Wnt/β-catenin信号通路及骨髓间充质干细胞源性外泌体在温和灸联合骨髓间充质干细胞移植促进大鼠肛门括约肌修复中的作用*

目的 基于前期研究证实温和灸联合骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC）移植可协同促进大鼠损伤肛门括约肌结构和功能修复的基础,探索协同修复效果是涉及Wnt/β-catenin通路,及BMSC源性外泌体对C212成肌细胞的影响。方法 将16只SD大鼠随机等分4组,所有大鼠均采用Zutshi大鼠肛门括约肌复合体损伤模型,造模成功后分别采用温和灸30 min、BMSC移植及生理盐水治疗,连续14 d。治疗结束后剥离肛门括约肌后采用q PCR和Western blot检测组间Wnt4、Wnt5a、Wnt5b蛋白表达差异。将BMSC源性外泌体与小鼠成肌细胞C2C12共培养后采用EDU及CCK8检测BMSC外泌体对C2C12细胞增殖作用,探索不同浓度外泌体对BMSC增殖的差异。流式细胞术检测BMSC源性外泌体对C2C12细胞周期的影响。结果 免疫印迹和qPCR分析结果提示温和灸联合BMSC移植可促进Wnt4、Wnt5A、Wnt5B高表达。CCK8结果显示BMSC源性外泌体可促进C2C12细胞的增殖,在浓度为25 μg/mL时疗效最佳。共培养结果显示BMSC源性外泌体可抑制Cleaved Caspase3和BAX表达,并显著上调BCL2表达。结论 温和灸联合BMSC移植可促进Wnt4、Wnt5A、Wnt5B高表达,BMSC源性外泌体可调控成肌细胞C2C12的细胞周期从而促进增殖并抑制凋亡,推测温和灸联合BMSC移植可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进对大鼠损伤肛门括约肌的修复作用。     

脱氢表雄酮通过丝裂活化蛋白激酶途径促进成骨细胞增殖的研究

目的研究脱氢表雄酮(DHEA)促进成骨细胞增殖的作用和机制。方法取新生2～4d的BALB/c小鼠颅骨,用酶消化法进行成骨细胞原代培养,以细胞形态学和碱性磷酸酶(ALP)染色鉴定。取传1代成骨细胞给予不同浓度DHEA,在不同培养时间后,应用光镜、电镜、四唑盐(MTT)法及流式细胞术(FCM)检测细胞的生长和增殖;同时用免疫印迹法检测磷酸化细胞外信号调控激酶(p44/42)的表达。结果10-8～10-6mol/L的DHEA可明显促进小鼠成骨细胞的生长和增殖,经10-7mol/LDHEA处理3d后的细胞,增殖指数明显增加(P<001);在10-9～10-6mol/L浓度范围内,DHEA能明显提高p44/42的表达,以10-8mol/L浓度的作用最佳(P<001),该作用可被U0126阻断。结论DHEA能够促进小鼠成骨细胞生长和增殖,其作用与激活丝裂活化蛋白激酶信号途径有关。     

B细胞表位人源化的猪ZP4在大肠杆菌中的表达与鉴定

近年来,以卵透明带为靶抗原的疫苗制备已从最初的卵透明带及其组分水平向更高层次发展.Minoru等发现用人工合成的LDPENLTL八肽B细胞表位片段与外源性T细胞表位所得嵌合肽免疫小鼠所得抗血清可有效抑制猪精卵结合试验,但对人精卵结合试验却效果甚差.     

17β-雌二醇对子宫内膜间质细胞体外分泌趋化因子IL-8、MIP-1α、RANTES和I-309的影响

目的：探讨17β-雌二醇对子宫内膜间质细胞分泌IL-8、MIP-1α、RANTES和I-309的调控，以解析雌激素在子宫内膜异位症发生发展中的作用机制。方法：用不同浓度17β-雌二醇处理子宫内膜间质细胞48小时；此后选用10^-9mol／L 17β-雌二醇处理子宫内膜间质细胞12、24、36和48小时，ELISA法分析刺激前后培养上清中IL-8、MIP-1α、RANTES和I-309分泌水平。结果：子宫内膜间质细胞体外高水平自然分泌IL-8，17β-雌二醇能抑制IL-8的分泌，呈剂量依赖性。RNATES和MIP-1α分泌水平较IL-8低，经雌激素刺激子宫内膜间质细胞后MIP-1α表现出与IL-8相同的分泌方式，但对RANTES分泌无明显影响。子宫内膜间质细胞经雌激素刺激前后均未检测到I-309。结论：雌二醇可能参与子宫内膜白细胞和单核巨噬细胞的募集，但不是异位灶中上述趋化因子高表达的原因。     

Binswanger病的再探讨

文章就Binswanger病的病因，发病机理及临床特征、神经影像学检查和临床诊断问题进行介绍。     

90例早产儿实施发育支持护理的体会

近年来新生儿医学的进步极大降低了早产儿和高危新生儿病死率.发育支持护理是改变新生儿重症监护室(NICU)环境和照顾方式、保障早产儿及其家人的身心健康的护理方法,要求护士能预先估计早产儿生长发育的应激能力,给予支持性的措施,缓解压力,促进发育.我院NICU自2002年1月-2003年1月对收治的90例早产儿实施发育支持护理,效果满意.现将护理体会介绍如下.     

以全血细胞减少为首发表现的肝豆状核变性1例

患儿张梦龙,男性,10岁,主因反复皮肤瘀斑、鼻衄2个月入住我院血液科。查体:轻度贫血貌,皮肤黏膜无黄染,双足背可见密集针尖大小出血点,心肺未见异常,腹软,脾脏触诊I线7cm,Ⅱ线9cm,Ⅲ-3cm     

基于新抗原筛选的肿瘤疫苗改造策略研究进展

近年来，肿瘤新抗原在个体化肿瘤免疫治疗领域颇受关注。利用肿瘤突变基因序列体外合成的新抗原肽制备的肿瘤治疗性疫苗具有更精准个体化治疗和更低脱靶效应等特征，现已成为当前抗肿瘤特异性免疫治疗的研究热点之一。越来越多的研究致力于新抗原的筛选与改造流程，以鉴定出免疫原性更高的新抗原，提高其与抗原提呈细胞表面人类白细胞抗原分子的结合亲和力和稳定性等重要免疫特征，从而进一步增强其免疫应答效率。鉴于新抗原在肿瘤免疫治疗领域中的巨大潜力，本文对新抗原研发中的高效筛选和优化改造研究进展作一综述。     

新生儿听力普遍筛查的管理

目的 探讨新生儿听力普遍筛查系统的管理方法.方法 以妇幼保健网络为依托,瞬态耳声发射(TEOAE)与全自动脑干诱发电位(AABR)联合应用为技术手段.以"筛查"、"确认"、"干预"、"跟踪随访"、"质量评估"5个环节为质量保障.结果 2004年6月～2007年12月,东营市妇幼保健系统新生儿听力筛查(TEOAE)共51710例,占出生人口的98%,最后确诊轻度和中度的听力损伤119例,重度和极重度的听力损伤26例.除1例死亡外,其余听力障碍均接受了干预治疗.结论 以三级妇幼保健网络为依托,运用先进无创伤的客观筛查技术,坚持筛查、干预、随访密切结合的管理方法,为新生儿听力普遍筛查的有效管理方法.     

2384名健康体检者高TC及高TG分布情况调查

目的调查了解健康体检者中高总胆固醇（Tc）及高甘油三酯（TG）分布情况。方法对2384名在我院行健康体检者中高Tc、高TG分布情况进行统计分析,探讨其与性别、年龄等因素的关系。结果男性高Tc和高TG检出率均高于女性（P〈0．05或P〈0．01）。男性50～59岁组高Tc检出率最高（7．41％）,40-49岁高TG检出率最高（11．11％）。男性18—29岁、30～39岁、40～49岁组高TG检出率均高于同年龄组女性（P〈0．05或P〈0．01）。50—59岁组为女性高Tc和高TG检出率最高组。男、女组高TC及高TG检出率均随年龄增加而增加,到一定阶段后又降低。结论高TC、高TG与性别、年龄等因素有关,中老年男性和更年期前后的女性是预防控制高TC、高TG的重点人群。