桂枝茯苓丸调节PI3K/Akt/mTOR通路对PCOS-IR大鼠排卵障碍的影响

目的:探讨桂枝茯苓丸对来曲唑联合高脂乳剂导致的多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗(PCOS-IR)大鼠排卵障碍的影响。方法:将72只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、二甲双胍组和桂枝茯苓丸低、中、高剂量组,每组12只。除空白组外,其余大鼠每日予来曲唑0.001 g·kg^-1结合高脂乳剂15 mL·kg^-1连续灌胃30 d建立PCOS-IR大鼠模型。桂枝茯苓丸低、中、高剂量组每日分别灌服桂枝茯苓丸混悬液0.31,0.62,1.24 g·kg^-1,二甲双胍组每日灌服二甲双胍混悬液0.27 g·kg^-1,空白组和模型组每日灌服12 mL·kg^-1生理盐水,共干预30 d。苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢组织病理形态学变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清促卵泡生成素(FSH),促黄体生成素(LH),睾酮(T),空腹胰岛素(FINS)水平,计算LH/FSH,胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)值;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠卵巢组织中磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路相关分子及自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin-1),自噬相关基因5(Atg5),微管相关蛋白轻链3(LC3)Ⅱ蛋白表达水平;免疫组化(IHC)检测Beclin-1,LC3Ⅱ蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠卵巢中各级卵泡、卵泡颗粒细胞层厚度也减少,黄体数量明显减少,而卵巢白膜厚度增加,闭锁卵泡及囊状扩张卵泡数量明显增多;血清T,LH,LH/FSH,FINS,HOMA-IR显著升高(P<0.01);卵巢组织中磷酸化(p)-PI3K,p-Akt,p-mTOR蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01);自噬相关蛋白LC3Ⅱ与Beclin-1的相对表达量明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,桂枝茯苓丸低、中、高剂量组及二甲双胍组囊状扩张卵泡数、闭锁卵泡数减少,卵泡颗粒细胞层厚度增加,可见到各级卵泡分布及较多黄体;桂枝茯苓丸低、中、高剂量组血清T,LH,LH/FSH,FINS,HOMA-IR明显降低(P<0.05,P<0.01),二甲双胍组血清FINS,HOMA-IR显著降低(P<0.01);各给药组p-PI3K,p-Akt,p-mTOR蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01);桂枝茯苓丸中、高剂量组LC3Ⅱ,Atg5与Beclin-1蛋白表达量显著降低(P<0.01)。结论:桂枝茯苓丸可激活颗粒细胞PI3K/Akt/mTOR信号通路,抑制颗粒细胞过度自噬,改善卵巢功能及胰岛素抵抗,恢复排卵,并且以高剂量效果更佳。     

丹参酮ⅡA调控PI3K/Akt/mTOR通路对高脂血症大鼠肝脏自噬的影响

目的:基于PI3K/Akt/mTOR自噬信号通路探讨丹参酮Ⅱ改善高脂血症大鼠肝脏脂质沉积的作用机制。方法:30只SPF级,健康雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组和治疗组。正常组每日给予普通大鼠饲料喂饲;模型组、治疗组予高脂饲料喂饲。造模4周后,治疗组予丹参酮ⅡA磺酸钠10 mg/(kg·d)腹腔注射;正常组、模型组予等体积生理盐水腹腔注射。用药8周后,全自动生化分析仪检测大鼠血脂情况,HE、油红O染色观察肝脏组织形态学变化,Western blot技术检测PI3K、p-Akt、p-mTOR及Beclin1蛋白表达。Real time-PCR技术检测Beclin1 mRNA水平。结果:与正常相比,模型组TG、TC和LDL-C水平升高(P<0.05或P<0.01),HDL-C水平降低(P<0.01);与模型组相比,治疗组TC、TG、LDL-C、HDL-C水平均无明显改变(P>0.05)。形态学结果显示,与模型组相比,治疗组大鼠肝脏脂肪空泡与脂质沉积减少。Western blot结果显示,与正常组相比,模型组PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白水平上调,Beclin1蛋白表达水平下调(P<0.01);与模型组相比,治疗组pAkt、p-mTOR蛋白表达水平下调,Beclin1蛋白表达水平上调(P<0.01),PI3K蛋白表达水平呈下调趋势。Real time-PCR结果显示:与正常组相比,模型组Beclin1 mRNA水平下调(P<0.01);与模型组相比,治疗组Beclin1mRNA水平上调(P<0.01)。结论:丹参酮ⅡA可能通过调控PI3K/Akt/mTOR自噬信号通路,增强高脂血症大鼠肝脏自噬水平,减少肝脏脂质沉积。     

金钗石斛生物总碱对糖尿病大鼠血糖及肝脏组织IRS-2 mRNA，IGF-1 mRNA表达的影响

目的:研究金钗石斛生物总碱(Dendrobium nobile Lindl.alkaloids,DNLA)对糖尿病大鼠血糖及肝脏组织胰岛素受体底物2(IRS-2)mRNA、胰岛素样生长因子1(IGF-1)mRNA表达的影响。方法:雄性SD大鼠高脂、高糖饲料喂养大鼠6周后,1次ip链脲佐菌素(STZ)40 mg·kg-1诱导糖尿病大鼠模型。糖尿病大鼠随机分为模型组,二甲双胍组(二甲双胍100 mg·kg-1)和DNLA 20,40,80 mg·kg-1组。另设正常对照组予基础饲料喂养。给药组每日ig给药1次,连续4周,正常组及模型组ig给予等体积的双蒸水。检测大鼠空腹血糖(FPG)空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),Real time RTPCR检测大鼠肝脏组织中IRS-2 mRNA,IGF-1 mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组FPG,FINS,HOMA-IR明显升高(P<0.05);与模型组比较,二甲双胍组、DNLA 40,80 mg·kg-1组FPG,FINS,HOMA-IR显著降低(P<0.05);与正常组比较,模型组肝脏组织中IRS-2 mRNA,IGF-1 mRNA表达明显减少(P<0.05);与模型组比较,二甲双胍组、DNLA 40,80mg·kg-1组肝脏组织中IRS-2 mRNA,IGF-1 mRNA表达明显增加。结论:DNLA能降低糖尿病大鼠血糖,其机制可能与其上调肝脏组织IRS-2 mRNA,IGF-1 mRNA表达,减轻胰岛素抵抗有关。     

电针对PCOS合并IR大鼠下丘脑瘦素/Kisspeptin信号的影响

目的:通过电针对多囊卵巢综合征(PCOS)合并胰岛素抵抗(IR)大鼠生殖内分泌与代谢功能的同时调节,探讨其与影响下丘脑瘦素(LEP)/Kisspeptin(KP)信号传导的关联性。方法:3周龄SD雌性大鼠以硫酸普拉睾酮钠皮下注射联合高脂饲料喂养21 d建立PCOS合并IR模型,建模后随机分为模型组、西药组、电针组,继续高脂饲料喂养。另设空白组,每组8只。电针组大鼠予三阴交、关元、中脘、足(后)三里穴位电针治疗,西药组大鼠予二甲双胍溶液灌胃,连续治疗28 d。检测血清T、LH、FSH、LEP、FINS和FPG水平变化,计算HOMA-IR;HE染色观察卵巢形态学变化;实时PCR法检测下丘脑LEP mRNA、Kiss-1 mRNA和GnRH mRNA表达水平;蛋白质印迹法检测下丘脑LEP和KP蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠性激素紊乱、糖脂代谢异常(P<0.01),下丘脑LEP mRNA及蛋白表达降低且Kiss-1 mRNA、GnRH mRNA及KP蛋白表达升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组大鼠血清LH、LEP水平及HOMA-IR降低(P<0.01或P<0.05),下丘脑LEP mRNA及蛋白表达升高(P<0.01或P<0.05),GnRH mRNA表达降低(P<0.05);西药组大鼠血清T、LH、LEP、FINS水平及HOMA-IR降低(P<0.05或P<0.01),下丘脑LEP mRNA表达升高(P<0.01)。西药组和电针组大鼠卵巢结构均较模型组改善,电针组大鼠血清T、LH、FSH、LEP、FINS、FPG水平,HOMA-IR,下丘脑LEP mRNA、Kiss-1 mRNA及GnRH mRNA表达,以及LEP及KP蛋白表达与西药组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:电针干预PCOS合并IR大鼠,可影响下丘脑LEP/KP信号传导,可能是电针同时调节糖脂代谢与生殖内分泌治疗PCOS的机制。     

白藜芦醇对代谢综合征大鼠糖脂代谢的改善作用

目的 观察白藜芦醇对代谢综合征(MS)大鼠糖脂代谢的改善作用.方法 采用高脂高盐高糖饮食诱导大鼠MS模型,随机分为正常组、模型组、白藜芦醇组(100 mg/kg)、二甲双胍组(150 mg/kg),灌胃给药4周.观察一般行为学,记录体质量和血压,计算体脂比;检测FPG、FINS,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);检测TC、TG、LDL-C、HDL-C)水平;qRT-PCR法检测AMPKα、ChREBP、SREBP-1 mRNA表达;Western blot法检测肝脏乙酰ACCα、Fas蛋白表达.结果 与模型组比较,白藜芦醇能有效控制MS大鼠体质量增长、腹腔脂肪蓄积(P<0.05),降低体脂比、SBP、DBP、FPG、FINS、HOMA-IR(P<0.05,P<0.01),降低LDL-C水平(P<0.05),增加HDL-C水平(P<0.05),促进AMPKα mRNA表达(P<0.05),同时下调ChREBP、SREBP-1 mRNA (P<0.01)及ACCα、Fas蛋白表达(P<0.01).结论 白藜芦醇通过调节AMPK及相关靶分子活性改善糖脂代谢,这可能是其有效防治MS的重要机制.     

黄连温胆汤对IGT大鼠炎症反应与肝细胞焦亡的影响

目的:探讨高脂饮食诱导糖耐量低减(IGT)大鼠是否存在炎症反应与细胞焦亡及黄连温胆汤对其干预作用。方法:健康雄性SD大鼠予45%脂肪含量饲料喂养20周复制IGT模型。将符合模型标准的大鼠随机分为3组,每组10只,另取10只空白鼠作为正常组。黄连温胆汤组予7.8 g·kg^-1·d^-1复方水煎液,阳性药组予盐酸二甲双胍水溶液0.05 g·kg^-1·d^-1,体积为10 mL·kg^-1·d^-1,正常组和模型组予以同体积蒸馏水。连续灌胃4周后,测体质量、体长、腹围,计算Lee’s指数;测空腹血浆葡萄糖(FPG)及餐后2 h血糖(2 h PG)。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清白介素-6(IL-6)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)测肝组织核转录因子-κB(NF-κB),天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)及NOD样受体蛋白3(NLRP3)mRNA及蛋白表达;免疫荧光法测肝组织Caspase-1及NLRP3蛋白表达;苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织形态。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量、腹围、体长及Lee’s指数明显增长(P<0.05,P<0.01),FPG及2 h PG水平均明显升高(P<0.05,P<0.01),血清中IL-6含量和肝组织NF-κB,Caspase-1及NLRP3基因与蛋白表达均显著增加(P<0.01),免疫荧光显示IGT大鼠肝组织Caspase-1和NLRP3表达明显上调,HE染色见IGT大鼠肝组织存在炎症细胞浸润;与模型组比较,黄连温胆汤和盐酸二甲双胍组均可有效减轻IGT大鼠体质量(P<0.01),腹型肥胖,纠正FPG和2 h PG水平(P<0.01),同时能有效降低IGT大鼠血清IL-6含量和肝组织中NF-κB,Caspase-1及NLRP3基因与蛋白表达,减轻肝组织炎症细胞浸润程度。结论:高脂饮食诱导IGT大鼠存在明显炎症反应及细胞焦亡,黄连温胆汤可明显减轻其炎症反应,缓解肝细胞焦亡。     

参苓白术散对NAFLD大鼠肝脏超微结构及mTOR、STAT3蛋白磷酸化的影响

目的:观察参苓白术散对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织mTOR、STAT3蛋白磷酸化的影响。方法:SPF级SD大鼠40只随机分为正常对照组、模型组及参苓白术散低、高剂量组,每组10只。采用高脂饲料喂养复制大鼠NAFLD模型组,8 w后处死大鼠,取血、肝组织。全自动生化分析检测血清TC、TG、ALT、AST,ELISA法检测血清IL-6、TNF-α水平,HE染色和油红O染色观察肝组织病理学改变,透射电子显微镜观察肝组织超微结构变化,Western blot法检测大鼠肝组织mTOR、STAT3蛋白磷酸化水平。结果:8 w高脂饮食成功复制了NAFLD大鼠模型,模型组大鼠肝组织存在严重的脂质蓄积和肝脏脂肪变性,血清TNF-α、IL-6含量及肝组织p-mTOR/mTOR、p-STAT3/STAT3水平较正常对照组显著升高(P0.01)。与模型组比较,各给药组血脂及病理组织学有不同程度改善,血清TC、TG、ALT、AST、TNF-α、IL-6水平及肝组织mTOR、STAT3蛋白磷酸化水平显著降低(P0.05或P0.01)。参苓白术散高剂量作用优于低剂量。结论:mTOR、STAT3蛋白可能是参苓白术散防治NAFLD的有效作用靶点。参苓白术散可能通过抑制肝组织mTOR、STAT3蛋白磷酸化,减轻肝脏脂质蓄积及炎症反应,发挥防治NAFLD的作用。     

双清平化方对代谢综合征大鼠骨骼肌自噬通路蛋白表达的影响

目的 观察双清平化方对代谢综合征大鼠Lee''s指数、血糖、血脂及骨骼肌哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、自噬效应蛋白1(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein1 light chain 3,LC3)蛋白表达的影响,探讨其改善糖脂代谢的作用机制。方法 大鼠给予高脂饲料加10%果糖水溶液喂养,并联合应用N-硝基-L-精氨酸甲酯(N-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME)及链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导代谢综合征模型。代谢综合征大鼠给予双清平化方或二甲双胍干预8周,实验前后定期测量大鼠体质量、体长、腹围、血压、糖耐量、糖化血红蛋白(glycated hemoglobin,GHb)、胰岛素(insulin,INS)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C),计算葡萄糖曲线下面积(OGTT-AUC)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用苏木素-伊红(HE)染色观察骨骼肌组织病理形态学变化;采用Masson染色观察骨骼肌纤维形态变化;采用免疫组化法检测骨骼肌组织中LC3蛋白表达;采用Western blotting检测骨骼肌组织中mTOR、Beclin1和LC3蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、餐后2 h血糖(2 h postprandial glucose,PG2h)、OGTT-AUC、HOMA-IR、INS、GHb、TC、TG及LDL-C水平均显著升高(P<0.01),HDL-C水平显著降低(P<0.01);骨骼肌组织中mTOR蛋白表达显著上调(P<0.01),Beclin1、LC3蛋白表达显著下调(P<0.01)。与模型组比较,双清平化方组FBG、PG2h、OGTT-AUC、HOMA-IR、INS、GHb、TC、TG及LDL-C水平均显著降低(P<0.05、0.01),HDL-C水平显著升高(P<0.01);骨骼肌组织中mTOR蛋白表达水平显著上调(P<0.01),Beclin1和LC3蛋白表达显著下调(P<0.01)。结论 双清平化方可以改善代谢综合征大鼠胰岛素抵抗,改善糖脂代谢水平,抑制骨骼肌病理变化,其作用机制可能与调节骨骼肌自噬,激活骨骼肌组织自噬通路中mTOR、Beclin1、LC3蛋白表达有关。     

基于PI3K/AKT/mTOR通路研究杜仲总黄酮对多囊卵巢综合征大鼠性激素水平及卵巢组织自噬的影响

目的:探讨杜仲总黄酮基于磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠性激素水平及卵巢组织自噬的影响。方法:55只SD大鼠随机取10只作为正常对照组,其余建立PCOS大鼠模型,40只大鼠建模成功,随机分为模型对照组、PI3K抑制剂BKM120 40 mg/kg组、BKM120 40 mg/kg+杜仲总黄酮200 mg/kg组、杜仲总黄酮200 mg/kg组,各组灌胃生理盐水或相应药物,连续干预3 w。Elisa法检测血清促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、抗苗勒氏管激素(AMH)水平;HE染色观察卵巢病理学变化;流式细胞术检测卵巢组织颗粒细胞自噬率;Western blot检测卵巢组织中PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白及微管相关蛋白1轻链3 II(LC3 II)表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠AMH、LH、T含量显著升高,FSH含量显著降低P<0.01);大鼠卵巢组织颗粒细胞自噬率显著升高(P<0.01),p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值显著降低,LC3 II/LC3 I比值显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,抑制剂组大鼠AMH、LH、T含量显著升高,FSH含量显著降低(P<0.01),卵巢组织颗粒细胞自噬率显著升高,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值显著降低,LC3 II/LC3 I比值显著升高(P<0.01);杜仲总黄酮+抑制剂组、杜仲总黄酮组大鼠AMH、LH、T含量明显降低,FSH含量明显升高(P<0.05或P<0.01),卵巢组织颗粒细胞自噬率显著降低(P<0.01),p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值显著升高,LC3 II/LC3 I比值显著降低(P<0.01)。模型对照组卵巢表面苍白,黄体减少,出现多个囊状扩张卵泡;杜仲总黄酮+抑制剂组、杜仲总黄酮组卵巢体积减小,表面色泽较红,黄体有所增加,囊状扩张卵泡减少;抑制剂组卵巢体积更大、黄体更少,囊状扩张卵泡更多。结论:杜仲总黄酮可能通过激活PI3K/AKT/mTOR通路降低PCOS大鼠卵巢组织自噬水平,改善其性激素水平。     

尿石素A激活自噬改善糖尿病小鼠肝脏胰岛素抵抗研究

目的研究尿石素A(UA)对2型糖尿病模型小鼠肝脏胰岛素信号通路的影响及与自噬的关系。方法将C57BL/6小鼠按体质量随机分成4组,即对照组、模型组、尿石素A(50 mg/kg)组、尿石素A(50 mg/kg)联合氯喹(50 mg/kg)组,高脂饲料喂养6周后,ip链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病模型。各组小鼠ig给药7周,检测小鼠体质量、饮水量、血脂、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)水平;计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(ISI);HE染色观察小鼠肝组织病理变化;蛋白免疫印迹法检测小鼠肝组织磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、葡萄糖转运蛋白2(Glut2)、磷酸化糖原合酶激酶-3β(p-GSK3β)及自噬相关蛋白微管相关蛋白质1轻链3Ⅱ/Ⅰ(LC3 Ⅱ/Ⅰ)、选择性自噬接头蛋白(p62)表达水平。结果与模型组比较,UA能够显著改善糖尿病模型小鼠肝组织脂肪变和水肿;显著降低血浆三酰甘油(TG)、游离脂肪酸(FFA)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、FBG、FINS水平,升高高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)水平(P0.01);显著降低HOMA-IR,升高ISI(P0.01);上调肝组织p-Akt、Glut2、p-GSK3β、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达,抑制p62蛋白表达(P0.01)。联合氯喹后,小鼠FBG、FINS、HOMA-IR增加,ISI降低(P0.05);肝组织水肿和脂肪病变明显加重;肝组织p-Akt、Glut2、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平降低,p62蛋白表达水平升高(P0.05),显示自噬抑制剂氯喹明显削弱了UA的作用。结论 UA可能是通过激活肝脏自噬改善糖尿病小鼠肝脏胰岛素抵抗。     

化瘀温胆汤治疗代谢综合征48例疗效观察

目的:观察化瘀温胆汤对代谢综合征(MS)患者代谢综合征各主要组分的影响。方法:48例符合纳入标准的患者予以化瘀温胆汤汤剂治疗1个疗程(14天),观察治疗前后各代谢指标变化情况。结果:经1个疗程治疗后,患者餐前血糖明显降低,与治疗前比较P0.01;餐前胰岛素水平有所升高,但与治疗前比较无统计学意义;胰岛素抵抗指数降低,与治疗前比较P0.01;血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白明显降低,高密度脂蛋白明显升高,与治疗前比较差异显著,P0.05;舒张压升高,脉压缩小,与治疗前比较均有差异显著,P0.01;腰围明显减小,与治疗前比较差异显著,P0.05。结论:化瘀温胆汤能有效改善代谢综合征的超重、糖代谢紊乱、血脂紊乱、血压异常。     

柴芪汤治疗肝郁脾虚型代谢综合征患者临床疗效观察

[目的] 观察柴芪汤治疗肝郁脾虚型代谢综合征患者的临床疗效。[方法] 使用随机数字表法将80例肝郁脾虚型代谢综合征患者分为两组,对照组40例,予基础治疗（控制饮食及适当运动）;治疗组40例,予基础治疗的同时口服柴芪汤。治疗3个月后,观察两组患者血压、体重指数（BMI）、空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、血脂的变化,并对中医证候疗效进行评价。[结果] 治疗组血压、BMI、FPG、FINS、HOMA-IR、血脂与治疗前比较均有改善（P<0.05）;与对照组比较,收缩压、FPG、FINS、HOMA-IR、TC、LDL-C改善明显（P<0.05）;两组中医证候疗效比较,治疗组总有效率明显高于对照组（P<0.05）。[结论] 柴芪汤治疗肝郁脾虚型代谢综合征疗效显著,具有改善胰岛素抵抗、调节糖脂代谢的作用。     

基于脂肪细胞自噬探讨温胆汤干预肥胖痰湿证炎症状态的作用机制

目的观察温胆汤对肥胖痰湿证大鼠肾周脂肪组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)等相关炎症细胞因子,对自噬活性标志物B细胞淋巴瘤2结合蛋白-1(Beclin-1)、微管相关蛋白轻链(LC3) mRNA与蛋白水平表达,以及对脂肪细胞超微结构与自噬状态变化的影响,探讨温胆汤干预肥胖痰湿证炎症状态的作用机制。方法选用清洁级60 g左右雄性SD大鼠100只,随机分成造模组(70只)和空白组(30只),空白组采用普通饲料喂养,造模组采用高脂饲料喂养,持续喂养6周,借助文献方法制作肥胖痰湿证大鼠模型。造模成功后,按照体质量依序淘汰过轻者,共遴选出16只肥胖大鼠,随机分为模型组、温胆汤组(为本课题组前期实验已确定的最佳剂量组),每组8只;另在空白组中随机选取8只大鼠设为正常组。药物组以15 g·kg^-1生药量进行灌胃,模型组和正常组均予等量蒸馏水进行灌胃,1次/d,共6周。禁食不禁水12 h,麻醉后进行样本采集,检测并计算大鼠体质量、Lee’s指数和肥胖率,按试剂盒说明书采用全自动生化分析仪检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)和高密度脂蛋白(HDL-C)水平;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术检测SD大鼠肾周脂肪组织炎症细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1的表达;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测肾周脂肪组织Beclin-1、LC3 mRNA表达;采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测肾周脂肪组织Beclin-1、LC3蛋白表达;采用透射电镜观测腹周脂肪组织脂肪细胞超微结构与自噬体的改变。结果高脂饲料喂养可成功复制肥胖痰湿证模型,造模组大鼠肥胖率大于20%,与空白组比较,模型组体质量、Lee’s指数呈显著升高(P<0.01,P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠体质量显著升高(P<0.01),血脂水平呈显著改变(P<0.01),肾周脂肪组织炎症细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1的表达水平显著升高(P<0.01),自噬基因Beclin-1、LC3 mRNA与蛋白水平显著升高(P<0.01),与模型组比较,药物组体质量、Lee’s指数显著下降(P<0.01,P<0.05),血脂水平显著变化(P<0.01),肾周脂肪组织炎症细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1表达水平显著下降(P<0.01),自噬基因Beclin-1、LC3 mRNA和蛋白表达水平显著下降(P<0.01),透射电镜观察显示,正常组的细胞结构完整,表面突起,细胞核不规则,细胞器较丰富;模型组的细胞表面突起严重,细胞核不规则,细胞器较丰富,线粒体嵴破坏显著,出现碎解和分离现象,胞浆内有空泡,自噬体较多。药物组的细胞表面稍突起,细胞核不规则,部分线粒体嵴破坏,部分胞浆内有空泡,自噬体减少。结论温胆汤可有效改善肥胖大鼠痰湿证的炎症状态,其机理可能与调节肾周脂肪细胞自噬活性有关,这为经典治痰名方温胆汤干预肥胖痰湿证提供了实验依据。     

DM120方为主治疗2型糖尿病30例临床观察

目的观察DMl20方治疗2型糖尿病（T2DM）的临床疗效。方法采用随机方法将60例T2DM患者随机分为两组,治疗组和对照组各30例。在原先治疗方案不变的条件下,治疗组给予DMl20方,对照组给予糖脉康;疗程均为12周。观察治疗前后空腹血糖（FPG）、餐后2h血糖（2hPG）、糖化血红蛋白（HbAlc）、空腹血浆胰岛素（FINS）、空腹C肽、体重指数（BMI）、腰围（wc）的变化,计算胰岛素抵抗指数（HOMA2．IR）。结果两组治疗后FPG、2hPG、HbAlc、FINS、空腹C肽、HOMA2一IR均有改善（P〈0．05,P〈0．01）,治疗组WC改善（P〈0．05）;组问治疗后比较2hPG、FINS有统计学差异（P〈0．05）。结论DMl20方对降低T2DM患者的餐后向糖、减郫睛岛素柢杭疗效确切。‘     

降糖方对糖耐量异常大鼠糖脂代谢及骨骼肌组织IκB-α和NF-κBp65的影响

目的:探讨降糖方对糖耐量异常大鼠糖脂代谢及骨骼肌组织κB抑制蛋白α(IκB-α)、核转录因子肽p65(NF-κBp65)的影响。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、盐酸二甲双胍组、降糖方低、高剂量组,采用高脂饮食喂养4周,链脲佐菌素(STZ)腹膜内注射建立糖耐量异常大鼠模型,治疗8周后,观察骨骼肌组织病理变化,测定空腹血糖(FPG)、血清胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、骨骼肌组织IκB-α mRNA、NF-κBp65 mRNA水平、骨骼肌组织白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-12(IL-12)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白水平。结果:正常组大鼠骨骼肌组织结构正常,模型组骨骼肌排列紊乱、肌纤维断裂、可见明显炎症细胞浸润;盐酸二甲双胍及降糖方干预后,骨骼肌炎症细胞浸润减少,肌纤维排列趋于整齐。模型组大鼠FPG、FINS、HOMA-IR水平、血清TG、TC、LDL-C水平、骨骼肌IκB-α mRNA、NF-κBp65 mRNA和蛋白水平、骨骼肌组织IL-4、IL-12、TNF-α蛋白水平高于对...     

加味温胆汤对抑郁模型大鼠胃肠动力的影响

[目的]探讨加味温胆汤对抑郁模型大鼠胃肠动力的影响。[方法]将36只SD大鼠随机分为正常组、模型组及加味温胆汤组,每组12只,应用孤养加慢性不可预见性应激方法造模,采用胃排空率检测大鼠胃动力、小肠推进率检测大鼠肠动力、透射电镜检测大鼠胃肠组织的超微结构形态结构。[结果]造模21 d后,与空白组比较,模型组、加味温胆汤组得分低于空白组,差异有统计学意义(P0.01);给药28 d后,与正常组比较,模型组得分低于正常组,差异有统计学意义(P0.01);与模型组比较,加味温胆汤组得分高于模型组,差异有统计学意义(P0.01)。21 d慢性应激后,与空白组比较,其余两组糖水偏爱率显著降低,差异有统计学意义(P0.01);药物干预4周后,与模型组比较,加味温胆汤组大鼠糖水偏爱度显著增加,差异有统计学意义(P0.01)。与空白组比较,模型组的胃排空率、小肠推进率显著降低(P0.01);与模型组比较,加味温胆汤组的胃排空率、小肠推进率增加(P0.05)。透射电镜结果显示,与空白组比较,模型组大鼠胃主细胞胞膜结构不完整,核严重固缩、核质边移,胞质中部分细胞器出现崩解,线粒体排列不均匀,粗面内质网扩张,电镜下超微形态变化较明显;与模型组比较,加味温胆汤组大鼠胃主细胞上述表现明显减轻。与空白组比较,模型组大鼠结肠黏膜细胞处于崩解状态,损伤严重;与模型组比较,加味温胆汤组的大鼠结肠组织紧密连接较好,接近正常组。[结论]加味温胆汤能够改善抑郁模型大鼠的抑郁状态,增强抑郁症大鼠胃肠动力,改善胃肠组织超微形态结构,为加味温胆汤在临床治疗抑郁症、改善胃肠动力提供了实验支持。     

腹部推拿对高脂饮食诱发肥胖大鼠胰岛素抵抗的改善作用机制

目的:观察腹部推拿对肥胖大鼠胰岛素抵抗的改善作用与机制。方法:将60只大鼠随机分为空白对照组和模型组,空白对照组喂养普通饲料;模型组喂养高脂饲料造模,造模成功大鼠随机分为模型对照组和推拿干预组。两组均继续采用高脂饲料喂养,推拿干预组采用腹部推拿疗法进行干预。4周后观察各组动物空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(ISI)、骨骼肌单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)、沉默信息调节因子(SIRT1)、过氧化物酶体增生物激活受体Y共活化因子lα(PGC-1α)蛋白表达水平。结果:模型对照组的FPG与TC、LDL-C、FINS、HOMA-IR均显著高于空白对照组(P<0.05,P<0.01),TG、HDL-C、ISI及骨骼肌AMPK、PGC-1α、SIRT1蛋白表达水平均显著低于空白对照组(P<0.01);推拿干预组与模型对照组比较,FPG、TC、LDL-C、FINS、HOMA-IR均显著降低(P<0.05,P<0.01),TG、HDL-C、ISI及骨骼肌AMPK、SIRT1、PGC-1α蛋白表达水平均显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:腹部推拿疗法能够有效调节肥胖大鼠的胰岛素抵抗现象,其可能的机制之一是改善和加强了骨骼肌SIRT1/PGC-lα通路的作用,更好发挥其调节糖脂代谢及胰岛素分泌的功能。     

加味黄连温胆汤治疗痰瘀交阻型慢性失眠疗效观察

目的观察加味黄连温胆汤治疗痰瘀交阻型慢性失眠的临床疗效。方法将140例痰瘀交阻型慢性失眠患者随机分为两组;治疗组70例予以黄连温胆汤加味治疗,对照组70例予以艾司唑仑片治疗,疗程4周。结果治疗组的近期疗效和远期疗效均优于对照组（P〈0．01）;治疗组心烦、胸闷等主要症状缓解均优于对照组（P〈0．05,P〈0．01）。结论加味黄连温胆汤治疗痰瘀交阻型慢性失眠疗效确切。