香烟烟油对粒细胞吞噬功能作用的化学发光研究(简报)

香烟烟油可诱导AHH(芳烃羟化酶),从而使致癌物经代谢活化成为带有亲电子基团的终致癌物,引起细胞癌变。有关从烟油对免疫机能的影响,应用化学发光法(Chemical light,CL)研究烟油对吞噬功能作用以推测对细胞癌变的影响,国内外尚未见报道。作者用Luminol和Lucigenin作为CLP(化学发光探针),检测了全血吞噬CL。结果发现,二者的吞噬CL的强度与所加烟油剂量之间呈现抑制效     

抗P-选择素功能域单抗体外抗黏附作用的实验研究

目的 观察针对P-选择素的抗P-选择素ktin-EGF功能域单抗(PsL-EGFmAh)体外抗黏附功能。方法 常规培养或制备人脐静脉内皮细胞(ECV-304)、中性粒细胞及肾小管上皮细胞(HK2细胞)，并对ECV-304和HK2细胞行炎症因子TNF-d刺激，然后观察和比较经PsL-EGFmAh和抗P-选择素全长单抗以及配体拮抗剂Ⅳ一去硫酸肝素处理前后，中性粒细胞与ECV-304细胞黏附变化，以及HK2细胞的黏附分子(P-选择素)和共刺激分子(CD80)表达情况。结果 经PsL-EGFmAb等三种药物处理后，中性粒细胞与受刺激ECV-304细胞黏附量随药物浓度均下降，受刺激后HK2细胞的P-选择素表达及CD 80mRNA转录水平也均受到抑制，其中尤以PsL-EGFmAh抗黏附抑制效应更明显。结论 抗P-选择素功能域单抗较其他两种药物更具体外抗黏附靶向抑制效应，为进一步研究针对P-选择素抗黏附作用提供了基础。     

抗P-选择素功能域单抗体外抗黏附作用的实验研究

目的观察针对P-选择素的抗P-选择素lectin-EGF功能域单抗(PsL-EGFmAb)体外抗黏附功能.方法常规培养或制备人脐静脉内皮细胞(ECV-304)、中性粒细胞及肾小管上皮细胞(HK2细胞),并对ECV-304和HK2细胞行炎症因子TNF-α刺激,然后观察和比较经PsL-EGFmAb和抗P-选择素全长单抗以及配体拮抗剂N-去硫酸肝素处理前后,中性粒细胞与ECV-304细胞黏附变化,以及HK2细胞的黏附分子(P-选择素)和共刺激分子(CD80)表达情况.结果经PsL-EGFmAb等三种药物处理后,中性粒细胞与受刺激ECV-304细胞黏附量随药物浓度均下降,受刺激后HK2细胞的P-选择素表达及CD80mRNA转录水平也均受到抑制,其中尤以PsL-EGFmAb抗黏附抑制效应更明显.结论抗P-选择素功能域单抗较其他两种药物更具体外抗黏附靶向抑制效应,为进一步研究针对P-选择素抗黏附作用提供了基础.     

5 Gy全身照射对大鼠伤口巨噬细胞的抑制效应及W11-a12的促愈作用

目的 研究大鼠全身5Gy照射对伤口巨噬细胞（MΦ）功能的影响及W11－a12的促愈作用。方法 采用^60Coγ射线身身照射复合皮肤创伤模型,观察了MΦ酵母－补体复合物玫瑰花环形成试验、吞噬功能和分泌纤维粘连蛋白（FN）、转化生长因子β1（TGFβ1）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的功能。结果 大鼠5Gy全身照射复合皮肤创伤后第3、5天伤口内巨噬细胞C3b受体表达、吞噬功能,合成与分泌FN、TGFβ、bFGF的功能均显著受到抑制,但抑制效应的程度不同,MΦ的吞噬功能的抑制重于其分泌功能,分泌TGFβ1功能的抑制重于分泌bFGF的功能,W11-a12能显著逆转辐射对MΦ功能的抑制效应。结论 伤口MΦ功能受抑是合并放射损伤后伤口难愈的主要原因,增强MΦ功能是W11－a12促愈作用的一个途径。     

中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂在疾病中的作用

中性粒细胞衍生的弹性蛋白酶破坏组织、增加血管的通透性、促进中性粒细胞移行。中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂可以通过抑制中性粒细胞弹性蛋白酶活性减少组织损伤,此外,它还具有抗炎、调节免疫功能。近年来研究发现,它可以保护器官损伤,尤其是中性粒细胞介导的组织损害。现就中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂在些疾病中的作用做一综述。     

肝硬化患者中性粒细胞吞墨试验观察

<正> 中性粒细胞吞噬微生物的作用是机体防御感染的重要机制之一,与单核细胞的吞噬功能相比,中性粒细胞主要针对化脓性细菌和某些真菌。肝硬化患者之易遭细菌性感染,除肝脏清除和杀灭入血细菌的能力受损外,也与患者中性粒细胞趋化、移动抑制及吞噬功能减退相关。本文主要报道25例肝硬化患者中性粒细胞吞噬墨汁试验的观察结果。     

老鹳草素对血小板聚集和血小板-中性粒细胞之间相互作用的影响

目的 研究老鹳草素抗血小板聚集作用及其对血小板与中性粒细胞之间相互作用的影响.方法 采用Born方法观测老鹳草素在体内和体外对家兔血小板聚集功能的影响,运用玫瑰花结实验测定血小板与中性粒细胞的黏附反应,以Fura-2-AM为荧光指示剂,检测老鹳草索对激活的血小板内钙水平的影响.结果 老鹳草素在体外呈浓度依赖性明显抑制花生四烯酸(AA)、腺苷二磷酸(ADP)及血小板活化因子(PAF)诱导的血小板聚集功能.其半数抑制浓度(IC50)分别为2.4、0.4和1.1μmol/L;5 mg/kg的老鹳草素灌胃亦明显抑制AA、ADP和PAF诱导的血小板聚集;老鹳草素显著降低洗涤血小板内钙离子浓度、减少细胞外钙内流及内钙释放,其IC50分别为71.9、84.9、62.9 μmol/L.老鹳草素明显阻抑凝血酶激活的血小板与中性粒细胞之间的黏附作用,并抑制肉豆蔻佛波醇(fMLP)激活的中性粒细胞上清液诱导的血小板聚集功能,其IC50分别为3.2和10.2 μmol/L.结论 老鹳草素明显抑制血小板聚集功能,降低血小板内钙水平,同时阻抑血小板与中性粒细胞之间的相互作用.     

肾上腺素能受体及其亚型在海马调节机体细胞免疫功能中的作用

用 MTT法测定 Con A刺激脾淋巴细胞的增殖活性 ,研究了在大鼠海马中微量注射去甲肾上腺素 (NE)对细胞免疫功能的影响 ,探讨了α及β受体在此影响中的作用。发现 :1海马内微量注射 NE对 Con A刺激的脾淋巴细胞增殖反应产生抑制效应 ,此效应能被 α及 β受体阻断剂酚妥拉明、心得安所阻断。 2 β、β1 及 β2 受体激动剂异丙基肾上腺素 (ISO)、Dobutam ine、Metaproterenol均能抑制 Con A刺激的脾淋巴细胞增殖反应。心得安可阻断 β2 受体激动剂的免疫抑制效应。提示 :海马内的 NE对大鼠细胞免疫功能有抑制效应 ,此效应由肾上腺素能 α及 β受体共同介导。     

酒精中毒大鼠全身性细胞免疫功能的测定

目的：探讨酒精中毒时大鼠细胞免疫功能的变化。方法：采用外周血中性粒细胞吞噬实验、白细胞移行抑制实验检测酒精中毒大鼠非特异性与特异性细胞免疫功能的变化。结果：酒精中毒大鼠外周血中性粒细胞吞噬率低于对照组,而白细胞移行抑制指数则高于对照组。结论：酒精中毒大鼠特异性与非特异性细胞免疫功能受到明显抑制。     

去甲肾上腺素对豚鼠回肠纵肌标本中脑啡肽能神经抑制效应的加强作用

已有许多实验表明,脑啡肽能抑制肾上腺素能神经的作用。还有资料证明,10Hz电场刺激豚鼠回肠纵肌标本产生的抑制效应是脑啡肽能神经的作用。本工作以此模型作为实验对象,观察到去甲肾上腺素能加强脑啡肽能神经的抑制效应。并且,在一定范围内,这种加强作用随去甲肾上腺素的剂量加大而增强。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿患者尿激酶受体的表达及临床意义

目的:检测尿激酶型纤溶酶原激活物受体在阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)患者中的表达,并探讨其与PNH诊断以及血栓形成的关系。方法:PNH患者22例,其中4例伴血栓形成;单纯心/脑血栓形成患者20例;健康志愿者20例。以流式细胞术检测外周血粒细胞上CD87的表达,ELISA法检测血清可溶性尿激酶受体(su鄄PAR)。结果:健康志愿者外周血CD87 粒细胞比例皆>90%,单纯心/脑血栓形成组与健康志愿者组表达率差异无统计学意义。与其他两组相比,PNH患者外周血CD87 粒细胞百分率显著降低(P<0.01)。PNH组血清su鄄PAR水平显著升高(P<0.01),PNH患者伴血栓形成组与不伴血栓形成组比较,前者外周血CD87 粒细胞比例明显降低,血清su鄄PAR水平显著升高(P<0.01)。PNH患者血清su鄄PAR与CD87 粒细胞百分率呈负相关。结论:PNH患者外周血CD87 粒细胞百分率显著降低,血清su鄄PAR水平明显增高,与血栓形成并发症相关。以流式细胞术检测粒细胞CD87及血清su鄄PAR,有助于PNH的诊断及监测血栓形成的病情变化。     

Characteristics of lymphocytes and granulocytes removed from whole blood by buffy coat depletion. Comparison of an automated bottom-and-Top processing system and the manual technique

BACKGROUND: Characteristics of lymphocyte and granulocyte removal were studied during the processing of fresh human blood by buffy coat (BC) depletion. The manual technique of BC depletion and that performed in a bottom-and-top (BAT) semiautomated system were compared. Blood cells were counted in the resulting components. RESULTS: Removal efficiency in lymphocytes and granulocytes correlated to the loss of erythrocytes due to removal of the BC. Sigmoidal curves showed good fit to experimental data. Variables of the equations differed substantially concerning removal of lymphocytes and granulocytes. The bottom-and-top bag in the semiautomated system resulted in better efficiency in leukocyte removal compared to the conventional manual technique.98% of lymphocytes may be removed from whole blood in the semiautomated BAT system. Removal efficiency of granulocytes is inferior compared to that of lymphocytes. Performance characteristics of the semiautomated BAT technique appeared superior when compared to the conventional manual technique. CONCLUSIONS: Substantial variability was observed in granulocyte removal efficiency in both systems. The present study may contribute to the production of erythrocyte preparations with less contaminating leukocytes and to standardize semiautomated blood processing.     

粒细胞在犬烟雾吸入性肺损伤中的作用

利用重度犬烟雾吸入伤模型,观察了血中粒细胞的动态变化,及其在烟雾吸入性肺损伤中的作用。伤后血中粒细胞很快向肺内聚集和浸润;多核粒细胞(PMN)对自体细胞的毒性效应显著增强;PMN释放的髓过氧化物酶不断增加;代表氧自由基产生的PMN化学发光显著改变;这些变化均先于肺损伤,与其损伤时相基本一致。提示肺内粒细胞聚集和浸润在吸入性肺损伤中具有重要作用,颗粒酶和氧自由基可能是粒细胞介导肺损伤的效应因素。     

尿激酶受体在血栓性疾病中的表达及临床意义

目的：检测尿激酶型纤溶酶原激活物受体(u—PAR)在阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)患和心肌梗死、脑梗死患中的表达，并探讨其临床意义。方法：PNH组22例，其它血栓形成组20例，其中心肌梗死10例，脑梗死10例，健康对照组20例。以流式细胞术检测外周血白细胞上u—PAR的表达，BLISA法检测血清su—PAR。结果：健康对照组外周血粒细胞中u—PAR^ 细胞比例皆＞90％，其它血栓形成组与健康对照组表达率无显性差异。PNH患外周血粒细胞u—PAR^ 细胞显降低，与其它两组相比，有显性差异。其它血栓形成组和健康对照组血清su-PAR水平较低，范围较窄，而PNH组血清su-PAR水平显升高，且离散度较大，与另两组有显性差异。PNH伴血栓形成su—PAR水平显升高。PNH患中血栓阳性组与血栓阴性组比较，外周血粒细胞u—PAR表达率明显降低，血清su—PAR水平显升高，均有显性差异。PNH患血清su-PAR与u—PAR^ 细胞百分率呈负相关。结论：PNH患外周血粒细胞u-PAR表达率降低，血清su-PAR水平明显增高，与血栓形成并发症相关。以流式细胞术检测细胞u—PAR并检测血清su—PAR有助于监测PNH患血栓形成。     

具有肿瘤杀伤活性粒细胞的筛选及其体外抑瘤效应观察

目的探索具有肿瘤杀伤活性(CKA)粒细胞的筛选方法,并对其体外抑瘤效应进行初步研究。方法(1)收集健康志愿者外周抗凝全血21份,分离粒细胞,与人肺癌A549细胞共培养,通过检测肿瘤细胞增殖活性筛选出CKA粒细胞。(2)将筛选得到的CKA粒细胞作用于不同种类的肿瘤细胞,采用CCK8法检测肿瘤细胞活性,双染法检测肿瘤细胞凋亡发生情况。(3)分别采用直接接触、Transwell共培养、条件培养液等共培养细胞方式,观察不同处理方式对CKA粒细胞抑制肿瘤细胞活性的影响。结果(1)有6株粒细胞克隆对A549细胞活性具有明显的抑制作用,将其中作用最显著的克隆3标记为CKA粒细胞。(2)CKA粒细胞不仅对人肺腺癌细胞A549、人肝癌细胞HepG2和人宫颈癌细胞HeLa生长活性有明显抑制作用,且能促进这3种细胞的凋亡。(3)3种处理方式的抑制效率比较:直接接触＞Transwell＞条件培养。结论CKA粒细胞对某些类型的肿瘤细胞活性具有明显的抑制作用;CKA粒细胞对肿瘤的杀伤作用可能与其与肿瘤的接触方式有关。     

Reduced tar, nicotine, and carbon monoxide exposure while smoking ultralow- but not low-yield cigarettes

An unresolved public health issue is whether some modern cigarettes are less hazardous than others and whether patients who cannot stop smoking should be advised to switch to lower-yield cigarettes. We studied "tar" (estimated by urine mutagenicity), nicotine, and carbon monoxide exposure in habitual smokers switched from their usual brand to high- (15 mg of tar), low- (5 mg of tar), or ultralow-yield (1 mg of tar) cigarettes. There were no differences in exposure comparing high- or low-yield cigarettes, but tar and nicotine exposures were reduced by 49% and 56%, respectively, and carbon monoxide exposure by 36% while smoking ultralow-yield cigarettes. Similarly, in 248 subjects smoking their self-selected brand, nicotine intake, estimated by blood concentrations of its metabolite cotinine, was 40% lower in those who smoked ultralow but no different in those smoking higher yields of cigarettes. Our data indicate that ultralow-yield cigarettes do deliver substantial doses of tar, nicotine, and carbon monoxide, but that exposures are considerably less than for other cigarettes.     

免疫磁珠法及密度梯度离心法分离纯化人外周血中性粒细胞的比较

目的比较免疫磁珠法和密度梯度离心法分离纯化人外周血中性粒细胞的可靠性。方法用免疫磁珠法和密度梯度离心法分别分离中性粒细胞,使用血球计数仪结合显微镜鉴定细胞纯度、回收率,以台盼蓝检测细胞活力。结果免疫磁珠法与密度梯度离心法分离中性粒细胞纯度分别为（98．76±0．53）％,（92．34±1．57）％,回收率分别为（90．01±2．24）％和（82．20±2．17）％,两种方法分离后中性粒细胞活力分别为（95．60±2．30）％,（94．20±3．11）％。结论免疫磁珠法分离人中性粒细胞纯度及回收率均好于密度梯度离心法,但分离后细胞活性二者差异不大。     

两种白细胞滤器获取单个核细胞作为实验研究的生物学功能的比较*

目的：分析单采血小板去白细胞滤器(apheresis platelet leukoreduction system chambers, LRSCs)和全血去白细胞滤器(whole blood leukoreduction filters, LRFs)所收集的白细胞替代常规人全血白细胞进行实验的相关生物学功能和表型。方法：分别采用直接法和反冲洗获得LRSCs和LRFs白细胞，经人的淋巴细胞分离液进行密度梯度离心，分离出外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)。用CD3激发型抗体和细胞因子白细胞介素2(interleukin, IL-2)体外扩增培养10 d，观察细胞形态、细胞增殖、细胞凋亡，并用流式细胞术(flow cytometry, FCM)进行表型分析，对比两种滤器分离出的白细胞生物学差异。结果：(1)PBMCs镜下观察：LRSCs中细胞较纯，个体大小较均一；LRFs包含部分形态较小的血小板和形态较大的粒细胞。两者细胞活力无差异。(2)LRSCs所分离的PBMCs细胞亚群以淋巴细胞为主，单核细胞次之，含极少量的粒细胞；而LRFs淋巴细胞与粒细胞比例接近，单核细胞较少。初始状态淋巴细胞群体中各细胞亚群表型相似。(3)LRSCs-PBMCs细胞，经CD3与IL-2体外刺激后，细胞活化集落大且较均一，而LRFs-PBMCs细胞集落多但分布较散。(4)体外培养第6天、第10天两组滤器间淋巴细胞各亚群表型差异无统计学意义。(5)两种滤器血PBMCs细胞凋亡率类似，且均为早期凋亡细胞比例高于晚期凋亡细胞。(6)经体外扩增培养10 d，发现两种滤器血PBMCs细胞增殖速率相当，细胞活力等同。结论：两种滤器所得的白细胞均可用于相关的基础实验研究，且LRFs含有较多的粒细胞，这也为粒细胞的研究工作提供了便利，解决了临床用血与实验用血的需求。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者3种GPI锚定蛋白表达的改变

目的 比较阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者血细胞表面3种糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚定蛋白表达情况。方法 流式细胞术检测25例PNH患者粒细胞表面GPI锚定蛋白CD55、CD59和CD87的表达水平，并分析它们在不同疾病状态下的改变。结果 PNH患者粒细胞表面3种GPI锚定蛋白间具有较好的相关性(P均＜0．05)，红细胞表面CD55和CD59也表现出相关(P＜0．01)，但与粒细胞表面CD55和CD59的缺乏情况并不一致。结论 PNH患者同一系血细胞表面GPI锚定蛋白呈平行关系，这有助于对PNH发病机制的进一步了解。     

人尿集落刺激因子对受照小鼠外周血粒细胞存活和吞噬功能的影响

应用MTT活细胞测定法和3H-TdR细菌掺入法，观察人尿集落刺激因子（CSF）体外加入对受照小鼠外周血成熟粒细胞存活以及体内注射对外周血吞噬功能的影响．结果表明：体内加入一定浓度的CSF能提高外周血粒细胞的存活，且有良好的剂量效应关系．同时入尿CSF能增强受照鼠外周血的吞噬功能．提示入CSF具有辐射保护作用可能与之有关．