瞿麦正丁醇部位抗肿瘤活性成分筛选

目的:研究瞿麦(Dianthi herba)正丁醇部位中具有抗肿瘤活性的化合物。方法:用乙醇提取瞿麦全草中的化学成分,正丁醇萃取后,在用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Hep G2细胞活性的筛选下,用硅胶凝胶柱色谱以及半制备HPLC分离纯化,得到对肿瘤细胞株的细胞毒活性成分VI3-15-1-1,并通过LC-MS、1H、13C NMR,结合二维核磁图谱,推测出该活性成分为积雪草酸(Asiatic acid,2α,3β,23α-三羟基-熊果-12-烯-28-酸)。结果:通过MTT法分别测定瞿麦正丁醇部位硅胶柱色谱分离得到的8个组分,其中第6个组分(30-33组分)对Hep G2细胞增殖抑制率最高,为28.69%;进一步分离第6个组分得到的VI3-15组分对Hep G2细胞增殖抑制率为91.14%。从VI3-15分离得到的化学成分为积雪草酸,其对Hep G2、SSMC-7721、SK-HEP-1及Bel-7402细胞株的半数抑制率(IC50)分别为55.4、48.9、55.3、58.8μg·m L-1,在体外具有较好地抑制肿瘤细胞增殖的活性。结论:确定瞿麦正丁醇部位抗肿瘤活性成分为五环三萜类化合物积雪草酸。     

加味小柴胡汤抗胃溃疡有效物质部位的血清药物化学研究

该文应用色谱-质谱技术对加味小柴胡汤抗胃溃疡有效物质部位进行血清药物化学研究。通过小鼠无水乙醇致胃溃疡模型考察了全方和有效部位组方抗胃溃疡的药效作用,两者均能明显降低无水乙醇致小鼠溃疡;通过气相-质谱法,检测挥发性部位的化学成分和灌胃给药无水乙醇诱导的大鼠胃溃疡模型后的入血成分,共分析鉴定了63个化合物,约占挥发油总量的93%以上。其中α-姜黄烯23.51%,姜烯11.96%,莪术呋喃烯9.56%,β-倍半水芹烯6.54%,莰烯4.77%,为加味小柴胡汤挥发性物质部位的主要成分,在抗胃溃疡的含药血清中检测到6个原形成分;通过液相-质谱法,正负离子模式同时检测生物碱物质部位提取物化学成分和灌胃给药无水乙醇诱导的大鼠胃溃疡模型后的入血成分,共分析鉴定出17个化合物,在抗胃溃疡的含药血清中检测到6个原形成分,及3,5-O-feruloylquinic acid,巴马汀2个代谢成分。该研究明确了加味小柴胡汤抗胃溃疡的主要有效化学成分,阐明了其药效物质基础,为该经典方剂治疗胃溃疡的创新性临床应用提供科学实验依据,并为进一步的中药新药研制提供基础。     

竹节参化学成分及指纹图谱初步研究

目的:研究竹节参中皂苷类化学成分,并对其指纹图谱进行初步研究。方法:利用大孔吸附树脂柱、硅胶柱、制备型高效液相色谱(HPLC)法进行化合物的分离纯化,根据其理化性质和光谱数据进行结构鉴定;并研究湖北恩施产竹节参药材的HPLC指纹图谱。结果:从竹节参中分离得到3种皂苷类化合物,鉴定了其中2种,分别为人参皂苷Rd和人参皂苷Re。2个已鉴定化合物在湖北恩施产竹节参药材中含量较低。结论:本试验可为科学评价及有效控制竹节参药材的质量奠定基础。     

白术对慢传输型便秘小鼠短链脂肪酸和肠道屏障的影响

目的 通过观察生白术对慢传输型便秘（STC）小鼠的短链脂肪酸和肠道屏障的影响，探究其治疗STC的作用机制。方法 将48只雄性KM小鼠随机分为空白组、模型组、生白术低、中、高剂量组（2.5、5、10 g·kg^-1）及莫沙必利组（2.5 mg·kg^-1）。除空白组外，其余各组均灌胃洛哌丁胺混悬液（5 mg·kg^-1），2次/d，连续灌胃14 d，构建STC小鼠模型。同时各给药组给予相应的药物灌胃治疗，连续14 d，空白组和模型组灌胃等体积蒸馏水。观察生白术治疗对小鼠体质量、排便频率、粪便含水率、肠道推进率的影响；苏木素-伊红（HE）和过碘酸-雪夫（PAS）染色观察小鼠结肠的病理变化；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠血清中胃泌素（GAS）和胃动素（MTL）的含量；气相色谱质谱联用法（GC-MS）检测小鼠粪便中短链脂肪酸（SCFAs）的含量；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠结肠中闭锁小带蛋白-1（ZO-1）、咬合蛋白（Occludin）和闭合蛋白-1（Claudin-1）的mRNA和蛋白表达水平。结果 与空白组比较，模型组小鼠的体质量、排便频率、粪便含水率、肠道推进率均明显下降（P<0.05，P<0.01）；结肠组织排列紊乱，杯状细胞数量减少；血清中GAS、MTL的含量均显著下降（P<0.01）；粪便中SCFAs的含量均有下降趋势，其中乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸的含量明显下降（P<0.05，P<0.01）；结肠组织中ZO-1、Occludin和Claudin-1的mRNA和蛋白表达水平均显著降低（P<0.01）。与模型组比较，生白术低、中、高剂量组小鼠体质量、排便频率、粪便含水率、肠道推进率均明显上升（P<0.05，P<0.01）；结肠组织黏膜层结构完整，无明显损伤，杯状细胞的数量增多；血清中GAS、MTL的含量均显著上升（P<0.01）；粪便中短链脂肪酸的含量均有上升趋势，其中乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸的含量明显上升（P<0.05，P<0.01）；结肠组织中ZO-1、Occludin、Claudin-1的mRNA和蛋白表达水平均明显上升（P<0.05，P<0.01）。结论 生白术能够改善STC小鼠的便秘症状，其作用机制可能与提高肠道中SCFAs含量及促进结肠中ZO-1、Occludin和Claudin-1的mRNA及蛋白水平表达有关。     

复方脑得生中总黄酮纯化工艺研究

目的研究复方脑得生中总黄酮的最佳纯化工艺。方法采用正交设计和单因素试验法，以总黄酮的洗脱率和含量为指标，考察利用D-101树脂富集、纯化复方脑得生中总黄酮的工艺条件及参数。结果优选纯化工艺为：上样溶液浓度0．1g／mL，流速2aV／h，树脂径高比1：7；吸附后，先用5BV的水洗脱，再用5BV40％乙醇洗脱。所得提取物中总黄酮的含量为80．57％，总黄酮转移率达83．76％。结论优选纯化工艺得到的总黄酮含量高，工艺简单，适宜工业化生产。     

大叶蛇葡萄中蛇葡萄素含量的高效液相色谱法测定

目的 建立高效液相色谱法测定大叶蛇葡萄中蛇葡萄素含量的方法.方法 色谱条件:Angilent TC-C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(15∶85,V/V),检测波长为290 nm.结果 蛇葡萄素的回归方程为Y=24 061X+40.07(r=0.999 9,n=6),线性范围为0.101～1.101 μg;平均回收率为99.65%,RSD为1.49%.结论 该方法简单、结果可靠,为大叶蛇葡萄药材的质量控制提供了快速准确的测定方法.     

GC测定金玄痔科熏洗散超临界萃取物中胡薄荷酮的含量

目的:建立气相色谱法测定金玄痔科熏洗散超临界萃取物中胡薄荷酮含量的方法,为完善该中药制剂的质量标准提供参考依据。方法:采用ZB-5(30m×0.25mm,0.25μm)石英毛细管柱,以萘为内标,FID检测器,程序升温。结果:胡薄荷酮在0.0370～0.6667mg.mL-1线性关系良好,r=0.9999;平均回收率为100.64%,RSD=2.36%(n=6)。结论:该方法简便、灵敏、准确,从而为金玄痔科熏洗散中药品种提供了一种可靠性强的含量分析方法。     

RP-HPLC测定罗汉果茎、叶及其提取物中山柰苷的含量

目的:建立罗汉果茎、叶及其提取物中山柰苷的含量测定方法,为以罗汉果茎叶提取物为原料的保健食品质量控制提供依据。方法:采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对罗汉果茎、叶及其提取物中山柰苷的含量,用外标两点法定量。结果:此方法线性关系良好,山柰苷线性回归方程为Y=1459.5X+7.5689(r=0.9999),平均回收率为101.14%,RSD=1.59%(n=6)。结论:该方法简便、可靠,可作为罗汉果茎、叶及其提取物的质量控制方法。     

大孔吸附树脂用于人参抗皱美容添加剂提取液的脱色研究

目的:开发一种高效实用的人参抗皱美容添加剂提取液的脱色纯化技术。方法:以脱色率及人参皂苷Rg1含量为指标,从3种大孔吸附树脂中筛选出人参抗皱美容添加剂提取液的最佳脱色树脂,并以脱色率及人参皂苷Rg1含量为指标考察该树脂对人参抗皱美容添加剂提取液的最佳脱色条件。结果:SA-2型大孔树脂为人参抗皱美容添加剂提取液的最佳脱色树脂,该脱色树脂对人参抗皱美容提取液的的脱色率达70%以上,人参皂苷Rg1得率达90%左右。结论:该脱色方法具有显著的脱色效果,有效成分得率较高,工艺稳定,操作简便,适合于规模化生产。     

代料配方与传统松木栽培茯苓的药效学比较研究

目的比对研究代料配方与传统松木栽培茯苓调节免疫功能和抗疲劳的药效作用,为代料栽培茯苓提供科学依据。方法通过注射氢化可的松建立免疫功能降低的小鼠模型,以香菇多糖为阳性药物对照,分别给药代料配方与传统松木栽培茯苓提取物,测定小鼠血清中白细胞介素2(IL-2)、肿瘤坏因子(TNF-α)和干扰素(IFN-γ)等细胞因子含量及小鼠免疫器官脏器指数,并测定各实验组小鼠负重游泳时间和耐缺氧时间。结果综合分析,代料配方与传统松木栽培茯苓提取物均有较好的药效作用,其中代料配方B组的药效作用优于传统松木G组,代料配方A组的药效作用则与传统松木G组相当。结论通过代料配方与传统松木栽培茯苓药效学的对比分析,本论文研究结论可为代料栽培茯苓提供药理学实验依据。