硒在紫球藻蛋白质、多糖和脂类物质中的累积与分布

目的探讨硒对紫球藻的生长及其主要生化组成的影响,分析紫球藻累积同化硒的动态过程及其硒在细胞主要生化组成中的分布特点。方法利用添加0.5 mg.L-1硒的ASW培养基培养紫球藻(Porphyridium sp.),采用2,3-二氨基萘(DAN)荧光分光光度法测定藻体及各主要生化组成中的硒含量。结果与结论 (1)0.5 mg.L-1硒能够促进紫球藻的生长,最大干重可达到4.8 g.L-1,比对照组增加0.6 g.L-1,添加硒后紫球藻胞外分泌性多糖的产量明显提高,加硒组胞外分泌性多糖含量为180.7 mg.L-1,是对照组的1.69倍。添加硒培养紫球藻不会影响其生化组成和品质。(2)藻体硒含量在对数前期增加明显,由11.19μg.g-1增加到17.78μg.g-1;在培养中后期硒含量出现迅速升高,达到26.95μg.g-1,净增量为9.17μg.g-1;富硒紫球藻细胞的最高硒含量达到27.99μg.g-1,是对照组硒含量的14倍。每单位体积(L)培养物中,紫球藻富集硒的总量为140.16μg,硒的同化率达到28.03%。(3)添加硒后紫球藻培养物中胞外分泌性多糖的硒含量为31.02μg.g-1,,比藻体硒含量高3.03μg.g-1。藻体内硒主要分布在胞体多糖中,硒含量为7.08μg.g-1(DW),是细胞硒含量的25.3%,水溶性蛋白质和粗脂肪结合硒的量分别为5.84μg.g-1(DW)和0.89μg.g-1(DW),分别占细胞硒含量的20.9%和3.2%。     

富含EPA的海洋微藻眼点拟微球藻的大规模培养

采用“随机设计”软件优化了海洋微藻眼点拟微球藻 (Nannochloropsisoculata)的工业培养基 ,细胞在配方 1中的EPA含量占总脂肪酸的 4 0 %以上 ,平均比生长速率高达 0 .32d- 1。 1999年 10月间在 83.5m2 户外池中大规模获得生物量的平均面积产率为 1.0 9g/m2 ·d ,藻粉中含有 4 9.5 0 %的蛋白质、2 0 .30 %的总脂和3.0 0 %的EPA。 2 0 0 0年 8月 ,在 6 .12m2 、2 8.0 2m2 和露天 83.5m2 跑道池中采用耐高温生产藻种 ,生物量面积产率分别为 5 .4 4、9.96和 7.6 6g /m2 ·d ,藻粉中含有 2 .5 0 %的EPA。这表明富含EPA的眼点拟微球藻的工业化生产是完全可行的 ,生产的藻粉可作为单细胞蛋白和开发EPA产品的好原料     

光照和培养时间对紫球藻细胞脂肪酸含量的影响

紫球藻中高不饱和脂肪酸含量丰富,ＡＡ与ＥＰＡ二者之和可达总脂肪酸的４６．６％。不同生长时期的紫球藻脂肪酸组成不同。光强不仅影响藻体中类脂的含量,而且影响着各种脂肪酸在总脂肪酸中的比例。     

抗除草剂海洋微藻的生长和积累EPA的特性

在群体水平上研究了海产野生型眼点拟微球藻(Nannochloropsis oculata)及其抗除草剂Sandoz9785的细胞培养物在生长和脂肪酸组成方面的特性。结果表明,野生型藻株对Sandoz 9785较为敏感,除草剂用量为50μmol·L~(-1)时其生长的被抑制率为75％。在除草剂抑制作用下,野生型细胞的总脂肪酸含量显著下降,而EPA含量显著提高。在160μmol·L~(-1)和320μmol·L~(-1)Sandoz 9785浓度下,筛选到抗除草剂的细胞培养物R160和R320,其平均比生长速率与野生型没有显著差异,细胞的总脂肪酸、16;0、16:1ω9、18:0和18:1ω9的含量都低于野生型藻株,但20:5ω3(EPA)含量则高于野生型。R160在无除草剂的培养基中EPA含量最高,可占细胞干重的3.51％,比野生型提高了30％,但与野生型差异不显著。并讨论了抗性培养物抗Sandoz 9785和积累 EPA的机理。     

螺旋藻不同组份对小鼠脾细胞分泌IL-2的促进作用

本文采用 MTT法观察螺旋藻粗粉及提取物对 CTL L细胞和正常 BALB/ c小鼠脾细胞分泌 IL - 2的影响。实验结果表明 ,所用的螺旋藻的 3个组份在实验浓度范围内对 CTLL细胞无增殖活化作用、螺旋藻粗粉及提取物多糖、藻兰蛋白 1、0 .1和 0 .0 1g· L-1浓度时均对正常小鼠脾细胞分泌 IL - 2有促进作用 ,藻兰蛋白部分作用最强 ,其它提取物作用次之 ,在上述浓度范围内 IL - 2分泌水平有剂量依赖关系。高浓度 (1g· L-1)粗粉及提取物具有协同 Con A(2 mg· L-1)刺激小鼠脾细胞分泌 IL - 2的作用     

铁对蛋白核小球藻生长及营养品质的影响

目的 通过向培养液中添加不同浓度的氯化铁来研究铁对小球藻的生长和营养品质的影响。方法 用不同浓度的氯化铁培养小球藻,检测小球藻生物量、叶绿素a,β-胡萝卜素,蛋白质及可溶性糖含量的变化。结果 当铁的浓度为25 μmol.L-1时,小球藻生长最旺盛,生物量和富集量分别达到5.59 g.L-1和995.17 μg.g-1。同时伴随有叶绿素a、β-胡萝卜素、蛋白质及可溶性糖含量的升高,与对照组相比,增幅分别为75.2%,14.9%,11.7%,15.9%。当铁浓度升高到50 μmol.L-1时,藻的生长及各项指标都明显低与对照组,同时出现藻液变黄甚至藻体死亡现象。结论 铁的浓度为25 μmol.L-1时,为小球藻生长的最适浓度,同时小球藻的营养成分含量均最高。     

19种湛江地区海产贝类中脂肪酸组成GC-MS分析

目的运用GC-MS检测广东湛江地区19种常见的海洋经济贝类19种主要脂肪酸的组成和含量。方法借鉴Kang等组织样品前处理方法,再运用GC-MS分析脂肪酸组成和含量。结果19种海洋贝类脂肪酸含量介于0.08%～0.59%。饱和脂肪酸(SFA)占32.75%～62.35%,单不饱和脂肪酸(MUFA)达到1.55%～22.79%,多不饱和脂肪酸(PUFA)达到22.31%～57.32%。在19种贝类中n-3PUFA含量较高,其中头足纲的贝类要远高于腹足纲和双壳纲的16种贝类,3种头足类EPA和DHA在鲜贝中达到0.518～1.00g.kg-1和0.402～1.377g·kg-1。结论19种贝类都属于低脂肪酸高PUFA生物,在3个纲中n-6/n-3PUFA比值,腹足纲(1.00～14.34)要高于双壳纲(0.16～0.65)和头足纲(0.12～0.44),因此,头足纲贝类是人体补充n-3PUFA的极好来源。贝类的脂肪酸组成和含量分析结果表明,结合19种贝类在分类学和生物学特征的不同,贝类的脂肪酸组成与其分类学上的地位具有一定的联系。     

药用大海马的养殖与野生类群脂肪酸组成与差异性分析

摘要：目的 研究药用大海马的皮层与骨粉、雌雄性别、养殖与野生、生长年龄这4个因素对脂肪酸药效成分的影响,为海马营养学、养殖方式等相关研究提供依据。方法 采用CO2超临界流体萃取技术提取海马中的脂肪酸,GC-MS分析检测脂肪酸的组成及分布,并探究DHA与EPA的最优比。结果 大海马不同类群的脂肪酸组成相同,但含量不同,总脂肪酸含量占体重的1.88%～4.37%,其中不饱和脂肪酸占总脂肪酸的相对含量为41.39 %～44.10 %。结论 以脂肪酸作为药效的参考依据时,养殖海马可以代替野生海马,缓解海马市场药源紧张;海马的最佳养殖年龄为1年,此时不饱和脂肪酸富集最多,且DHA/EPA最接近最佳比例;雄性海马优于雌性,皮层优于骨粉。     

皱纹盘鲍性腺脂质成分分析

目的皱纹盘鲍雄性、雌性性腺中富含的脂质成分进行对比研究。方法基于脂肪酸的存在形态,运用不同的化学衍生和GC/MS分析其脂肪酸组成和含量;用总磷脂钼蓝比色法测定其磷脂含量。结果在皱纹盘鲍雄性性腺中检测出脂肪酸47种,而在皱纹盘鲍雌性性腺中检测出41种,皱纹盘鲍雄性、雌性性腺中PU-FA主要是以AA和EPA为主,且含有一定量的单不饱和脂肪酸,其中雄性、雌性中C18∶1Δ9均在10%以上,不同的化学衍生法得到的结果有显著差异,表明其中脂肪酸的分子形态具有多样性;通过钼蓝比色法可知皱纹盘鲍性腺中磷脂含量较高,均在3%以上。结论皱纹盘鲍性腺具有再利用的价值,提高其附加值,增加经济收益。     

RP-HPLC法测定尿液中非蛋白氮代谢产物的含量

目的建立RP-HPLC法同时测定尿液中尿素、肌酸、肌酐、尿酸和马尿酸5种非蛋白氮代谢产物。方法色谱柱为Century C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-20 mmol.L-1乙酸铵缓冲液(pH 6.8)为流动相,进行梯度洗脱,检测波长为220 nm。结果肌酸、肌酐、尿酸和马尿酸的质量浓度在2~100 mg.L-1内、尿素的质量浓度在100~1 000 mg.L-1内线性关系良好,方法平均回收率为97.6%~105.7%,RSD均小于4.2%。结论该法灵敏、准确,适用于临床尿液中非蛋白氮代谢产物的检测。     

紫球藻对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的调节

目的研究紫球藻对四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖水平及抗氧化能力的影响。方法用四氧嘧啶建立糖尿病小鼠模型,紫球藻藻粉600mg.kg-1和1200mg.kg-1灌胃给药,连续18d后,测定空腹12h血糖、血浆胆固醇、甘油三酯含量和SOD活性。结果与糖尿病模型组相比,两实验组小鼠的血糖显著降低(P<0.001);血浆甘油三酯水平呈下降趋势。1200mg.kg-1紫球藻给药组小鼠血浆SOD活性显著升高(P<0.01)。结论紫球藻能降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖并呈现一定的抗氧化能力。     

腺苷通过内质网应激途径诱导HepG2细胞凋亡的研究

目的探讨腺苷(ADO)诱导人类肝癌HepG2细胞凋亡的分子机制。方法将不同浓度的ADO(0～6mmol.L-1)作用于HepG2细胞36h,采用MTT法测定ADO抑制细胞增殖效应。将HepG2细胞暴露于不同浓度的ADO(0～4mmol.L-1)作用36h或2mmol.L-1ADO作用不同时间(0～48h),观察细胞核的形态学改变;观察2mmol.L-1ADO处理12h和24h后细胞周期的变化;观察2mmol.L-1ADO作用前后Caspase-3和CHOP的亚细胞定位的变化;用West-ernblot检测不同浓度ADO作用后HepG2细胞Caspase-3,Caspase-4,CHOP,JNK的蛋白表达变化。结果ADO对HepG2细胞生长有明显的抑制作用,不同浓度ADO(0.5,1,2,4,6mmol.L-1)处理HepG2细胞36h后,与对照组相比,相对细胞存活数分别下降13.48%±0.12%,27.92%±0.25%,35.21%±0.42%,51.46%±0.24%,71.42%±0.58%,呈现剂量依赖性;不同浓度ADO作用36h或2mmol.L-1ADO作用不同时间(0～48h)后,随着ADO浓度的增加或作用时间的延长,HepG2细胞核发生典型核固缩、核碎裂、核分解等凋亡形态学改变;2mmol.L-1ADO作用12h或24h后,细胞周期分析出现亚二倍体峰,提示细胞发生凋亡,对照组、ADD处理12h及24h组细胞凋亡率分别为1.55%±0.12%、10.96%±0.07%和21.04%±0.26%;2mmol.L-1ADO诱导Caspase-3和CHOP表达增加,并从胞质易位进入胞核内;随着ADO浓度的升高,Caspase-4,Caspase-3,CHOP的表达均升高,均呈现剂量依赖性;而JNK的表达则没有变化。结论腺苷诱导HepG2细胞凋亡与内质网应激途径有关。     

毛细管电泳高频电导法测定苦参碱注射液的含量

目的:采用毛细管电泳高频电导法测定苦参碱注射液的含量.方法:以融硅毛细管(150μm×60 cm)为分离柱,分离电压18.0 kV,以20 mmol·L-1Tris-2 mmol·L-1柠檬酸缓冲体系(pH 8.5)为电泳介质.结果:苦参碱浓度在0.10～1.20 g·L-1范围内线性关系良好(r=0.999 1),平均回收率为100.5%,RSD为1.6%.结论:本法简便、快速.     

从海带渣中提取分离EPA的工艺研究△

目的：探索海带渣中二十碳五烯酸(EPA)提取纯化及含量测定的方法,为深入研究海带渣中EPA提供技术方法。 方法：以海带渣为原料,在45℃条件下用3倍量无水乙醇提取两次得到粗脂,采用氢氧化钾乙醇皂化和盐酸酸化制备游离混合脂肪酸,并以EPA含量为指标,用正交试验探讨尿素包合法富集海带渣中EPA的工艺条件。高效液相色谱法(HPLC)测定游离EPA的含量。结果：皂化后游离EPA的相对含量为5.13 %。尿素包合反应最佳工艺为：95 %乙醇为溶剂,尿脂比3:1,包合温度为-15 ℃的条件下包合两次,每次包合15 h。尿包后EPA的相对含量达24.46 %。结论：该工艺简单易操作,可用于海带渣中EPA的提取纯化及含量测定。     

马粪海胆生殖腺营养成分的含量测定

目的通过对采自黄海海域的马粪海胆生殖腺的营养成分分析,为马粪海胆资源的开发利用提供理论依据。方法水分、灰分、蛋白质均采用国标测定;总糖采用苯酚-硫酸法测定;粗脂肪采用索式提取法测定;脂肪酸采用气相色谱-质谱联用技术测定;无机元素采用原子吸收法测定。结果马粪海胆生殖腺水分含量64.20%,灰分含量12.70%,粗脂肪含量2.34%,蛋白质含量12.25%,总糖含量5.59%。脂肪酸成分中花生四烯酸和EPA含量较高。无机元素中Ca、Mg、Fe等营养元素含量较高。结论马粪海胆生殖腺的营养成分含量丰富,具有较好的开发利用价值。     

添加前体物质对水培益母草中盐酸水苏碱含量的影响

目的探究盐酸水苏碱前体物质对益母草水培过程中产生盐酸水苏碱的影响。方法在益母草水培营养液中按不同浓度和时间分别添加盐酸水苏碱可能的前体物质L-脯氨酸和L-鸟氨酸,并采用HPLC-ELSD法测定各组盐酸水苏碱的含量。结果 L-脯氨酸添加的最佳浓度为0.5 mmol.L-1,最佳转化时间为96 h,盐酸水苏碱由对照的1.037%上升至1.585%;L-鸟氨酸添加的最佳浓度为1 mmol.L-1,转化时间为72 h时,盐酸水苏碱含量达到1.135%。结论添加前体物质L-脯氨酸和L-鸟氨酸,对益母草中盐酸水苏碱积累有效,且L-脯氨酸的效果优于L-鸟氨酸。     

血清尿素与肌酐在上、下消化道大出血鉴别诊断中的意义

目的 探讨血清尿素（BUN）与肌酐（Cr）在上、下消化道大出血鉴别诊断中的意义.方法回顾性分析68例消化道大出血病例.结果 36例上消化道大出血病例中32例血清尿素＞8.9 mmol·L-1,其平均值为（13.9±2.5）mmol·L-1,血清肌酐为（86.3±14.2）μmol·L-1.32例下消化道大出血组血清尿素为（5.8±2.4）mmol·L-1,血清肌酐为（84.5±12.5）μmol·L-1.上消化道出血组血清尿素与下消化道出血组比较P＜0.01,有显著性差异.其血清肌酐间比较P＞0.05,无显著性差异.上消化道和下消化道出血组的血清肌酐与对照组比较均P＞0.05,无显著性差异.结论 在参考血清肌酐的情况下,血清尿素有助于鉴别诊断上、下消化道大出血.     

河豚鱼肝油中EPA、DHA的纯化与含量测定

目的:研究河豚鱼肝油中二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)的纯化方法,并建立EPA和DHA的含量测定方法。方法:河豚鱼肝油经精炼、盐析、低温-钾盐乙醇法和尿素包合法相结合纯化得不饱和脂肪酸;不饱和脂肪酸经甲脂化后,采用气相色谱法测定EPA和DHA的含量。结果:河豚鱼肝油经纯化可获得高纯度的不饱和脂肪酸;EPA和DHA的含量分别为0.2619g·g-1和0.4527g·g-1。EPA甲酯和DHA甲酯标准品浓度均在0.05～0.25mg·mL-1范围内同其与内标的峰面积比值呈良好的线性关系(r分别为0.9997、0.9998)。结论:河豚鱼肝油中EPA和DHA的纯化方法可行;检测方法操作简单、结果准确、重复性良好,是一种可行的含量测定方法。     

驱虫斑鸠菊提取物抑制恶性黑色素瘤A375细胞增殖的研究

目的探讨驱虫斑鸠菊提取物对人恶性黑色素瘤A375细胞的增殖以及对其酪氨酸酶活性和黑色素含量的影响。方法四甲基噻唑氮蓝比色法测定对A375细胞抑制作用;显微法观察细胞形态;比色法测定酪氨酸酶活性和黑色素含量。结果在一定质量浓度范围(1～40mg.L-1)内随着驱虫斑鸠菊提取物质量浓度增加可抑制黑色素瘤细胞的增殖;驱虫斑鸠菊提取物质量浓度小于10mg.L-1,对酪氨酸酶活性和黑色素合成抑制有增加的趋势;大于20mg.L-1时,显示一定的细胞毒性作用。结论驱虫斑鸠菊提取物能显著抑制恶性黑色素瘤A375细胞的增殖,在一定质量浓度范围内(1～40mg.L-1)有浓度依赖关系(P<0.05)。     

高糖对高钾刺激引起新生大鼠星形胶质细胞谷氨酸释放和再摄取的影响

目的探讨高糖对高钾刺激引起星形胶质细胞谷氨酸释放和再摄取的影响。方法胶质原纤维酸性蛋白免疫染色法鉴定培养的星形胶质细胞纯度。星形胶质细胞分别用含葡萄糖5,10,20和40 mmol.L-1的细胞外液培养1 h,然后加入氯化钾75 mmol.L-1,于0,1,2,3,4和5 min后分别取细胞培养液。用柱前邻苯二甲醛和N-异丁酰基-D-半胱氨酸衍生高效液相色谱法测定细胞培养液中谷氨酸含量。结果培养的星形胶质细胞纯度在95%以上。不同浓度葡萄糖的细胞外液孵育星形胶质细胞0,1和3 h细胞培养液中谷氨酸含量无明显变化。氯化钾75 mmol.L-1孵育1,2,3,4和5 min后,含葡萄糖10,20和40 mmol.L-1组细胞培养液中谷氨酸含量均比对应时间点含葡萄糖5 mmol.L-1组明显升高(P<0.01),葡萄糖5和10 mmol.L-1组谷氨酸含量在3 min达到峰值,葡萄糖20 mmol.L-1组4 min达峰值;葡萄糖40 mmol.L-1组3 min谷氨酸含量升高最明显,4 min短暂下降后5 min又明显升高。结论高糖能够促进星形胶质细胞谷氨酸的释放和抑制再摄取。