :肾上腺髓质增生大鼠肾上腺组织中TH的表达明显增强 ,且与肾上腺髓质增生病变程度有关。     

尿胰蛋白酶原-2的检测在急腹症中的应用

目的 :评价免疫层析法尿胰蛋白酶原 -2在急腹症中的应用价值。方法 :对 99例急性腹痛病例进行尿胰蛋白酶原 -2及血、尿淀粉酶的检测 ,并比较其敏感性和特异性。结果 :5 4例急性胰腺炎患者中 ,5 2例尿胰蛋白酶原 -2阳性 ,敏感性为 96.3 % ;45例其它急腹症中 ,3例尿胰蛋白酶原 -2阳性 ,特异性为 93 .3 %。而血清淀粉酶检测的敏感性为 85 .2 % ( 4 6/5 4) ,特异性为 84.4% ( 3 8/4 5 ) ;尿淀粉酶检测的敏感性为 79.6% ( 4 3 /5 4) ,特异性为 77.8% ( 3 5 /4 5 )。尿胰蛋白酶原 -2检测的敏感性和特异性均显著高于血、尿淀粉酶 (P <0 .0 5 )。结论 :免疫层析法尿胰蛋白酶原 -2的检测可作为筛选急性胰腺炎的快速而准确的指标     

气相色谱法测定血清和胆汁中胆汁酸

报告气相色谱测定胆汁酸的方法。2ml血清用SEP—PAK C—18短柱萃取、甲醇洗脱、碱水解、乙醚萃取、正庚烷去杂质、六氟丙烷加三氟醋酐衍生化后进样。用ECD(电子捕获检测器)检测。胆汁中胆汁酸浓度较高,取10μl直接碱水解、以后之前处理步骤同血清、用FID(氢火焰检测器)检测。ECD对胆汁酸的检测限有1ng、各种胆汁酸回收率均在83%以上,相关系数在0.99以上。该方法稳定可靠,可供科研和临床常规应用。