尿酸酶在用氧嗪酸建立高尿酸血症模型大鼠体内的降尿酸作用

目的:用尿酸酶抑制剂氧嗪酸建立高尿酸血症大鼠模型,考察尿酸酶的体内降尿酸作用.方法:大鼠腹腔注射氧嗪酸钾建立高尿酸血症大鼠模型,尿酸酶滤菌后尾静脉注射给药;大鼠眼眶静脉采血,据对尿酸酶Vm/Km的改变测定血浆尿酸酶抑制剂含量,动力学尿酸酶法测定血浆尿酸水平.结果:每天腹腔注射氧嗪酸钾持续7 d后,大鼠血浆尿酸可维持在0.40mmol/L以上,但大鼠体内尿酸酶抑制剂也维持在很高水平.持续给予氧嗪酸钾21 d,每只大鼠给予0.5 U聚乙二醇修饰尿酸酶,配对t检验发现血浆尿酸有统计显著性下降,但降幅小于12%;给予低剂量或未经修饰尿酸酶则血浆尿酸水平无显著变化.结论:用尿酸酶抑制剂建立的高尿酸血症动物模型评价尿酸酶的降尿酸作用可靠性有限.     

苦碟子注射液治疗前部缺血性视神经病变的临床效果观察

目的 对苦碟子注射液在治疗之前出现缺血性视神经病变的相关临床效果进行探讨.方法 将我院在2009年1月至2010年9月期间收治的前部缺血性视神经病变的患者53例（53眼）随机分为两组,Ⅰ组患者给予苦碟子注射液治疗;Ⅱ组患者给予丹参注射液治疗,两周之后,对两组患者的疗效进行比较.结果 Ⅰ组患者共有27例,其中治愈、显效和有效分别为6例、8例和8例,其总有效率达到81.48％; Ⅱ组患者26例,治愈0例,显效4例,有效6例,总有效率为38.46％.Ⅰ组患者疗效明显由于Ⅱ组患者（P＜0.05）.结论 使用苦碟子注射液治疗前部缺血性视神经病变能取得较好的疗效,患者视力恢复较好,视野扩大,值得在临床推广使用.     

终点平衡尿酸酶法与动力学尿酸酶法联用测定尿酸

目的:考察终点平衡尿酸酶法和动力学尿酸酶法联用测定尿酸的可行性和线性范围.方法:在25℃下1.2 ml硼酸钠缓冲液(0.20 mol/L,pH 9.2)中用293 nm吸收跟踪尿酸酶反应;测定加入5 μl尿酸酶液前反应体系吸收,加入5 μl苛求芽孢杆菌尿酸酶液后记录5.0 min内吸收变化.终点平衡法以尿酸酶反应前吸收为起点而尿酸完全氧化后吸收为本底,二者之差为尿酸净吸收且同尿酸浓度成正比;动力学法分析尿酸酶反应过程预测本底.分析模拟尿酸酶反应曲线,探索从终点平衡法转换为动力学法的尿酸浓度界限值;实验测定联用法的可行性和线性范围.结果:分析40 U/L苛求芽孢杆菌尿酸酶模拟反应曲线,发现两种方法转换的尿酸浓度界限值可为5.0 μmol/L;分析实验反应曲线证实此界限值可行.在40 U/L尿酸酶时终点平衡法测量范围1.0~6.0 μmol/L;联用法测量范围1.5~60 μmol/L且对30 μmol/L黄嘌呤有抗性;在5.0 μmol/L以下变异系数小于10%而5.0 μmol/L以上可小于5%.结论:这种联用法测定尿酸成本更低、线性范围更宽且效率高.     

联用酶反应过程分析法和初速度法测定谷胱甘肽-S-转硫酶活性

目的:考察联用谷胱甘肽-S-转硫酶(Glutathione-S-transferase,GST)产物抑制反应过程分析法和初速度法测定GST活性的有效性.方法:阳离子交换层析纯化猪肝碱性GST同工酶.在25℃,用1.0 mmol/L 2,4-二硝基氯苯(1-Chloro-2,4-dinitrobenzene,CDNB)和...     

2种聚乙二醇不饱和酸单酯共聚合包被Fe3O4制备磁性微球及其表征

目的：用两种聚乙二醇（Polyethylene glycol,PEG）不饱和酸单酯经自由基共聚包被纳米Fe3O4磁芯制备磁性微球,考察其功能化后特异性和非特异性结合作用。方法：水解沉淀法制备纳米Fe3O4磁芯;用PEG-350单甲醚丙烯酸酯和PEG-1540单顺丁烯酸单酯为单体,在正庚烷-水组成的油包水体系自由基共聚制备磁性微球;将微球表面来自PEG-1540的羟基经甲磺酸酯活化、连接乙二胺后再用活化生物素修饰。透射电镜观察其外貌;测定与碱性磷酸酶标记链亲和素（Streptavidin labeled by alkaline phosphate,AP-SAV）的特异性结合、与4-硝基-1-萘酚苯甲酸酯等的非特异性结合。结果：所得Fe3O4粒径60 nm左右,生物素修饰后粒径接近200 nm。此磁性微球可从混合蛋白中选择性分离碱性磷酸酶酶标记的链亲和素,结合容量约51 ng蛋白/g磁性微球;4-硝基-1-萘酚苯甲酸酯在浓度很低时同此磁性微球的结合低于检测限,在浓度高达64 ?滋mol/L时仍无显著结合。结论：用两种PEG不饱和酸酯共聚包被Fe3O4可制备表面亲水磁性微球,功能化后有特异相互作用且非特异性作用很弱,但还需提高此磁性微球功能化后的特异性结合容量。     

卵磷脂络合碘治疗玻璃体混浊的临床研究

目的观察卵磷脂络合碘治疗玻璃体混浊的临床疗效和安全性。方法选择具有玻璃体混浊体征的眼科患者共216例（265眼）,随机分为两组。对照组患者给予氨碘肽滴眼液滴眼治疗;观察组患者给予卵磷脂络合碘片口服,0.2mg／次,3次／d。连续治疗8周,观察并比较两组患者的治疗效果和安全性。结果对照组总有效率为88.64％;观察组总有效率为89.47％。两组患者总有效率比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。两组患者用药后均未发生1例不良反应。结论采用卵磷脂络合碘口服治疗玻璃体混浊,可以取得与氨碘肽滴眼液相当的治疗效果。通过口服的给药途径,患者用药依从性好。     

用4-硝基-1-萘基磷酸酯为底物测定碱性磷酸酶活性

目的：合成4-硝基-1-萘基磷酸酯 (4-nitro-1-naphthyl phosphate,NNPP)为显色底物测定牛小肠粘膜碱性磷酸酶 (alkaline phosphatase, ALP)。方法：4-硝基-1-萘酚(4-nitronaphthol, 4-NNP)与三氯氧磷反应,经硅胶柱纯化制得NNPP;检测产物吸收跟踪水解过程测定初速度,双倒数法测定米氏常数(Michaelis-Menten constant, Km)。结果：ALP水解NNPP产物最大差吸收峰接近460 nm,等吸收波长接近405 nm。与p-硝基苯酚相比,在pH 6.0~7.0间4-NNP消光系数为其3倍以上,在pH 7.0以上为其2倍以上。ALP对NNPP的Km约12?mol/L而p-硝基苯基磷酸酯的Km约35?mol/L,产物磷酸相对NNPP的竞争性抑制常数接近20?mol/L。ALP催化NNPP水解效率接近水解p-硝基苯基磷酸酯的40％。结论：NNPP可用于测定ALP活性, 且有望与作用于p-硝基苯酚类显色底物的其它酶联用实现单通道两种酶同步测定。     

ＢＲＦ２ 基因及在肺癌中的作用研究进展

肺癌位居恶性肿瘤发病率第一位,是威胁人类健康的重大疾病。ＢＲＦ ２ 基因位于染色体 ８ｐ １２ 位 置,参与 ＲＮＡ 聚合酶Ⅲ催化小分子 ＲＮＡ 生成。ＢＲＦ ２ 基因与 ＲＮＡ 聚合酶Ⅲ之间的关系决定了 ＢＲＦ ２ 在肿瘤发 生发展过程中存在重要作用。研究发现 ＢＲＦ ２ 在非小细胞肺癌中过度表达,同时作为癌基因,保护癌细胞免受 氧化应激的影响,并在上皮间充质转化中促进了肿瘤细胞的转移与扩散。通过研究,希望将 ＢＲＦ ２ 作为靶点实 现对非小细胞肺癌更精准的诊断及治疗。