氧化型染发剂主要成分对皮肤细胞DNA,脂质和蛋白质合成 …

目的：探讨氧化型染发剂主要成分对皮肤角朊细胞ＤＮＡ和脂质合成能力及对真空成纤维细胞蛋白质合成能力的影响。方法;用氧化型染发剂的２种主要成分双氧水（Ｈ２Ｏ２）和对苯二胺（ＰＰＤ）及两者的混合物对大鼠角朊细胞和真皮成纤维细胞进行染毒,然后进行放射性核素标记产物的掺入,在Ｂｅｃｋｍａｎ ＬＳ ５０００ＴＤ液体闪烁仪上测定ｃｐｍ值。结果 经１２ｈ染毒后,受试样品对大鼠皮肤细胞的ＤＮＡ、脂质和蛋白质合成均有     

苯二胺(PPD)和双氧水(H2O2)对大鼠皮肤细胞影响的实验研究

目的:探讨与研究氧化型染发剂主要成分PPD、H2O2对大鼠皮肤细胞的影响.方法:用氧化型染发剂的主要成分对苯二胺(PPD)与双氧水(H2O2)作为染毒剂,分别对大鼠皮肤角朊细胞与成纤维细胞进行染毒,通过放射性核素标记产物14C-亚麻油酸,3H-胸腺嘧啶(3H-TdR),3H-亮氨酸(3H-Pro)分别进行掺入,用LS-1000液体闪烁仪给予cpm值的测定.通过单细胞凝胶电冰测定对角朊细胞DNA损伤.结果:用PPD、H2O2及PPD-H2O2对大鼠皮肤角朊细胞分别染毒12h后,跟对照组相比,发现在10～80μg/ml的剂量范围内,对角朊细胞脂质的合成、角朊细胞DNA的合成、成纤维细胞蛋白质的合成及对角朊细胞的DNA断裂均有一定的影响,且染毒剂的浓度与cpm值、彗尾长度之间均存在剂量反应关系.结论:PPD、H2O2可能对机体存在着潜在的危害.     

获取SD仔鼠角朊细胞和真皮成纤维细胞6种方法比较

目的 :探讨如何以简便快捷的方法获得大量最佳生长状态的角朊细胞和真皮成纤维细胞以作为皮肤组织工程的种子细胞 .方法 :用 2 .5 g·L -1 胰酶、35 g·L -1 热溶素和 9.0× 1 0 3 U·L-1 Dispase分别在不同条件下处理皮肤标本 ,观察表皮与真皮的分离情况 ,并分别培养角朊细胞和真皮成纤维细胞 ,观察比较细胞的贴壁率和克隆形成率 ,通过MTT和BrdU检测观察细胞的生长状态 ,并分别用不同方法获得的细胞构建组织工程皮肤 .结果 :在各种条件下 ,Dispase处理组获得的细胞数量、细胞贴壁率和克隆形成率均优于其他消化液处理组 ,细胞纯度高 ,生长状态良好 ;用其他方法获得的细胞生长状态相似 ,都可成功构建组织工程皮肤 .结论 :使用9.0× 1 0 3 U·L-1 Dispase可以简便快捷的获得大量生长状态良好的角朊细胞和真皮成纤维细胞 ,以作为皮肤组织工程的种子细胞 ,合适的消化方法、时间和温度可以最大限度保持原代细胞的活力     

染发剂对豚鼠皮肤表皮和真皮超微结构的影响

目的:探讨染发剂对豚鼠皮肤的毒性作用.方法:用市售染发剂涂抹豚鼠皮肤制作染发剂的皮肤慢性损伤动物模型,统计豚鼠的体重变化,以及用电子显微镜观察皮肤表皮和真皮的超微结构改变.结果:在8000～20000倍电子显微镜下观察,皮肤角质形成细胞及真皮成纤维细胞的细胞核、细胞器都出现不可逆转损伤.结论:50%、100%浓度的染发剂可导致豚鼠皮肤角质形成细胞和成纤维细胞发生不可逆病理改变,以及豚鼠的生长抑制等全身性影响.     

下期要目

应用ＤＮＡＰｏｏｌｉｎｇ技术对一例母系遗传非综合征耳聋大家系进行全基因组扫描氧化型染发剂主要成分对皮肤细胞ＤＮＡ、脂质和蛋白质合成能力的影响异搏定对非ｐ ｇｐ高表达细胞株的增敏及耐药逆转作用的研究体外循环围手术期患者血浆内皮素浓度变化及抑肽酶对其的影响ＩＧＦ Ｉ、ＥＧＦ在糖尿病性肾病中的变化及临床意义食管癌ｐ53基因突变与临床病理的相关研究下期要目     

应用胶原蛋白构建组织工程皮肤的实验研究

目的 探讨以胶原蛋白为支架构建组织工程皮肤的体外培养理想方法.方法 体外分离、培养、鉴定角朊细胞和成纤维细胞;利用本室自制胶原蛋白,制备胶原凝胶和胶原海绵两种组织工程支架;在成功构建人工真皮的基础上,种植角朊细胞,构建人工复合皮肤,并进行组织学及免疫组化检查.结果 制备的胶原海绵孔径平均100～150μm,孔隙率89%,组织相容性良好;两种皮肤替代物免疫组化染色显示Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白(FN)和层粘连蛋白(Laminin)阳性,HE染色可见均具有表皮和真皮双层结构,厚度约3mm,在形态结构上与正常皮肤相似.结论 培养的人角朊细胞和成纤维细胞种植于胶原蛋白支架上气-液界面培养可构建出具有类似天然皮肤结构的组织工程皮肤.     

地白忍煎剂对角朊细胞和成纤维细胞的细胞生物学效应

目的：观察地白忍煎剂（ Ｄ Ｂ Ｒ Ｄ）对角朊细胞和成纤维细胞增殖的影响以及对成纤维细胞收缩功能的潜在作用．方法：将人角朊细胞和真皮成纤维细胞分别培养于含不同稀释度 Ｄ Ｂ Ｒ Ｄ 的培养基中，以噻唑蓝染色法测定细胞增殖率．采用体外胶原立体培养模型观察 Ｄ Ｂ Ｒ Ｄ 作用后成纤维细胞收缩功能的变化． 结果：１∶１０７ 稀释的 Ｄ Ｂ Ｒ Ｄ对角朊细胞和成纤维细胞均具有促增殖作用，而１∶１０ 稀释的 Ｄ Ｂ Ｒ Ｄ 仅促进角朊细胞的增殖． Ｄ Ｂ Ｒ Ｄ 剂量依赖性地抑制含成纤维细胞的胶原凝胶块的收缩率，且该抑制作用可被仅含１００ ｍ Ｌ／ Ｌ胎牛血清的培养基逆转． 结论： Ｄ Ｂ Ｒ Ｄ可促进角朊细胞和成纤维细胞的增殖，并可逆性地抑制胶原立体培养的成纤维细胞的收缩功能     

茶多酚对原代培养的大鼠皮肤角朊细胞和成纤维细胞生长的 …

目的 探讨茶我酚对原代培养的皮肤角朊细胞和成纤维细胞生长作用的影响。方法 利用原代２的两种主要的皮肤细胞－－角朊细胞和成纤维细胞,采用丙酮酸比色法、ＴＢＡ比色法和ＤＴＮＢ（双硫代对硝基苯甲酸）法测定细胞２的上清液胞浆酶（ＬＤＨ）释放情况,脂质氧化产物（ＭＤＡ）、谷胱甘这氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）,并测定培养细胞的生长情况,对茶多酚在皮肤中可能起到的作用进行评价。结果 在加入茶多酚后不同时间地多数发现     

人工皮肤培养模型的建立

模拟体内生理条件,采用细胞三维培养技术将角朊细胞接种在一活性真皮替代物（即成纤维细胞胶原凝胶）上,然后行气液界面培养,使角朊细胞的一些正常生长和分化的特殊提以再现,从而形成一种能应用于临床的人工皮肤。而且这一培养模型使角朊细胞、成纤维细胞和细胞外基质构成了一有机的整体,因而也是研究表皮分化、其表皮间相互关系的良好模型。     

干扰素对人皮肤成纤维细胞抑制作用的体外观察

干扰素对人皮肤成纤维细胞抑制作用的体外观察李英春，陈壁，汤朝武（￥第四军医大学西京医院烧伤科，西安７１００３３）关键词干扰素，成纤维细胞，皮肤中图号Ｒ６１９．６皮肤成纤维细胞（Ｆｂ）通过合成胶原等细胞外基质（ＥＣＭ）成分在维持真皮结缔组织稳定性和参与...     

超低温慢速冻存与玻璃化冻存对大鼠骨髓细胞DNA合成功能的影响

目的 :研究超低温慢速冻存和玻璃化冻存对大鼠骨髓细胞的DNA合成功能的影响。方法 :采用3H TdR掺入的方法对慢速和玻璃化冻存后的大鼠骨髓细胞DAN合成功能进行比较。结果 :慢速冻存 1d、5d、10d、2 0d与新鲜对照相比 ,在DAN合成功能上差异无显著性 ;而玻璃化冻存组与慢速冻存组相比 ,短期差异无显著性 ,10d后 ,每分钟脉冲数 (cpm)值显著下降 (P <0 .0 1)。结论 :常规慢速冻存后的骨髓细胞损伤较小 ,DNA合成水平较高 ;玻璃化冻存在短期内具有一定的可行性     

“美容牌”染发剂对雄性小鼠生殖细胞非程序DNA合成的诱导

本文应用雄性小鼠生殖细胞非程序DNA合成(UDS)检测方法研究了“美容牌”染发剂对雄性生殖细胞DNA的损伤作用。发现该染发剂诱发的UDS与药物剂量呈线性正相关。提示此类染发剂对雄性生殖细胞DNA有损伤作用。其遗传毒理效应应引起注意。     

环孢霉素A对游离肝细胞核酸及蛋白质合成的影响

用ＳＤ大鼠肝细胞原代培养研究了环孢霉素Ａ对肝细胞蛋白质及核酸合成的影响，不同浓度的环孢霉素Ａ加入培养液、培养４ｈ后加＾３Ｈ－ＴｄＲ，＾３Ｈ－Ｕｒｄ，＾３Ｈ－Ｌｅｕ入培养继续培养１２，２４及３６ｈ，测肝细胞放射性强度，发现环孢霉素Ａ可抑制ＲＮＡＲＮＡ，蛋白质合成，对ＤＮＡ无明显影响。     

辛伐他汀对鼠心脏成纤维细胞DNA合成的影响

目的探讨辛伐他汀(Sim)对新生SD大鼠心脏成纤维细胞(CFs)DNA合成的影响及甲羟戊酸(MVA)的干预效应。方法采用胰酶消化、差速贴壁法培养新生SD大鼠CFs,以3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测定DNA合成,观察不同浓度Sim及MVA分别作用不同时间对CFsDNA合成功能的影响。结果 (1)CFs的3H-TdR掺入率随着Sim干预浓度的增加而降低,其中10-6和10-5mol／L Sim组的3H-TdR掺入率分别为(1175±202．66)、(771±164．86)cpm／2000细胞, 显著低于对照组的(1608±204．32)cpm／2000细胞(均P<0．01);(2)10-5mol／L Sim作用CFs 6、12、18、24、30、36、42、48 h, 随着Sim作用时间的延长,CFs的3H-TdR掺入率呈递减趋势,与时间呈明显的负相关(r=-919,P<0．01);(3)CFs的3H-TdR 掺入率随着MVA干预浓度的增加呈进行性上升,其中10-4、10-3 mol／L MVA 10-5 mol／LSim组3H-TdR掺入率分别为 (1612±308．57)、(1995±353．83)cpm／2000细胞,显著高于对照10-5mol/L Sim组的(771±164．86)cpm／2000细胞(P<0．01); (4)10-3 mol／L MVA分别作用CFs 6-48 h,CFs的3H-TdR掺入率随着MVA作用时间的延长而逐渐增加,呈明显的正相关(r=0．968,P<0．01)。结论 Sim呈浓度-时间依赖方式抑制CFs DNA的合成且可被MVA拮抗,提示Sim可抑制CFs 增殖,延缓心肌纤维化,其作用可能通过MVA途径实现。     

氧化型染发剂对小鼠精子畸形和骨髓细胞微核的影响

目的探讨氧化型染发剂对小鼠精子畸形和骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核的影响。方法将40只成年健康昆明种雄性小鼠随机分为染发剂A组、染发剂B组、染发剂C组和对照组,每组10只。3个染发剂组用氧化型染发剂染毒,每隔2d经皮染毒1次,连续染毒7次,于首次染毒后35d处死小鼠,检测精子畸形率及骨髓微核率。结果各染发剂组精子畸形率均高于对照组(P<0.008);各染发剂组小鼠精子畸形率比较差别均无统计学意义(P>0.008)。染发剂A组小鼠骨髓PCE细胞微核率变化与对照组比较差别无统计学意义(P>0.008);染发剂B组和染发剂C组小鼠骨髓PCE细胞微核率均高于对照组,差别有统计学意义(P<0.008);染发剂B组和染发剂C组骨髓细胞微核率高于染发剂A组,差别有统计学意义(P<0.008);染发剂B组与染发剂C组骨髓细胞微核率比较差别无统计学意义(P>0.008)。结论氧化型染发剂可导致小鼠精子畸形和骨髓微核率的升高,对使用者的健康存在潜在危害。     

胰岛素对大鼠血管平滑肌细胞增殖及胶原蛋白合成的影响

目的 观察胰岛素对分离培养的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖及胶原蛋白合成的影响.方法 采用大鼠的腹主动脉血管平滑肌细胞分离培养,应用3H-TdR和3H-脯氨酸掺人方法检测胰岛素对大鼠VSMCs干预后,VSMCs内DNA合成以及胶原蛋白合成.结果 胰岛素可促进处于静止状态的大鼠VSMCs DNA及胶原蛋白的合成,并呈现明显的浓度依赖关系,在40 nmol/L的浓度时DNA及胶原蛋白的合成达到高峰,DNA及胶原蛋白分别处于36 h和48 h时合成最为显著.结论 胰岛素可明显促进培养的VSMCs增殖及胶原蛋白的合成.     

肝细胞生长因子对辐射后心肌细胞蛋白合成的保护作用

目的 研究肝细胞生长因子(HGF)对60Coγ射线照射体外培养的大鼠心肌细胞蛋白表达的影响.方法 体外培养新生大鼠心肌细胞,分为未照射组、单纯照射组、HGF处理照射组,照射组细胞分别用60Coγ射线20Gy单剂量照射心肌细胞,HGF处理的照射组在照射前3 h用终浓度为40ng/ml的HGF孵育.在照射后48 h:(1)用蛋白检测试剂盒检测各组心肌细胞中的总蛋白含量;(2)流式细胞仪检测各组的细胞周期变化;(3)带绿色荧光蛋白基因的腺病毒(AdGFP)感染各组心肌细胞,感染后48 h用流式细胞仪检测各组心肌细胞中所含的绿色荧光蛋白的荧光强度,间接比较各组心肌细胞中绿色荧光蛋白的生成量.结果 照射后48h,照射组心肌细胞中总蛋白含量较未照射组减低(P＜0.01),HGF处理的照射组心肌细胞中总蛋白含量较单纯照射组增高(P＜0.05).照射后96 h、感染AdGFP后48 h,照射组心肌细胞的绿色荧光强度明显弱于未照射组(P＜0.01),HGF处理的照射组心肌细胞的绿色荧光强度较单纯照射组增强(P＜0.01).结论 60Coγ射线单剂量照射抑制体外培养的心肌细胞蛋白合成,HGF可部分逆转60Coγ射线对心肌细胞蛋白生成的抑制作用.     

油漆和染发剂导致人体染色体畸变的分析:附2例首报染色体核型

目的 分析一对夫妻长期从事油漆或染发职业对早期胚胎细胞染色体突变的作用,为预防不良妊娠和遗传缺陷儿出生积累临床资料.方法 通过1例新生儿和1例妊娠21周胎儿染色体突变的临床和实验检测以及其父母双方血液相关指标的分析,探讨育龄期长期接触油漆或染发剂对早期胚胎细胞基因突变的影响.结果 1例新生儿和1例胎儿染色体均发生突变,核型分别是46,XX,del(2)ptet'q31)和46,XX,t(4;12;15),2例的父母亲染色体正常.但因长期接触油漆或染发剂而有头晕、头疼、失眠等症状,淋巴细胞微核发生率和血铃浓度均显著升高,并有白细胞、血小板和血红蛋白下降等.结论 长期从事油漆或染发工作可引起机体中毒,母体中的有害物质通过胎盘而影响早期胚胎正常发育,最终可导致胚胎基因损伤和染色体突变,因此计划妊娠前后要注意脱离有害环境,或通过相关检查了解机体中毒状况,以减少不良妊娠的发生.     

雷公藤内酯对 L_(1210)等癌细胞的体外杀伤作用

以台盼兰排染法及中性红活染比色法测定雷公藤内酯对 L_(1210),HeLa 等癌细胞的体外杀伤作用,以[~3H]TdR,[~3H]UR 参入、荧光染色等方法观察药物对这些细胞株核酸合成的影响,发现该药对癌细胞的杀伤作用与其抑制核酸合成有关。