高效液相色谱法测定左归丸中马钱苷和莫诺苷的含量

<正>山茱萸为左归丸方中主要药味,其主要成分为马钱苷、莫诺苷、熊果酸和齐墩果酸等。在山茱萸的质量研究中,马钱苷研究的已较多;而莫诺苷与马钱苷有相近药效作用,并且含量更高于马钱苷,关于莫诺苷含量测定的研究却很少,是目前山茱萸相关药物质量控制中的一大缺憾。为了更有效控制左归丸的质量,本文采用高效液相色谱法同时测定左归丸中马钱苷和莫诺苷的含量,为更好地评价药物提供科学依据。1仪器与试药     

HPLC法同时测定大鼠血清中马钱苷和莫诺苷的含量

目的建立HPLC法对六味地黄方在大鼠体内吸收入血的有效成分(莫诺苷和马钱苷)的血药浓度测定方法。方法采用HPLCDAD法对给药前、后大鼠血清中的药物有效成分进行检测。结果空白血清不会对莫诺苷和马钱苷的血药浓度分析产生干扰,均能达到基线分离;莫诺苷和马钱苷的峰面积比值与血清浓度呈良好的线性关系;六味地黄血清中莫诺苷和马钱苷高、中、低3种浓度5次测定的平均回收率为84.9%~109.8%和89.4%~102.7%;六味地黄血清中莫诺苷高、中、低3种浓度5次测定的平均提取回收率为73.9%~82.7%。结论该方法血清中内源性物质不干扰样品的测定,且分离度好,可满足药代动力学研究中血药浓度测定的要求。     

菝葜抗炎活性部位的血清药物化学研究

摘要目的对菝葜抗炎活性部位进行血清药物化学研究,探讨菝葜药效物质基础。方法建立菝葜提取物高效液相色谱（HPLC）分析法,通过HPLC图分析比较空白血清、含药血清、菝葜提取物的成分的差异,确定菝葜提取物大鼠灌胃后血中移行成分。结果在菝葜提取物含药血清中发现了45种入血成分,其中25种为原型成分,20种可能为原型成分的代谢产物。结论45种入血成分可能是菝葜的体内直接作用物质,对其进行深入研究将有助于阐明菝葜的药效物质基础及药效机制。     

都梁丸的血清药物化学研究

目的对都梁丸的入血成分进行分析研究,探讨都梁丸的药效物质基础。方法采用偏头痛模型小鼠,灌胃给药制得含药血清和空白血清,通过比较都梁丸、酒炖白芷和川芎体外供试品及含药血清样品和空白血清样品的HPLC色谱图,根据保留时间及对照品,明确都梁丸给药后血中移行成分。结果都梁丸给药后,在血清中共有22个移行成分,其中18个成分为原形入血成分,4个成分为原型成分的代谢产物,经对照品确认了12种原型成分。结论这22个血中移行成分可能是都梁丸在体内直接作用的药效物质,为深入研究其作用机制、质量控制标准及剂型改革提供了科学依据。     

驱虫斑鸠菊血清药物化学的初步研究

［摘要］目的对维药驱虫斑鸠菊进行血清药物化学研究,探讨驱虫斑鸠菊药效作用的物质基础。方法在建立驱虫斑鸠菊高效液相色谱（HPLC）指纹图谱的基础上,通过比较驱虫斑鸠菊水提取物、驱虫斑鸠菊含药血清和空白血清HPLC指纹图谱的差异,确定驱虫斑鸠菊血中移行成分。结果在驱虫斑鸠菊含药血清中发现了9种入血成分,其中5种为原型成分,其余4种可能为原型成分的代谢产物。结论9种入血成分可能是驱虫斑鸠菊的体内直接作用物质,对其进行深入研究将有助于阐明驱虫斑鸠菊的药效物质基础及药效机制。     

玳玳果黄酮降脂滴丸的肠吸收动力学特性

目的：考察玳玳果黄酮降脂滴丸的肠吸收特性并探讨其作用机制。方法：采用大鼠外翻肠囊模型,建立同时测定大鼠肠吸收液中玳玳果黄酮降脂滴丸特征药效成分新橙皮苷和柚皮苷含量的液-质联用（UPLC-MS）分析法,比较玳玳果黄酮降脂滴丸与原料玳玳果黄酮降脂提取物在大鼠不同肠段的累积吸收量,分析不同质量浓度大鼠空肠段的吸收过程,探讨其肠吸收部位及机制。结果：玳玳果黄酮降脂滴丸特征药效成分新橙皮苷和柚皮苷90 min时的累积吸收量由多到少依次是空肠、十二指肠、回肠和结肠;玳玳果黄酮降脂滴丸在高、中、低剂量下空肠的累积吸收量随时间的增加而增加,相关系数r>0.95,且随着药液质量浓度的增加新橙皮苷和柚皮苷的Ka均增加,符合一级药动学过程;在等剂量给药下,玳玳果黄酮降脂滴丸中新橙皮苷和柚皮苷的累积吸收量约是玳玳果黄酮降脂提取物的1.6倍。结论：玳玳果黄酮降脂滴丸在全肠道均有吸收,小肠的上中段为最佳吸收部位,新橙皮苷和柚皮苷吸收可能为被动吸收循环入体,制成的玳玳果黄酮降脂滴丸可显著改善提取物在肠道的吸收,提高其口服生物利用度。     

玳玳黄酮滴丸质量分析

目的 建立玳玳黄酮滴丸质量评价方法。方法 采用薄层色谱法鉴别玳玳黄酮滴丸,并对玳玳黄酮滴丸进行重金属及砷盐的检查;建立高效液相色谱法同时测定玳玳黄酮滴丸主要药效成分柚皮苷和新橙皮苷含量的方法。结果 薄层色谱主要成分斑点清晰可见,阴性对照无干扰;玳玳黄酮滴丸重金属及砷盐的限量均小于百万分之十;新橙皮苷在4.088--16.352μg.mL 1内呈良好线性关系,柚皮苷在4.084--16.336μg.mL 1内呈良好线性关系,3批玳玳黄酮滴丸新橙皮苷平均含量分别为75.32,74.82,73.76 mg·g-1,柚皮苷平均含量分别为63.05,63.21,62.07mg·g-1。结论 所建立的鉴别、检查、含量测定方法稳定简便,可有效控制玳玳黄酮滴丸质量。     

基于胃肠动力障碍模型大鼠的气滞胃痛颗粒血清药物化学初步研究

目的 利用血清药物化学研究胃肠动力障碍模型大鼠灌胃气滞胃痛颗粒后的入血成分.方法 采用超高效液相色谱-电喷雾-飞行时间质谱技术,确定胃肠动力障碍大鼠口服气滞胃痛颗粒提取物后血中移行成分及其代谢产物.结果 胃肠动力障碍模型大鼠灌胃给予气滞胃痛颗粒后血清中检测25个移行成分,4个原型入血成分及21个代谢成分,并对其中的18个成分进行了结构推测.结论 血中移行成分及代谢产物可能为气滞胃痛颗粒发挥促胃肠动力的体内直接作用物质,为明确气滞胃痛颗粒药效物质基础提供了科学依据.     

芪天扶正胶囊的HPLC指纹图谱研究

目的 建立芪天扶正胶囊的高效液相色谱(high performance liquid chromatography, HPLC)指纹图谱，为其质量控制提供依据。方法 用Shimadzu C₁₈柱(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱，以乙腈-1 mL·L^-1甲酸水溶液为流动相梯度洗脱，流速为0.8 mL·min^-1,柱温为25℃,检测波长为258 nm。结果 10批芪天扶正胶囊的HPLC指纹图谱有35个共有指纹峰，相似度均大于0.9,通过与混合对照品比对，指认出19种化学成分：腺苷、没食子酸、5-羟甲基糠醛、红景天苷、酪醇、莫诺苷、马钱苷、当药苷、毛蕊异黄酮苷、芦丁、木犀草苷、特女贞苷、芹菜苷、橙皮苷、橄榄苦苷、芒柄花苷、女贞苷G13、毛蕊异黄酮、木犀草素。结论 所建立的HPLC指纹图谱能够表达芪天扶正胶囊中多组分的整体特征，可用于其质量控制。     

一测多评法测定代代花中4种二氢黄酮类成分

目的：建立代代花药材中4种二氢黄酮类成分芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的一测多评法,验证该方法在代代花质量分析中应用的准确性和可行性。方法：以柚皮苷为内标,分别建立柚皮苷与芸香柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的相对校正因子,采用相对校正因子计算各成分的质量分数。同时用外标法测定代代花中4种二氢黄酮的量,并比较计算值与实测值的差异,以验证一测多评法的可行性与科学性。结果：各相对校正因子重复性良好,一测多评法与外标法测定结果无显著差异。结论：以柚皮苷为内标同时测定代代花中芸香柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的一测多评法可用于代代花的定量分析。     

HPLC法测定复方前列舒丸中6个活性成分

目的建立HPLC法同时测定复方前列舒丸中大车前苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、朝藿定C、淫羊藿苷6个活性成分的方法。方法采用安捷伦Zorbax C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈–0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;检测波长为330 nm(0~20 min,测定大车前苷)、283 nm(20~40 min,测定柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷)、270 nm(40~50 min,测定朝藿定C、淫羊藿苷);柱温为35℃;体积流量为1.0 m L/min;进样量为5μL。结果大车前苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、朝藿定C、淫羊藿苷在10.11~202.20、49.62~992.40、15.46~309.20、44.62~892.40、18.39~367.80、52.18~1 043.60 ng与峰面积线性关系良好。大车前苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、朝藿定C、淫羊藿苷的平均回收率分别为97.4%、98.8%、99.5%、98.9%、97.2%、95.6%,RSD值分别为0.83%、1.2%、1.4%、1.5%、1.5%、1.0%。结论该方法稳定可靠、简便易行,同时测定复方前列舒丸中大车前苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、朝藿定C、淫羊藿苷6个特征性成分,为全面控制复方前列舒丸的质量提供了参考。     

补骨脂素与异补骨脂素对乳鼠颅骨成骨细胞分化成熟影响的比较研究

目的比较研究中药补骨脂中两种重要组分——补骨脂素与异补骨脂素对体外培养乳鼠颅骨成骨细胞(rat cal-varial osteoblasts,ROB)分化成熟的影响。方法取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法培养ROB,每3天换液1次,铺满80%皿底后传代培养。以1×10-5mol.L-1的补骨脂素和异补骨脂素对ROB的分化成熟进行药物干预,比较补骨脂素组、异补骨脂素组和不加药的对照组之间碱性磷酸酶(ALP)活性、碱性磷酸酶阳性克隆数(CFU-FALP)、骨钙素分泌量、钙盐沉积量以及钙化结节数量的差异,Real Time RT-PCR检测IGF-1、Osterix、Runx-2和collagen I的基因表达情况。West-ern blot法检测Ⅰ型胶原蛋白的分泌量。结果补骨脂素和异补骨脂素均可促进ROB的分化成熟,具体表现在明显提高ROB的ALP活性,促进钙盐的沉积以及骨钙素的分泌,增加CFU-FALP和钙化结节数量,提高IGF-1、Osterix、Runx-2和collagen I的mRNA水平,增强Ⅰ型胶原的蛋白表达,但异补骨脂素的活性明显高于补骨脂素。结论异补骨脂素促进ROB分化成熟的活性明显高于补骨脂素,提示异补骨脂素是中药补骨脂发挥抗骨质疏松活性的主要有效成分,具有开发为抗骨质疏松新药的潜力。     

Protective effects of iridoid glycosides on acute colitis via inhibition of the inflammatory response mediated by the STAT3/NF-кB pathway

Morroniside and loganin are iridoid glycosides extracted from Cornus officinalis, a plant species widely used in traditional Chinese medicine. However, the anti-inflammatory effects of morroniside and loganin in colitis are barely understood. The aim of the present study was to explore the effects of morroniside and loganin on the dextran sodium sulfate (DSS)-induced murine model of colitis and an LPS-induced colorectal cancer (CRC) cell inflammation model, and to clarify the underlying mechanisms. We found that morroniside and loganin were able to ameliorate clinical features, including disease activity index (DAI), histological inflammation score and periodic acid-Schiff staining (PAS). In the mouse model, morroniside and loganin treatment increased expression of tight junction proteins (TJs) and decreased pro-inflammatory cytokine production. Moreover, our findings showed that the expression of p-STAT3 and p-p65 were suppressed compared to the disease group. In in vitro experiments, treatment with morroniside and loganin had no obvious effects on proliferative activity in HCT116 cells and HIEC-6 cells. Expression of pro-inflammatory cytokines was inhibited by morroniside and loganin treatment in comparison with the LPS-treated group. Taken together, morroniside and loganin have beneficial effects on colitis in vivo and are anti-inflammatory in vitro. Possible mechanisms of the anti-inflammatory response may include blockade of the STAT3/NF-κB pathway.     

Pharmacokinetics,tissue distribution and excretion of coumarin components from <Emphasis Type="Italic">Psoralea corylifolia</Emphasis> L. in rats

Coumarin components from Psoralea corylifolia L. are novel drugs in which psoralen and isopsoralen are the active components. The pharmacokinetics, tissue distribution and excretion of the two compounds were studied by liquid chromatography-tandem mass spectrometry after intravenous administration to Wistar rats. The elimination half-lives of psoralen and isopsoralen were 4.88 and 5.35 h. After dosing, the area under the curves of the tissues decreased in the following order: liver > lung > heart > kidney > spleen > brain for psoralen; and kidney > lung > liver > heart > spleen > brain for isopsoralen. After dosing, 51.27% of psoralen and 56.25% of isopsoralen were excreted as prototype, and urine was the major excretion route. In addition, the pharmacokinetics of psoralen and isopsoralen after oral administration to Wistar rats were also studied. The elimination half-lives of psoralen and isopsoralen were 4.13 and 5.56 h, and their relative bioavailabilities were 61.45% and 70.35%. Overall, the results show that coumarin components from P. corylifolia L. have high oral bioavailability, they are rapidly and widely distributed into tissues after intravenous administration, but they are slowly cleared and excreted.     

UPLC法测定山茱萸中的莫诺苷和马钱子苷

目的建立一种同时测定山茱萸中莫诺苷和马钱子苷的UPLC法。方法采用超高效液相色谱仪。色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH C18(50mm×2.5mm,1.7μm);检测波长:240nm;流动相:乙腈(A)-1mL·L-1甲酸水溶液(B);采用梯度洗脱;流速:0.3mL·min-1;柱温:30℃。结果该色谱条件下,山茱萸中各组分的分离满足分析要求,莫诺苷和马钱子苷的线性回归方程分别为y=241.65x+27.59,r=0.999 66和y=192.39x-31.96,r=0.999 89;莫诺苷和马钱子苷在0.112 5~1.80和0.087 5~1.40μg范围内峰面积与进样量线性关系良好;测得陕西佛坪山茱萸中莫诺苷和马钱子苷的含量分别为16.53±0.89和6.81±0.32mg·g-1。结论该方法高效、快速,适合山茱萸中莫诺苷和马钱子苷的含量分析;陕西山茱萸中有效成分的含量远高于《中国药典》规定,品质优异。     

A rapid method for simultaneous determination of 15 flavonoids in Epimedium using pressurized liquid extraction and ultra-performance liquid chromatography

Herba Epimedii (family Berberidaceae), Yinyanghuo in Chinese, is one of commonly used Chinese medicines. Flavonoids are considered as its active components. In this study, a rapid ultra-performance liquid chromatography (UPLC) method was developed for simultaneous determination of 15 flavonoids, including hexandraside E, kaempferol-3-O-rhamnoside, hexandraside F, epimedin A, epimedin B, epimedin C, icariin, epimedoside C, baohuoside II, caohuoside C, baohuoside VII, sagittatoside A, sagittatoside B, 2'-O-rhamnosyl icariside II and baohuoside I in different species of Epimedium. The analysis was performed on Waters Acquity UPLC system with an Acquity UPLC BEH C18 column (50 mm x 2.1mm I.D., 1.7 microm) and gradient elution of 50mM acetic acid aqueous solution and acetonitrile within 12 min. All calibration curves showed good linearity (R2>0.9997) within test ranges. The LOD and LOQ were lower than 0.13 and 0.52 ng on column, respectively. The R.S.D.s for intra- and inter-day of 15 analytes were less than 5.0% at three levels, and the recoveries were 95.0-103.7%. The validated method was successfully applied to quantitatively analyze 15 flavonoids in different species of Epimedium. The results showed there were great variations among the contents of investigated flavonoids. Hierarchical clustering analysis based on characteristics of 15 investigated compounds peaks in UPLC profiles showed that 37 samples were divided into 3 main clusters, which were in accordance with their flavonoids contents. The simulative mean chromatogram of the high content cluster was generated to compare the samples from different species and/or locations of Epimedium. Four flavonoids including epimedin A, B, C and icariin were selected as markers for quality control of the species of Epimedium used as Yinyanghuo.     

不同厂家炙朝鲜淫羊藿饮片主成分含量比较

目的:对不同厂家炙朝鲜淫羊藿饮片主成分进行比较。方法:以反相高效液相色谱(PR-HPLC)法同时测定炙朝鲜淫羊藿饮片中5种主要黄酮类成分朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷和宝藿苷I的含量。结果:朝藿定A以亳州千草药业有限公司的炙朝鲜淫羊藿饮片含量最高;朝藿定B、朝藿定C以药都集团茗都中药饮片有限公司的炙朝鲜淫羊藿饮片含量最高;淫羊藿苷、宝藿苷I以安徽滕王药业有限公司的炙朝鲜淫羊藿饮片含量最高。结论:建立多种成分的含量测定方法可全面控制炙朝鲜淫羊藿饮片质量。     

一测多评法测定枳术颗粒中四种黄酮类成分的含量

目的采用高效液相色谱法,建立以柚皮苷为内参物,同时测定枳术颗粒中芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的一测多评法。方法以柚皮苷为内标,分别建立柚皮苷与芸香柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的相对较正因子,并将校正因子应用于芸香柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的含量测定,实现一测多评。同时采用外标法测定上述4种黄酮类成分的含量,比较计算值与实测值的差异。结果建立的校正因子重现性良好,枳实药材中采用校正因子计算的含量值与外标法实测值之间没有明显差异。结论该方法快速、准确,可作为一个新模式用于枳术颗粒的多成分质量控制。     

基于HPLC-DAD的产康乐颗粒入血成分鉴定及含量测定

目的: 通过对产康乐颗粒进行血清药物化学研究,初步阐明产康乐颗粒的药效物质基础。方法: SD大鼠灌胃给药后,采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)测定含药血清样品的HPLC色谱图,通过与空白样品的HPLC色谱图进行对比分析,获得血中移行成分信息,并对主成分进行定量分析。结果: 产康乐颗粒HPLC色谱图中可检出20个血中移行成分,其中5个成分可能为代谢成分,15个成分为机体直接吸收入血,包括绿原酸、黄芩苷和6-姜辣素(含量分别为:16.26,0.49,0.41μg·mL^-1)。结论: 通过该方法的研究,为阐明产康乐颗粒的药效物质基础提供科学依据。     

正交设计优化枳实中3种二氢黄酮苷的提取工艺

目的优化枳实中柚皮苷、新橙皮苷、橙皮苷的提取工艺。方法采用L9(34)正交试验,以柚皮苷、新橙皮苷、橙皮苷的含量为评价指标,以乙醇浓度、提取时间、提取次数、乙醇用量为考察因素。优化枳实的提取工艺。结果最佳提取工艺即用8倍量50%乙醇提取1次,每次1.5 h。应用此工艺可得到最大量的柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷。结论本试验方法快捷简单,重复性好;优化得到的工艺稳定可行。