三拗汤对支气管哮喘大鼠Th1,Th2转录调节机制的研究

目的:重点探讨三拗汤对哮喘大鼠Th1/Th2细胞的调节作用,并深入研究其对转录因子GATA-3和T-bet水平的干预作用.方法:以鸡卵清蛋白腹腔注射并雾化吸入复制大鼠哮喘模型,分别以不同剂量三拗汤及地塞米松灌服,检测用药前后哮喘大鼠肺泡灌洗液中细胞因子IL-4和IFN-γ含量;RT-PCR方法检测肺组织中T-bet和GATA-3 mRNA表达水平.结果:中药中剂量组大鼠BALF中IL-4水平较其他组明显减低,IFN-γ水平升高,IL-4/IFN-γ较哮喘组明显减小,肺组织GATA-3和T-bet转录因子mRNA表达水平分别与IL-4及IFN-γ变化水平相一致.结论:中药三拗汤可能通过对哮喘大鼠Th1/Th2细胞转录因子的调节作用,达到抑制哮喘大鼠气道炎症的目的.     

三拗芎葶合剂对哮喘大鼠肺NGF表达作用研究

目的:探讨三拗芎葶合剂对哮喘大鼠肺神经生长因子(NGF)表达的影响。方法:取健康SD大鼠60只,随机分为空白对照组、哮喘模型组、三拗芎葶合剂低、中、高剂量组、地塞米松组。除空白组外,其他5组均行哮喘造模,三拗芎葶合剂不同剂量组分别灌胃给予相应剂量的药液,模型组给予等量生理盐水,地塞米松组给予相应剂量地塞米松腹腔注射。采用免疫组织化学法和原位杂交法观察各组大鼠肺组织NGF及NGFmRNA的表达,光镜观察肺组织病理变化。结果:哮喘组大鼠NGF及NGFmRNA在气道的表达明显高于正常组(P<0.05)而三拗芎葶合剂各剂量组和地塞米松则能明显降低大鼠NGF及NGFmRNA表达(P<0.05)。结论:三拗芎葶合剂能抑制哮喘大鼠NGF的表达,并抑制炎性细胞的分泌,这可能是其治疗哮喘的作用机制之一。     

麻杏芎葶合剂对哮喘模型大鼠气道炎症的调控作用

目的 观察麻杏芎葶合剂对哮喘大鼠气道炎症的作用及机制.方法 SD大鼠100只随机分为6组:正常对照组、模型对照组各16只;麻杏芎葶合剂低、中、高剂量组(低、中、高剂量组),地塞米松组各17只.采用卵白蛋白溶液皮下注射和超声雾化器激发建立哮喘大鼠模型,各组给予相应药物7天后处死,取肺组织进行HE染色观察病理变化;采用免疫组织化学法和原位分子杂交(ISH)法检测肺组织的神经生长因子(NGF)及NGF mRNA水平;采用免疫组化学法检测肺组织蛋白激酶C(PKC)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平;采用RT-PCR法检测肺组织转录因子T-bet mRNA,GATA-3 mRNA;采用ELISA法检测血清细胞因子白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)表达.结果 与模型对照组比较,低、中、高剂量组肺组织炎性细胞浸润减少,支气管周围水肿减轻,气道上皮损伤减小.与模型对照组比较,中、低剂量组T-bet mRNA、GATA-3 mRNA及T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值明显下降(P＜0.01);低、中、高剂量组及地塞米松组NGF mRNA和NGF蛋白表达明显低于模型对照组(P＜0.01);低、中、高剂量组CGRP表达低于模型对照组(P＜0.05或P＜0.01),低、中、高剂量组与地塞米松组比较差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).与模型对照组比较,中、低剂量组IFN-γ/IL-4比值明显下降(P＜0.05或P＜0.01). 结论 麻杏芎葶合剂能够减少炎性细胞在肺组织中的浸润,减轻哮喘气道炎症反应,缓解哮喘病情.     

川芎嗪对儿童哮喘中转录因子T-bet/GATA-3表达失衡干预作用的研究

目的通过检测30例哮喘儿童T-betmRNA和/GATA-3mRNA的表达强度及上清液中IFN-γ、IL-4水平,评价T-bet/GATA-3的比率与Th1/Th2失衡的关系及哮喘发病机制,研究川芎嗪对儿童哮喘中转录因子T-bet/GATA-3表达失衡的干预作用。方法抽取30例正常对照组、30例哮喘发作组儿童空腹外周静脉血4 ml,分离出单核细胞,用ELISA法测定上清液IL-4、IFN-γ含量,RT-PCR法检测转录因子T-bet mRNA和GATA-3mRNA表达强度。结果哮喘组儿童IFN-γ/IL-4比值明显低于正常对照组(P<0.001),川芎嗪干预组IFN-γ/IL-4比值明显高于哮喘(P<0.001),差异有显著性。哮喘组T-bet/GATG-3比值低于正常对照组(P<0.001),川芎嗪干预组T-bet/GATA-3比值高于哮喘组(P<0.001),差异有显著性。结论川芎嗪能通过上调儿童哮喘患者T-bet mRNA的表达强度,降低GA-TA-3mRNA表达水平,从而逆转Th1/Th2功能失衡,对儿童哮喘起到有效防治作用。     

小青龙汤对单纯型和复合型变应性鼻炎豚鼠模型Th1/Th2失衡的影响

目的:建立单纯型和肾阳虚复合型2种不同变应性鼻炎模型,探讨小青龙汤对2种变应性鼻炎模型Th1/Th2失衡作用的异同。方法:将105只雄性豚鼠随机分7组,每组15只:空白对照组(A组),单纯模型对照组(B1组),小青龙汤干预单纯模型组(B2组),息斯敏干预单纯模型组(B3组),肾阳虚复合模型对照组(C1组),小青龙汤干预肾阳虚复合模型组(C2组),息斯敏干预肾阳虚复合模型组(C3组)。B1、B2、B3组进行单纯变应性鼻炎造模;C1、C2、C3组在单纯变应性鼻炎的模型上进行肾阳虚复合模型造模。造模成功后,模型组进行用药观察,记录各组局部过敏反应;ELISA法(酶联免疫吸附试验法)检测血清中IFN-γ、IL-4、IL-2和IL-10等细胞因子含量;荧光定量PCR法测脾组织中IFN-γmRNA、IL-4mRNA、T-bet mRNA、GATA-3 mRNA等转录因子的相对含量。结果:变应性鼻炎单纯模型和肾阳虚复合模型均出现IFN-γ降低(P0.01),IL-4升高(P0.01),IFN-γ/IL-4比值降低(P0.01),IFN-γmRNA降低(P0.01),IL-4 mRNA升高(P0.01),IFN-γmRNA/IL-4 mRNA比值降低(P0.01),T-bet mRNA降低(P0.01),但可使GATA-3 mRNA升高(P0.01),因而T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值也相对降低(P0.01)。小青龙汤可使单纯模型IFN-γ升高(P0.01),IL-4降低(P0.01),IFN-γ/IL-4比值升高(P0.01);升高IFN-γmRNA(P0.01),降低IL-4 mRNA(P0.01),使IFN-γmRNA/IL-4 mRNA比值升高(P0.01);使T-bet mRNA升高(P0.01),但可使GATA-3 mRNA降低(P0.01),从而使T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值也相对升高(P0.01)。小青龙汤可降低肾阳虚复合模型中IL-4的含量(P0.01),对IFN-γ作用不明显,升高IFN-γ/IL-4比值(P0.01);可使IFN-γmRNA升高(P0.01),但对IL-4 mRNA变化不大,IFN-γmRNA/IL-4 mRNA比值升高(P0.01);对T-bet mRNA作用不明显,但可使GATA-3 mRNA降低(P0.05),因而T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值也相对升高(P0.01)。结论:小青龙通过调节IFN-γ/IL-4比值、IFN-γmRNA/IL-4 mRNA比值和T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值,来调节Th1/Th2平衡,对单纯变应性鼻炎模型的过敏反应的改善更为明显。     

穴位敷贴对过敏性哮喘豚鼠Th/Th2失衡的免疫调节效应

目的:观察豚鼠血清中白介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)含量以及T-bet和GATA-3 mRNA的表达情况,探讨穴位敷贴对过敏性哮喘的免疫调节机制。方法:将30只雄性豚鼠随机分为正常组、模型组、穴位组、非穴位组、阳性对照组(氨茶碱组),每组6只。以卵清白蛋白致敏激发法建立哮喘模型,采用ELISA法检测豚鼠血清中IL-4、IFN-γ含量,RT-PCR法检测肺组织T-bet和GATA-3 mRNA的表达。结果:穴位组与非穴位组IL-4血清含量、GATA-3 mRNA表达明显低于模型组,IFN-γ含量、T-bet mRNA表达明显高于模型组(P<0.01),非穴位组血清IL-4、IFN-γ含量,T-bet mRNA和GATA-3 mRNA的表达与穴位组相比有显著性差异(P<0.01)。结论:穴位敷贴可以通过调节转录因子的表达,从而改变Th0细胞分化方向,影响特征性细胞因子的分泌,纠正Th1/Th2比例失衡,这是穴位敷贴控制哮喘气道炎症的一种可能的机制,且药物敷贴于穴位处较之非穴位处能够发挥更好的疗效。     

天灸对哮喘模型大鼠细胞因子及特异性转录因子的影响

目的:探讨天灸调节哮喘大鼠免疫失衡的机制。方法:将70只SD雄性大鼠分为正常组、安慰剂组、地塞米松组、大饼长程贴药组、大饼短程贴药组、小饼长程贴药组、小饼短程贴药组,每组各10只,除正常组外均采用卵白蛋白致敏和激发建立大鼠哮喘模型,对贴药组进行天灸治疗,其中大饼贴药组用1cm×1cm的大药饼贴药,小饼贴药组用0.5cm×0.5cm的小药饼贴药,每次按照相关穴位进行贴药,每次贴药5h,每天1次,共4次为一疗程。长疗程组共治疗3个疗程,短疗程组治疗1个疗程。地塞米松组予地塞米松进行腹腔注射,疗程与长程贴药组相同。实验结束后,观察哮喘大鼠外周血中嗜酸性粒细胞(EOS)变化;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠肺组织中免疫球蛋白E(IgE)、细胞因子白介素4(IL-4)及干扰素γ(IFN-γ)的含量变化;用实时荧光定量(real-time Q-PCR)技术检测肺组织转录因子T-bet(T-box express in T cell)及GATA-3(GATA binding protein 3)蛋白的表达水平。结果:与正常组比较,安慰剂组全血EOS计数及血清IL-4、IgE含量均升高(均P0.01),血清中IFN-γ含量明显降低(P0.01));天灸贴药各组及地塞米松组可显著降低哮喘大鼠EOS、IgE水平及IL-4含量(均P0.01),提高IFN-γ的含量(P0.01)。与正常组比较,安慰剂组中T-bet mRNA表达显著降低(P0.01);各治疗组能显著提高T-bet mRNA的表达,明显减少GATA-3mRNA的表达(P0.01)。与短程贴药组比较,长程贴药组及地塞米松组中T-betmRNA的表达明显升高(P0.01),GATA-3mRNA的表达显著降低(P0.01);长程贴药组与地塞米松组比较无显著性差异(P0.05),大饼贴药组与小饼贴药组比较亦无显著性差异(P0.05)。结论:天灸能明显减轻哮喘大鼠的气道炎症,随时间的延长,疗效增加,具有明显的时效性,与药饼的大小无明显关系。     

宣肺逐瘀化痰法对低氧性肺动脉高压血管活性物质的影响

目的:探讨三拗芎葶合剂对低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠血浆内皮素1(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)、血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列环素1α(6-KETO-PGF1α)的影响。方法:取健康雄性SD大鼠50只,随机分为空白对照组、模型组、卡托普利组、中药高剂量组、中药低剂量组五组,除空白对照组外,将其余4组大鼠放入常压缺氧箱内缺氧造模5周,从第3周起各组分别用等量生理盐水、卡托普利溶液及三拗芎葶合剂灌胃3周,各组动物在同等条件下饲养。5周之后用右心导管法检测PASP、PADP、mPAP;用放免法检测ET-1、CGRP、TXB2、6-KETO-PGF(1α)。结果:实验显示模型组PASP、PADP、mPAP明显升高;中药高、低剂量组CGRP、6-KETO-PGF(1α)明显升高,ET-1、TXB2、PASP、PADP、mPAP明显降低。结论:三拗芎葶合剂能够通过升高大鼠血浆CGRP水平、6-KETO-PGF(1α)含量,降低TXB2、ET-1含量而防治肺动脉高压,并改善HPH大鼠血液的高凝状态。为宣肺逐瘀化痰法治疗肺动脉高压提供了试验依据。     

五虎汤对病毒诱发幼年哮喘大鼠肺组织初始CD4~+T细胞转录因子表达的影响

目的:探讨五虎汤对病毒诱发幼年SD哮喘大鼠肺组织初始CD4+T细胞转录因子mRNA及蛋白表达的影响。方法:采用RSV诱导,OVA致敏加激发制备大鼠哮喘模型。造模成功后,随机分成五虎汤高、中、低(4.752g/kg、2.376g/kg、1.188g/kg)剂量组,阳性对照组(地塞米松片,2.4mg/kg),哮喘模型组和空白对照组6组。治疗14d后,取肺组织,分别采用RT-PCR及免疫印迹法检测肺组织初始CD4+T细胞转录因子T-bet、GATA-3、RORγt、Foxp3 mRNA及其蛋白表达情况。结果:模型组T-bet、Foxp3 mRNA及蛋白较正常对照组表达降低(P0.05),GATA-3、RORγt mRNA及蛋白较正常对照组表达升高(P0.05);与模型组比较,五虎汤干预后,高剂量组T-bet、Foxp3 mRNA及蛋白表达显著升高(P0.01),GATA-3、RORγt mRNA及蛋白表达显著降低(P0.01);中剂量组T-bet、Foxp3 mRNA及蛋白表达升高(P0.05)、GATA-3、RORγt mRNA及蛋白表达降低(P0.05)。结论:五虎汤通过抑制转录因子GATA-3、RORγt表达、促进转录因子T-bet、Foxp3表达,进一步调控Thl/Th2、Th17/Treg细胞平衡和免疫功能进而抑制哮喘气道炎症形成。     

“邵氏五针法”对慢性哮喘大鼠GATA-3/T-bet表达的影响

目的:探讨"邵氏五针法"对慢性哮喘大鼠Thl/Th2细胞失衡相关因子的影响。方法:SD大鼠40只按随机数字表法分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组,通过HE染色观察各组大鼠肺组织病理学变化,通过酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清白介素(IL)-5、γ干扰素(IFN-γ)含量,荧光定量PCR检测各组大鼠肺组织中GATA结合蛋白3(GATA-3)、T盒子转录因子(T-bet)mRNA表达水平。结果:肺组织病理显示针刺组和艾灸组大鼠气道炎症较模型组明显减轻,针刺组和艾灸组大鼠血清中IL-5含量及肺组织中GATA-3mRNA表达明显低于模型组,血清IFN-γ含量及肺组织T-betmRNA表达明显高于模型组。结论:针刺和艾灸能降低哮喘大鼠气道炎症,抑制Th2特异性转录因子GATA-3的表达,促进Thl特异性转录因子T-bet的表达,可能通过纠正Th1/Th2失衡,调控哮喘大鼠免疫功能,从而降低哮喘大鼠的气道高反应性及慢性炎症,达到防治哮喘的作用。     

止咳平喘合剂对哮喘大鼠Th1/Th2细胞因子影响的实验研究

目的：观察中药复方止咳平喘合剂对哮喘大鼠Th1/Th2细胞因子的影响,从而进一步深化探讨名老中医经验方的作用机制。方法：随机将60只SD大鼠分为空白对照组、模型组、阳性对照组、止咳平喘合剂大、中、剂小剂量组,每组均为10只,以卵白蛋白（oval albumin,OVA）复制哮喘大鼠模型,采用ELISA方法检测血清中IL-4、IFN-γ含量,取右肺组织行HE染色进行形态学观察。结果：模型组血清中IL-4明显高于空白对照组（P〈0.01）,而IFN-γ明显低于空白对照组（P〈0.01）,存在IL-4/IFN-γ失衡;与模型组相比,阳性对照组、中药大剂量与中剂量组IL-4含量降低（P〈0.05）,而IFN-γ含量均有升高（P〈0.01～0.05）;并且血清IL-4与IFN-γ呈明显负相关（r为-0.974,P〈0.01）。结论：IFN-γ/IL-4的失衡参与哮喘发病过程,止咳平喘合剂可能通过下调IL-4的水平和提高IFN-γ的含量,纠正Th1/Th2细胞因子的失衡,进而减轻气道炎症。     

三拗芎葶合剂对哮喘大鼠肺组织蛋白激酶C、基质金属蛋白-9的影响

目的探讨三拗芎葶合剂对哮喘大鼠肺组织蛋白激酶C(PKC)、基质金属蛋白-9(MMP-9)的影响。方法 60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组、三拗芎葶剂高剂量组(简称高剂量组)、三拗芎葶剂中剂量组(简称中剂量组)、三拗芎葶剂低剂量组(简称低剂量组),每组10只。除正常组,其余各组复制哮喘大鼠模型。造模成功后,正常组大鼠腹腔注射致敏用等体积0.9%氯化钠注射液代替卵清白蛋白(OVA)氢氧化铝混合液,超声雾化吸入激发用等体积0.9%氯化钠注射液代替OVA。各组均于激发前30 m in予相应药物治疗,高剂量组、中剂量组、低剂量组均给予三拗芎葶合剂(分别按照20、10、5 g/kg给药)4 mL,每日1次灌胃;地塞米松组给予醋酸地塞米松注射液(按照1 mg/kg给药)2 mL,每日1次腹腔注射;正常组和模型组均给予4 mL0.9%氯化钠注射液灌胃。给药2周后处死大鼠,取右肺组织,观察各组大鼠肺组织病理形态学变化及支气管黏膜和黏膜下嗜酸粒细胞数(EOS)和淋巴细胞数;检测各组大鼠支气管、肺组织PKC及MMP-9含量。结果肺组织苏木精-伊红(HE)染色观察发现,模型组支气管黏膜下层和平滑肌层较对照组明显增厚,管腔变形、狭窄,肺泡膈明显增宽,可见血管增生和扩张,气道壁和肺组织中可见以嗜酸性粒细胞、淋巴细胞为主的大量炎症细胞浸润;各治疗组较模型组有所改善,高、中剂量组及地塞米松组优于低剂量组(P0.05)。模型组EOS和淋巴细胞计数均明显高于正常组(P0.05),地塞米松组、高剂量组、中剂量组及低剂量组EOS和淋巴细胞计数均低于模型组(P0.05),低剂量组和地塞米松组EOS和淋巴细胞计数差异均有统计学意义(P0.05),低剂量组均高于地塞米松组。模型组PKC和MMP-9阳性反应产物平均光密度值均明显高于正常组(P0.05),地塞米松组、高剂量组、中剂量组及低剂量组PKC及MMP-9阳性反应产物平均光密度值均低于模型组(P0.05),低剂量组PKC及MMP-9阳性反应产物平均光密度值较地塞米松组明显升高(P0.05)。结论三拗芎葶合剂可明显降低大鼠气管黏膜和黏膜下EOS和淋巴细胞数,改善肺组织的病理变化,减弱肺组织PKC和MMP-9表达。     

哮喘模型大鼠肺组织中IL-4、IFN-γ的变化及防哮方的干预作用

目的观察哮喘模型大鼠肺组织白细胞介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)的变化及防哮方的干预作用,探讨其防治哮喘的作用机理。方法将48只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组,模型组,中药低、中、高剂量组及地塞米松组各8只。用卵蛋白(OVA)致敏激发建立慢性哮喘大鼠模型。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行白细胞计数分类;逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺组织中IL-4、IFN-γm RNA相对表达量。结果 1)与正常组比,模型组白细胞(WBC)总数及嗜酸粒细胞(EOS)百分率显著升高(P0.05);与模型组比,中药低、中、高剂量组及地塞米松组WBC总数及EOS百分率明显降低(P0.05);中药高剂量组与地塞米松组比,变化不明显(P0.05)。2)与正常组比,模型组IL-4水平升高,IFN-γ水平降低(均P0.05);与模型组比,中药低、中、高剂量组及地塞米松组,IL-4水平均降低,IFN-γ水平均升高(均P0.05);中药高剂量组与地塞米松组比,IL-4水平较高(P0.05),IFN-γ水平变化不明显(P0.05)。结论防哮方可改善哮喘大鼠气道炎症,其作用机理可能与下调IL-4水平、上调IFN-γ水平、调节Th1/Th2免疫平衡有关。     

玉屏风散对肺气虚型变应性鼻炎转录因子T-bet/GATA-3表达的影响

目的通过建立肺气虚型变应性鼻炎(AR)动物模型,探讨玉屏风散对肺气虚型变应性鼻炎转录因子T-bet/GATA-3表达影响,为益气固表法治疗AR提供基因分子水平的依据。方法采用烟熏法及卵清蛋白为过敏原对大鼠致敏,建立大鼠肺气虚-变应性鼻炎病证复合模型,并将大鼠分为对照组、AR组、AR+肺气虚组、AR+肺气虚治疗组,予相应药液灌胃。采用ELISA检测大鼠血浆中IFN-γ与IL-4的浓度;QRT-PCR检测血浆中GATA-3、T-bet mRNA的表达情况;HE染色观察大鼠鼻黏膜结构与炎症情况。结果 HE染色结果显示,AR组呈慢性炎症表现,黏膜上皮排列紊乱,部分区域坏死脱落;AR+肺气虚治疗组黏膜上皮细胞修复良好。与对照组比较,AR组IL-4浓度和GATA-3 mRNA表达明显升高(P0.05),T-bet m RNA表达明显降低(P0.05);与AR组比较,AR+肺气虚治疗组IL-4浓度和GATA-3 m RNA表达明显降低(P0.05),T-bet m RNA表达明显升高(P0.05)。结论玉屏风散通过抑制GATA-3,增强T-bet,从而调节Th1/Th2细胞因子平衡,对肺气虚型变应性鼻炎大鼠发挥治疗作用。     

小儿止咳颗粒对哮喘大鼠气道炎症的免疫调控作用研究

目的:观察小儿止咳颗粒对哮喘模型大鼠血清与肺泡灌洗液中白三烯C4(LTC-4)、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)、白介素-5(IL-5)的影响,从而探讨其治疗咳嗽变异性哮喘的作用机制。方法:36只SD雌性大鼠随机分为6组:空白对照组,模型组,地塞米松组,小儿止咳颗粒低、中、高剂量组,每组6只。除空白对照组外,余组均采用鸡卵白蛋白(OVA)致敏并反复多次激发的方法建立大鼠哮喘模型。从腹腔注射OVA氢氧化铝悬液致敏第15天起行雾化激发,在雾化激发前模型组以10 ml/kg生理盐水灌胃,地塞米松组以0.3 mg/kg地塞米松溶液灌胃,小儿止咳颗粒低、中、高剂量组分别以12.5 g/kg、25 g/kg、50 g/kg小儿止咳颗粒溶液灌胃。空白对照组以10 ml/kg生理盐水灌胃。治疗结束后收集血清及肺泡灌洗液(BALF),运用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组血清及肺泡灌洗液中LTC-4以及IFN-γ、IL-4、IL-5的含量。结果:1与空白对照组比较,模型组大鼠体重明显下降(P0.01);而地塞米松组及小儿止咳颗粒各剂量组大鼠体重均较模型组有显著提升(P0.01)。2与空白对照组比较,模型组大鼠中血清LTC-4水平显著升高,IFN-γ水平显著降低(均P0.01),而血清IL-4与IL-5无明显变化;地塞米松与小儿止咳颗粒各剂量均可降低模型大鼠血清中LTC-4水平(P0.01),高剂量组改善程度优于地塞米松组(P0.01);高剂量组可明显提升模型大鼠血清中IFN-γ水平,与模型组、地塞米松组比较均有显著性差异(P0.01)。3与空白对照组比较,模型组大鼠BALF中LTC-4、IL-4与IL-5水平显著升高(P0.01),IFN-γ水平显著下降(P0.01);地塞米松与小儿止咳颗粒各剂量均可下调LTC-4、IL-4水平(P0.05或P0.01),小儿止咳颗粒各剂量组均可上调模型大鼠BALF中的INF-γ水平(P0.01);地塞米松与小儿止咳颗粒中、高剂量可下调BALF中IL-5水平(P0.01)。结论:小儿止咳颗粒治疗咳嗽变异性哮喘可能是通过下调炎症介质表达,改善免疫紊乱,从而减轻气道炎症而实现的。     

五虎汤对病毒诱发幼年哮喘大鼠脾组织T-bet、GATA-3、RORγt、Foxp3 mRNA表达的影响

目的:研究五虎汤对病毒诱发幼年哮喘大鼠脾细胞悬液T-bet、GATA-3、RORγt、Foxp3 m RNA表达的影响。方法:采用RSV诱导OVA致敏大鼠哮喘模型。造模成功后,随机分成五虎汤高、中、低[4.752 g/(kg·d)、2.376 g/(kg·d)、1.188 g/(kg·d)]剂量组、地塞米松组[地塞米松片,2.4 mg/(kg·d))]、模型组。干预14 d后,取脾组织,采用RT-PCR法检测脾细胞悬液中T-bet、GATA-3、RORγt、Foxp3 m RNA表达情况。结果:模型组脾组织T-bet、Foxp3m RNA表达低于空白组(P0.05),而GATA-3、RORγt m RNA表达高于空白对照组(P0.05)。五虎汤高、中剂量组脾组织GATA-3、RORγt m RNA表达均明显低于模型组(P0.01或P0.05),而T-bet、Foxp3 m RNA表达均明显高于模型组(P0.01或P0.05)。结论:五虎汤能调控病毒诱发幼年哮喘大鼠脾组织转录因子T-bet、GATA-3、RORγt、Foxp3 m RNA的表达,调控Thl、Th2、Thl7、Treg细胞,重建免疫平衡,抑制哮喘气道炎症形成。     

咳可合剂对哮喘发作期小鼠肺组织ET-1血清I L-4 IFN-γ水平的影响研究

目的咳可合剂为本院儿科院内制剂,前期研究表明咳可合剂能明显改善热哮患儿咳嗽、喘息、痰鸣等主要症状及体征,可以改善患儿肺功能指标;可通过调节患儿诱导痰中EOS及血清中ECP水平,减轻哮喘患儿的病理变化从而控制哮喘的发作。为了探讨咳可合剂作用机制,特进行本实验研究。方法按照参考文献制备哮喘小鼠模型,分为空白对照组、模型对照组、咳可合剂低、中、高剂量组五组,各组小鼠从造模成功后第2天起灌胃,每次2 mL,每天1次,持续1周。中药治疗组分别给予咳可合剂药液;正常对照组和模型对照组均给予生理盐水灌胃1周,处死动物,取肺组织检测ET-1,血清检测IFN-r和IL-4。结果与空白组比较,模型组ET-1、IL-4值均升高,P0.05有统计学意义,IFN-γ值下降,P0.05有统计学意义,IFN-γ/IL-4比值下降,P0.05有统计学意义。咳可合剂三个剂量组均能降低ET-1、IL-4值,P0.05有统计学意义;均能提高IFN-γ、IFN-γ/IL-4值,P0.05有统计学意义。结论咳可合剂通过降低值肺组织ET-1含量,及提高血清IFN-γ水平,拮抗哮喘小鼠IL-4分泌水平,从而达到调Th1/Th2平衡发挥作用。     

培本中药及其拆方在哮喘大鼠Th1/Th2失衡中的免疫调节作用分析

目的:分析培本中药及其拆方在哮喘大鼠Th1/Th2失衡中的免疫调节作用。方法:60只清洁级雄性健康SD大鼠,随机分为正常对照组、模型组、全方组、拆方1组、拆方2组、阿斯美组6组,每组10只。正常对照组与模型组大鼠灌胃生理盐水,全方组大鼠灌胃23.0 g/kg药液,拆方1组大鼠灌胃9.0 g/kg药液,拆方2组大鼠灌胃8.0 g/kg药液,阿斯美组大鼠灌胃25.11 mg/kg药液。采用OVA注射及雾化激发方法复制哮喘模型。运用酶联免疫法对血清和BALF中IFN-γ进行检测,运用放射免疫法对血清和BALF中IL-4进行检测,运用RT-PCR法对肺组织中GATA-3及T-bet mRNA进行检测。结果:培本中药及其拆方均能改善哮喘大鼠血清和BALF中IL4/INF-γ水平及肺组织中T-bet/GATA-3 mRNA水平,以全方作用最佳,拆方1作用优于拆方2。结论:培本中药在哮喘大鼠Th1/Th2失衡中具有重要的免疫调节作用。