重组人骨形成蛋白成熟肽-2对辐射小鼠骨髓造血损伤的修复作用

目的：探讨重组人骨形成蛋白成熟肽-2(recombinant human bone morphogenetic protein-2m rhBMP-2m)对辐射引起的小鼠骨髓造血损伤的修复作用。方法：通过^60Coγ射线照射小鼠，建立骨髓造血损伤动物模型；经rhBMP-2m连续治疗后，比较照射对照组和rhBMP-2m治疗组之间，骨髓单个核细胞数和蛋白含量的差异；同时，通过酶联免疫吸附试验(ELISA)，检测骨髓细胞中CD34分子表达水平的变化。结果：经rhBMP-2m治疗后的动物，其单个核细胞数、蛋白含量和CD34分子的表达水平明显高于照射对照组(P&;lt;0．05，n=5)。结论：辐射引起的小鼠骨髓造血损伤，rhBMP-2m能够增加造血细胞数量．促进骨髓细胞CD34分子表达，加速造血损伤的修复过程。     

多糖代谢动力学研究的进展

 目的 多糖(polysaccharides，PS)是广泛存在于自然界的一类大分子物质，随着糖生物学与多糖药理学研究的进展。方法 笔者拟通过文献回顾并结合我们的研究，总结多糖代谢动力学的特征及研究现状，揭示制约多糖代谢动力学研究的瓶颈，探讨多糖代谢动力学研究的方法与策略。结果与结论 多糖类新药研究引起了人们的高度关注，多糖有望在肿瘤防治、抗衰老、乙型肝炎及艾滋病等重大疾病的防治中发挥重要的作用。阐明多糖的吸收、分布、代谢和排泄（ADME）特征，将为多糖类新药的研发提供重要的指导，也将使多糖的药理作用和临床应用得到合理的解释。
     

缺血预处理对兔脊髓缺血损伤后的保护作用及其机制

目的:探讨缺血预处理对兔脊髓缺血损伤的保护作用及机制。方法:24只雄性新西兰大白兔随机数字表法分3组(每组8只):即缺血组(IC组)、缺血预处理组(IPC组)及假手术组(S组)。IC组夹闭兔腹主动脉肾下段20min,制作兔脊髓缺血模型;IPC组预先使脊髓缺血6min,再灌注30min后再次阻闭兔腹主动脉肾下段20min;S组除不夹闭腹主动脉外,其余处理同IC组。再灌注后8,12,24和48h分别对动物神经功能评分;再灌注后48h,测定血浆血栓素B2(TXB2,TXA2的稳定代谢产物)的含量及6-酮前列素(6-keto-PGF1α,PGI2的稳定代谢产物)的含量,然后处死动物取脊髓,测定脊髓组织中TXB2及6-keto-PGF1α的含量。结果:IPC组神经功能评分各时间点均明显高于IC组。与IC组相比,IPC组血浆和脊髓中TXB2含量明显减少,分别为(108±20)mg/L,(733±64)ng/g(P<0.05,F=27.93,132.887),而IPC组血浆和脊髓中6-keto-PGF1α含量明显增多,分别为(75±14)mg/L,(502±37)ng/g(P<0.05,F=13.185,64.141)。IPC组血浆和脊髓中TXB2/6-keto-PGF1α分别为(1.45±0.17),(1.47±0.19),明显低于IC组(P<0.05,F=20.83,29.447)。结论:缺血预处理对脊髓缺血损伤有显著的保护作用,保护机制与缺血预处理改善脊髓缺血损伤后TXA2-PGI2平衡失调有关。     

氯离子通道阻断剂对肺血管内皮细胞氧化损伤的保护作用

目的:研究氯离子通道阻断剂在肺血管内皮细胞氧化损伤中的作用。方法:以肉联厂检疫合格的健康小牛为研究对象,过氧化氢(H2O2)诱导体外培养的牛肺动脉内皮细胞损伤,观察Cl-通道阻断剂对受损细胞细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)释放量、三磷酸腺苷(ATP)含量、细胞内钙离子浓度犤Ca2+犦i和DNA降解程度的影响。结果:Cl-通道阻断剂可使受损细胞的细胞活力得到提高,NPPB组和NFA组分别恢复到0.449±0.015和0.535±0.023;LDH释放量下降,分别为(12.4±0.4)%,(6.4±0.6)%。ATP含量分别回升为18.22nmol/mg蛋白质和21.96nmol/mg蛋白质,犤Ca2+犦i下降和DNA降解程度减轻。结论:Cl-通道参与了氧化剂对肺血管内皮细胞损伤的病理过程,Cl-通道阻断剂对肺血管内皮细胞的损伤具有保护作用。     

3,4-亚甲二氧苯基甲酰吗啉与AMPA受体的结合作用研究

目的 研究3,4-亚甲二氧苯基甲酰吗啉（化合物1）与AMPA受体的结合作用。方法 采用放射性配体受体结合试验测定化合物1与AMPA受体结合的IC₅₀值;采用分子对接技术研究化合物1与AMPA受体的结合能力和结合模式。结果 化合物1与AMPA受体结合的IC₅₀值为1.74×10^-9 mol·L^-1,具有较强的结合能力;化合物1与AMPA受体的结合能为-5.46 kcal·mol^-1,同样表明结合能力较强。结合的驱动力主要是氢键、疏水作用和静电作用。化合物1结构中O原子可与AMPA受体的Ser108、Ser242氨基酸残基形成氢键,这可能是该化合物与AMPA受体结合的重要位点。结论 化合物1可与AMPA结合,且结合能力较强。     

UHPLC/MSn多模式复合测定玉屏风复方提取物及制剂中13种化学成分含量

目的 建立测定玉屏风提取物中多组分的UHPLC/MSⁿ定量方法。方法 查阅文献,根据玉屏风制剂及其组方各单味药的药效学、药动学分析,选择升麻素苷、毛蕊异黄酮苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、芒柄花苷、亥茅酚苷、芒柄花素、黄芪甲苷Ⅳ、白术内酯Ⅲ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ等13个化合物作为玉屏风复方的指示性成分进行质量控制。采用ACQUITY UPLC^® HSS T3色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.5 mL/min。结果 在所建立的液相色谱条件下,13种成分的专属性良好,无干扰峰,各成分在线性范围内具有良好的线性关系;回收率为95%~105%,RSD均小于3%。结论 UHPLC/MSⁿ定量方法简便、快速、准确,有助于玉屏风复方的质量控制。     

选择性环氧合酶-2抑制剂PC407对TNBS诱导的大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用

目的:观察新型选择性环氧合酶-2抑制剂PC407对2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid,TNBS)诱导的大鼠溃疡性结肠炎的疗效并探讨其机制.方法:应用TNBS/乙醇灌肠复制大鼠溃疡性结肠炎模型,实验设正常对照组、模型对照组、塞来昔布阳性对照组(18 mg/kg)和PC407治疗组(9,18 mg/kg),ig给药,每天1次,共6 d,观察稀便出现情况.实验第7天,麻醉大鼠,分离大鼠结肠、脾脏、胸腺,观察各组实验动物体质量变化及结肠组织病理学改变,选用稀便率、结肠指数、溃疡比、胸腺指数和脾脏指数作为衡量治疗效果的指标,采用免疫组织化学方法检测结肠黏膜环氧合酶-2(COX-2)和肿瘤坏死因子a(tumor necrosis factor-alpha,TNF-a)的变化.结果:与模型组相比,18 mg/kg PC407治疗可明显阻止结肠炎大鼠的体质量下降(258.9 gvs 223.6 g,P＜0.05),降低稀便发生率(30% vs80%.P＜0.01),改善大鼠结肠组织损伤及病理学改变,包括降低结肠指数(5.03±1.26 mg/gvs 7.60±2.07 mg/g.P＜0.01)及溃疡比(24.69%±2.83% vs 36.13%±9.64%,P＜0.01);同时,PC407治疗可对抗结肠炎症引起的胸腺萎缩(1.964-0.48 mg/g vs 1.08±0.32 mg/g,P＜0.01)和脾脏肿大(2.85±0.33 mg/g vs 3.87±0.96mg/g,P＜0.01),显著降低结肠炎大鼠结肠黏膜COX-2和TNF-a的阳性表达率(30.6%±7.0%vs 67.4%±1.2%,19.5%±3.0% vs 52%±4.7%,P＜0.01).9 mg/kg PC407也可以改善以上指数,只是作用没有18 mg/kg明显.结论:PC407对TNBS/醇诱导的大鼠溃疡性结肠炎治疗作用良好,其机制可能通过下调COx-2及TNF-a的表达,从而缓解结肠炎症.     

内皮素-1对新生大鼠心肌细胞的影响及机制

目的:研究内皮素-1（ET-1）诱导心肌肥大的机制及对抗的药物。方法:在培养新生大鼠心肌细胞中,采用L-型钙通道阻滞剂拉西地平（larc id ip ine）和MN9202、钙激活氯通道阻断剂尼氟灭酸（n iflum ic ac id,NFA）、蛋白激酶C（prote in k inase C,PKC）通路的阻断剂白屈菜季氨碱（chelerythrine,che）和ERK通路阻断剂PD98059（PD）观察内皮素-1在诱导心肌蛋白质合成中的影响。结果:对照组（DMEM）蛋白质含量为273±20μg/m l,ET-1组为312±30μg/m l,较对照组升高14%。ET-1+NFA组、ET-1+che组、ET-1+MN9202组、ET-1+larc id ip ine组、ET-1+PD98059组分别为280±10μg/m l、283±10μg/m l、285±27μg/m l、275±22μg/m l、293±33μg/m l;与ET-1组比较分别降低10%、9%、8.6%、13.1%、6.1%。结论:ET-1刺激引起的心肌细胞蛋白合成与钙激活氯通道和L-型钙通道有关,PKC和ERK通路在ET-1诱导心肌肥大的信号转导通路中起重要作用。     

养阴通脑颗粒对犬血压和心率影响的实验研究

目的 :观察养阴通脑颗粒对麻醉犬平均血压和心率的影响。方法 :将 2 9只犬随机分为 5组 ,养阴通脑颗粒大剂量组 ,中剂量组和小剂量组 ,用维脑路通作阳性药对照组 ,空白对照组给等量生理盐水 ,养阴通脑颗粒、维脑路通和生理盐水均通过胃管灌入犬胃中。股动脉插管经晶体压力传感器测量主动脉平均血压 ,心率从心电图的 R- R间期测算。结果 :养阴通脑颗粒对平均血压和心率有轻度降低作用 ,维脑路通对平均血压有轻度升高作用 ,也有减慢心率的作用 ,两种药对血压和心率的影响都无显著意义。结论 :养阴通脑颗粒对平均血压和心率无明显影响。表明其适合于作为缺血性脑血管疾病的治疗用药     

成骨细胞膜脂筏在TNFR1介导信号转导中的作用

目的:初步研究细胞膜脂筏在MC3T3成骨细胞TNFRl介导信号转导中的作用.方法:应用MCD(10 g/L,60 min)消耗细胞膜胆固醇,以TNF-α(10 μg/L)刺激MC313成骨细胞0、5、10、15、30 rain或以TNF-α+CHX(10ms/L)处理4 h诱导凋亡,以SDS-PAGE/Western blot法检测IKBot、ph-AKT、ph-ERK、ph-p38及caspase-3活性片段表达水平的变化,分析膜胆固醇在TNFRI介导信号转导中的作用.结果:MCD(10 g/L)处理60 min可将膜胆固醇水平减少至约35%.降低膜胆固醇水平不影响TNFRI介导的IKBa信号,但显著抑制TNFRl介导的AKT磷酸化激活;不影响TNFRl介导的caspase03活化和细胞凋亡;也不影响TNFRI介导的ERK和p38磷酸化激活.结论:消耗膜胆固醇可破坏脂筏结构,提示成骨细胞膜脂筏在TNFR1介导AKT激活的过程中发挥重要作用,而TNFR1介导的NF-kB和ERK、p38及凋亡信号通路的激活并不依赖脂筏.